CONDITIONNEMENT ET TRANSMISSION DES PRELEVEMENTS

Transcription

1 CONDITIONNEMENT ET TRANSMISSION DES PRELEVEMENTS 1. CONTENU 1. OBJECTIFS INTRODUCTION INFORMATIONS REQUISES POUR TOUT EXAMEN ADRESSE AU CACP QUIMPER Demande d avis et sous traitance Demande d avis : Sous traitance technique : PRELEVEMENTS URGENTS et à RISQUES INFECTIEUX PRELEVEMENTS de TISSUS Biopsie Pièces chirurgicales : EXAMENS CYTOPATHOLOGIQUES Cytopathologie gynécologique: Cytopathologie non gynécologique : Cytologie des liquides et sécrétions Cytologie d aspiration a l aiguille fine : EXAMENS AVEC TECHNIQUES COMPLEMENTAIRES Examen en immunohistochimie Immunofluorescence Examen d hybride capture: Date d impression : 23/09/ :03 Page 1 sur 21

2 8.4. Examen d hybridation in situ (DISH ou CISH): OBJECTIFS L objectif de ce document est de décrire la méthodologie de prise en charge par l établissement de santé «préleveur» des prélèvements (échantillons) histologiques ou cytologiques destinés à un examen anatomocyto-pathologique (ACP). Il traite dans les premiers chapitres des éléments communs à l ensemble des examens et détail ensuite les spécificités des grandes catégories d examen. 2. INTRODUCTION La qualité d un examen anatomo-cyto-pathologique dépend de la bonne exécution de trois phases : préanalytique, analytique et post analytique. La phase pré-analytique débute avant que les prélèvements ne parviennent au cabinet de Pathologie CACP QUIMPER (Cabinet d anatomie et cytologie pathologiques de Quimper-SELARL OMICRO) pour examen, la participation de tous les professionnels concernés est très importante afin que le diagnostic final soit rendu avec la meilleure fiabilité possible dans l intérêt du patient. L identification correcte des échantillons, les renseignements corrects et exhaustifs du bon de demande de l examen, la qualité du prélèvement et la fixation adéquate de ces prélèvements sont les points fondamentaux de la phase pré-analytique. Pour cette raison le CACP QUIMPER, au travers de ce document, informe quels sont les examens pratiqués et donne toutes les informations nécessaires pour obtenir et préserver les échantillons soumis à examen dans les meilleures conditions. Les méthodes utilisées sont revues régulièrement en accord avec les recommandations nationales et internationales. Des échantillons inadéquats rendent difficile voire impossible un diagnostic correct, complet et précis. Ce manuel indique les méthodes pour obtenir des échantillons de bonne qualité. 3. INFORMATIONS REQUISES POUR TOUT EXAMEN ADRESSE AU CACP QUIMPER Il est nécessaire de : Identifier correctement le récipient qui contient le prélèvement et Remplir le bon de demande d examen (prescription) avec o Nom de naissance du patient, o Nom marital si applicable, Date d impression : 23/09/ :03 Page 2 sur 21

3 o o o o o o o o Sexe Date de naissance, Adresse, Téléphone si possible, Nom du médecin prescripteur, Date et heure de l excision du prélèvement, Caractère urgent ou non de l examen, Destinataires : Lieu d exercice et nom. Deux comptes rendus papiers sont adressés au maximum. Des CR supplémentaires peuvent être adressés à d autres correspondants s ils disposent d une messagerie sécurisée. Les informations cliniques participent au diagnostic. L absence de renseignement clinique peut conduire à l absence de diagnostic voire à un diagnostic erroné. Ils doivent comprendre : L indication de la demande d examen ACP La topographie de la lésion Latéralité le cas échéant Les antécédents si applicables Les résultats d éventuels examens biologiques et/ou radiologiques en lien avec la pathologie recherchée par le prélèvement Les thérapeutiques en cours si elles risquent de modifier l aspect microscopique des lésions (radiothérapie, chimiothérapie, traitements hormonaux pour les frottis, tous médicaments pour les prélèvements digestifs et cutanés, ) Les hypothèses diagnostiques. 4. DEMANDE D AVIS ET SOUS TRAITANCE 4.1. Demande d avis : Certains prélèvements, soit parce que le diagnostic est difficile soit parce qu une double lecture est recommandée, peuvent être adressés à un médecin pathologiste exerçant dans une autre structure, le plus souvent hospitalière. Cette procédure allonge le délai de réponse mais permet une qualité optimale du diagnostic. Dans de tel cas, un compte rendu provisoire est établi par le CACP Quimper, indiquant cette demande d avis et les hypothèses diagnostiques. Dès réception de l avis, celui-ci est adressé au médecin prescripteur. Un courrier explicatif émanant du CACP Quimper accompagne ce résultat, ainsi qu un compte rendu définitif, reprenant les conclusions de l avis et pouvant également comporter des commentaires sur le résultat de cet avis. Date d impression : 23/09/ :03 Page 3 sur 21

