e Forum du Cancéropôle du Grand-Est

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1 Liège Luxembourg Champagne Ardenne Lorraine Heidelberg Strasbourg Alsace Freiburg Bourgogne Franche-Comté Lausanne e Forum du Cancéropôle du Grand-Est Basel 19-0 novembre 009 au Château de l Ile à Strasbourg 1

2 Partenaires Comité scientifique Alsace Bourgogne Franche-Comté Lorraine Champagne-Ardenne Joseph ABECASSIS Denise BAGREL Laurent BEDENNE Philippe BIREMBAUT Christophe BORG Jean-François BOSSET Jean-Christophe EYMARD Jean FAIVRE Pierre FUMOLEAU François GHIRINGHELLI Hinrich GRONEMEYER Marc GUENNEUGUES Francis GUILLEMIN François GUILLEMIN Jacques HAIECH Jean-Marc LIMACHER François-Xavier MAQUA Laurent MAINY Christiane MOUGIN Pierre OUDET Christian PIERALLI Xavier PIVOT François PLENAT Laboratoire de Biologie Tumorale, Centre Paul Strauss, Strasbourg Université Paul Verlaine, Laboratoire d Ingénierie Moléculaire et Biochimie Pharmacologique, Metz Inserm EMI 0106, Epidémiologie des Cancers Digestifs, CHU Dijon Inserm UMR S90, Laboratoire Pol Bouin, CHU Reims Service d Oncologie Médicale du CHU de Besançon, EFS Bourgogne Franche-Comté Service de Radiothérapie du CHU de Besançon Responsable Médical du Département de Recherche Clinique, Institut Jean Godinot, Reims Inserm U866, Registre Bourguignon des Cancers Digestifs, Faculté de Médecine, Dijon Service d Oncologie, Centre Georges-François Leclerc, Dijon Service d Oncologie, Centre Georges-François Leclerc, Dijon Département Biologie du Cancer, IGBMC, Strasbourg Chargé de mission scientifique, CGE Centre d Epidémiologie Clinique, CIC-EC INSERM, CHU Nancy Centre Alexis Vautrin, Nancy Ecole Supérieure de Biotechnologie de Strasbourg, Faculté de Pharmacie, Strasbourg Directeur Médical, Transgene, Strasbourg MEDyC, Université Reims Champagne-Ardenne MEDyC, Université Reims Champagne-Ardenne, Reims EA181, IFR1, Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, CHU de Besançon Laboratoire de Biochimie et Biologie Cellulaire, CHU Strasbourg, Coordinateur scientifique du CGE Département d Optique, FEMTO-ST, Besançon Service de Cancérologie, CHU Besançon Laboratoire d Anatomie et Cytologie Pathologiques, CHU Nancy

3 Editorial Pierre OUDET Coordonnateur scientifique Laboratoire de Biochimie et Biologie Moléculaire du CHU de Strasbourg Institut de Génétique et de Biologie Moléculaire et Cellulaire (IGBMC) à Illkirch Le Rapport Grünfeld «Pour un Nouvel Elan» du Plan Cancer relève la contribution des cancéropôles pour la mobilisation et l animation des équipes de recherche dans le domaine de la cancérologie. Ceci vient conforter notre démarche de mutualisation des ressources et expertises à l échelle du Grand-Est dans le cadre de projets de recherche de transfert du et vers le patient. Près de 80 projets pilotés par des chercheurs du Grand-Est ont été financés par l Institut National du Cancer (INCa) depuis 004, ce qui représente un montant de plus de 16,5 millions d euros. En outre, 1 bourses doctorales et 8 post-doctorales ont été attribuées. Ces chiffres illustrent la dynamique de structuration de notre inter-région et témoignent du rayonnement au-delà du Grand-Est puisque 41 équipes françaises et européennes sont partenaires dans au moins un projet. L année qui vient de s écouler a connu des événements marquants pour le CGE, et tout particulièrement : - Le démarrage de l étude CiRCE sur les facteurs de risque environnementaux, nutritionnels et métaboliques de carcinome hépatocellulaire (CHC) chez les patients atteints de cirrhose. La collecte systématisée de prélèvements annotés alimente la recherche de biomarqueurs prédictifs de ce cancer. L enjeu porte sur la prévention et le traitement précoce du CHC dans une population à haut risque. Ce projet est porté par un réseau initié en 004 et coordonné par Dijon ; il associe cliniciens hépatologues, épidémiologistes, biologistes et biostatisticiens de nos 5 régions. Une extension internationale est engagée avec le centre hospitalier chinois d Urumqi ; - La création de la 1ère plateforme française de recherche clinique dédiée à la Qualité de Vie (QdV) par des équipes multidisciplinaires du CGE. La QdV est une dimension essentielle de l efficacité d une prise en charge thérapeutique. Labellisée par la Ligue Nationale Contre le Cancer, cette plate-forme apporte son soutien pour l évaluation de la QdV dans des essais cliniques ou des études épidémiologiques en cancérologie et poursuit des développements méthodologiques de «transfert» selon axes : i) validation, sélection et utilisation de questionnaires de QdV, ii) analyses longitudinales de la QdV et iii) valeur pronostique de la QdV et relation avec les critères cliniques ; - La reconduction pour deux ans du financement du programme de recherche en virologie tumorale appliquée mené en collaboration avec le DKFZ. Un comité d experts international a évalué très favorablement en novembre 008 les avancées de ce projet ambitieux démarré en 006 et qui a produit une vingtaine de publications. Les axes de recherche portent sur les infections aux papillomavirus humains : mécanismes de carcinogenèse, identification de nouveaux biomarqueurs diagnostiques et pronostiques et développement d approches thérapeutiques innovantes notamment basées sur des virus oncolytiques. Les efforts dans le champ de la formation (création d un collège doctoral avec 8 thèses en co-tutelle) ont été reconnus par l université franco-allemande. Il nous faut à présent préparer l avenir et un groupe de travail a été mis en place pour construire la suite du programme ( ) qui intégrera d autres virus (HCV, EBV, HIV) et de nouvelles équipes, notamment du Cancéropôle CLARA. La compétitivité et l innovation puisent dans les synergies entre les divers acteurs de la recherche. Le forum scientifique du CGE est une belle opportunité pour faire émerger et consolider des projets collaboratifs et multidisciplinaires de dimension interrégionale, nationale et transfrontalière, voire, et c est son ambition, susciter la réalisation d études de recherche clinique précoces multicentriques adossées à des plateformes. Après Vittel en 007 et 008, c est à Strasbourg que nous nous retrouverons les 19 et 0 novembre 009, et pour la 1ère fois sur journées complètes avec un programme enrichi de conférenciers extérieurs et d interventions sélectionnées parmi les réponses à l appel à communication. Toute l équipe de coordination du CGE se joint à moi pour vous souhaiter un excellent ème Forum. Sommaire Programme du e Forum du Cancéropôle du Grand-Est... 6 Résumés des interventions novembre Épidémiologie et santé publique...10 Infections et cancers... 1 Génomique, post-génomique, relations hôte-tumeur La recherche translationnelle au sein du CGE novembre Épidémiologie : de la qualité de vie aux déterminants sociaux... Progression tumorale... Nouveaux marqueurs... 5 Cibles thérapeutiques et traitements innovants... 7 Nouvelles approches chirurgicales... 9 Résumés des communications affichées...1 Épidémiologie...1 Cancérogenèse viro-induite... Cibles thérapeutiques... 4 Marqueurs diagnostiques & pronostiques... 6 Progression tumorale : mécanismes & voies thérapeutiques Micro-environnement tumoral et relations hôte-tumeur Radiothérapie & dosimétrie Plan de la manifestation

4 Programme 19 novembre 009 : les thèmes fédérateurs du CGE 10h00-10h0 : Accueil 10h0 11h00 : Ouverture du Forum Institut National du Cancer - Guy-Robert AULELEY, responsable de la recherche clinique Ligue contre le Cancer du Grand-Est - Bruno AUDHUY, Coordonnateur de la Conférence de Coordination Interrégionale Cancéropôle du Grand-Est - Pierre OUDET, Coordonnateur scientifique Session I - Epidémiologie et santé publique Chairman : Francis GUILLEMIN (Centre d Epidémiologie Clinique, CIC-EC INSERM, CHU Nancy) 11h00-1h0 : Dépistage du cancer colo-rectal : comparaison du test Hemoccult et des tests immunologique - Jean FAIVRE (Inserm U866, Dijon) Conséquences psychologiques du cancer du sein et thérapie EMDR - Cyril TARQUINIO (Université Paul Verlaine, Metz) Construction et quotidienneté du proche : trajectoires de proches de patients atteints de cancer - Joelle KIVITS (Société Française de Santé Publique, Nancy) qualité de vie et réinsertion des patientes guéries d un cancer du sein - Mariette MER- CIER (Université de Franche-Comté, CHU Besançon) qualité de vie et phénomène de response shift au cours des traitements des tumeurs du sein - Franck BONNETAIN (Centre G.F. Leclerc, Dijon) Communication orale : Progrès majeurs de la prise en charge et du pronostic du cancer primitif du foie sur 0 ans - Boris GUIU (CHU & Centre G.F. Leclerc, Dijon) 1h0-14h00 : Cocktail déjeunatoire et session de posters (N 1 à 19) Session II - Infections et cancers Chairman : Christine CLAVEL (Laboratoire Pol Bouin, Inserm UMRS-90, CHU Reims) 14h00-15h0 : Conférence invitée : Polyomavirus MCV et carcinome à cellules de Merkel - Pierre COURSAGET (Inserm U818, Université François Rabelais, Tours) Role of beta human papillomaviruses in skin carcinogenesis - Massimo TOMMASINO (IARC, Lyon) & François AUBIN (CHU Besançon) Virus de l Hépatite C et carcinome hépatocellulaire - Françoise STOLL-KELLER (Inserm U748, CHU Strasbourg) & Jean-Marc LIMACHER (Transgene, Strasbourg) Virus Epstein-Barr et lymphomes - Sébastien PFEFFER (IBMC, Université de Strasbourg) & Antoine DURRBACH (AP-HP, Paris) Communication orale : Une nouvelle voie de carcinogenèse: la transformation cellulaire induite par transfert horizontal d oncogènes viraux via les corps apoptotiques - Emilie GAIFFE (Université de Franche-Comté, Besançon) Session III - Génomique, post-génomique, relations hôte-tumeur Chairman : Joseph ABECASSIS (Centre Paul Strauss, Strasbourg) 15h0-17h00 : Conférence invitée : Induction of multifunctional high avidity human tumor-specific CD8 T cells can override tumor mediated immune suppression - Daniel SPEISER (Institut Ludwig de Recherches sur le Cancer, Lausanne, Suisse) Dialogue entre les effets non génomiques et génomiques de l acide rétinoique: dérégulation dans certains cancers - Cécile ROCHETTE-EGLY (IGBMC, Strasbourg) approches protéomiques en cancérologie - Alain VAN DORSSELAER (CNRS, Institut Pluridisciplinaire Hubert Curien, Strasbourg) rôle du système immunitaire dans la réponse à la chimiothérapie: le cas du cancer mammaire - François GHIRINGHELLI (Centre G.F. Leclerc, Equipe Inserm AVENIR, Dijon) Communication orale : La Cavéoline-1 contrôle la croissance et la survie des glioblastomes humains via les intégrines α 5 β 1 et les récepteurs TGF-β - Sophie MAIN (Faculté de Pharmacie, Strasbourg) 17h00-17h0 : Pause café, session de posters (N 0 à 41) et Espace Biopharma Session IV - La recherche translationnelle au sein du CGE Chairman : Pierre FUMOLEAU (Centre G.F. Leclerc, Dijon) 17h0-19h0 : Conférence invitée : Recherche translationnelle et personnalisation de la prise en charge des patients : l exemple de la génomique clinique - Hélène PEYRO-ST-PAUL (Ipsogen, Marseille) alsace La PLATEFORME BIOPUCES de l IGBMC : validation d un profil génomique de tumeurs du sein HER-+ traitées par chimiothérapie première à base de trastuzumab (Herceptin ) - Philippe KASTNER (IGBMC, Strasbourg) & Sarab LIZARD (Centre G.F. Leclerc, Dijon) BOURGOGNE La PLATEFORME CLIPP (CLinical & Innovation Proteomic Platform): un outil pour le diagnostic et le criblage de molécules anti-cancéreuses - Patrick DUCOROY (IFR100 - EFS, Dijon) & Pierre FUMOLEAU (Centre G.F. Leclerc, Dijon) CHAMPAGNE-ARDENNE La PLATEFORME D IMAGERIE CELLULAIRE ET TISSULAIRE : diagnostic différentiel des carcinomes cutanés par spectroscopie vibrationnelle - Michel MANFAIT (Unité MEDIAN, CNRS UMR 614, Reims) & Anne DURLACH (CHU Reims) FRANCHE-COMTE La PLATEFORME ITAC (Innovative Immune Targetting in Cancer) : production d anticorps monoclonaux et élaboration de modèles précliniques pour le ciblage thérapeutique des cancers - Christophe BORG (CHU Besançon) & Christophe FERRAND (Inserm U645 - EFS, Besançon) lorraine La PLATEFORME XENOGREFFES ET MODELES ANIMAUX : modèles orthotopiques de tumeurs cérébrales prédictifs d effets thérapeutiques - François PLENAT (Faculté de Médecine, Nancy) & Pascal CHASTAGNER (CHU Nancy) Communication orale : Les modèles pré-cliniques dans la souris nude de carcinomes rénaux établis à partir de prélèvements de patients - Thierry MASSFELDER (Inserm U68, Faculté de Médecine, Strasbourg) CLÔTURE DE LA 1è JOURNÉE - Apéritif puis dîner de gala au Château de l Ile (à partir de 0h) 6 7

