Le prélèvement biologique : un échantillon «vivant» dans un contenant.
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- Arthur Ricard
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1 Le prélèvement biologique : un échantillon «vivant» dans un contenant. B CHAUVIN IFSI JANVIER 2014
2 Plan de l exposé Pourquoi prélever des échantillons biologiques? Que peut-on analyser ou détecter dans ces échantillons? Quel laboratoire, quelle discipline, quelle particularité? Quelle réglementation aujourd hui? Quelle attention porter aux prélèvements biologiques? Exemples et non conformités
3 Plan de l exposé Pourquoi prélever des échantillons biologiques? Que peut-on analyser ou détecter dans ces échantillons? Quel laboratoire, quelle discipline, quelle particularité? Quelle réglementation aujourd hui? Quelle attention porter aux prélèvements biologiques? Exemples et non conformités
4 Pourquoi prélever des échantillons biologiques? ou l intérêt des analyses. Art.L Un examen de biologie médicale est un acte médical qui concourt à la prévention, au dépistage, au diagnostic ou à l'évaluation du risque de survenue d'états pathologiques, à la décision et à la prise en charge thérapeutiques, à la détermination ou au suivi de l'état physiologique ou physiopathologique de l'être humain. Ordonnance /01/2010 ratifiée par la loi du 30 mai 2013 portant reforme de la biologie médicale
5 Pourquoi prélever des échantillons biologiques? ou l intérêt des analyses.(2). Prévention de tout risque encouru avant intervention chirurgicale (hémostase.) ou avant mise sous traitement Dépistage (Hépatite, VIH..) Diagnostic prénatal (recherche d une trisomie, ) Aide au diagnostic devant un syndrome (hémorragique, fébrile )
6 Pourquoi prélever des échantillons biologiques? ou l intérêt des analyses.(3). Simulation des métabolismes dans les tests dynamiques (hyperglycémie provoquée) Suivi des traitements (AVK, hormones, médicaments, vitamines..) Suivi immunitaire d une patiente (sérologie pour toxoplasmose.) Aide et proposition au médecin d un traitement efficace pour un agent pathogène détecté ( identification et antibiogramme,.)
7 Plan de l exposé Pourquoi prélever des échantillons biologiques? Que peut-on détecter ou analyser dans ces échantillons? Quel laboratoire, quelle discipline, quelle particularité? Quelle réglementation aujourd hui? Quelle attention porter aux prélèvements biologiques? Exemples et non conformités
8 Que peut-on détecter ou analyser dans ces différents échantillons (1)? Différents échantillons: Du sang ou ses composants (plasma, sérum et cellules sanguines, hémocultures) Des liquides profonds (LCR, LBA.) Des sécrétions (urines, selles, sueur, ascite..) Des fragments de tissus, des biopsies ou des pièces opératoires plus importantes
9 Que peut-on détecter ou analyser dans ces différents échantillons (2)? Différents analytes: ions (Ca, K, P.) glycoprotéines, des lipides (Fibrinogène, albumine.) hormones (TSH ), enzymes (cardiaques, hépatiques ) Différents constituants: des des des des des cellules (sanguines, épithéliales..) des chromosomes, des gènes Des agents pathogènes: des des des des bactéries (les pneumocoques ou les BK ) virus (le virus de l hépatite B, le CMV..) parasites (le tænia, la douve du foie ) champignons..)
10 Que peut-on détecter ou analyser dans ces différents échantillons (3)? Des modifications : de notre patrimoine génétique (caryotype, étude génomique, translocation.) de nos tissus (présence de cellules tumorales,.) la présence anormale de cellules d un liquide dans un autre (cellules de la moelle osseuse en grande quantité dans le sang, ) Etc
11 Plan de l exposé Pourquoi prélever des échantillons biologiques? Que peut-on détecter ou analyser dans ces échantillons? Quel laboratoire, quelle discipline, quelle particularité? Quelle réglementation aujourd hui? Quelle attention porter aux prélèvements biologiques? Exemples et non conformités
12 Quel laboratoire, Quelle discipline Quelle particularité (1) Les laboratoires représentent plusieurs disciplines: La BIOCHIMIE avec ses différentes composantes. L HEMATOLOGIE avec ses deux composantes. L IMMUNO-ALLERGOLOGIE La PHARMACO-TOXICOLOGIE Le département des INFECTIEUX Le département de PATHOLOGIE CELLULAIRE ET TISSULAIRE LA GENETIQUE Chacun d entre eux étudie tout à la fois le physiologique et le pathologique
13 Quel laboratoire, Quelle discipline Quelle particularité (2) La BIOCHIMIE avec ses différentes composantes: La Biochimie de base avec le dosage des ions et molécules, enzymes, L Hormonologie avec le dosage des hormones produites par les différentes glandes, et leurs interactions Le Métabolique avec l étude des différents métabolismes (glucides, lipides ou acides aminés).