4 4.2. Sous traitance technique : Certaines techniques immunohistochimiques nécessitant des Anticorps rares sont adressées au plateau technique de l Association des Pathologistes de l Ouest (APO). Ce plateau technique est constitué sous la forme d une Société Civile de Moyen, dont la CACP Quimper est actionnaire. Les examens de biologie moléculaire non présents à la nomenclature CCAM sont adressés à la plateforme de génétique moléculaire du CHU de BREST (service prof. FERREC) : Les recherches de mutations K- RAS, EGFR, KIT, B-RAF,.. font partie de ces examens 5. PRELEVEMENTS URGENTS ET A RISQUES INFECTIEUX Les prélèvements urgents doivent être clairement identifiés : Sur le bon de demande d examen par la mention «Urgent», Sur le sachet ou autre «container» renfermant le prélèvement par une gommette ou autre autocollant, de couleur rouge. Les prélèvements présentant un risque infectieux doivent être clairement identifiés : Sur le bon de demande d examen par la mention «Attention infectieux», Sur le sachet ou autre «container» renfermant le prélèvement par une gommette ou autre autocollant, de couleur verte. 6. PRELEVEMENTS DE TISSUS 6.1. Biopsie Les biopsies correspondent à des fragments de petite taille pour lesquelles l étape macroscopique se limite à un dénombrement des fragments, peut comporter une mesure des fragments et une section (en général en deux), puis l inclusion en totalité. Sont inclus dans cette catégorie les biopsies endoscopiques du tractus gastro intestinal, les biopsies transbronchiques, biopsies vésicales randomisées, carotte biopsique du sein, prostate, foie, reins et autres organes dans lesquels ce type d examen peut être réalisé, «punch» de la peau, biopsies du col utérin, produits de curetage de l endomètre (excepté des produit d avortement). Les biopsies de très petite taille doivent être mises en cassettes, et entre deux mousses, spécialement dédiées immédiatement après le prélèvement puis mises en flacon avec formol. Date d impression : 23/09/ :03 Page 4 sur 21

5 Le flacon doit, au mieux, être identifié par l étiquette patient de l établissement de santé, ou à défaut par l inscription du nom, du prénom et de la date de naissance. En cas de prélèvements multiples, chaque flacon sera indexé. L index est explicité sur le bon de demande d examen. FIXATION : Le prélèvement doit être fixé dans du formol tamponné à 4%, immédiatement après l excision en utilisant les flacons pré-remplis à biopsies (flacons de 40 ml et 50 ml) fournis par le cabinet. Les récipients doivent être hermétiquement fermés. Hors protocoles spéciaux (tumorothèques), les biopsies ne doivent pas être transmises à l état frais (dessiccation très rapide). METHODE : Après la description macroscopique, le prélèvement est traité, inclus en paraffine, et coloré à l'hématoxylineéosine. Prélèvements non conformes : Mauvaise fixation (en raison d'une quantité insuffisante de formol par rapport à la taille de l'échantillon, ou fixateur utilisé inapproprié), Absence d'identification du patient et / ou absence de données cliniques pertinentes. DELAI DE TRANSMISSION DU CR : Prélèvements urgents : 24 heures si le cabinet est prévenu du caractère urgent. Les prélèvements devant être faits le Vendredi pourront exceptionnellement être traités dans la journée s ils sont reçus avant 11 heures et si le cabinet est prévenu. Prélèvements habituels : 48 heures (hors week-end et jours fériés) après la réception de l'échantillon dans le laboratoire. Certains prélèvements peuvent être d interprétation difficile et demandent un délai supplémentaire. Si ce délai dépasse 7 jours, le cabinet prendra un contact téléphonique avec le médecin prescripteur pour le prévenir et donner les premiers éléments diagnostiques. Date d impression : 23/09/ :03 Page 5 sur 21