5 Programme 0 novembre 009 Session I - EPIDEMIOLOGIE : de la qualité de vie aux déterminants sociaux Chairman : Michel VELTEN (Laboratoire d Epidémiologie et de Santé Publique, Strasbourg) 8h0-9h10 : analyse longitudinale de la qualité de vie dans un essai de phase III randomisé auprès de patients ayant un cancer du pancréas métastatique - Emilie MAILLARD (FFCD & Inserm U866, Dijon) Utilisation des typologies territoriales dans l étude des déterminants sociaux des hémopathies lymphoïdes dans cinq départements disposant d un registre de cancers - Mathieu HÄGI (Registre des Tumeurs du Doubs, CHU Besançon, FRANCIM Toulouse) Session II - PROGRESSION TUMORALE Chairman : Monique DONTENWILL (UMR CNRS 71, Strasbourg) 9h10-10h10 : l expression de l IP-10 à partir des PBMC reflète la progression tumorale du mélanome in vivo - Franck ANTONICELLI (CNRS UMR 67, Reims) les polyphénols du raisin préviennent la croissance de la lignéee cellulaire d adénocarcinome C6 et la néo-vascularisation - Nelly ETIENNE-SELLOUM (CNRS UMR 71, Strasbourg) Des matériaux nanostructurés actifs pour la prévention des métastases osseuses - Nadia JESSEL (Inserm U595, Strasbourg) 10h10-10h40 : Pause café, session de posters (N 0 à 41) et Espace Biopharma Session III - NOUVEAUX MARQUEURS Chairman : Alain VAN DORSSELAER (CNRS, Institut Pluridisciplinaire Hubert Curien, Strasbourg) 10h40-1h0 : Une nouvelle protéine deltacd0, codée par un nouveau transcrit alternatif du gène CD0 associée à la résistance au Rituximab: marqueur moléculaire potentiel des hémopathies B - Carole HENRY (Inserm U645 & EFS, Besançon) SOX- est un oncogène activé par des amplifications du locus q6. récurrentes dans les carcinomes du poumon à cellules squameuses - Thomas HUSSENET (IGBMC, Strasbourg) le CD148, un marqueur de surface potentiel des hémopathies lymphoïdes chroniques identifié par approche protéomique - Sarah SANGLIER-CIANFERANI (CNRS, Institut Pluridisciplinaire Hubert Curien, Strasbourg) Une plateforme de cytomique clinique dédiée à la recherche clinique - Gilbert FAURE (CHU & Centre Alexis Vautrin, Nancy) mise en place d un réseau national d analyse statistique des données de protéomique clinique - Caroline TRUNTZER (IFR Santé STIC & CHU Dijon) 1h0-1h50 : Cocktail déjeunatoire et session de posters (N 1 à 19) Session IV - CIBLES THERAPEUTIQUES ET TRAITEMENTS INNOVANTS Chairman : Christian GAIDDON (Inserm U69, Strasbourg) 1h50-15h0 : les composés dérivés du Ruthénium: développement d une nouvelle classe de chimiothérapies dotée d une neurotoxocité réduite et agissant indépendamment de p5 - Christian GAIDDON (Inserm U69, Strasbourg) Génotypage de KRAS dans les cancers colorectaux métastatiques: analyse comparative par les techniques de PCR-LP, PCR-Taqman et HRM - Anne-Sophie CHRETIEN (Centre Alexis Vautrin, Nancy) Fonction du gène Cdx au cours de l émergence des leucémies aigües - Claire DOMON-DELL (Inserm U68, Strasbourg) la protéine membranaire Hsp7 issue d exosomes dérivés de tumeurs provoque la fonction p-stat-dépendante des MSC (Myeloid Suppressor Cells) via la voie TLR-MyD88 - Grégoire MIGNOT (Inserm U866, Dijon) modulation de la réponse moléculaire tumorale au Cetuximab par l extinction de PTEN dans la lignée cellulaire HNSCC: impact sur l angiogenèse - Jihane MRIOUAH (Faculté de Médecine, Nancy) Session V - NOUVELLES APPROCHES CHIRURGICALES Chairman : Christian DEBRY (CHU Strasbourg) 15h0-16h0 : réalité virtuelle et robotique: nouvelles technologies appliquées à la recherche et au traitement des cancers - Luc SOLER (IRCAD, Strasbourg) l exérèse endoscopique de l adéno-carcinome nasal permet de ré-écrire son histoire diagnostique et thérapeutique - Roger JANKOWSKI (CHU Nancy) LES PRIX DU JEUNE CHERCHEUR 16h0-16h0 16h0 : CLOTURE DU FORUM RC Recherche clinique Recherche fondamentale Recherche translationnelle 8 9

6 Résumés des interventions Session Épidémiologie et santé publique Dépistage du cancer colo-rectal : comparaison du test Hemoccult et des tests immunologiques. Auteur : J. Faivre Affiliation(s) : Inserm U866, Dijon jean.faivre@u-bourgogne.fr Résumé : Le dépistage du cancer colorectal en utilisant un test au guaiac de recherche d un saignement occulte dans les selles a fait la preuve que c était un moyen de diminuer la mortalité due à ce cancer. Cependant, ce test a été critiqué en raison de sa sensibilité médiocre et parce qu il réagit avec l hème contenu dans les aliments. Des tests immunologiques ont été développés avec l objectif d améliorer l efficacité du dépistage. Les données disponibles sur la valeur clinique de ces tests sont insuffisantes pour tirer des conclusions. L objectif de cette étude était de comparer des tests immunologiques au test au guaiac de référence (test Hemoccult). A l occasion de la troisième campagne de dépistage organisée du cancer colorectal dans les départements de la Côte-d Or, du Haut-Rhin, de l Ille-et-Vilaine et de l Indre-et-Loire, il a été proposé aux sujets âgés de 50 à 74 ans (nés entre 19 et 1957) de faire simultanément un test au guaiac sur selles consécutives et un test immunologique fourni par les groupes industriels permettant une lecture automatisée : OC Sensor, FOB Gold et Magstream. Les résultats ne sont disponibles que pour les deux premiers tests, du fait de la mise à disposition tardive du troisième. Près de personnes ont fait un test Hemoccult et un test OC Sensor et un test Hemoccult et un test FOB Gold. La proportion des tests positifs était plus élevée avec le test immunologique :,8% avec le test OC Sensor (seuil de 150 ng/ml), 4,9% avec le test FOB Gold (au seuil de 175 ng /ml) qu avec le test Hemoccult, respectivement 1,8% et,7%. La valeur prédictive positive pour la détection d un cancer était voisine pour tous les tests, comprise entre 6 et 8%. Par contre, le taux de détection des cancers était plus de fois plus élevé avec les tests immunologiques qu avec le test au guaiac. Une étude de stabilité a été conduite pour les tests OC Sensor et FOB Gold. Les prélèvements ont été placés dans une étuve à température contrôlée (15, 0, 5, 8 et 0 C), chaque tube étant lu à 5 temps différents (JO, J, J7, J10 et J14). La stabilité du test OC Sensor était bonne à 15 et 0 C jusqu à J10. Pour les températures plus élevées, la décroissance est modérée jusqu à J7, mais atteint 0% à J10. La stabilité du test FOB Gold est moins bonne : décroissance de 0% à 15 et 0 C dès J. Dès que la température atteint 5%C, la décroissance est rapide (45% à J7). Au total, les tests immunologiques, par leur taux de positivité, induisent un plus grand nombre de coloscopies, mais permettent de dépister un nombre plus élevé de cancers. Leur stabilité laisse à désirer à température élevée (conservation des tubes au frigidaire avant leur envoi postal?). 19 novembre Evaluation randomisée de la prise en charge par thérapie EMDR dans le cancer du sein. Auteur : C. Tarquinio Affiliation(s) : Unité de Recherche APEMAC, EA 460 «Approches Psychologiques et Epidémiologiques des Maladies Chroniques», Equipe de Psychologie de la Santé Metz tarquinio@univ-metz.fr Résumé : Objective: The aim is to show the results of a randomized controlled pilot study about EMDR therapy in the care of breast cancer patients. All patients met in the Hospital and the treatment was performed in a private office with two EMDR. The measures were realized by an independent psychologist different of the two psychotherapists. Subjects: A total of 0 subjects were randomly allocated to eye-movement desensitization and reprocessing (EMDR) n = 10 versus waiting list (WL) (n = 10) in a primary care setting. Methods: The subjects had to answer questions from the IES-R, BDI and STAI scales. These different measures were administered to all of the subjects before beginning the therapy (T1), after six sessions of sixty minutes of EMDR (T), six months later (T) and eleven months later (T4). Main results: The data were processed with non-parametric tests. Results indicate that the group that received EMDR treatment has lower depression, anxiety and PTSD score than waiting list and in comparison to pretreatment baseline. The initial results were maintained at the 6 and the 1-months follow-up Construction et quotidienneté du proche : trajectoire de proches de patients atteints d un cancer du poumon. Auteur : J. Kivits, H. Kane Affiliation(s) : Société Française de Santé Publique, Nancy jk@sfsp.info Résumé : Notre étude, d approche socio-anthropologique, a pour objectif d analyser les «trajectoires» de proches de personnes atteintes d un cancer du poumon. Plus ou moins dépendante de la trajectoire de la maladie, la trajectoire du proche est appréhendée comme évolution qualitative de la relation avec la personne atteinte. Le déroulement de cette trajectoire est envisagé au sein d un entourage familial et/ou amical. Cette étude repose sur une observation participante d une année au sein d un service de pneumologie, la réalisation d entretiens semi-directifs avec les proches aux domiciles des familles et l organisation d entretiens de groupe avec les équipes soignantes. Après présentation des profils de proches participant à l étude, nous analyserons le cancer du poumon comme épreuve personnelle et relationnelle. Cette épreuve réside dans les transformations corporelles, la gestion de l incertitude et de la mort, la recomposition des rôles dans l entourage qui sont autant d expériences venant moduler les trajectoires des proches. Nous développerons ensuite les rôles investis par les proches auprès des malades, incluant la présence à l hôpital et les relations avec le personnel soignant ainsi que les pratiques d information sur la maladie. La discussion portera sur les spécificités du rôle du proche révélées par l étude, l importance de la localisation du cancer sur la définition des trajectoires des proches et le processus de réhabilitation de la personne malade par les proches, garant du maintien de la qualité de la relation au malade et du lien social. Cette communication sera enfin l occasion de s interroger sur l apport des sciences sociales en santé publique, plus particulièrement dans la recherche sur le cancer. Qualité de vie et réinsertion des patientes guéries d un cancer du sein Etude comparative à partir de trois registres des cancers. Auteur : M. Mercier 1, M. Velten, D. Klein Affiliation(s) : 1 Registre des cancers du Doubs, EA 181, Université de Franche-Comté, Besançon