TESTS BIOMOLECULAIRES : ROUTINE INDISPENSABLE DANS LES SYNDROMES MYELOPROLIFERATIFS
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- Édouard Lamarche
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1 TESTS BIOMOLECULAIRES : ROUTINE INDISPENSABLE DANS LES SYNDROMES MYELOPROLIFERATIFS Gérard DINE et Yves REHN Hématologie biologique et clinique Centre Hospitalier de Troyes 1 G. DINE Avril 2010
2 Syndromes myéloprolif loprolifératifsratifs LMC (Leucémie Myéloïde Chronique ; CML) Polyglobulie (Vaquez ; PV) Thrombocythémie essentielle (ET) Splénomégalie myéloïde (Myélofibrose Primitive ; PMF) Maladies malignes subaigües ou chroniques Evolution lente et parfois aléatoire Risques médicaux variés notamment vasculaires et hématologiques (aplasie, transformation aiguë, pancytopénie fibrosante) 2 G. DINE Avril 2010
3 Démarche diagnostique Clinique Imagerie Biologie (découverte inopinée) Hémogramme perturbé : GB, GR, plaquettes Anomalies associées : acide urique, LDH, B12 Biologie spécialisée Marqueurs indirects : EPO, ferritine, récepteur soluble de la transferrine Bilan hématologique : myélogramme, BOM, caryotype «Tests bio moléculaires accessibles à la prise de sang» Transcripts BCR / ABL V617F de Jak2 Mutations MPL 3 G. DINE Avril 2010
4 Lignée e globulaire élevée Jak2 Jak2 Θ EPO normale ou élevée EPO subnormale Mutations exon 12 Θ Mutations exon 12 Polyglobulie Autres étiologies Explorations complémentaires Polyglobulie tjs BCR / ABL Θ si LMC 4 G. DINE Avril 2010
5 Lignée e plaquettaire élevée Jak2 Jak2 Θ BOM Cytogénétique MPL MPL Θ Thrombocythémie essentielle Explorations complémentaires (BOM et cytogénétique) tjs BCR / ABL Θ si LMC 5 G. DINE Avril 2010
6 Jak2 Situation intriquée avec splénom nomégalie Jak2 Θ BOM Cytogénétique MPL MPL Θ Splénomégalie myéloïde Explorations complémentaires (BOM et cytogénétique) tjs BCR / ABL Θ si LMC 6 G. DINE Avril 2010
7 Suivi thérapeutique Transcripts BCR / ABL Glivec, Sprycel, Tasigna V617F de Jak2 Hydrea, Xagrid, Vercyte Pas d impact des saignées 7 G. DINE Avril 2010
8 APPORT DE LA BIOLOGIE MOLECULAIRE DANS LE DIAGNOSTIC ET LE SUIVI DES SMP Laboratoire de biologie médicale 8
9 Examens de biologie moleculaire dans les SMP Recherche et quantification des gènes de fusion BCR-ABL Détection de la mutation JAK2 V617F/G1849T Détection de la mutation MPL W515L et W515K A partir d une simple prise de sang (1 tube EDTA) Laboratoire de biologie médicale 9
10 BCR-ABL Chez les patients atteints de LMC, présence d un chromosome anormal (chromosome Philadelphie ou Ph+) résultant d une translocation entre les chromosomes 9 et 22 t(9;22) mettant en continuité les gènes BCR et ABL avec pour conséquence la production d un ARN de fusion et d une protéine chimérique bcr-abl à forte activité tyrosine kinase (90 à 95% des cas) Laboratoire de biologie médicale 10
11 11 LA TRANSLOCATION CHROMOSOMIQUE t(9:22) à l origine de la LMC XY Schéma du Chromosome Ph+ abl bcr Chr 9 Chr 22 Ph bcrabl Protéine de fusion à forte activité tyrosine kinase 11
12 Objectifs du traitement par ITK Obtenir une Réponse Hématologique Complète Absence de symptôme, de splénomégalie et de myélémie Leucocytes < 10 G/L et plaquettes < 450 G/L Obtenir une Réponse Cytogénétique Complète Éradication des cellules porteuses de la translocation (0 % de cellules Ph+ médullaires) Obtenir une Réponse Moléculaire Majeure Ratio Bcr-Abl/Abl < 0,1 % par RQ-PCR Diminution 3 log du taux de transcrits Bcr-Abl Dans l idéal, transcrits Bcr-Abl indétectables de manière durable (rémission complète) Laboratoire de biologie médicale 12
13 Adaptation du traitement Circonstances pouvant conduire à une augmentation de la dose de Glivec Suivi recommandé dans la LMC en phase chronique Laboratoire de biologie médicale 13
14 Mutation JAK2 V617F Découverte en 2005 de la mutation V617F du gène codant pour la tyrosine kinase JAK2 (chromosome 9) dans les SMP Mutation JAK2 V617F, premier marqueur génétique de la polyglobulie de Vaquez Mutation JAK2 V617F, détectée chez une majorité de patients atteints de la PV Mutation JAK2 V617F, retrouvée également dans environ la moitié des cas de myélofibroses primitives (PM) et des Thrombocytémies essentielles (ET) Laboratoire de biologie médicale 14
15 Mutation MPL W515L Découverte en 2006 d une mutation touchant le récepteur de la thrombopïétine (MPL W515L ou MPL W515 K) Mutation MPL W515L ou MPL W515 K retrouvée dans 5% des myélofibroses primitives JAK2 V617F négatif Mutation MPL W515L ou MPL W515 K retrouvée dans 1% des Thrombocytémies essentielles JAK2 V617F négatif Intérêt de la recherche de cette mutation chez les sujets ayant une myélofibrose, qu ils soient porteurs ou non de la mutation JAK2 V617F, pour identifier les patients ayant une dépendance plus élevée aux transfusions de GR Laboratoire de biologie médicale 15
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