6 TRAITEMENT SPECIFIQUE DE CERTAINES BIOPSIES : Moelle osseuse : Doit être envoyée de préférence dans le formol tamponné à 4%. Ce type d échantillons est soumis à décalcification et fréquemment à des colorations histochimiques et /ou immunohistochimiques, le délai de réponse est supérieur à celui des autres biopsies (5 jours). Foie : Doit être envoyé de préférence dans le formol tamponné à 4%. Ce type de prélèvements est souvent soumis à des colorations histochimiques et très souvent immunohistochimiques, le temps de réponse est supérieur aux autres biopsies (5 jours). La peau : Les prélèvements seront au mieux réalisés par punch de 4 mm ou à la lame. En cas de demande d examen avec immunofluorescence, sera communiqué, en plus du prélèvement fixé par le formol, un prélèvement congelé à l azote ou conservé dans du liquide de Michel. En cas de suspicion de maladie lupique, le prélèvement pour immunofluorescence doit être réalisé en peau lésée. Dans les autres pathologies il sera réalisé en peau saine. Délai de réponse : Ganglions : Pathologie tumorale : 48 heures si pas de nécessité d immunohistochimie et 4 jours avec immunohistochimie. Pathologie non tumorale : 5 jours. voir R_TR_IN05_Protocole biopsie ganglionnaire. Date d impression : 23/09/ :03 Page 6 sur 21

7 Biopsie pleurale chirurgicale : Le prélèvement doit porter à la fois sur la plèvre et sur le tissu adipeux et/ou musculaire adjacent. Le cabinet met à disposition les fiches mésopath en cas de mésothéliome Pièces chirurgicales : Sont considérées pièces chirurgicales les pièces d exérèse partielle ou totale, monobloc ou en plusieurs fragments par le préleveur d une ou de plusieurs structures anatomiques. Commentaire [MSOffice1]: Modifié le 19/12/2012 FIXATION : L'échantillon doit être fixé dans le formol à 4% tamponné, dès l excision. Le volume optimal de formol pour fixer le tissu est de 10 volumes de formol pour un volume de tissu. Les contenants doivent également être adaptés à la taille de la pièce (la pièce ne doit pas à avoir être comprimée pour rentrer dans son récipient). Dans certains cas la pièce doit être transmise à l état frais au CACP QUIMPER : Pièce trop volumineuse pour être fixée correctement, Protocoles nécessitant un examen ACP à l état frais. Dans ces cas, le CACP QUIMPER doit être impérativement prévenu ( ) le plus tôt possible afin d optimiser le transport et la prise en charge du prélèvement, au mieux, avant l acte chirurgical. Si le CACP ne peut être joint (WE, jours fériés,..) les prélèvements doivent être conservés à 4 C. INFORMATIONS COMPLEMENTAIRES: Doivent impérativement être précisés : Localisation précise des prélèvements (par exemple niveau de drainage d un ganglion lymphatique), L existence et la localisation d éventuels repères (fil de préférence à agrafe). En cas de pièce anatomiquement complexe (ORL), un dessin est recommandé. METHODE : Après la description macroscopique, et mise en cassette, les prélèvements sont inclus en paraffine, et colorée à l hématoxyline /éosine. Date d impression : 23/09/ :03 Page 7 sur 21