Registre des cancers du Bas-Rhin, EA 1801, Université de Strasbourg, Strasbourg mariette.mercier@univ-fcomte.fr Résumé : Contexte et objectifs : Compte tenu du nombre croissant de femmes guéries d un cancer du sein, dont une proportion importante de sujets jeunes, une étude en population générale, à partir de trois registres français des cancers, a été réalisée pour étudier l impact de cette pathologie sur la qualité de vie et de réinsertion 5, 10 et 15 ans après le diagnostic. Patients et Méthodes : Les patientes considérées guéries d un cancer du sein (cas) ont été tirées au sort (TAS) à partir des fichiers de trois registres des cancers (Bas-Rhin, Calvados et Doubs) pour trois périodes de diagnostic: 1990, 1995 et 000. Les témoins ont été sélectionnés par TAS sur les listes électorales, avec stratification sur l âge et l habitat (urbain/rural). Chaque sujet recevait cinq questionnaires: deux questionnaires de qualité de vie (EOC QLQ-C0 et SF-6), un questionnaire d anxiété (Spielberger), un questionnaire fatigue (MFI-0) et un questionnaire de conditions de vie. Une analyse de variance a été réalisée pour comparer la QdV entre les cas et les témoins, ajustée sur les variables socio-démographiques significativement liées aux scores de QdV et sur les variables de stratification. Résultats : 65 cas et 1188 témoins ont participé à l étude entre 006 et 007. Des différences cliniquement et statistiquement significatives, variant de 10,0 à 1,7 points sur une échelle de 100, ont été mises en évidence entre les témoins et les cas 5 ans après le diagnostic pour plusieurs dimensions de QdV : activité physique, limitations dues à l état physique, limitations dues à l état psychique et fatigue. Ces différences s estompent avec le temps pour la quasi totalité des indicateurs. Quinze ans après le diagnostic, la qualité de vie des patientes est comparable à celle des femmes indemnes de cancer. Des résultats relatifs à la réinsertion seront également présentés. Conclusion : Les répercussions de la maladie cancéreuse sur la QdV sont importantes les premières années suivant le diagnostic puis s estompent progressivement avec le temps chez les femmes «considérées comme guéries», ce qui justifie une attention particulière à la prise en charge psychosociale de ces malades

7 Qualité de vie et phénomène de response shift au cours des traitements des tumeurs du sein. Auteur : F. Bonnetain, Thierry Conroy, Michel Velten, Damien Jolly, Mariette Mercier, Sylvain Causeret, Jean Cuisenier, Olivier Graesslin, Mélanie Liegard, Delphine Hocquette, Francis Guillemin pour la plateforme de recherche clinique Qualité de vie et cancer Affiliation(s) : Unité de biostatistique et d épidémiologie, Centre G.F. Leclerc EA 4184 & plateforme de recherche clinique qualité de vie et cancer, Dijon FBonnetain@dijon.fnclcc.fr Résumé : Introduction : Dans le cadre d essais cliniques en cancérologie, la qualité de vie relative à la santé (QdV) est un critère de jugement majeur pour évaluer l efficacité des traitements. La Response shift ; définie selon composantes comme un changement de référence interne, de l importance relative des dimensions et une reconceptualisation de la QdV ; pourrait interférer dans l évaluation comparative de la QdV de prises en charge en sénologie. Les objectifs de notre étude sont d étudier l impact des modalités de prise en charge du Cancer du sein sur l évolution de la qualité de vie, sur les composantes de la «response shift» et sur les attentes de santé; d identifier les composantes de la «response shift» et analyser leurs influences respectives sur la mesure et l analyse longitudinale de la QdV et d étudier l influence des attentes de santé sur l évolution de la qualité de vie et sur la «response shift» ; Méthode : Cohorte prospective multicentrique incluant toutes les patientes hospitalisées ou consultant pour un cancer primitif du sein (ou une suspicion). La QdV a été évaluée à l aide du QLQ C0 et son module des cancers du sein BR, de l Euro- QOL EQ-5D lors de la première hospitalisation puis à la sortie, à mois et à 6 mois. Différentes méthodes statistiques et psychométriques («Then-test», «Ideal scales», «successive comparisons») ont été implémentées pour caractériser les composantes de la «Response shift». L ordre des questionnaires a été randomisé. Nous rapportons les résultats concernant l occurrence de la «response shift» en sortie d hospitalisation. Résultats : De Février 006 à Février 008, 81 femmes ayant un âge moyen de 56 ans ont été incluses, plus de 60% avaient un cancer du sein confirmé et 0 % avaient une suspicion. En sortie d hospitalisation, l évaluation rétrospective de la QdV (then-test) montre que les femmes sous évaluaient significativement (p < ) leur QdV à l inclusion pour les dimensions émotionnelles (- 5 points) et cognitives du QLQ-C0 (- points), la diminution de l importance relative de douleur de l EUROQOL ayant un impact différentiel sur ces dimensions (p < 0.01). Les symptômes de fatigue, d insomnie, de diarrhée et de perte d appétit étaient significativement sur évalués. La dimension de perspective future du BR était sous évaluée de 7 points (p < ) ne permettant pas de conclure à une amélioration de cette dimension, après prise en charge, en sortie d hospitalisation. L ordre des questionnaires et les caractéristiques cliniques n ont pas d influence significative différentielle sur ce phénomène. Conclusion : Nos résultats montrent un impact de la composante référence interne de la response shift évaluée par la méthode then-test dès la sortie d hospitalisation, elle influence précocement le sens clinique du changement de QdV. Son analyse longitudinale est en cours. Progrès majeurs de la prise en charge et du pronostic du cancer primitif du foie sur 0 ans. Auteur : B. Guiu, A. Minello, C. Lepage, P. Hillon, J. Faivre, A.M. Bouvier Affiliation(s) : CHU Dijon le Bocage et Centre Georges-François Leclerc, Dijon boris.guiu@chu-dijon.fr Résumé : Contexte : Très peu d études ont été rapportées sur les changements de la prise en charge diagnostique et thérapeutique du cancer primitif du foie (CPF) au cours du temps. Le but de ce travail était d étudier l évolution des pratiques de soin et du pronostic du CPF sur une période de 0ans. Méthode : Les données sur la stratégie diagnostique, le traitement et le pronostic ont été collectées par le registre des cancers digestifs de Côte d Or sur la période Les facteurs associés à un traitement curatif ont été déterminés par régression logistique. Une analyse multivariée de la survie relative a également été réalisée. Résultats : Entre 1976 et 005, 167 patients (1044 hommes, femmes) ont présenté un CPF. Le contexte du diagnostic de CPF a changé au cours du temps : la proportion de patients asymptomatiques a augmenté de 5.6% ( ) à 4.8% ( ). Le diagnostic porté sur des seuls critères morphologiques a augmenté au cours du temps (.6% en contre 8% en ), alors que celui porté sur des critères histologiques a diminué (87.6% en contre 40.% en ). La proportion de patients traités de manière curative a considérablement augmenté : de 0.7% ( ) à.6% ( ). La survie s est améliorée de manière concomitante : la survie relative à 1 an passe de 4.4% ( ) à 4.% ( ) et la survie relative à 5 ans passe de 1.% à 10.4% (mêmes périodes). La survie à 5 ans des patients traités de façon curative a considérablement augmenté pour atteindre 47.5% en En analyse multivariée, l âge, la période du diagnostic, le type de traitement, la présentation clinique et l alfafoetoproteine étaient des facteurs pronostiques indépendants. Conclusion : Sur une période de 0ans, l augmentation importante du nombre de CPF diagnostiqués chez des patients asymptomatiques et les progrès considérables des thérapeutiques curatives et palliatives expliquent l amélioration majeure du pronostic. Session Infections et cancers Polyomavirus MCV et carcinome à cellules de Merkel. Auteur : P. Coursaget Affiliation(s) : Inserm U818 et Université François Rabelais, Tours coursaget@univ-tours.fr Résumé : Récemment, un virus dénommé Merkel cell polyomavirus (MCPyV ou MCV) a été découvert comme étant associé au carcinome à cellules de Merkel (MCC) (Feng et al., Science 008). Il s agit du premier cancer humain associé à un polyomavirus. Nous avons confirmé la présence de ce virus dans les MCC observés en France et la totalité du gène codant la protéine VP1 a été obtenue par amplification à partir du tissu tumoral de 7 sujets. Les gènes de ces souches ont été séquencés et présentent quelques mutations au niveau de la séquence protéique. L expression de la protéine VP1 de la souche virale de référence MCV MCC50 (Feng et al. 008) dans le système baculovirus-cellules d insecte ne conduit pas à l obtention de pseudo-particules virales ou VLPs, alors que l expression de la protéine VP1 de la souche française MK1 conduit à l obtention de nombreuses VLPs. Ces capsides induisent chez la souris de fort titres d anticorps spécifiques. Ces VLPs purifiées, ainsi que des VLPs VP1 des virus BKV et LPV (lymphotropic polyomavirus) ont permis de rechercher les anticorps correspondants dans différents groupes de population. Les anticorps anti-mcv ont été détectés chez tous les sujets atteints de MCC et chez 75 à 95% des contrôles. Les titres des anticorps anti-mcv sont toutefois généralement beaucoup plus élevés chez les sujets atteints de MCC. À l inverse, les anticorps anti-bkv et anti-lpv ont été détectés à des fréquences et à des titres équivalents chez les sujets atteints de MCC et les sujets contrôles. Ces résultats confirment l association entre MCV et MCC, mais ils suggèrent qu il pourrait exister d autres étiologies que le MCV. Les données obtenues indiquent également que les infections à MCV sont ubiquitaires comme cela est observé pour les virus BKV et JCV. 19 novembre Role of beta human papillomaviruses in skin carcinogenesis. Auteur : M. Tommasino 1, F. Aubin Affiliation(s) : 1 Infections and Cancer Biology Group, IARC, Lyon Université de Franche Comté, EA181, IFR1 et CHU, Service de Dermatologie, Besançon tommasino@iarc.fr - francois.aubin@univ-fcomte.fr Résumé : Non-melanoma skin cancer (NMSC) is the most common form of malignancy in Caucasian adult populations. UV light and immune suppression are risk factors for NMSC. The fact that impairment of the immune system increases the risk for development of skin cancers strongly suggests that infectious agents are also involved in their aetiology. The epitheliotropic human papillomaviruses (HPVs) are likely candidates, especially those classified in the genus beta of the HPV phylogenetic tree, also known as Epidermodysplasia verruciformis (EV) HPV types. Independent investigations have shown that the DNA of several EV HPV types is highly prevalent in NMSC of both immunocompromised and immunocompetent individuals. Despite this association, however, a direct role of the beta HPV types in the development of skin cancer remains to be proven. In addition, it is still not known whether, within the genus beta, certain HPV types are more prevalent than others in malignant skin lesions. To further evaluate the role of beta HPV types in skin carcinogenesis, we are currently following two complementary strategies: (i) Functional studies to characterize the biological properties of different beta HPV types using in vitro and in vivo model systems; (ii) Epidemiological studies to determine the presence of beta HPV types in several human specimens. The rationale of our functional studies is based on the fact that viruses directly associated with human cancers have developed several mechanisms to efficiently evade the immune surveillance and to promote cellular transformation. Therefore, we have initiated the characterization of the ability of several beta HPV types to de-regulate cellular pathways involved in the immune response and cellular transformation in order to predict their oncogenic potential. Regarding the epidemiological approach, we conducted different studies in different groups of patients and skin lesions with healthy skin controls and eyebrow hairs to evaluate the prevalence of cutaneous HPV infection. The data obtained in the epidemiological and functional studies will be presented. 1 1