14 Quel laboratoire, Quelle discipline Quelle particularité (2) L HEMATOLOGIE avec ses deux composantes : La cytologie : l étude et le comptage des constituants cellulaires du sang mais aussi de la moelle osseuse, L hémostase avec l étude de la cascade enzymatique permettant le fragile équilibre entre saignement et thrombose. Chaque discipline de ce département peut-être amenée à effectuer des recherches en biologie moléculaire pour des pathologies particulières.
15 Quel laboratoire, Quelle discipline Quelle particularité (3) L IMMUNO-ALLERGOLOGIE est un laboratoire qui regroupe deux entités: Le laboratoire d Immunologie participe à l exploration des facteurs liés à l immunité et au dépistage des pathologies associées. Le laboratoire d allergologie permet un dépistage et un suivi des réactions allergiques.
16 Quel laboratoire, Quelle discipline Quelle particularité (4) La PHARMACO-TOXICOLOGIE regroupe aussi deux domaines : La PHARMACOLOGIE qui permet le dosage des médicaments et le suivi des traitements. La TOXICOLOGIE qui permet le dépistage et l identification des toxiques.
17 Quel laboratoire, Quelle discipline Quelle particularité (5) Le département des INFECTIEUX regroupe trois disciplines que sont: La BACTERIOLOGIE La VIROLOGIE La PARASITOLOGIE - MYCOLOGIE Chaque discipline de ce département peut-être amenée à effectuer des identifications d agents pathogènes en biologie moléculaire.
18 Quel laboratoire, Quelle discipline Quelle particularité (6) Le département de PATHOLOGIE CELLULAIRE ET TISSULAIRE regroupe plusieurs entités que sont : Le Le Le Le Le laboratoire laboratoire laboratoire laboratoire laboratoire d histo-cytopathologie de foetopathologie de neurobiologie neuropathologie de pathologie osseuse de la biologie de la reproduction
19 Quel laboratoire, Quelle discipline Quelle particularité (7) Le laboratoire de GENETIQUE : Utilise différentes techniques pour établir la carte chromosomique ou génomique d un individu né ou en devenir.
20 Plan de l exposé Pourquoi prélever des échantillons biologiques? Que peut-on détecter ou analyser dans ces échantillons? Quel laboratoire, quelle discipline, quelle particularité? Quelle réglementation aujourd hui? Quelle attention porter aux prélèvements biologiques? Exemples et non conformités
21 Quelle réglementation aujourd hui?(1) Les principaux textes: Loi HPST du 21/07/2009 Art. L Modifiée par LOI n du 30 mai art. 4 «Un laboratoire de biologie médicale ne peut réaliser d examen de biologie médicale sans accréditation». Ordonnance du 13/01/2010 modifiée par la LOI n du 30 mai art. 8 «Aucun laboratoire de biologie non accrédité ne peut fonctionner après le 1er novembre 2020» Il doit être accrédité pour 50% de son activité à compter du 1 novembre 2016 et 100% à compter du 1er novembre 2020
22 Quelle règlementation aujourd hui?(2) Accréditation par l Instance nationale d accréditation = COFRAC (Art I) «Dans un CHU le pôle constitue un laboratoire unique dont le biologiste responsable est le chef de pôle» (Art. L ) Arrêté du 5 août 2010 fixant les références des normes d'accréditation applicables aux LBM Les normes d accréditation en vigueur applicables aux laboratoires de biologie médicale prévues à l article L sont : La norme NF EN ISO (La norme NF EN ISO ) La norme NF EN ISO pour la biologie délocalisée
23 Quelle règlementation aujourd hui?(3) Que veut dire accréditation? «L accréditation est une attestation délivrée par une tierce partie constituant une reconnaissance formelle de la compétence d une entité à réaliser des activités spécifiques» Accréditation Certification Que veut dire, pour un laboratoire être accrédité? Le laboratoire doit prouver que du prélèvement au résultat de l analyse tout est conforme et réalisé par du personnel informé et compétent.
24 Quelle réglementation aujourd hui?(3) Un examen de biologie médicale se déroule en trois phases : 1 La phase pré-analytique, qui comprend le prélèvement d'un échantillon biologique sur un être humain, le recueil des éléments cliniques pertinents, la préparation, le transport et la conservation de l'échantillon biologique jusqu'à l'endroit où il est analysé ; 2 La phase analytique, qui est le processus technique permettant l'obtention d'un résultat d'analyse biologique ; 3 La phase post-analytique, qui comprend la validation, l'interprétation contextuelle du résultat ainsi que la communication appropriée du résultat au prescripteur et, dans les conditions fixées à l'article L , au patient, dans un délai compatible avec l'état de l'art.