8 PRELEVEMENTS NON CONFORMES : Mauvaise fixation (en raison d'une quantité insuffisante de formol par rapport à la taille de l'échantillon, ou fixateur utilisé inapproprié), Absence d'identification du patient et / ou absence de données cliniques pertinentes. DELAI DE TRANSMISSION DU COMPTE RENDU : Pièces simples : 4 jours après la réception de l'échantillon dans le laboratoire, sauf si l échantillon n est pas assez fixé. Pièces complexes ou nécessitant des techniques complémentaires : 8 jours. TRAITEMENTS SPECIFIQUES POUR CERTAINS TYPES DE PRELEVEMENTS: Ganglions lymphatiques: CF protocole. Peuvent être expédiés frais du laboratoire, à condition d avoir prévenu le CACP QUIMPER, par téléphone ( ) ou dans du formol tamponné à 4%. L analyse de l architecture des lésions qui affectent les ganglions lymphatiques est une condition indispensable pour le diagnostic anatomo-pathologique, le matériel devra être totalement excisé sans fragmentation si le ganglion mesure moins de 1 cm, sinon, un demi ganglion sera suffisant pour l examen histologique (le protocole précis - R_TR_IN05_Protocole biopsie ganglionnaire est fourni sur simple demande). Si le ganglion est de taille importante et ne peut être envoyé rapidement à l état frais, on recommande la réalisation de coupes transversales dans le grand axe, avant la fixation dans le formol. Comme il s agit de prélèvements souvent soumis à de l immunohistochimie le délai de réponse est supérieur à celui des autres pièces chirurgicales (7 jours). Commentaire [RLF2]: A changer : ½ gg si gg de 1cm Date d impression : 23/09/ :03 Page 8 sur 21

9 Os : Doivent être envoyés de préférence dans le formol tamponné à 4%. Ce type de demande pour les lésions osseuses devra être accompagné des examens d imagerie de la lésion. L'image radiologique des lésions osseuses correspond à l'examen macroscopique de la lésion, et cet examen est essentiel pour l'interprétation correcte de l'image histologique. Comme il s'agit de prélèvements qui doivent être soumis à une décalcification, le temps de réponse est supérieur aux autres pièces chirurgicales (Environ 5 à 10 jours après réception de la pièce en fonction de la taille de cette dernière-délais de fixation). Embryons et fœtus (<12 semaines de gestation) : Devront être placés dans des sacs en plastique ou flacons avec du formol. Les gros fœtus doivent être réfrigérés jusqu'au transport. Ils doivent être accompagnés du placenta. Les données cliniques de la mère (et père si adapté pour les maladies génétiques) de la grossesse et accouchement sont essentielles pour un l examen anatomo-pathologique. Comme cet examen est complexe, le temps de réponse est supérieur à celui des pièces chirurgicales (environ 5 à 10 jours). Commentaire [RLF3]: A modifier selon notre code pour les FC avec fœtus Fœtus de plus de 12 semaines de gestation : adressés au service ACP du CHU de Brest. HYGIENE ET SECURITE : Les échantillons de pathologie chirurgicale doivent être considérés comme contagieux jusqu'à ce qu'ils soient fixés. Respecter les recommandations universelles pour la manipulation des échantillons de patients. Les règles de sécurité quant à la manipulation de formol doivent être appliquées sous la responsabilité de la direction de l établissement de santé vis-à-vis de ses personnels. Une fiche de donnée de sécurité (FDS) est fournie. 7. EXAMENS CYTOPATHOLOGIQUES 7.1. Cytopathologie gynécologique: La cytologie cervicale (frottis cervico utérin - FCU) est l examen recommandé pour le dépistage du cancer du col de l utérus (HAS 2010). Il a pour but de repérer, par examen microscopique des cellules prélevées au niveau du col de l utérus, des anomalies spécifiques de lésions dysplasiques (précancéreuses) du col. Ces lésions sont accessibles à un traitement conservateur et curateur. Pour qu un échantillon soit observé sous le microscope, il doit être de bonne qualité et cette qualité dépend des procédures de prélèvement, fixation transport jusqu au CACP QUIMPER. À l'heure actuelle les examens de cytologie cervico-vaginale peuvent être réalisés de manière conventionnelle ou par des méthodes en milieu liquide. Date d impression : 23/09/ :03 Page 9 sur 21