8 Virus de l Hépatite C et vaccin thérapeutique. Auteur : F. Stoll-Keller 1, J.M. Limacher, G. Honnet Affiliation(s) : 1 Inserm U748, Strasbourg Transgene, Strasbourg francoise.stoll@unistra.fr - honnet@transgene.fr Résumé : Les virus des hépatites B et C sont associés à 70% des hépatocarcinomes (HCC) et indirectement responsables de décès par an à travers le monde liés à cette tumeur et dont l incidence est en augmentation. Plus de 170 millions de personnes sont chroniquement infectées par le virus de l hépatite C (VHC) et les sujets nouvellement infectés évoluent dans plus de / des cas vers une hépatite chronique. La cirrhose qui se développe chez 10 à 0% des patients chroniquement infectés est associée à un risque de à 5% par an de cancer du foie. La réponse immunitaire à médiation cellulaire joue un rôle important dans le contrôle et / ou l éradication du VHC. Le vaccin TG4040 a été développé pour induire ou stimuler une réponse cellulaire anti-vhc médiée par les lymphocytes T CD4+ et CD8+. TG4040 est une suspension virale du Virus Modifié de la vaccine de souche Ankara (MVA) contenant les séquences du VHC (génotype 1) codant pour les protéines non structurales NS, NS4 et NS5B. Les objectifs de cette étude sont d évaluer l innocuité, l activité antivirale et l immunogénicité de TG4040 chez des patients porteurs du VHC de génotype 1 et naïfs de tout traitement. Methode : 15 patients ont reçu injections de TG4040 aux jours 1, 8 et 15 aux doses de 10 6 pfu (cohorte 1 : patients), 10 7 pfu (cohorte : patients) et 10 8 pfu (cohorte : 9 patients). Une injection de rappel à 6 mois a été administrée aux patients recevant la dose la plus élevée. Tous les patients ont été suivis 6 mois après leur dernière injection. La quantification de l ARN du VHC dans le sang a été réalisée de même que l analyse de la réponse immune cellulaire contre le VHC. (ELISpot IFN-gamma, Luminex et prolifération). Resultats : L analyse de tolérance a été réalisée sur les 15 patients. Les effets secondaires les plus fréquents sont des réactions légères à modérées au site d injection, de la fatigue et des syndromes grippaux. Aucun effet indésirable de grade /4 n a été observé. 8 patients sur 15 ont présenté une réduction de leur charge virale de 0,5 à 1, log10 suite au traitement (dont 6 patients des cohortes 1 et ). Dans les premières cohortes, une augmentation de cellules produisant de l IFN-gamma (ELISpot) a été détectée chez 50 % des patients. La réponse cellulaire spécifique contre NS et NS4B détectable à baseline chez seulement 1 patient et a été induite ou augmentée chez 5 patients sur 15 suite aux injections de TG4040. Virus Epstein-Barr et lymphomes. Auteur : S. Pfeffer 1, A. Durrbach Affiliation(s) : 1 IBMC Université de Strasbourg, Strasbourg Hôpital du Kremlin-Bicêtre, Paris s.pfeffer@ibmc.u-strasbg.fr - antoine.durrbach@bct. ap-hop-paris.fr Résumé : Les lymphomes non hodgkin (NHL) sont les tumeurs hématologiques les plus fréquentes. En dépit de progrès thérapeutiques, l espérance de vie des patients avec NHL reste faible nécessitant l amélioration de la compréhension de la physiopathologie de ces tumeurs, l identification des marqueurs précoces de la maladie et de nouvelles cibles thérapeutiques. Le rôle d EBV dans le développement des NHL a été mis en évidence et l EBV a été démontré comme étant associé au développement des tumeurs lymphoïdes. Le rapport complexe entre virus et l organisme humain résulte de la transformation cellulaire et la progression de la tumeur. Le mécanisme menant à partir d une infection virale habituellement bénigne au cancer est loin entièrement compris. Récemment, des micrornas (mirnas) ont été démontrés comme pouvant avoir un impact important sur le développement de plusieurs tumeurs. Dans les lymphomes post transplantation (PTLD), les mirnas viraux et/ ou les variations d expression cellulaire de mirnas pourraient contribuer à la transformation de cellules. La détermination des profils de mirna pendant le développement de NHL peut offrir de nouvelles stratégies diagnostiques et thérapeutiques en particulier en employant des anticorps convoyant des inhibiteurs de mirna. En outre, comme cela a été démontré dans le cancer de prostate, les mirnas peuvent constituer un biomarker plasmatique sensible pour les lésions pre-tumorales ou à développement infraclinique. Dans ce projet, nous étudierons la participation des mirnas viraux et cellulaires dans le processus de lymphomagénèse induit par EBV en étudiant l expression des mirnas viraux et la déréglementation de l expression cellulaire de mirnas tous les deux dans les patients transplantés qui ont développé un PTLD, chez les patients immunocompetent (icnhl) aussi bien que dans des contextes cellulaires expérimentaux. Nous établirons et comparerons les profils de mirna des cellules naïve et mémoire B, infectées ou pas avec EBV, des cellules principalement infectées (mononucléose), et des cellules dérivées de PTLD ou d icnhl. Nous corrélerons le profil des différents mirnas avec l analyse histologique des PTLD et des NHL et validerons à grande échelle le profil des mirnas dans des biopsies de lymphome et dans le sérum par qpcr et hybridation in situ. Nous analyserons l implication de la réactivation d EBV sur l expression virale et cellulaire de mirnas aussi bien que leurs effets sur les protéines pro-apoptotic de la famille Bcl-, Bad, Bax et Bim. Nous déterminerons également si les mirna circulants pourraient être employés en tant que biomarker précoce du développement de NHL ou comme marqueurs de réponse ou de rechute thérapeutique en comparant des sérums des patients transplantés PTLD ayant ou non un NHL ou un icnhl. Pour le développement de de nouveaux outils thérapeutiques, nous identifierons et évaluerons les mirnas viraux et cellulaires qui peuvent être efficacement modulés en employant des approches biochimiques et informatiques. En conclusion, en employant un vecteur ciblé par anticorps, des inhibiteurs de ces mirnas seront évalués in vitro et in vivo dans modèle de souris Scid-NOD dans lesquelles un NHL aura aupréalable été implanté. Une nouvelle voie de carcinogénèse : la transformation cellulaire induite par transfert horizontal d oncogènes viraux via les corps apoptotiques. Auteur : E. Gaiffe, S. Launay, M. Saunier, P. Oudet, J.L. Prétet, C. Mougin Affiliation(s) : Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire EA181 «Carcinogenèse épithéliale» - U SMP IFR 1, Besançon emilie.gaiffe@univ-fcomte.fr Résumé : Le transfert horizontal de gènes par des corps apoptotiques a été documenté dans des modèles viraux (EBV) ou cellulaires (oncogène c-myc ou H-ras V1 ). Les gènes transférés s avèrent fonctionnels car ils peuvent s exprimer et dans le cas des oncogènes ils conduisent à la transformation des cellules receveuses. L objectif de notre travail est de déterminer si des corps apoptotiques dérivés de cellules cancéreuses du col de l utérus, infectées ou non par un HPV, sont capables de transformer des fibroblastes primaires. Une suspension de corps apoptotiques dérivés de cellules HeLa (HPV18+), CaSki (HPV16+) et CA (HPV-) a été obtenue après une irradiation UV de 0 mj/cm² et un traitement par 00 nm de staurosporine. Les corps apoptotiques ont été cocultivés avec des fibroblastes humains ou murins pendant une durée de 0 min à 48 h. La cinétique d internalisation des corps apoptotiques par les fibroblastes a été déterminée par cytométrie de flux et le mécanisme étudié par microscopie confocale. La transformation cellulaire a été évaluée par tests clonogéniques. Le transfert de l oncogène E6 a été mis en évidence par PCR en temps réel. L internalisation des corps apoptotiques est mise en évidence dès 1 h de coculture (10%) et elle est quasiment totale (90%) après 8h. Le mécanisme impliqué nécessite le recrutement de filaments d actine et est totalement inhibé à 4 C. Les tests clonogéniques indiquent que seuls les fibroblastes cocultivés avec des corps apoptotiques dérivés de cellules abritant de l ADN d HPV sont efficacement transformés. Enfin, des séquences d HPV16 ou d HPV18 ont été amplifiées à partir d ADN extrait de fibroblastes transformés. Ces résultats suggèrent que le transfert horizontal d oncogènes d HPV est possible par l intermédiaire de corps apoptotiques et que les séquences virales délivrées peuvent être responsables de la transformation des fibroblastes

9 Session Génomique, post-génomique, relations hôte-tumeur Induction of multifunctional high avidity human tumor-specific CD8 T cells can override tumor mediated immune suppression. Auteur : D. Speiser Affiliation(s) : Ludwig Institute for Cancer Research, Lausanne, Switzerland Daniel.Speiser@chuv.hospvd.ch Résumé : T cell mediated destruction of cancer cells is based on recognition of tumor-specific peptide antigens presented by HLA-A/-B/-C molecules. Therapeutic vaccines are aiming to promote activation of tumor-specific T cells in cancer patients. However, there are major differences in the capacity of various vaccine formulations to activate such T cells, and their functional competence remains poorly characterized. When combined with Incomplete Freund s Adjuvant (IFA) and antigenic peptide, CpG oligonucleotides (ODNs) are particularly potent vaccine adjuvants, due to the capacity of CpG ODNs to stimulate innate immune cells such as dendritic cells. After vaccination of melanoma patients with a mixture of the tumor peptide antigen Melan-A/MA-1 6-5, CpG ODNs and IFA, Melan-A-specific T cells expanded rapidly and reached high frequencies (on average >1% of circulating CD8 T cells). Direct ex vivo analysis revealed considerable antigen specific cytotoxic function and cytokine production by the T cells. Interestingly, tumor recognition was fully achieved by nearly all T cells after vaccination with the natural wildtype Melan-A/MA-16-5 peptide, whereas 8 % of T cells after vaccination with the analog (A7L) peptide failed to recognize tumor cells in vitro (unless they were labeled with synthetic peptide). Our data indicate that tumor cell killing was in part hampered by low TCR avidity, but also by deficiencies in perforin / granzyme expression and cytolytic function, the latter of which was reversible by the addition of IL-1. Thus, the generation of competent CD8 effector T cells depends on successful strategies to selectively activate high avidity TCRs, and an environment that promotes T1 type immune responses including IL-1 production. T cell responses need to overcome tumor driven peripheral immune suppression. Multiple cell types and factors of the tumor microenvironment have been shown to dampen effector T cell responses, and even maintain a state of local T cell anergy. Regulatory T cells and myeloid derived suppressor cells are prominent in various tumor types. High levels of COX-, IDO and arginase are important metabolic barriers, and co-inhibitory receptors (CTLA-4, PD-1) may mediate downregulation of T cell function. We have uncovered BTLA (B and T cell attenuator) as a new receptor inhibiting human tumor immunity. This molecular circuit is alleviated by vaccination with peptide, CpG ODNs and IFA, but not by vaccination without CpG ODNs. I will discuss immunological and tumor responses to vaccination of melanoma patients, and give novel insights in T cell activity and immune suppression in melanoma patients. 