HEMATOLOGIE : ETUDE DES LEUCOCYTES

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1 HEMATOLOGIE : ETUDE DES LEUCOCYTES INTRODUCTION : L examen sanguin, et particulièrement l examen des leucocytes, a plusieurs intérêts, notamment : Il représente un moyen d évaluation de l état général de l animal Il permet de compléter l examen ou le diagnostic clinique Il évalue la capacité de l animal à combattre une infection Il est le témoin de l évolution de certains processus pathologiques Il permet le suivi thérapeutique Il fait partie du bilan préanesthésique Il faut cependant souligner que les anomalies de l hémogramme sont en général non spécifiques, et que des réponses similaires peuvent être associées à de nombreuses pathologies différentes. Il existe toutefois quelques exceptions, comme la mise en évidence de parasites sanguins ou de cellules atypiques, qui permettent directement de poser un diagnostic. L évaluation correcte du leucogramme requiert également certaines informations concernant notamment l espèce, le site et le moment du prélèvement, l anamnèse et l examen clinique de l animal. Les frottis de sang devraient être préparés le plus rapidement possible après prélèvement sur anticoagulant. En effet, des modifications morphologiques, comme une vacuolisation cytoplasmique, une irrégularité de la membrane ou de la picnose (éclatement du noyau), peuvent être observés avec le temps, notamment au niveau des neutrophiles, lors de prélèvement sur EDTA. 1

2 Evaluation du nombre total de leucocytes : Le nombre total de leucocytes varie avec l espèce et l âge de l animal. Il est élevé à la naissance et diminue progressivement pour atteindre les valeurs de l adulte entre 2 et 12 mois. Le nombre total de leucocytes est évalué pour mettre en évidence une éventuelle augmentation, c est-à-dire une leucocytose, ou une diminution, c est-à-dire une leucopénie, du nombre de cellules par rapport à un intervalle de référence adapté en fonction de l espèce. Il est également important de déterminer le type de leucocyte responsable de cette variation. Une modification du nombre total de leucocytes peut provenir d une anomalie de production, de libération ou de distribution intravasculaire, d un changement de leur demi-vie ou encore des variations de l équilibre entre les réserves sang-tissus. Leucocytose : Elle correspond à une augmentation du nombre total de leucocytes. Elle peut être physiologique, réactionnelle ou proliférative (autonome). Leucocytose physiologique : Il s agit de la mobilisation du pool marginal de neutrophiles et/ou lymphocytes vers la circulation générale, résultant en une augmentation du nombre total et absolu des neutrophiles et/ou lymphocytes. Cela se traduit par une neutrophilie et/ou une lymphocytose transitoire (augmentation rare des monocytes et des éosinophiles). Elle est fréquente chez les jeunes animaux. Elle est souvent secondaire à un déséquilibre émotionnel ou physique. La leucocytose «de stress», induite par les corticoïdes peut être physiologique ou pathologique. En général, on retrouve : Une neutrophilie Une lymphopénie (lympholyse des lymphocytes T stéroid-sensible ou séquestration des lymphocytes dans des sites extravasculaires) Une éosinopénie (interférence avec les effets chimiotactiques de l histamine). Chez le chien, on peut également noter de la monocytose (cause inconnue). 2

3 Il est intéressant de noter que l éosinopénie et la lymphopénie sont les seules modifications caractéristiques du leucogramme lors de Cushing chez le chien (alors que la leucocytose est observée dans 20% des cas seulement). Leucocytose réactionnelle : Elle se produit en réponse à une pathologie. Elle s accompagne ou non de left shift (augmentation du nombre de formes immatures dans le sang circulant). Son importance varie d une espèce à l autre et est souvent fonction du rapport N/L (neutrophiles /lymphocytes). Les animaux ayant un N/L élevé (chiens et chats) montrent une réponse beaucoup plus importante que les animaux ayant un N/L bas (chevaux, bovins). Une leucocytose est qualifiée de réactionnelle lorsqu elle s accompagne de : Neutrophilie avec left shift Hyperfibrinogénémie Monocytose (espèce autre que le chien) Absence de lymphopénie ou d éosinopénie Leucocytose proliférative : Elle résulte d une modification néoplasique des cellules souches de la moëlle osseuse. Elle ne se manifeste pas toujours par de la leucocytose! En effet, le comptage total peut être normal ou même bas, et la population leucocytaire anormale. Leucopénie: Elle est due la plupart du temps à une neutropénie ou une lymphopénie : - Neutropénie : cause majeure de leucopénie chez les animaux ayant un N/L >1 - Lymphopénie : cause majeure de leucopénie chez les animaux ayant un N/L <1 La neutropénie est plus fréquente lors d infections bactériennes, alors que la lymphopénie est plus fréquente lors d infections virales. Les chats atteints de panleucopénie développent une leucopénie (neutropénie et lymphopénie) dans les 2 à 4 jours (dépression de la myélopoièse). On peut également observer une anémie et une thrombocytopénie dans les cas plus graves. On note le même phénomène chez les chiens atteints de parvovirose. Lors de maladie de Carré, on observe une leucopénie très précoce suivie d une leucocytose due à une surinfection bactérienne. La lymphopénie est une observation constante de la maladie de Carré (nécrose importante du tissu lymphoïde par le virus). 3

