Éléments utiles au diagnostic de malignité
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- Maurice Lebeau
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1 Éléments utiles au diagnostic de malignité Biologique Hyperlymphocytose Monocytopénie et leucopénie Neutropénie Paraprotéine Hypogammaglobulinémie, β2 microglobuline, LDH Hyperéosinophilie et clinique Adénopathie Splénomégalie
2 Incidence Lymphome B matures : 4 % des nouveaux cancers chaque année LZM (1.8 %) LLP (1 %) Autres (7.4 %) LLA T (1.7 %) Burkitt (2.5 %) LB anaplasique (2.4 %) LBGC diffus (30 %) LBGC médiastin m (2.4 %) MCL (6.7 %) LT Mature (7.6 %) LLC/LL (7.6 %) WHO (2001) L du MALT (7.6 %) Lymphome folliculaire (22.1 %)
3 Pathologie lymphoïde B Moelle osseuse Lymphome B à grandes cellules Immunoblaste B Lymphome lymphoplasmocytaire Cellule plasmocytoïde LLA-B/LL B/LL-B Lymphoblaste B précurseur LLC Cellule B naïve Antigène ne Cellule du manteau Lymphome folliculaire Centrocyte Centroblaste Paracortex et medulla LLC Lymphocyte B mémoire Plasmocyte Lymphome du manteau Organe lymphoïde secondaire Lymphome folliculaire Cellule de la zone marginale Lymphome de la zone marginale Myélome Moelle osseuse
4 Leucémie lymphoïde chronique Morphologie habituelle Petite cellule au contour cytoplasmique régulier, au rapport N/C élevé et au noyau à chromatine condensée en motte Présence de masse de Gümprecht (fragilité cellulaire) Rares paraimmunoblastes ou prolymphocytes
5 Leucémie lymphoïde chronique Variantes morphologiques LLC pleiomorphe LLC à cellules de taille moyenne et rapport N/C faible à flexion plasmocytoïde LLC riche en prolymphocytes <10 % prolymphocytes % prolymphocytes >55 % prolymphocytes LLC LLC/PL Leucémie prolymphocytaire Confirmation du diagnostic par cytométrie trie en flux
6 LLC à cellules de taille moyenne et rapport N/C faible à flexion plasmocytoïde
7 Cytométrie en flux
8 Scattergramme (biparamétrique) Diffusion axiale (taille) Monocytes Lymphocytes Granulocytes Sélection de la population intéressante grâce à la création d une régionr d intérêt Débris Diffusion à 90 (granularité)
9 Histogramme (monoparam( monoparamétrique) - + CD4 FITC Intensité de fluorescence
10 Scattergramme (biparamétrique) CD3 + CD3 +/CD8+ Expression des marqueurs fluorescents Obtention du pourcentage CD3 - /CD8 - CD8 +
11 Pathologie lymphoïde B non hodgkinienne Moelle osseuse Immunoblaste B CD20+, cigm+ Cellule plasmocytoïde CD79a CD10 TdT Cµ CD23+ Paracortex et medulla CD5+ Lymphoblaste B précurseur Cellule B naïve Antigène ne CD20, CD5+ Cellule du manteau CD5+/- CD23- CD5+, sigm+, D+ IgM+ Organe lymphoïde secondaire CD10+ Centrocyte Centroblaste Lymphocyte B mémoire Cellule de la zone marginale CD5-,, CD23- Plasmocyte cig+ Moelle osseuse
12 Leucémie lymphoïde chronique immunophénotype : CD19+, CD20+(faible), CD5+, CD23+, IgS faible Score de Matutes : 4 à 5/5 IgS CD5 CD23 CD79b FMC7 1 point Faible + + -/faible - 0 point Fort
13 Ces cellules d un même patient vous semblent-elles monomorphes? 2 1. Oui 2. Non 3. Je ne me prononce pas
14 Ces cellules d un même patient vous semblent-elles monomorphes? 1. Oui 1 2. Non 0 3. Je ne me prononce pas 1 0 1
15 Monomorphe : pourquoi? Taille variable, rapport N/C variable Cytoplasme légèrement basophile Noyau irrégulier, replié (en forme de poing fermé) Noyau parfois nucléolé