19 novembre Dialogue entre les effets non génomiques et génomiques de l acide rétinoïque : dérégulation dans certains cancers. Auteur : C. Rochette-Egly Affiliation(s) : IGBMC, INSERM U596, CNRS UMR7104, Université de Strasbourg, Strasbourg cegly@igbmc.u-strasbg.fr Résumé : L acide rétinoïque (AR) et ses dérivés de synthèse ou rétinoïdes sont utilisés avec succès dans le traitement d un certain nombre de cancers et leucémies. L AR agit via des récepteurs nucléaires, RAR (α, β, γ) qui se comportent comme des facteurs de transcription inductibles par le ligand et régulent l expression de toute une panoplie de gènes impliqués dans le contrôle de la prolifération et de la différentiation des cellules ainsi que de leur mort ou apoptose. Récemment notre équipe a montré que, en plus de ces effets génomiques, l AR exerce des effets non génomiques comme l activation de voies de signalisation. En effet l AR active rapidement les MAPKs qui vont ensuite induire des cascades d activation d autres kinases aboutissant à la phosphorylation des RARs eux-mêmes et de leurs corégulateurs. Ces phosphorylations sont indispensables à la dynamique des interactions des RARs avec leurs corégulateurs et les promoteurs des gènes cibles et donc à leurs effets génomiques ou transcriptionnels. D après des études récentes, un nombre croissant de cancers présente des anomalies ou des aberrations des voies de signalisation. Par exemple 0% environ des cancers du sein sont caractérisés par la surexpression de récepteurs à activité tyrosine kinase du type erbb-. Nous avons montré que dans des cellules tumorales de ce type, les RARs sont phosphorylés de façon aberrante. De plus, de telles cellules sont insensibles aux effets non génomiques comme aux effets génomiques de l AR. Ces résultats mettent en exergue un nouveau concept selon lequel les effets des rétinoïdes nécessitent l intégrité des voies de signalisation au sein de la cellule. Cela ouvre de nouvelles perspectives non seulement au niveau du mécanisme d action des RAR mais aussi dans la mise en place de nouvelles combinaisons thérapeutiques associant des drogues ciblant les voies de signalisation. Approches protéomiques en cancérologie. Auteur : A. Van Dorsselaer Affiliation(s) : LSBMO, CNRS IPHC-DSA, CNRS UMR7178, Univ. de Strasbourg vandors@chimie.u-strasbg.fr Résumé : Les possibilités de la protéomique en cancérologie n ont pas toujours été utilisées à bon escient ces dernières années par de nombreux laboratoires non avertis. Nous avons focalisé nos efforts d abord sur les développements méthodologiques nécessaires (augmentation de la gamme dynamique des protéines identifiables). Nous avons ensuite appliqué ces développements à une série de projets réalistes de recherche de biomarqueurs et d études de mécanismes biologiques fondamentaux importants pour la cancérologie. Développement méthodologique : - Traitement d échantillons (plasmas, tissus, xénogreffes), - Chromatographies à plusieurs dimensions sans milieu tamponné pour la LC-MS/MS, - Nouvelles séquences MS/MS pour augmentation de la sensibilité et augmentation du nombre de protéines identifiées - Automatisation des interprétations des spectres MS/MS (programme ANR VALANOT, 008) - Ecriture de nouveaux logiciels d exploitation des données à partir des banques de séquences génomiques et protéiques - Mise au point d une nouvelle méthode de détection sélective d une série de protéines (jusqu à 1000 protéines) par spectrométrie de masse avec la technique MRM (projet soutenu par l INCa, appel à projet libre 009 : PROTELL, Biomarkers identification in CNS relapse of diffuse large B cell lymphomas porté par Catherine THIEBLEMONT, AP-HP) CONCLUSION : L effort en développement méthodologique permet maintenant une approche crédible pour la recherche de nouveaux biomarqueurs. Recherche de nouveaux marqueurs : - Xénogreffe de cancer du colon avec métastases. Comparaison d extraits protéiques de xénogreffes de tumeurs. Etude comparative d une xénogreffe de tumeur primaire du cancer du colon avec les xénogreffes de métastases collectées dans le foie. Démonstration de la possibilité de différencier l origine (homme ou souris) des protéines extraites des xénogreffes grâce à une étude protéomique et l utilisation de peptides trypsiques discriminants (programme soutenu par l INCA Réseau structurant 005 ; collaboration avec E. Guérin et JF Launay, Inserm U68 et CHU Strasbourg). - Leucémie (malignant B-cells) : étude en protéomique comparative de trois types de leucémies (lymphome du manteau MCL, lymphome à petites cellules SLL et leucémie lymphoïde chronique LLC). Mise en évidence du CD 148 comme molécule différenciante. (Soutien ARC en 005 et de l INCa projet PAIR lymphome 008, collaboration avec Pr. L. Miguet). CONCLUSION : Un candidat «biomarqueur potentiel» est au stade de validation au sein d un PHRC. Rôle du système immunitaire dans la réponse à la chimiothérapie : le cas du cancer mammaire. Auteur : F. Ghiringhelli Affiliation(s) : Centre G.F. Leclerc, Equipe Inserm «Avenir», Dijon francois.ghiringhelli@wanadoo.fr Résumé : Les infiltrats tumoraux en lymphocytes T CD8 sont corrélés avec un bon pronostics dans plusieurs type de cancers. A l inverse les infiltrats en cellules Foxp sont retrouvés comme facteurs de mauvais pronostic dans de nombreux cancer et notamment chez les patientes porteuses de cancer du sein. Nous avons pu démontré que dans des modèles animaux comme chez l homme la réponse à la chimiothérapie notamment aux anthracyclines est dépendante de la bonne fonction de gène associé à la réponse immunitaire, en l occurrence TLR4 et PX7. Ainsi une cohorte de 0 patientes présentant un cancer du sein localisé et traitées en situation adjuvante par anthracycline furent génotypées à la recherche de polymorphismes perte de fonction de PX7 et TLR4. Ainsi cette population les patientes présentent une mutation de TLR4 ou de PX7 présentent un plus mauvais pronostic et un plus grand risque de récidive. Le rôle de la réponse immunitaire au aussi été démontré en situation néoadjuvante. Ainsi la présence d un riche infiltrat intratumoral en cellules CD8 associé à l absence de cellules Foxp après chimiothérapie neoadjuvante pour un cancer mammaire est un phénomène associé à une meilleur survie sans rechute. Le caractère pronostic de l infiltrat immunologique est retrouvé indépendant du type de chimiothérapie et de la présence d une réponse histologique complète. Ces résultats sous-tendent également l hypothèse que la chimiothérapie néoadjuvante des cancers mammaires peut induire une réponse immunitaire impliquée dans la récidive

10 Caveolin-1 controls growth and survival of human glioblastoma through α 5 β 1 integrins and TGF-β receptors. Auteur : E. Cosset, D. Bonnet, M. Dontenwill, S. Martin Affiliation(s) : LBP, UMR 71 CNRS, Faculté de Pharmacie, Strasbourg Sophie.Martin@pharma.u-strasbg.fr, smartin@unistra.fr Résumé : Glioblastomas (GBM) are the most common deadly brain tumors for which new therapeutic approaches are needed. Caveolin-1 plays a checkpoint function in the regulation of processes often altered in cancer. We investigated the role of caveolin-1 in GBM using genetic approaches and showed that caveolin-1 controls the aggressivity of GBM with caveolin-1 negative cells exerting the most aggressive phenotype. Using PCR array and Antibody array strategies we discovered that caveolin-1 affects two signalling pathways crucial for GBM development, maintenance and chemoresistance, the α 5 β 1 integrin and the TGF-β1 receptor (TGF-βR) pathways. Interestingly, α 5 β 1 integrin and TGF-βR expression and activation were inversely correlated to caveolin-1 expression suggesting that caveolin-1 acts as a repressor on these pathways. Data therefore supported the notion that caveolin-1 acts as a tumor suppressor. The inverse correlation between caveolin-1 and α 5 β 1 integrins was confirmed in human brain tumor biopsies and is under investigation for the TGF-βR. Our study also investigated and uncovered (1) the signalling pathways involved in the regulation of α 5 β 1 integrin and TGF-βR expression by caveolin-1 and () the pathways activated by α 5 β 1 integrins and the TGF-βR mediating caveolin-1 effect on GBM with a special focus for ERK-1/, Akt-1 and SMAD/. Given that α 5 β 1 integrins and TGF-βR are overexpressed and activated in GBM, the response of GBM to either α 5 β 1 integrin antagonists (SJ749 and K4) or TGF-βR inhibitor (SB4154) or a combination of both drugs was investigated. Data suggest that the status of GBM in caveolin-1 can influence the anti-tumor effect of each drug alone and the combination of both drugs with a higher sensitivity of caveolin-1 negative cells. In conclusion, our data open new aspects in the contribution of caveolin-1 in the biology of glioma and uncovered new potential therapeutic targets for the clinical management of GBM: α 5 β 1 integrin and/or TGF-βR. Session La recherche translationnelle au sein du CGE Recherche translationnelle et personnalisation de la prise en charge des patients : l exemple de la génomique clinique. Auteur : H. Peyro-Saint-Paul Affiliation(s) : Ipsogen, Marseille peyro-saint-paul@ipsogen.com Résumé : La recherche translationnelle, dont l objectif est de transformer aussi rapidement que possible les nouveaux savoirs scientifiques en bénéfices pour les patients, est un champ en plein essor. Pour permettre une mise en œuvre optimale des connaissances les plus récentes dans la pratique médicale quotidienne, la recherche translationnelle doit se développer au plus près des patients, dans des centres de référence combinant expertises scientifique et clinique. Le modèle traditionnel allait du laboratoire de recherche à l application clinique. Grâce en particulier aux progrès de la bioinformatique, de l imagerie ou de la génomique, on peut aujourd hui faire le chemin inverse, à savoir partir de l évolution clinique d un sous-groupe particulier de patients pour déchiffrer les mécanismes pathologiques sous-jacents. Une des illustrations de cette approche est l identification de caractéristiques biologiques génomiques permettant de guider la décision thérapeutique en oncologie. A la frontière des sciences dures, de la pratique clinique, et des technologies de pointe, la recherche translationnelle doit consolider ses méthodes et ses critères d évaluation. Trois niveaux d évidence doivent aujourd hui être considérés pour toute nouvelle procédure: Validité analytique, ou performances techniques, en particulier lors de l utilisation dans des laboratoires multiples Validité clinique, à savoir sa capacité à identifier précisément les groupes de patients ciblés Utilité clinique, qui reflète sa valeur ajoutée dans la prise en charge des patients Enfin, deux questions essentielles demeurent à explorer: l intégration des nouvelles procédures issues de la recherche translationnelle à la pratique clinique quotidienne, et l équilibre optimal entre niveau d évidence scientifique et rapidité de transfert des progrès scientifiques aux patients. Ces différents points seront discutés au cours de la session, et en prenant l exemple de la génomique clinique et du cancer du sein dans cette présentation. 