10 PRELEVEMENT : Identifier : avant de réaliser le prélèvement, écrire au crayon gris le nom de la patiente sur les lames ou le porte lames (cytologie conventionnelle), ou sur les flacons (pour la cytologie en milieu liquide). Prélever : le prélèvement peut être réalisé avec une spatule d Ayre ou de préférence avec une brosse (type Cytobrush). Utiliser la spatule d Ayre (avec la partie la plus longue dans l orifice cervical externe) ou la brosse tout autour de la muqueuse cervicale de manière délicate pour éviter les saignements (un seul tour dans le sens horaire). Pour qu un FCU soit de qualité optimale il est nécessaire les consignes suivantes, à destination des patientes, soient respectées Ne pas avoir fait de lavages, pas d application de médicaments intra-vaginaux au cours des 48 dernières heures. Ne pas avoir eu des rapports sexuels au cours des 24 dernières heures. Ne pas être en période menstruelle. Etaler: ensuite, étaler le matériel obtenu sur la 1 ère lame avec une face de la brosse, et sur la 2 ème lame, avec l autre face de la brosse. Le matériel prélevé doit être frotté de manière régulière, afin d obtenir le frottis le plus mince possible. Toute la superficie de la spatule ou de la brosse doit adhérer à la lame pour faire le frottis. Le mouvement doit être délicat, ferme et dans un seul sens. Eviter les mouvements circulaires, car ils causent fréquemment des artéfacts d écrasement et de distorsion des cellules. Fixer: fixer immédiatement le frottis après étalement à l aide du spray. Il est important de fixer le frottis immédiatement afin d éviter des artéfacts de séchage qui nuisent à la qualité des résultats. Pour la cytologie en milieu liquide, après le prélèvement, la brosse doit être immergée et «lavée» et son extrémité détachée dans le flacon contenant le milieu de préservation (le CACP Quimper utilise le milieu Easyfix commercialisé par le LABONORD. Toute la documentation concernant ce milieu est disponible sur simple demande auprès du CACP Quimper. METHODE : Les lames de la cytologie conventionnelle sont directement colorées par la technique Papanicolaou et examinées au microscope. Les lames issues de prélèvements en milieu liquide sont obtenues après cyto-centrifugation. Elles sont ensuite également colorées par la coloration de Papanicolaou. Date d impression : 23/09/ :03 Page 10 sur 21

11 RESULTAT : Le résultat est fourni sous forme d un compte rendu respectant la nomenclature recommandée selon le système de Bethesda 2001 actualisé PRELEVEMENTS NON CONFORMES : Lames ou flacons sans bon d examen complété, Bon d examen sans données suffisantes d'identification du patient, Lames cassées, Lames, ou porte lames ou flacon sans identification du patient. DELAI DE TRANSMISSION DU COMPTE RENDU : Entre 7 et 21 jours (moyenne 12 jours) pour le dépistage cytologique. Le délai peut être raccourci en cas d urgence : anomalie clinique constatée, départ de la patiente... Dans ce cas, la mention «Urgent» doit figurer sur le bon d examen. RAPPELS SUR LES INFORMATIONS UTILES : Données personnelles Nom de naissance complet de la femme, date de naissance, adresse ou un contact téléphonique. Informations cliniques importantes : date du prélèvement, date des dernières règles, statut hormonal (ex. grossesse, ménopause), méthode contraceptive, antécédents de : o néoplasie, o de traitement : radio- chimiothérapie, chirurgie gynécologique, o examens cytopathologies ou histologiques anormaux, o anomalies gynécologiques Cytopathologie non gynécologique : Les examens de cytopathologie non gynécologique comprennent les examens de liquides d épanchement, des sécrétions, et les ponctions à l aiguille fine (cytoponction) des organes. Comme pour les autres examens, la qualité de l échantillon dépend du prélèvement, de la fixation et du transport jusqu au laboratoire. Date d impression : 23/09/ :03 Page 11 sur 21