16 Lymphome du manteau Immunophénotype : CD19+, CD20+ (forte densité), CD5+, CD23-, IgS forte densité. Cytogénétique et biologie moléculaire : t(11;14), gène Bcl1, hyperexpression de protéine cyclin D1 Évolution morphologique : Apparition d éléments blastiques de plus grande taille (forme blastoïde) Analyse du contenu en ADN Tétraploïdie
17 Quelle est la particularité de ces cellules? 2 1. Petite taille 2. Noyau clivé 3. Noyau à chromatine mottée 4. Rapport N/C élevé 5. Noyau blastique
18 Quelle est la particularité de ces cellules? 1. Petite taille 1 2. Noyau clivé 2 3. Noyau à chromatine mottée 0 4. Rapport N/C élevé 1 5. Noyau blastique
19 Lymphome folliculaire Présence de centrocytes typiques petites cellules, chromatine compacte non mottée clivages nucléaires bien visibles cytoplasme peu abondant, de basophilie faible
20 Lymphome folliculaire (phase leucémique) Immunophénotype : CD19+, CD20+, CD10+/-, CD5-, CD23+/-, CD44-, CD38 -/+(faible densité) Génétique : t(14;18) et ses variantes t(2;18) et (18;22) (70 à 95%) réarrangement du gène BCL2 (85% des cas) 14 der(14) 18 Caryotype der(18) Technique Fish
21 Quelle particularité morphologique peut-on relever dans cette petite galerie? 0 1. Ces cellules sont blastiques 2. Les noyaux sont mottés 3. Certains éléments possèdent des villosités 4. On observe parfois des prolongements cytoplasmiques 5. Les noyaux sont irréguliers 6. Toutes ces cellules sont normales
22 Quelle particulartité morphologique peut-on relever dans cette petite galerie? 1. Ces cellules sont blastiques 2. Les noyaux sont mottés Certains éléments possèdent des villosités 4. On observe parfois des prolongements cytoplasmiques 5. Les noyaux sont irréguliers Toutes ces cellules sont normales
23 Leucémie à tricholeucocytes (HCL) Quel est l intrus? Monocyte Tricholymphocytes : Cellule souvent de taille moyenne à grande Contours cytoplasmiques irréguliers (villosités) sur tout le pourtour de la cellule Cytoplasme plus ou moins abondant et peu basophile Noyau parfois irrégulier, réniforme Noyau à chromatine peu condensée parfois fine contenant parfois un nucléole
24 Leucémie à tricholeucocytes (HCL) Particularité : Leucopénie et monocytopénie Immunophénotype : FSC faible et SSC moyen <> lymphocytes FSC faible et SSC faible CD19+, CD20+, CD103+, CD25+, CD123+, CD24-, IgS à forte densité Ne pas confondre avec : SLVL
25 Lymphome de la zone marginale splénique (LZMs ou SLVL) Morphologie : Souvent hyperlymphocytose (<> HCL) Petit lymphocyte à rapport N/C élevé et à noyau à chromatine condensée souvent en mottes (comme dans la LLC) Villosités polarisées (> 20 % de lymphocytes villeux) Immunophénotype : CD19+, CD20+, CD5-, CD103-, CD24+, CD123-
26 Que pensez vous des cellules de cette galerie 2? 1. Contexte réactionnel 2. Hémopathie chronique 3. Présence de cellules anormales jeunes 4. Sans avis
27 Que pensez vous des cellules de cette galerie? 1. Contexte réactionnel 0 2. Hémopathie chronique 0 3. Présence de cellules anormales jeunes 2 4. Sans avis
28 Leucémie Lymphoblastique Aiguë Eléments parfois de petite taille pouvant être confondus avec des petits lymphocytes mûrs
29 Envahissement sanguin par un myélome
30 Particularité : Globules rouges en rouleaux
31 Et enfin!!!!! Qu en pensez-vous? 2 1. Normal 2. Curieux 3. Suspect 4. Anormal 5. Bénin 6. Malin
32 Et enfin!!!!! 1. Normal 0 2. Curieux 0 3. Suspect 0 4. Anormal 0 5. Bénin 0 6. Malin 1 0 1
33 Lymphome de la zone marginale Immunophénotype : CD19+, CD20+, CD5-, CD23-
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