19 novembre ALSACE - La PLATEFORME BIOPUCES : validation d un profil génomique de tumeurs du sein HER- + traitées par chimiothérapie première à base de trastuzumab (Herceptin ). Auteur : S. Lizard 1, P. Kastner Affiliation(s) : 1 Centre G.F. Leclerc, Dijon IGBMC, Strasbourg slizard@dijon.fnclcc.fr, philippe.kastner@igbmc.ustrasbg.fr Résumé : La chimiothérapie première dans les cancers du sein HER-+ est capable d obtenir une réponse histologique complète dans 50% des cas. Il serait important de connaître les facteurs génomiques concourant à cette excellente réponse au traitement, et de meilleure survie à long terme, ou bien à contrario connaître les facteurs de résistance à ce type de traitement. Nous avons effectué l analyse génomique de 8 tumeurs du sein localement évoluées et traitées par chimiothérapie première à base de trastuzumab afin de pouvoir déterminer des profils génomiques expliquant les phénomènes de réponse ou bien de moindre sensibilité à une thérapeutique ciblée en corrélant les profils génomiques à la réponse histologique. Ce travail a été réalisé en collaboration avec la plateforme génomique (IGBMC, Strasbourg). Vingt et une patientes ont été traitées par association de trastuzumab et docetaxel. Neuf patientes ont été traitées par association de trastuzumab, docetaxel et carboplatine. 50 % des patientes ont été mises en rémission complète histologique. Pour les 5 patientes étudiées pour établir le profile génomique, après filtrages (heuristique et statistique, p<0.00), 8 gènes sont corrélées à la réponse. Pour 1 patientes utilisées comme groupe de confirmation, ces 8 gènes se retrouvent discriminants réponse ou non réponse à la chimiothérapie à base de trastuzumab (herceptin ) avec une exactitude de 9%. Ces résultats montrent pour la première fois une signature génomique prédictive de la réponse à la chimiothérapie à base de trastuzumab. Il devient donc important de valider sur une cohorte indépendante supplémentaire cette signature génomique de sensibilité au traitement trastuzumab/chimiothérapie

11 BOURGOGNE - La PLATEFORME CLIPP (Clinical Innovative Proteomic Platform) : un outil pour le diagnostic et le criblage de molécules anticancéreuses. Auteur : P. Ducoroy 1, P. Fumoleau Affiliation(s) : 1 CLIPP (Clinical Innovation Proteomic Platform), IFR 100 Santé STIC, Université de Bourgogne, Dijon Centre G.F. Leclerc, Dijon patrick.ducoroy@clipproteomic.fr - pfumoleau@dijon. fnclcc.fr Résumé : Des progrès significatifs ont été réalisés ces dernières années en oncologie avec l avènement de thérapeutiques ciblées. La précocité du diagnostic et l évaluation précise de la réponse sont essentielles à la réussite du traitement. Pour pouvoir répondre à ces deux critères il est primordial d identifier de nouveaux marqueurs biologiques à la fois sensibles et fiables. Les technologies de protéomique applicables à l étude des liquides biologiques, actuellement en plein essor, ont toutes leurs places dans cette recherche ciblée. Les résultats préliminaires issus de deux d études cliniques réalisées sur la plateforme CLIPP en collaboration avec le Centre Georges François Leclerc, seront présentés illustrant à la fois l apport potentiel des approches protéomique ainsi que les innovations récentes apportées dans le domaine. Ces études portent sur la recherche de biomarqueurs précoces de la résistance à la chimiothérapie néoadjuvante des cancers du sein et de biomarqueurs précoces d efficacité thérapeutique pour la prise en charge des cancers ovariens. A travers ces exemples, nous soulèverons la nécessité de coordonner les études de protéomique clinique de manière multicentrique afin de répondre au besoin crucial de la puissance des études et de la multiplicité des essaies thérapeutiques. CHAMPAGNE-ARDENNE - La plateforme d IMAGERIE CELLULAIRE ET TISSULAIRE : Diagnostic différentiel des carcinomes cutanés par microspectroscopie vibrationnelle IR-TF et Raman. Auteur : M. Manfait 1, E. Ly 1, O. Piot 1, A. Durlach Affiliation(s) : 1 Unité MéDIAN CNRS UMR 67 MEDyC, Université de Reims Champagne Ardenne, Reims Laboratoire Pol Bouin, CHU Reims michel.manfait@univ-reims.fr - adurlach@chu-reims.fr Résumé : Les techniques de microspectroscopies vibrationnelles (absorption moyen infrarouge et diffusion Raman) sont particulièrement bien adaptées à la caractérisation des échantillons biologiques. Ces techniques, basées sur l interaction non destructive lumière - matière permettent d accéder à des informations d ordre moléculaire et structural, caractéristiques de l état physiopathologique d un échantillon. Les investigations peuvent être menées à différentes échelles, depuis la cellule unique jusqu aux approches tissulaires in vivo. Au sein de notre unité, la peau fait l objet d une importante activité de recherche au niveau des pathologies tumorales cutanées. De plus, la spectroscopie de diffusion Raman présente l avantage de pouvoir être mise en œuvre au moyen de systèmes fibrés, autorisant donc le développement d applications in vivo, directement sur les patients pris en charge à l hôpital. Les applications actuelles portent sur la caractérisation in vivo des lésions tumorales cutanées (carcinomes basocellulaires et spinocellulaires). FRANCHE-COMTE La plateforme ITAC (Innovative immune Targetting in Cancer) : production d anticorps monoclonaux élaboration de modèles précliniques pour le ciblage thérapeutique des cancers. Auteur : C. Borg 1, C. Ferrand Affiliation(s) : 1 CHU Besançon, EFS Bourgogne Franche- Comté Inserm U645 EFS Bourgogne Franche-Comté, Besançon christophe.ferrand@efs.sante.fr - christophe.borg@efs. sante.fr Résumé : La plateforme ITAC est située sur le site de l institut de bio-ingénierie de Franche Comté, et réunit les expertises des unités de recherche de l IFR1 et des entreprises du domaine biomédical (société Diaclone, EFS Bourgogne Franche Comté) pour le développement de l innovation et du transfert biotechnologique en onco-hématologie. Les principaux objectifs de cette plateforme comprennent : i) la production d anticorps monoclonaux pour le ciblage thérapeutique des cancers ou des hémopathies, ii) la production d outils moléculaires pour l identification de molécules impliquées dans le suivi biologique des cancers ou le ciblage thérapeutique (vaccins, screening de chimiothèque), iii) l élaboration de modèles précliniques in vitro et in vivo pour obtenir la preuve de concept de l intérêt clinique potentiel d une nouvelle stratégie thérapeutique. Dans un premier temps, Christophe Borg décrira l organisation de la plateforme ITAC. La description de programmes de recherche caractéristiques des équipes impliquées dans l activité de transfert illustreront les activités de la plateforme ITAC. Dans un second temps, Christophe Ferrand détaillera comment l identification d un épissage alternatif de la protéine CD0 peut contribuer à l élaboration de stratégies diagnostiques pour le suivi de la maladie résiduelle et la prédiction de la résistance au rituximab dans le contexte des hémopathies B. Les applications thérapeutiques potentielles seront également évoquées. LORRAINE La plateforme XENOGREFFES ET MODELES ANIMAUX : modèles orthotopiques de tumeurs cérébrales prédictifs d effets thérapeutiques. Auteur : F. Plénat, S. Pinel, M.C. Lanhers, P. Chastagner Affiliation(s) : EA 441 «Signalisation, Génomique et Recherche Translationnelle en Oncologie» (SIGRETO), Faculté de Médecine, Nancy CHU Nancy cf.plenat@chu-nancy.fr - p.chastagner@chu-nancy.fr Résumé : La plateforme Xénogreffes est un élément structurel de l Equipe d Accueil EA 441 «Signalisation, Génomique et Recherche Translationnelle en Oncologie (SIGRETO) de la Faculté de Médecine de Nancy. Cette plateforme a pour mission de développer et de valider des modèles animaux de cancers par greffes de tumeurs humaines chez la souris nude et de tester sur ces modèles différents schémas thérapeutiques. Ces dernières années, les efforts ont plus particulièrement porté sur la mise au point de modèles orthotopiques de glioblastome et de métastases cérébrales de tumeurs épithéliales. Ces modèles et leurs méthodes d exploration seront décrits et des applications pré-cliniques conçues pour être directement applicables chez l Homme rapportées. Les dernières expérimentations concernent le traitement de tumeurs cérébrales primitives et secondaires par des anthracyclines ou par le gefitinib, associées de façon concomitante à la radiothérapie. Concernant les anthracyclines, nous avons montré que les formes liposomales avaient une biodistribution intracérébrale (i) supérieure à celle obtenue avec la doxorubicine non liposomale, (ii) préférentielle au niveau de la tumeur par rapport au tissu cérébral sain (iii) intratumorale supérieure à celle observée en sous-cutané. Nous avons déterminé le meilleur schéma thérapeutique pour obtenir une concentration intratumorale optimale durant la radiothérapie. Les résultats de ces expérimentations nous ont permis d élaborer un protocole de traitement des gliomes malins (phase I puis II) par une doxorubicine liposomale et de métastases cérébrales de carcinome mammaire (phase I). Concernant le gefitinib, nous avons observé une importante radiopotentialisation sur lignées de glioblastome ainsi qu une nette modification de la vascularisation tumorale. Preclinical models of human renal cell carcinoma in nude mice directly from patients. Auteur : L. Thomas, T. Charles, V. Lindner, S. Danilin, V. Dormoy, S. Rothhut, D. Jacqmin, H. Lang, T. Massfelder Affiliation(s) : Inserm U68, Equipe Cancer du Rein et Physiopathologie Rénale, Faculté de Médecine, Strasbourg thierry.massfelder@medecine.u-strasbg.fr Résumé : Human renal cell carcinoma (RCC) remains resistant to therapy despite anti-angiogenic strategies, such as sunitinib. New therapeutic options are thus needed. RCC is heterogeneous for a same patient and show high cytogenetic variability among patients. Preclinical validations of treatments should be done on reliable models taking into account such parameters. One priority in R&D is to accelerate proof of principle through translational research, to allow a better evaluation of clinical potential of the therapy studied by identifying biomarkers at the preclinical level. Such strategy paves the way to personalized medicine. Actual models, obtained from tumorigenic clonal cell lines not reflecting the tumor in situ, are inadequate. The tumor xenografted nude mice model with freshly harvested human RCC is today the most pertinent but it is still poorly represented because it is difficult to developp and necessitates a close collaboration with a department of urology. Since March 007, tumor and normal corresponding tissues of 17 patients (all stages and grades) with sporadic RCC were obtained from the Urology department of the New Hospital of Strasbourg. Tumor fragments were xenografted sub-cutaneously and orthotopically in 5 weeks nude male mice using a secret experimental approach. Tumors that have grown were sequentially retransplanted until the fourth passage. Histopathologic, transcriptomic, genomic, proteomic and metabolomic studies were performed in specialized laboratories. The tumor take rate was 14.6% and 8.%, and the duration between grafting and growth was and 6 months for sub-cutaneous and orthotopic implantations, respectively, and did not correlate with sex, histology, stage, Fuhrman grade, angioinvasion and ischemia. Six models are still established. Histopathological parameters were conserved during sequential passages. Molecular parameters are currently under investigation. The effects of sunitinib, everolimus and sorafenib on tumor growth were measured in 6 tumors. Tumor growth arrest was observed in models depending on drug used. Molecular parameters will be analyzed to find biomarkers of response. These models should help researchers, clinicians and pharmaceutical companies to developp new therapies for RCC patients depending on tumor s characteristics. 0 1