12 La cytologie non gynécologique peut être réalisée de manière conventionnelle ou en milieu liquide. Identifier et renseigner: avant de réaliser le prélèvement, écrire au crayon gris le nom du patient sur les lames ou le porte lames), ou sur les flacons. Renseigner le Bon d Examen: identifier le prescripteur et le patient, noter les informations cliniques, les hypothèses diagnostiques et les antécédents. Date d impression : 23/09/ :03 Page 12 sur 21

13 CYTOLOGIE DES LIQUIDES ET SECRETIONS PRELEVEMENT ET FIXATION: Cytologie des liquides : Les liquides (liquide d ascite, liquide pleural, ou péricardique) devront être placés dans un flacon sans fixateur, hermétiquement fermé, étiqueté. Le prélèvement doit parvenir rapidement au laboratoire (vaguemestre ou coursier du cabinet doivent être prévenus). Le matériel peut rester au frigo (4 C) pour une durée maximale de 24H. Important : plus de 4 H hors du frigo ou plus de 24H au frigo (4 C) sans fixation, rend l échantillon inutilisable et un nouveau prélèvement devra être fait. Dans le cas de cytologie en milieu liquide, mettre le liquide dans un récipient contenant le milieu de conservation. Cytologie d aspiration bronchique : Fixer l échantillon dans un flacon de formol tamponné à 4%. Cytologie urinaire : L idéal est d'envoyer l échantillon qui peut être recueilli à n'importe quel moment de la journée, mais avec la recommandation de rester deux heures sans uriner avant le prélèvement. Les échantillons, de 20 ml minimum, devront être placés dans un flacon préalablement étiqueté et identifié. Le matériel peut rester au frigo (4 C) pour une durée maximale de 24H. Important : plus de 4 H hors du frigo ou plus de 24H au frigo (4 C) sans fixation, rend l échantillon inutilisable et un nouveau prélèvement devra être fait. NB : renseigner s il s agit d urines mictionnelles ou prélevées lors d une cystoscopie. Date d impression : 23/09/ :03 Page 13 sur 21

14 METHODE : Des étalements sont réalisés après cyto-centrifugation des liquides et colorés au Papanicolaou et/ou au MGG. Le culot de centrifugation des aspirations bronchiques est inclus en paraffine et coloré par l hématoxyline éosine. PRELEVEMENTS NON CONFORMES : Les échantillons sont considérés non conformes selon les critères suivants : Echantillons non identifiés, Non conservés de façon adéquate, Cytologie des liquides non conformes : o Importante proportion de sang, o Liquide coagulé ou auto lysé. DELAI DE TRANSMISSION DU COMPTE RENDU : 4 jours ouvrables après réception de l'échantillon dans le laboratoire. HYGIENE ET SECURITE Les échantillons cytologiques doivent être considérés comme infectieux jusqu'à ce qu'ils soient fixés. Respecter les recommandations réglementaires de manipulation des échantillons patients. CYTOLOGIE D ASPIRATION A L AIGUILLE FINE : Il s agir généralement de cytoponction d organes sur une cible (lésion) : adénopathies, glandes salivaires, pancréas, prélèvements trans-bronchiques, thyroïde, sein, L aspiration à l'aiguille fine est un examen rapide et peu invasif à partir duquel on obtient du matériel pour diagnostic cytologique. Cet examen peut être utilisé dans des lésions palpables et non palpables, pour ces dernières grâce à l imagerie. PRELEVEMENT ET FIXATION: Le prélèvement est réalisé par le médecin habilité après une asepsie locale à l alcool à 70% et selon la technique de ponction de préférence non-aspirative. Technique: effectuer un délicat mouvement de va et vient de l aiguille dans le tissu ponctionné jusqu à ce qu une sérosité remonte dans l aiguille. Date d impression : 23/09/ :03 Page 14 sur 21