25 Plan de l exposé Pourquoi prélever des échantillons biologiques? Que peut-on détecter ou analyser dans ces échantillons? Quel laboratoire, quelle discipline, quelle particularité? Quelle réglementation aujourd hui? Quelle attention porter aux prélèvements biologiques? Exemples et non conformités
26 Quelle attention porter aux prélèvements biologiques? (1) Le respect de la personne prélevée : IDENTITOVIGILANCE Un patient = Un nom (et/ou nom de naissance) + Un prénom + Une date de naissance
27 Quelle attention porter aux prélèvements biologiques? (2) Un prélèvement, c est un moment approprié C est une position du patient appropriée: Par exemple : rénine en position coucher ou debout C est un statut physiologique Par exemple : Deux heures après l injection ou avant la prise d un médicament Par exemple: à jeun, enceinte C est un site de prélèvement approprié Par exemple: dans le bras opposé à la perfusion ou après purge de l héparine
28 Quelle attention porter aux prélèvements biologiques? (3) Un prélèvement, c est un contenant spécifique Pot stérile ou non (recueil de LCR, de selles) Tube avec conservateur ou non (recueil d urines) Recueil en atmosphère aérobie ou anaérobie (hémoculture ) Tube contenant un activateur de la coagulation (avec gel ou non) Tube contenant un anticoagulant spécifique
29 Quelle attention porter aux prélèvements biologiques? (4) Les différents anticoagulants obtention de plasma après centrifugation Le K2EDTA ou K3EDTA préserve l intégrité des populations cellulaires tout en complexant le calcium et donc en l inhibant. Le citrate de sodium à 3.8% (rapport citrate/sang 1 volume pour 9 volumes) est utilisé pour les tests d hémostase et son pouvoir de complexer le calcium. L héparinate de lithium favorise l inhibition du facteur Xa par l antithrombine II. Le fluorure de sodium mono iodoacétate est indiqué dans le dosage de la glycémie car il contient un inhibiteur de la glycolyse. Le K2EDTA sans élément trace est préconisé pour les dosages en pharmacologie notamment des métaux.
30 Quelle attention porter aux prélèvements biologiques? (5) Les tubes avec activateurs de la coagulation obtention de sérum après centrifugation Sans gel Avec gel Attention SERUM PLASMA SERUM = PLASMA PROTEINES DE LA COAGULATION
31 Quelle attention porter aux prélèvements biologiques? (6) Un impératif : L ordre des tubes de prélèvement
32 Quelle attention porter aux prélèvements biologiques? (7) Le transport des échantillons : des conditions à respecter À l abri de la lumière (vitamines) A 37 C (cryoglobulines) Dans la glace (ammoniaque, lactate.)
33 Quelle attention porter aux prélèvements biologiques? (8) Attention aux erreurs d étiquetage Du bon étiquetage, les règles: Une étiquette = un flacon particulier Attention aux erreurs d étiquetage
34 Plan de l exposé Pourquoi prélever des échantillons biologiques? Que peut-on détecter ou analyser dans ces échantillons? Quel laboratoire, quelle discipline, quelle particularité? Quelle réglementation aujourd hui? Quelle attention porter aux prélèvements biologiques? Exemples et non conformités
35 Exemples et non conformités (1) Le bilan d hémostase Bilan d hémostase pour un patient dont le prélèvement a été fait au Niveau d une perfusion d héparine TP 90% TCA 60/28 ratio 2.14 Bilan d hémostase pour un patient correctement prélevé Temps de thrombine >120/17 Temps de thrombine 17/17 TP 90% TCA 29/28 ratio 1.03
36 Exemples et non conformités (2) La numération Résultats de cytologie pour un patient dont le prélèvement a été fait au bras de la perfusion Résultats de cytologie pour le même patient dont le prélèvement a été correctement réalisé Globules Rouges Volume Globulaire Moyen 119 Hémoglobine 5.1 Globules Rouges Volume Globulaire Moyen 95 Hémoglobine 8.7
37 Exemples et non conformités (3) Le bilan de biochimie Madame L. Marie est hospitalisée en médecine interne. L infirmière a précisé sur le bon qu elle était très difficile à piquer. Son ionogramme donne : Glucose 5mmoles/L Urée 7.2 mmoles/l Protides 46 g/l Na 138 mmoles/l K 9.5 mmoles/l Cl 106 mmoles/l Bicarbonates 20 mmoles/l Que pouvez-vous dire de ce ionogramme? - K+ :, Ca Quelle explication pouvez-vous évoquer? -prélèvement sur tube EDTA, ou plutôt ajout du contenu du tube EDTA dans le tube hépariné (l EDTA est de l EDTA dipotassique) Normales Glucose 4,1-6,1 mmol/l Urée 3,5-7,2 mmol/l Protides g/l Na mmol/l K 3,5-5 mmol/l Que devez-vous faire? - Discontinuer tout le bilan et téléphoner pour reprélever Cl mmol/l Créatinine 87 µmoles/l Bicarbonate mmol/l Calcium 0.66 mmoles/l Créatinine µmol/l Calcium 2,25-2,60 mmol/l
38 Exemples et non conformités (4)
39 Un prélèvement pour une analyse C est.. Un patient Un contenant et un acheminement appropriés pour une aide au diagnostic, au traitement..
40 Merci pour votre écoute
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