Certificat en biotechnologie

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1 Immunologie MCB Certificat en biotechnologie Faculté des sciences et génie Département de biochimie, de microbiologie et de bioinformatique Laboratoire d immunologie appliquée MCB crédits Trimestre : Professeurs : Automne-2010

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3 Laboratoire d immunologie appliquée MCB CLIENTÈLE Ce cours s adresse spécifiquement aux étudiant(e)s inscrit(e)s au certificat en biotechnologie. Aucun préalable n est requis pour ce cours. Cependant la maîtrise des notions de base en immunologie est un atout. HORAIRE Le cours a lieu les jeudis de 18 h 00 à 23 h 00 dans les locaux du Cégep de Lévis-Lauzon (A-307 et A-362). Conformément au calendrier scolaire , les cours débutent le 2 septembre et se terminent le 9 décembre. Il n y a pas de cours lors de la semaine de lecture (28 octobre). BUT DU COURS Fournir à l étudiant(e) l opportunité d acquérir des connaissances et habiletés techniques reliées à l immunologie. OBJECTIFS DE CONNAISSANCE Définir la structure et les fonctions des anticorps; Caractériser les interactions entre antigène et anticorps; Expliquer une réponse anticorps; Décrire les différentes façons de produire des anticorps (polyclonale, monoclonale, par ingénierie génétique) Décrire les principales immunotechniques (immunoessais, agglutination et précipitation, bioessais). Comprendre le développement d outils immunologiques à des fins diagnostiques et thérapeutiques. Commenter les principales applications des anticorps dans les domaines diagnostiques et thérapeutiques. OBJECTIFS D HABILETÉS TECHNIQUES Mettre en pratique les techniques immunologiques dans une perspective d application en biotechnologies; Appliquer des protocoles reliés aux immunotechniques; Compiler les notes et résultats de laboratoire; Purifier des immunoglobulines; Mesurer la réaction antigène-anticorps par diverses techniques : Immunoessais (ELISA), immunoempreinte, immunofluorescence, agglutination, immunodiffusion. Isoler les cellules du système immunitaire en utilisant différentes techniques (gradient, panning ); Intégrer différentes techniques dans un projet concret de recherche et développement.

4 CONTENU THÉORIQUE Module 1 Les anticorps : outils de base Structure des immunoglobulines. Classes d immunoglobulines. Domaines fonctionnels. Purification d immunoglobulines. Date 2 sept Module 2 Production d anticorps Caractéristiques de la réponse anticorps. Production d anticorps polyclonaux et monoclonaux. Ingénierie génétique des anticorps sept Module 3 Interactions antigène-anticorps Module 4 Immunoessais Module 5 Immunologie cellulaire Types d antigènes. Épitopes linéaires et conformationnels. Liaisons impliquées dans l interaction antigène-anticorps. Spécificité. Affinité et avidité. Essais d interactions primaires, secondaires et tertiaires. Immunofluorescence, ELISA, immunoempreinte. Réactions de précipitation et d agglutination Séparation de cellules. Cytofluorométrie Cytokines et réponse immunitaire 23 sept 7-14 oct nov Module 6 Autres utilisations des anticorps Protéomique et biosenseurs Immunoprécipitation. Chromatographie d affinité utilisant des anticorps. Utilisation d outils thérapeutiques basés sur l immunologie dans le traitement du cancer. Interventions passives utilisant des anticorps. 25 nov

5 Laboratoire d immunologie appliquée MCB HORAIRE DES LABORATOIRES Professeur Titre Date Préparation des solutions 2 septembre Purification d immunoglobulines Purification et dosage des protéines Vérification de la pureté (électrophorèse) Immunoempreinte Électrophorèse et transfert Immunoessai Examen Théorique I 9 septembre 16 septembre 23 septembre 30 septembre 30 septembre Immunofluorescence 7 octobre Réactions d agglutination Immunodiffusion Immunodiffusion (suite) 14 octobre 21 octobre Examen Laboratoire I 21 octobre Séparation de cellules Cytométrie Cytométrie (suite) Dosage cytokines 4 novembre 11 novembre Dosage cytokines (suite) 18 novembre Détermination d un titre 25 novembre Remise Fiches laboratoire 25 novembre Retour sur les laboratoires 2 décembre Examen Théorique II Examen pratique Examen Laboratoire II 2 décembre 9 décembre 9 décembre

6 FORMULE PÉDAGOGIQUE Le cours de «Laboratoire d immunologie appliquée» du Certificat en biotechnologie se donnera sous la forme de cours magistraux et de laboratoires. Des protocoles, des notes de cours, des articles scientifiques et des documents audiovisuels seront utilisés pour faciliter l apprentissage. L étudiant(e) devra lire les protocoles et préparer son cahier de laboratoire avant de se présenter aux travaux pratiques. Les expérimentations seront effectuées en équipe de deux personnes. MATÉRIEL NÉCESSAIRE Cahier de compilation. Sarrau, lunettes de protection et crayon marqueur permanent. Pour l accès aux protocoles et autres documents, l étudiant(e) doit s inscrire au site suivant : virtuel.levinux.org DISPONIBILITÉ L étudiant(e) pourra rejoindre les professeurs par téléphone au (4129) et fixer une rencontre, au besoin. Le bureau des professeurs est situé au CEGEP de Lévis-Lauzon, local A-300A. Vous pouvez également contacter le professeur via courrier électronique à l adresse suivante : mathieu.nadeau@clevislauzon.qc.ca et marie-eve.janelle@clevislauzon.qc.ca BIBLIOGRAPHIE HRALOW, E., LANE, D. Using antibodies. A laboratory manual. New York. Cold Spring Harbor Laboratory Press FERNANDEZ-BOTRAN, R. VETVICKA, V. Advanced methods in cellular immunology. Boca Raton. CRC Press GOLDSBY, R.A., KINDT, T.J. OSBORNE B.A. Immunologie. Le cours de Janis Kuby. Paris. Dunod. 2001

7 Laboratoire d immunologie appliquée MCB ÉVALUATION L étudiant(e) sera tenu de compiler ses observations et résultats de laboratoire dans un cahier selon les critères définis par le professeur lors du premier cours. Deux examens permettront d évaluer la compréhension des techniques et l analyse des observations faites en laboratoire. Pour ces examens, l étudiant(e) aura droit à son cahier de compilation. La capacité de l étudiant(e) de planifier et de réaliser les manipulations adéquates sera également évaluée. Un travail de documentation et de rédaction de protocole sera également demandé. Répartition de l évaluation : Examen théorique I : 30 septembre % de la note finale Examen laboratoire I : 21 octobre % de la note finale Cahier + fiches de laboratoire 25 novembre % de la note finale Examen théorique II: 2 décembre % de la note finale Test pratique : 9 décembre % de la note finale Examen laboratoire II : 9 décembre % de la note finale Les cotes A à E seront distribuées de la façon suivante : A % C % A 90-94% C 70-73% A % C % B % D % B 80-82% D 50-59% B % E < 50% (ÉCHEC) POLITIQUES D ÉVALUATION ET VALORISATION DE LA LANGUE La note de passage est de 50%. En cas d absence à une évaluation, l étudiant(e) doit référer aux règlements en vigueur à la Faculté des sciences et génie de l Université Laval. Pour connaître les diverses modalités de valorisation de la langue française, l étudiant(e) doit référer à la Politique de valorisation de la langue française du Département de biochimie, de microbiologie et de bio-informatique, Faculté des sciences et génie.