12 0 novembre Session Épidémiologie : de la qualité de vie aux déterminants sociaux Session Progression tumorale 0 novembre Analyse longitudinale de la qualité de vie dans un essai de phase III randomisé auprès de patients ayant un cancer du pancréas métastatique. RC Auteur : E. Maillard 1, L. Dahan, J.F. Seitz, E. Mitry, M. Ychou 4, M. Gasmi 5, J.L. Raoul 6, C. Mariette 7, L. Bedenne 1, F. Bonnetain 1 Affiliation(s) : 1 Fédération Francophone de Cancérologie Digestive, INSERM U866, Dijon CHRU de Marseille AP-HM, Marseille Hôpital Ambroise Paré AP-HP, Boulogne 4 Centre Val d Aurelle, Montpellier 5 Hôpitaux Nord de Marseille AP-HM, Marseille 6 Centre Eugène Marquis, Rennes 7 CHRU de Lille, Lille emilie.maillard@u-bourgogne.fr Résumé : Contexte : L essai FFCD de phase III comparant LV- 5FU puis Gemcitabine(bras A) versus la séquence inverse (bras B) chez des patients atteints d un cancer du pancréas métastatique, n a pas démontré de différence significative sur la survie globale. Pour comparer longitudinalement la qualité de vie (QdV) selon les bras de traitement, nous avons exploré des définitions du temps jusqu à détérioration définitive (TDD) d un score de QdV selon la valeur minimale d une différence de score ayant un sens clinique (DSC). Méthode : La QdV a été évaluée à l aide du QLQ-C0 de l EOC toutes les 8 semaines jusqu au décès. Les TDD des scores de Santé globale (SG), santé mentale, santé physique, fatigue et douleur, intervalle de temps entre la randomisation et l occurrence d une DSC>5 points sans amélioration ultérieure>5 points ou sans aucun score disponible, ont été estimés à l aide de la méthode de Kaplan Meier et comparés par des tests du Log-Rank. Ces analyses ont été répétées en utilisant une DSC de 10 points, puis en incluant les décès comme événement. Résultats : Entre 08/00 et 05/006, 10 pts dans le bras A et 100 pts dans le bras B ayant un cancer du pancréas métastatique, OMS 0- et sans chimiothérapie antérieure ont été randomisés. Seuls 179 pts ont complété au moins un questionnaire de QdV (89%). Pour une DSC de 5 ou de 10 points, le TDD des 5 scores ne diffère pas selon le bras de traitement. Environ 5% des pts ont une détérioration>5 et 15%>10 points. En intégrant le décès comme événement avec une DSC de 5 points, le TDD médian du score SG est de 5. mois (4.-6.) dans le bras A et 6.1 mois ( ) dans le bras B (Log-Rank p=0.50). Le modèle de Cox multivarié montre que la localisation tumorale et la progression sont significativement associées avec les TDD (p<0.05). Discussion : La progression a un impact négatif sur la QdV. Les modalités d analyses de QdV employant les techniques d analyse de survie tiennent compte des données manquantes en offrant une interprétation plus «classique» des résultats par les cliniciens. Utilisation des typologies territoriales dans l étude des déterminants sociaux des hémopathies lymphoïdes dans cinq départements français disposant d un registre de cancers. RC Auteur : M. Hägi 1,7, A. Griffond-Boitier, S. Grandjean 1,7, A. Buémi,7, P. Grosclaude 4,7, S. Olteanu 5,7, F. Poncet 6,7, M. Velten 5,7, D.A. Vuitton 1,7, L. Daubisse-Marliac 4,7, M. Colonna 6,7, A. Danzon 1,7 Affiliation(s) : 1 Registre des Tumeurs du Doubs, CHU de Besançon, EA 181 Université de Franche-Comté, Besançon Laboratoire ThéMA «Théoriser et modéliser pour aménager», UMR CNRS 6049, Université de Franche-Comté, Besançon Registre des Cancers du Haut-Rhin, Mulhouse 4 Registre des Cancers du Tarn, Albi 5 Registre des Cancers du Bas Rhin, Strasbourg 6 Registre des Cancers de l Isère, Grenoble 7 Réseau français des registres de cancer Francim, Toulouse mathieu.hagi@chu-dijon.fr Résumé : Contexte : L impact de l environnement social et des conditions de vie sur le risque de survenue d une hémopathie lymphoïde est encore peu connu. L objectif de notre étude est d analyser le lien entre incidence des hémopathies lymphoïdes et niveau socio-économique à partir des données de 5 départements français disposant d un registre de cancers (Doubs, Isère, Bas- Rhin, Haut-Rhin, Tarn). Méthode : Le découpage en Ilots Regroupés pour l Information Statistique (IRIS) de l INSEE a été utilisé. Deux typologies territoriales ont été développées, basées sur les indicateurs du recensement général de la population : une typologie «globale» distinguant 7 types de territoires et une typologie «spécifique», analysant séparément les territoires ruraux et les zones urbaines et périurbaines, distinguant 9 types de territoires. Un modèle bayesien multiniveaux spatialisé a été utilisé pour modéliser le nombre de cas observés de cancers par IRIS (modèle de Poisson). Les cas incidents d hémopathies lymphoïdes diagnostiqués entre le 1er janvier 1990 et le 1 décembre 00 dans l un des cinq départements ont été inclus. Deux pathologies témoins ont également été étudiées afin de valider les typologies construites : le cancer du poumon et les cancers ORL. Résultats : Le risque d hémopathie lymphoïde est apparu plus important dans les zones caractérisées par un niveau socioéconomique élevé, plus particulièrement en zones urbaines et périurbaines. Les liens déjà connus entre cancers du poumon et ORL et niveau socio-économique ont été retrouvés : risque important en milieu urbain et dans les milieux les plus défavorisés, ainsi que dans certaines populations aisées à forte proportion de cadres. Discussion : Cette étude a permis de mettre en évidence une incidence des hémopathies lymphoïdes particulièrement élevée au sein des populations les plus favorisées. Ces résultats seront approfondis par une analyse sociologique suivie d une étude castémoins. L expression de l IP-10 à partir des PBMC reflète la progression tumorale du mélanome in vivo. Auteur : F. Antonicelli, J. Lorin, S. Kurdikowsky, S. Gangloff 1, J. Sallenave, R. Le Naour 1, W. Hornebeck, F. Grange, P. Bernard Affiliation(s) : 1 Service de Dermatologie et CNRS UMR 67, EA 796, URCA, Reims INSERM U874, Institut Pasteur, Paris frank.antonicelli@univ-reims.fr Résumé : La progression tumorale du mélanome est en partie liée à la réponse immunitaire du malade qui participe via les lymphocytes à la réaction stromale péri-tumorale. Le but de la présente étude était de rechercher un lien entre l état de progression tumorale clinique du mélanome et le profil des cytokines sécrétées par les PBMC des malades, ainsi que leur capacité à moduler la réaction stromale de cellules de mélanome in vitro. L étude a été réalisée à partir de PBMC préparés sur gradient de Ficoll-Hypaque, provenant de malades atteints de mélanome en rémission (n=10) ou présentant des métastases évolutives (n=10) et de sujets normaux (n=10). L effet inhibiteur des PBMC a été étudié soit par contact direct, soit via leur surnageant sur l invasion in vitro de cellules de mélanome SK-Mel8 à travers un gel de matrigel en système Transwell. Le profil de sécrétion de 0 cytokines par les PBMC a été déterminé par protein array selon la technologie Luminex (CliniSciences ). La modulation de l invasion tumorale in vitro était également étudiée après ajout des cytokines d intérêt définies par protein array. L effet de l IP-10 a aussi été étudié in vivo dans un modèle murin (souris C57BL/6) avec injection sous-cutanée de cellules de mélanome B16F1. Les résultats sur l invasion des cellules de mélanome montrent un effet par contact direct des lymphocytes circulants dépendant du stade évolutif de la maladie (inhibiteur chez les malades en rémission). Les effets étaient encore plus nets avec les milieux de sécrétion des lymphocytes sanguins, suggérant le rôle crucial des cytokines sécrétées dans la régulation de l invasion tumorale des cellules de mélanome. L augmentation de la sécrétion d IP- 10, molécule angiostatique et chimioattractante, est le meilleur marqueur biologique caractérisant les malades en rémission de mélanome. Son effet inhibiteur direct sur l invasion tumorale in vitro est démontré ici pour la première fois et confirmé in vivo (modèle murin). Grape polyphenols prevent C6 adenocarcinoma growth and neovascularization. Auteur : A. Walter 1, N. Etienne-Selloum 1, D. Brasse, H. Khallouf 1, M.C. Rio, A. Beretz 1, V. Schini-Kerth 1 Affiliation(s) : 1 Laboratoire de Biophotonique et Pharmacologie, UMR 71 CNRS, Université de Strasbourg, Faculté de Pharmacie, Strasbourg Institut Pluridisciplinaire Hubert Curien, UMR 7178 CNRS- INP, Université de Strasbourg, Strasbourg IGBMC, CNRS/INSERM U184 /Université de Strasbourg, Strasbourg allison.walter@pharma.u-strasbg.fr, netienne@unistra.fr Résumé : Introduction : Several lines of evidence suggest that colon cancer could be prevented by regular consumption of fruits and vegetables, which are rich sources of polyphenols. The aim of the present study was to determine whether Red Wine Polyphenols (RWPs) prevent tumor growth. Methods : C6 cells, derived from mice colon carcinomas, were subcutaneously injected into BALB/c mice. Two days later, RWPs (100 mg/kg/day) or vehicle were given in the drinking water for 6 days. The tumor macrovessel density was assessed by high definition microct, and the microvessel density by immunohistochemistry. A proliferation index (Ki67), apoptosis (TUNEL, activated caspase-) and the expression level of pro-angiogenic factors (VEGF, MMPs) and tumor suppressor genes (p1, p16, p5 as determined in tumors). In addition, the effect of RWPs on aberrant crypt foci (ACF) formation was determined in a model of azoxymethaneinduced colon cancer in rats. Results : After treatment with RWPs, tumor size was significantly reduced by 0% compared to control. The vessel density assessed by microct and immunohistochemistry, was reduced by 40 % and by 47 %, respectively in the RWPs-treated group. This effect was associated with a decreased expression level of VEGF, MMP- and MMP-9 in tumor cells. Moreover, RWPs reduced by 61% the proliferating index and increased by 81% the apoptotic index associated with high caspase- activity in tumor cells. RWPs also induced the expression of tumor suppressor genes such as p16, p1, p5 and p7 in tumor cells. Finally, treatment by RWPs reduced by 50% the number of ACF in colon. Conclusions : RWPs reduced tumor growth by preventing tumor neovascularisation and by inducing tumor cells apoptosis through the expression of tumor suppressor genes. Additionally, RWPs inhibited the formation of pre-neoplasic lesions in colon. Altogether, these findings indicate that RWPs have potent anti-cancer properties.

