INTRODUCTION A LA BIOCHIMIE CLINIQUE

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1 INTRODUCTION A LA BIOCHIMIE CLINIQUE

2 INTRODUCTION Biochimie clinique: chimie clinique ou médecine de laboratoire dans laquelle les méthodes de la chimie et de la biochimie sont appliquées à l étude des maladies Place de la BC: 1/3 des investigations au laboratoire

3 Place de la BC en médecine Antécédents Examen clinique Services de diagnostic imagerie Tests physiologiques: ECG,EEG,SPIROMETRIE,Fibro Services de laboratoire Hémato Histopath Immuno Microbiologie Biochimie clinique - Services d urgences -Biochimie de base -Examens spécialisés

4 Usage des tests biochimiques Diagnostic Surveillance des traitements Dépistage Pronostic Recherche sur la base biochimique des maladies Essais cliniques des nouveaux médicaments

5 REPERTOIRE ANALYTIQUE PLUS DE 400 TESTS Biochimie de base - sodium,potassium,chlore,bicar - Urée, créat - PT, albumine - Bili, PAL - ASAT,ALAT - GGT - CK - ph, pco2,po2( gaz de sang) - Glucose, - Amylase

6 REPERTOIRE ANALYTIQUE Examens spécialisés - Hormones - Protéines spécifiques (CRP,Hapto,Oroso) - Oligoéléments - Vitamines - Drogues (médicaments et toxiques) - Lipides,lipoprotéines - Analyses de l ADN

7 Échantillons utilisés en BC Sang veineux, sérum ou plasma Sang artériel Sang capillaire Urine Fécès LCR Crachat et salive Tissus et cellules Liquide d aspiration (pleural, ascite,aticulaire, intestinal) Calculs

8 Toute demande d examen biochimique doit être conçue comme une question sur le patient et tout résultat biochimique comme une réponse L obtention de réponses correctes est souvent entachée de difficultés touchant tout le circuit de l échantillon au laboratoire Chaque étape est crucial et doit donc être documenté ( SAQ) avec préalable une bonne gestion des équipements et réactifs

9 De la question clinique à la réponse biochimique ETAPE PREANALYTIQUE Formulaire de demande d analyses avec données cliniques Prélèvement du patient (service clinique, hors hôpital, laboratoire) Envoi au laboratoire Réception et identification ( formulaires et échantillons correctement étiquetés)

10 ETAPE PREANALYTIQUE Erreurs d échantillonnage Technique de prélèvement : difficulté de prélèvement entraînant hémolyse libérant le K et d autres constituants des hématies (erreurs par excès) Stase prolongée pendant la ponction veineuse: diffusion de l eau plasmatique et hémoconcentration (erreurs par excès des protéines et composés qui leurs sont liés :Ca, thyroxine)

11 ETAPE PREANALYTIQUE Erreurs d échantillonnage Échantillon insuffisant Non respect des horaires de prélèvement (urine de 24h, cortisol) Récipient incorrect pour l échantillon Conservation incorrecte Prise d aliments ou perfusion Prise de médicaments Stress anxiété Posture du patient Effets de l effort (libération des enzymes tissulaires)

12 ETAPE ANALYTIQUE Étiquetage des échantillons secondaires Calibration Contrôle de qualité (CIQ et EEQ) Validation analytique Enregistrement ( résultats, CQ)

13 ETAPE POST ANALYTIQUE Compte rendu ( valeurs de référence) Les résultats biochimiques sont le plus souvent rapportés: sous forme de concentration (petites molécules:mmol/l, µmol/l, nano,pico ou femtomol/l macromolécules: g/l, mg/l). La concentration exprime la quantité de substance dissoute dans un volume connu de compartiment hydrique. Une concentration peut varier pour 2 raisons: - La quantité de substance peut augmenter ou diminuer - Le volume de liquide dans lequel la substance est dissoute peut augmenter ou diminuer

14 ETAPE POST ANALYTIQUE Compte rendu ( valeurs de référence) Les résultats biochimiques sont le plus souvent rapportés: Unités - Unités d activité enzymatique (UI, Kat) - Unités d activité hormonale KPa ou mm Hg ( Gaz du sang)

15 Interprétation des résultats (validation biologique): comprendre ce que signifient les chiffres en BC est CAPITAL pour établir un diagnostic ou pour modifier un traitement comprendre la signification des chiffres suppose la connaissance des variations des résultats. Les mesures biochimiques varient pour 2 raisons: - Variations analytiques - Variations biologiques

16 Interprétation des résultats (validation biologique): Variations analytiques La variation analytique est fonction de la performance de la méthode analytique caractérisée par les termes suivants: - Précision: reproductibilité ou repétabilité d une méthode analytique - Exactitude:définit à quel point la valeur mesurée est proche de la valeur réelle

17 Interprétation des résultats (validation biologique): Variations analytiques - Sensibilité analytique: exprime la plus petite quantité de la substance recherchée que la méthode peut détecter ( limite de détection) - Spécificité analytique: exprime avec laquelle efficacité le dosage peut discriminer la substance recherchée et les substances potentiellement interférentes

18 Interprétation des résultats (validation biologique): Variations analytiques - Sensibilité clinique: mesure la fréquence des résultats positifs chez des patients connus pour avoir la maladie (VPP) - Spécificité clinique: mesure à quelle fréquence un résultat négatif est obtenu chez une personne non atteinte par la maladie (VPN) NB: un test de diagnostic idéal serait sensible à 100% cad donnerait des résultas positifs chez tous les malades et spécifique à 100% avec des résultats négatifs chez toutes les personnes exemptes de la maladie

19 Interprétation des résultats (validation biologique): Variations biologiques : sont liées aux modifications effectives qui se produisent dans les milieux biologiques chez un patient La discrimination entre résultats normaux et anormaux est affectée par différents facteurs physiologiques devant être pris en compte dans l interprétation des résultats: - Sexe - Age - Effet de l alimentation - Heure de prélèvement - Cycle menstruel - Antécédents médicamenteux

20 Interprétation des résultats (validation biologique): Le biologiste doit se poser les questions suivantes avant de valider les résultats: Les résultats correspondent ils à ce qui est attendu d après les renseignements cliniques? Si le résultat n est pas ce qui était attendu, la discordance s explique t elle?

21 Interprétation des résultats (validation biologique): En résumé le biologiste doit prendre en compte les éléments suivants pour valider les résultats: Les concentrations varient avec la quantité de substance ou le volume du milieu La variabilité des résultats peut être causée par les facteurs analytiques et biologiques la fourchette de référence figurant à coté du résultat d un test n est qu un guide sur la probabilité que le résultat soit statistiquement normal ou anormal La VR varie avec l age et le sexe Si un résultats n est pas conforme aux attentes, discuter avec le clinicien et prévoir de reprendre l examen