Transfection in vitro

Transcription

1 1. Lignée cellulaire : Hepatocytes GB12/DE (5:3.3) BSV10/DE KLN Lignées cellulaires adhérentes (16HBE, A549, HeLa, C2C12) GB18: KLN BSV Lignée cellulaire non-adhérente: K KLN

2 1. Lignée cellulaire : Hepatocytes 1.1. GB12/DE (5:3.3) Efficacité/toxicité GB12 Injection dans la capsule de Glisson de cellules transfectés (placz) (après 2 jours) Cationic lipids derived from glycine betaine promote efficient and non-toxic gene transfection in cultured hepatocytes. Gilot, D.; Miramon, M. L.; Benvegnu, T.; Ferrières, V.; Loreal,.; Guguen-Guillouzo, C.; lusquellec, D.; Loyer,., Journal of Gene Medicine 2002, 4, rix 2

3 Lignée cellulaire : Hepatocytes 1.2. BSV10/DE N H H N NH 2 Cl NH 2 BSV10 Concentration standard : 1,5 µmol Efficacité/toxicité Lignée cellulaire : HepaRG % GFT positive cells (histograms), viability (lines) Highly efficient gene transfer into hepatocyte-like HepaRG cells: new means for drug metabolism and toxicity studies, Laurent, V. ; Fraix, A. ; Montier, T. ; Cammas-Marion, S. ; Ribault, C. ; Benvegnu, T. ; Jaffrès,.A. ; Loyer,. Biotechnology J., 2010, 5, rix 3

4 Lignée cellulaire : Hepatocytes 1.3. KLN47 Concentration standard : 1,5 µmol NH (CH 2 ) 2 As I Efficacité/toxicité Lignée cellulaire : HepaRG % GFT positive cells (histograms), viability (lines) Highly efficient gene transfer into hepatocyte-like HepaRG cells: new means for drug metabolism and toxicity studies, Laurent, V. ; Fraix, A. ; Montier, T. ; Cammas-Marion, S. ; Ribault, C. ; Benvegnu, T. ; Jaffrès,.A. ; Loyer,. Biotechnology J., 2010, 5, rix 4

5 Lignée cellulaire adhérentes 2. Lignées cellulaires adhérentes (16HBE, A549, HeLa, C2C12) 2.1. GB18:1 GB18:1 Efficacité Lignée cellulaire : 16HBE, A549, HeLa, C2C12. 1.E+8 1.E+7 RLU/mg prot. 1.E+6 1.E+5 1.E+4 1.E+3 1.E+2 1.E+1 1.E+0 16HBE A549 HeLa LFM 16HBE C2C Charge Ratio rix 5

6 Lignée cellulaire adhérentes 2.2. KLN47 Concentration standard : 1,5 µmol NH (CH 2 ) 2 As I Efficacité Cationic Lipophosphoramidates and Lipophosphoguanidines Are Very Efficient for in Vivo DNA Delivery, E. icquet, K. Le Ny,. Delépine, T. Montier, J.J. Yaouanc, D. Cartier, H. des Abbayes, C. Férec, J.C. Clément Bioconjugate Chem 2005; 16, rix 6

7 Lignée cellulaire adhérentes 2.3. BSV4 Concentration standard : 1,5 µmol NH (CH 2 ) 2 As I Efficacité Remarque : vecteur également efficace in vivo, voir J. Med. Chem., 2010, 53, A novel cationic lipophosphoramidate with di-unsaturated lipid chains : synthesis, physicochemical and transfection activities. Le Gall, T. ; Loizeau, D. ; icquet, E. ; Carmoy, N. ; Yaouanc, J.J. ; Deschamps, L., ; Delépine,. ; Giamarchi,. ; Jaffrès,.A. ; Lehn,. ; Montier T. J. Med. Chem. 2010, 53, rix/disponibilité : 7

8 Lignée cellulaire non-adhérente 3. Lignée cellulaire non-adhérente: K KLN5 Efficacité N CH 2 CH 2 CH 2 N I CH 3 KLN5 K562 Toxicité s KLN-5: a safe monocationic lipophosphoramide to transfect efficiently haematopoietic cell lines and human CD34+ cells, T. Montier,. Delépine, K. Le Ny, Y. Fichou, M. Le Bris, E. Hardy, E. icquet, J.C. Clément, J.J. Yaouanc, C. Férec Biochimica et Biophysica Acta, Biomembranes, 2004, 1665, Activation of tumor-specific T cells by dendritic cells expressing the NY-ES-1 antigen after transfection with the cationic lipophosphoramide KLN5, M. Le Gallo,. Toutirais, T. Montier, F. Cabillic, F. Bouet,. Delépine,. Lehn, F. Jotereau, V. Catros, J. Gene Med., 2008, Volume 10, Issue 6, Date: June 2008, ages: rix/disponibilité : 8