15 On monte alors la seringue et on aspire légèrement pour ne pas faire saigner. On réalise les frottis : on dépose 1 ou 2 gouttes du liquide de ponction à l extrémité de la lame (identifiée) et on étale avec une autre lame placée selon un angle aigu. Il doit en résulter un étalement uniforme qui répartit les cellules sans les abimer. Faire 2 ou 3 étalements. Sécher les lames à l air en agitant. Mettre le reste du produit de ponction dans un flacon d Easyfix pour technique monocouche. Pour les liquides de kystes thyroïdiens, le restant de liquide est à adresser frais au cabinet. COLORATION : Les lames séchées à l'air sont colorées en routine par la technique de May-Grünwald-Giemsa. D autres colorations plus spécifiques peuvent être réalisées en fonction des pathologies. PRELEVEMENTS NON CONFORMES : Les échantillons ne sont pas considérés acceptables selon les critères suivants: l'excès de sang, insuffisance de matériel, Fixation inappropriée. Date d impression : 23/09/ :03 Page 15 sur 21

16 DELAI DE TRANSMISSION DU COMPTE RENDU : 4 jours ouvrés après réception de l'échantillon dans le laboratoire. HYGIENE ET SECURITE Les échantillons cytologiques doivent être considérés comme infectieux jusqu'à ce qu'ils soient fixés. Respecter les recommandations réglementaires de manipulation des échantillons patients. 8. EXAMENS AVEC TECHNIQUES COMPLEMENTAIRES 8.1. Examen en immunohistochimie C est un examen réalisé sur biopsies, pièces opératoire ou sur du matériel cytologique (autre que frottis) pour mettre en évidence la présence ou l absence de certaines protéines «antigènes» dans les tissus/cellules. Cet examen est très souvent une aide pour préciser le diagnostic des lésions (histogénèse/différentiation de néoplasie) et recherche d étiologie. Cet examen permet aussi de détecter des facteurs pronostiques et un ajustement thérapeutique : récepteurs hormonaux et HER-2/neu dans les carcinomes mammaires, thérapies ciblées. FIXATION : Actuellement les techniques d immunohistochimie peuvent être réalisées sur du matériel fixé au formol et inclus en paraffine ou fixé à l acétone pour les prélèvements de cytologie spéciale. METHODE : La technique consiste à utiliser des d'anticorps monoclonaux ou polyclonaux pour la détection d'antigènes spécifiques dans les tissus ou cellules. PRELEVEMENTS NON CONFORMES : Une fixation inadéquate (insuffisante ou retardée ) altère ou rend impossible la mise en évidence des antigènes. DELAI DE TRANSMISSION DU COMPTE RENDU : Généralement 6 jours ouvrés après la réception de l'échantillon dans le laboratoire. Date d impression : 23/09/ :03 Page 16 sur 21

17 EVALUATION EXTERNE DE LA QUALITE : Pour ces techniques, le CACP Quimper participe très régulièrement à des évaluations externes de la qualité misent en œuvre par l AFAQAP (Association Française d assurance Qualité en Anatomie cytologie Pathologique). Les résultats de ces évaluations peuvent vous être transmis sur simple demande au CACP Quimper 8.2. Immunofluorescence C est un examen réalisé sur des biopsies (par exemple la peau) pour démontrer la présence de certains antigènes dans les tissus. Souvent, cet examen permet le diagnostic et la classification des lésions (par exemple, lésions cutanées inflammatoires). FIXATION : Le prélèvement doit être immédiatement plongé dans une solution d azote liquide dans la bonbonne de transport fournie par le cabinet. A défaut de bonbonne d azote, le prélèvement doit être plongé dans un tube contenant du liquide de Michel (fourni par le cabinet). METHODE : La technique consiste à utiliser des anticorps pour détecter les antigènes spécifiques de tissus ou de cellules. PRELEVEMENTS NON CONFORMES : Conservation inadéquate qui ne permet pas de mettre en évidence les antigènes. Prélèvement trop petit pour être techniqué. DELAI DE TRANSMISSION DU COMPTE RENDU : 7 jours ouvrés suivant la réception de l'échantillon au laboratoire Examen d hybride capture: Hybrid Capture est une technique de biologie moléculaire utilisée pour détecter des micro-organismes, par exemple le Papilloma virus humain (HPV). Cette technique permet de détecter ce virus et de le classer en groupes de HPV à bas ou haut risque. Date d impression : 23/09/ :03 Page 17 sur 21