4 Left shift : Le sang périphérique contient normalement seulement un nombre limité de neutrophiles immatures (moins de 300 band cells/µl dans la plupart des espèces). L augmentation de la mise en circulation de neutrophiles immatures à partir de la moëlle dans le sang a lieu lorsque la demande dans les tissus augmente, ou lors de leucémie myélogène. La présence d un nombre supérieur à la normale de neutrophiles immatures dans le sang constitue un «left shift». Il peut être gradé de 1+ à 4+ selon le type de cellules myéloïdes présentes : 1+ : band cells 2+ : métamyélocytes 3+ : myélocytes et promyélocytes 4+ : myéloblastes L importance du left shift caractérise la sévérité de la pathologie, alors que l importance du comptage leucocytaire reflète la capacité de la moëlle à répondre à une demande. Regenerative left shift : Leucocytose légère à marquée. Nombre de neutrophiles immatures < nombre de neutrophiles segmentés Indique une bonne réponse de l hôte A lieu lorsque la moelle a suffisamment de temps (3 à 5 jours) pour répondre à la demande de neutrophiles dans les tissus Degenerative left shift : Nombre total de leucocytes normal ou légèrement augmenté Nombre de neutrophiles immatures > nombre de neutrophiles matures Indique que la moelle n a plus de neutrophiles matures en réserve et est obligée de libérer un nombre important de cellules immatures Signifie donc que soit la moelle n a pas assez de temps pour répondre, soit qu elle est dépassée par une demande excessive. Pronostic réservé. 4

5 Réaction leukémoïde : Il s agit d une leucocytose réactionnelle due à une élévation inhabituelle du nombre total de globules blancs, suggérant une leucémie. Elle concerne le plus souvent la lignée des neutrophiles (similaire à un regenerative left shift) et occasionnellement les lymphocytes ou les éosinophiles. La clinique et les autres examens complémentaires suffisent en général pour confirmer qu il ne s agit pas d une leucémie. Exemples de réaction leukémoïde : Regenerative left shift extrême lors de pyomètre Lymphocytose marquée lors de pathologies suppuratives chroniques Modifications morphologiques des leucocytes : Elles touchent essentiellement les neutrophiles. Elles sont secondaires à l effet de toxines bactériennes, de produits toxiques du métabolisme ou de produits de nécrose tissulaire. Elles se marquent principalement par : Une basophilie du cytoplasme (due à la rétention d ARN cytoplasmique) Une vacuolisation cytoplasmique Des corps de Döhle (restes de RER). Fréquent chez le chat et le cheval. Des granules azurophiles Des formes géantes bizarres et polyploïdes Des artefacts de stockage sur EDTA peuvent également être observés (membrane cellulaire irrégulière, picnose, ). Ces artefacts doivent être distingués des anomalies toxiques des neutrophiles associées à des pathologies inflammatoires ou infectieuses. L hypersegmentation (> 5 lobes nucléaires) du noyau du neutrophile traduit : Un vieillissement du sang in vitro Un séjour intravasculaire prolongé des cellules (effet corticostéroïde). L augmentation du nombre de neutrophiles hypersegmentés dans le sang est qualifié de right shift. L hyposegmentation est moins fréquente. Elle est héréditaire lors d anomalie de Pelger- Hüet. 5

6 CAUSES DE NEUTROPHILIE Physiologique o Libération d épinéphrine o Corticostéroïdes endogène ou exogène Réactionnelle o Infection locale ou systémique : bactérienne, virale, parasitaire, fungique o Nécrose tissulaire o Pathologies à médiation immune o Tumeurs Proliférative o Leucémie myéloïde aiguë ou chronique CAUSES DE NEUTROPENIE Diminution de la survie o Infections bactériennes aiguës o Septicémie o Toxémie o Anaphylaxie o Hypersplénisme Diminution de la production o Infections aiguës : bactérienne, virale,.. o Intoxication (oestrogènes) o Leucémie myéloïde ou lymphoïde o Hématopoièse cyclique canine Granulopoièse inefficace o Infection par le FeLV o Leucémie aiguë myéloïde ou lymphoïde 6

7 CAUSES DE LYMPHOCYTOSE o Physiologique o Inflammation suppurative chronique o Lymphome o Leucémie lymphocytaire CAUSES DE LYMPHOPENIE o Corticostéroides o Infection virale o Septicémie o Endotoxémie o Lymphome o Leucémie lymphocytaire o Immunosuppresseurs o Syndrome d immunodéficience CAUSES DE MONOCYTOSE o Corticostéroides chez le chien o Inflammation ou infection chronique (matrice!!) o Leucémie monocytaire ou myélomonocytaire o Pathologies granulomateuses CAUSES DE MONOCYTOPENIE o Inflammation ou infection aiguë o Corticostéroides (certaines espèces) 7

8 CAUSES DE EOSINOPHILIE o Parasitisme o Allergies o Pathologis au sein de tissus riches en mastocytes o Leucémie éosinophilique o Causes inconnues CAUSES DE EOSINOPENIE o Corticostéroïdes o Infection aiguë CAUSES DE BASOPHILIE o Idem éosinophilie o Leucémie basophilique 8