18 PRELEVEMENT: Le matériel doit être mis dans un récipient spécifique (Digene-STM ) et envoyé au laboratoire dans un délai maximum de 7 jours après prélèvement, à température ambiante. La technique peut également être réalisée à partir du milieu liquide utilisé par le CACP Quimper les prélèvements de Frottis Cervico-Utérin (Easyfix du laboratoire LABONORD). La recherche de Papilloma virus est essentiellement faite en cas de FCU de type ASC-US selon la terminologie Bethesda. En cas de résultat négatif, la patiente n a quasiment aucun risque d avoir une lésion du col de l utérus. En cas de résultat positif, la conduite à tenir doit être basée sur les recommandations HAS Lorsque le CACP Quimper classe un FCU en ASC-US, si ce FCU a été effectué en milieu liquide, la recherche de Papilloma virus est directement prescrite et effectuée par le cabinet. Les médecins prescripteurs qui ne souhaiteraient pas que cette recherche soit effectuée sous ma seule responsabilité du CACP Quimper doivent en avertir le CACP Quimper par courrier. PRELEVEMENTS NON CONFORMES : Échantillons trop hémorragiques ou avec une cellularité insuffisante. Date d impression : 23/09/ :03 Page 18 sur 21

19 REALISATION TECHNIQUE La technique proprement est réalisée au sein du plateau technique de l Association des Pathologistes de l Ouest (APO). Ce plateau technique est constitué sous la forme d une Société Civile de Moyen, dont la CACP Quimper est actionnaire. DELAI DE TRANSMISSION DU COMPTE RENDU : 30 jours ouvrés après réception de l'échantillon au laboratoire Examen d hybridation in situ (DISH ou CISH): La technique d hybridation in situ (DISH) c est une technique de biologie moléculaire utilisée pour détecter spécialement des anomalies génétiques ou chromosomiques. Dans notre structure elle est effectuée pour la détection de l'amplification de l'oncogène HER-2/neu dans le cancer du sein et pour la recherche du virus EBV dans certaines pathologies carcinologiques. METHODE : La technique consiste en l utilisation de sondes marquées par une enzyme qui en présence de son substrat provoque un précipité coloré (exemple : détection de copie du gène HER-2/neu) et réalisée en système automatique Automate Benchmark XT de la société VENTANA. Fixateur 1 Formol tamponné à 4% Durée de la fixation 2 Pièces chirurgicales : de 6 à 48 heures après avoir été tranchées Microbiopsie : 6 heures (minimum 1 heure) Echantillon de carcinome invasif du sein (primaire ou métastatique) Blocs de paraffine Lames avec des coupes à 2µ «fraîches» (inférieure à 3 jours) 1 Si un autre type de fixateur est utilisé, il est impératif de le signaler 2 Si la durée de fixation n est pas dans l intervalle recommandé il est impératif de le signaler Date d impression : 23/09/ :03 Page 19 sur 21

20 Cas traités IHC 2+ PRELEVEMENTS NON CONFORMES : Une fixation inadéquate (insuffisante ou retardée ) altère ou rend impossible l interprétation de la technique. DELAI DE TRANSMISSION DU COMPTE RENDU : 10 à 15 jours ouvrés suivant la réception de l'échantillon au laboratoire. EVALUATION EXTERNE DE LA QUALITE : Pour ces techniques, le CACP Quimper participe très régulièrement à des évaluations externes de la qualité misent en œuvre par l AFAQAP (Association Française d assurance Qualité en Anatomie cytologie Pathologique). Les résultats de ces évaluations peuvent vous être transmis sur simple demande au CACP Quimper. Date d impression : 23/09/ :03 Page 20 sur 21

21 Date d impression : 23/09/ :03 Page 21 sur 21