13 Nanostructured active materials for bone metastasis prevention. Auteur : D. Vautier, M.C. Rio, J.C. Voegel, N. Benkirane-Jessel Affiliation(s) : INSERM U595, IGBMC, Strasbourg nadia.jessel@medecine.u-strasbg.fr Résumé : The main objective of this project concerns the buildup of a biomaterial aimed at (i) preventing inflammation and bone metastasis in the site of implantation, (ii) preventing in situ bone metastasis invasion after ablation, and (iii) bone repair. The proposed ways are highly innovative and consist in a simple and progressive spraying of all the elements constituting finally the biomaterial. Considerable efforts have been devoted to the design of structured materials with functional properties. Polyelectrolyte multilayer films are now a well-established concept with numerous potential applications, in particular as biomaterial coatings. This technique allows the preparation of nano-structured architectures exhibiting specific properties in terms of control of cell activation and the development of local drug delivery systems. In this study, we used this nanostructured system comprising of poly-(l-lysine), β-cyclodextrin (CD) and PLL-CD (:1) as a reservoir for an active drug, the bisphosphonate Risedronate, in order to test its efficacy on inhibition of cancer cell invasion in vitro and prevention of cancer-induced bone metastases in animals. When incorporated into the cavity of CD covalently coupled to PLL, the in-vitro and invivo inhibitory activity of Risedronate was substantially improved. List of publications - Jessel et al. Short-time tuning of the biological activity of functionalized polyelectrolyte multilayers. Adv. Functional Materials, 005, 15, Schultz et al. Polyelectrolyte multilayers functionalized by a synthetic analogue of an anti-inflammatory peptide, alpha-msh, for coating a tracheal prosthesis. Biomaterials, 005, 6, Gangloff et al. Biologically active lipid A antagonist embedded in a multilayered polyelectrolyte architecture. Biomaterials, 006, 7, Jessel et al. Multiple and time scheduled in situ DNA delivery mediated by β-cyclodextrin embedded in a polyelectrolyte multilayer. Proc. Natl. Acad. Sci (USA), 006, 10, Dierich et al. Bone formation mediated by growth factors embedded in a polyelectrolyte multilayer film. Advanced Materials. 007, 19, Nadiri et al. Cells apoptosis Control by BMP-4 and Noggin embedded in a polyelectrolyte multilayer film. Small, 007,, 9, Zhang et al. Nano letters, 008, 1;8(8): Grossin et al. Step by step build up by spraying of cell containing biologically active stratified architectures aimed to tissue engineering. Advanced Materials 008. in press - Daubine et al. Nanostructured system as drug delivery for bone metastasis prevention. (Submitted) Session Nouveaux marqueurs Une nouvelle protéine ΔCD0, codée par un nouveau transcrit alternatif du gène CD0 associée à la résistance au Rituximab. Marqueur moléculaire potentiel des hémopathies B. Auteur : C. Henry, M. Deschamps, P.S. Rohrlich, J.R. Pallandre, J.P. Rémy-Martin, C. Grandclément, F. Garnache-Ottou, E. Deconinck, E. Robinet, P. Tiberghien, C. Borg, C. Ferrand Affiliation(s) : INSERM UMR645, EFS-BFC, Laboratoire de thérapeutique immuno-moléculaire des cancers, Besançon carole.henry@edu.univ-fcomte.fr Résumé : La molécule CD0 est un marqueur spécifique des lymphocytes B, exprimée à la fois sur les cellules normales et leucémiques. Cette protéine est la cible de l anticorps monoclonal Rituximab (Rx) utilisé en immunothérapie. Par -PCR, nous avons identifié et caractérisé un nouvel épissage alternatif du gène CD0. Cet ARNm (ΔCD0) délété de la majeure partie de l exon jusqu à l exon 7 est détecté dans différentes hémopathies B (lymphomes, leucémies), dans des lymphocytes B (LB) activés in vitro ou transformés par EBV. Il n a pas été détecté dans des LB CD19+ ou CD0+ purifiés de moelle osseuse ou sang de donneurs sains. Ce marqueur pourrait ainsi constituer un marqueur moléculaire diagnostique et de suivi des hémopathies B, comme nous l avons illustré à travers exemples. Nous avons également mis en évidence par western blot que cet ARNm épissé codait pour une protéine de 15-17Kd, délétée de la majeure partie des 4 segments transmembranaires. De manière très intéressante, sur des modèles de résistance au Rx, nous avons observé une augmentation de l ARN et de la protéine ΔCD0 liée au traitement par Rx. Nos résultats montrent également que la protéine ΔCD0 est associée à la protéine CD0 et module ainsi son expression. Enfin, à partir de modèle de souris transgéniques HLA, nous avons pu obtenir une réponse T cytotoxique CD8 contre un peptide spécifique de la zone de jonction de l épissage. Chez l homme, une réponse T a pu être déclenchée à partir de cellules dendritiques chargées en peptide de jonction ΔCD0, Ces résultats suggèrent que ΔCD0 pourrait être une cible thérapeutique intéressante pour améliorer le traitement par Rx, par des approches d immunothérapie anti-tumorale. En conclusion, nous dérivons l existence d un épissage du gène CD0, codant pour une protéine impliquée dans les résistances au Rx, par modulation de l expression de CD0 sauvage. Ce nouvel ARN ou cette nouvelle protéine pourrait constituer une cible intéressante pour améliorer les traitements. D. Dembelé, N. Martinet, C. Thibault, J. Huelsken, E. Brambilla and Stanislas du Manoir* *Co-corresponding authors Affiliation(s) : IGBMC, Cancer Biology Department, Strasbourg hussenet@igbmc.fr Résumé : Squamous Cell Carcinoma (SCC) of the Lung is a frequent and aggressive cancer type. Gene amplifications, a known activating mechanism of oncogenes, target the q6-qter region as one of the most frequently gained/amplified genomic site in SCC of various localizations. Here, we used array Comparative Genomic Hybridization to delineate the consensus region of q6. amplifications in lung SCC. We show that recurrent amplifications occur in about 0% of the cases ( independent cohorts, 16 tumors in total) and map to a core region of Mb which encompasses SOX, coding for a transcription factor. SOX intense immunostaining is frequent in nuclei of lung SCC (67% of tumors) indicating potential active transcriptional regulation by SOX in a majority of tumors. Analyses of the transcriptome of Lung Squamous Cell Carcinoma, SOX-overexpressing lung epithelial cells and Embryonic Stem Cell (ESC) reveals that SOX contributes to activate ESC-like molecular phenotypes and provide clues on the deregulated genes involved in the malignant phenotype. Finally, Sox over-expression renders human lung bronchial epithelial cells tumorigenic upon their implantation in immunocompromised mice. Our results newly and clearly designate the SOX transcription factor, a major regulator of stem cell function, as a pleoitropic oncogene and a driver gene of the recurrent q6. amplifications in lung SCC. Le CD148, un marqueur de surface potentiel des hémopathies lymphoïdes chroniques identifié par approche protéomique. Auteur : L. Miguet, G. Béchade, L. Fornecker, E. Zink, C. Felden, C. Gervais, R. Herbrecht, A. van Dorsselaer, L. Mauvieux, S. Sanglier-Cianferani. Affiliation(s) : Laboratoire de Spectrométrie de Masse Bio- Organique, ECPM, UMR/CNRS 7178, Institut Pluridisciplinaire Hubert CURIEN, Universite de Strasbourg Laboratoire d Hématologie, CHU Strasbourg sarah.sanglier@chimie.u-strasbg.fr laurentyannick.miguet@chru-strasbourg.fr Résumé : Contexte : Le diagnostic des hémopathies lymphoïdes chroniques B (HLCB) repose aujourd hui sur la morphologie et l immunophénotypage, les techniques cytogénétiques et moléculaires. Cependant le diagnostic par ces techniques usuelles SOX- is an Oncogene Activated by Recurrent est encore trop souvent difficile ou ambigu, ce qui se fait au q6. Amplifications in Lung Squamous Cell détriment du choix du traitement le plus adapté et du suivi des Carcinomas. patients. De nouveaux marqueurs de surface utilisables en routine en clinique sont donc nécessaires pour mieux préciser le diagnostic et orienter des explorations plus spécialisées. Auteur : T. Hussenet*, S. Dali, J. Exinger, B. Monga, B. Jost, Méthode : Pour ce faire, nous avons entrepris de rechercher les novembre

14 protéines exprimées à la surface des cellules de HLCB par une approche protéomique combinant la spectrométrie de masse et l utilisation d un matériel cellulaire original, les microparticules membranaires 1,. La mise en évidence d une expression différentielle de protéines de surface dans le cas des HLCB permettrait ainsi de disposer d une cible supplémentaire accessible aux techniques immunologiques usuelles du diagnostic. Résultats/Discussion : L étude de différentes HLCB (lymphome du manteau, lymphome à petites cellules et leucémie lymphoïde chronique) a permis de mettre en évidence l expression différentielle d une protéine particulière : le CD148, récepteur membranaire à activité phosphatasique, dans le cas du lymphome du manteau. Cette différence d expression a été confirmée par cytométrie en flux chez 158 patients et 0 témoins. Une expression élevée du CD148 est donc révélatrice du diagnostic du lymphome du manteau avec une spécificité de 91% et une sensibilité de 78% (avec une valeur de fluorescence du CD148 > fois la valeur moyenne des contrôles). Cette étude est une des premières où une approche protéomique a permis la mise en évidence d un biomarqueur potentiellement utilisable en routine clinique. Références 1 Miguet L, et al. Proteomics. 006, 1, Miguet L, et al. Subcell Biochem. 007; 4, 1-4. Miguet L, et al. J Proteome Res. 009, Epub in press cells (Treg, NKT, dendritic cell subpopulations, minimal residual disease, platelets ) and microparticles. - The Cell Search Veridex allowing to detect and quantify up to 10-7 cells in a quasi automated fashion. This equipment has been validated as a very powerful tool to detect circulating tumoral epithelial cells (CTC) in metastatic breast, prostate, colorectal cancer and thus establish CTCs as a new prognostic biomarker for adjuvant therapy protocols. It can also quantify endothelial cells in inflammatory disorders and for follow-up of anti-angiogenic therapies. A preparative methodology opens new fields of cell isolation for fundamental research - The AMNIS system combining flow cytometry and image analysis techniques with a powerful software allows a direct observation of cell markers in individual cells, at a membrane, cytoplasmic and nuclear levels and more efficient functional analysis of cells and even cell interactions. These equipments will be accessible in a mutualized fashion for the developments of clinical research projects according to good practice procedures of biological and clinical research from various medical structures of the interregional area. Session Cibles thérapeutiques et traitements innovants 0 novembre Les composés dérivés du Ruthénium : Affiliation(s) : 1 Unité de Biologie des Tumeurs, Centre Alexis Développement d une nouvelle classe de Vautrin, Nancy chimiothérapies dotée d une neurotoxicité réduite Laboratoire d Anatomie Pathologique, Centre Alexis Vautrin, et agissant indépendamment de p5. Nancy as.chretien@nancy.fnclcc.fr Résumé : Contexte : La recherche de mutation du gène KRAS Auteur : X. Meng, M. Leyva, M. Sidhoum, P. Wlosik, A. Boos, est obligatoire pour envisager la prescription d anticorps monoclonaux anti-egfr dans les cancers colorectaux métastatiques. S. Harlepp, P. Hébraud, P. Bischoff, C. Sirlin, M. Pfeffer, J.P. Loeffler, C. Gaiddon La plateforme régionale lorraine de phénotypage KRAS réalise en routine environ 700 analyses par an. Afin d optimiser la qualité des Affiliation(s) : INSERM U69, Strasbourg analyses et de réduire les délais de réponse, plusieurs approches christiangaiddon@mac.com techniques sont envisagées. Résumé : Malgré le développement de thérapies anticancéreuses Méthode : Cette étude rapporte une analyse comparative de dites ciblées, les chimiothérapies cytotoxiques, tel que les dérivés techniques : la PCR-LP, la PCR-Taqman et l HRM, réalisées Mise en place d un réseau national d analyse du platine, sont encore largement utilisées dans les traitements de à partir de 86 échantillons de cancer colorectaux adressés à la statistique des données de protéomique clinique. nombreux cancers. Toutefois, l activité anticancéreuse des chimiothérapies s accompagne de deux types de complications : des d anticorps anti-egfr. Seules 7 mutations parmi 1 sont recher- plateforme de génotypage pour analyse en vue de prescription toxicités sur plusieurs organes (neurotoxicité) et des mécanismes chées en PCR-Taqman. de résistances. Auteur : C. Truntzer 1, D. Maucort-Boulch, N. Molinari, P. Roy Résultats : 6% des échantillons n ont pu être analysés en raison Dans ce contexte, nous avons synthétisé et caractérisé de nouveaux Composés Dérivés du Ruthénium (RDC) qui appartiennent Affiliation(s) : 1 Plateforme Protéomique CLIPP IFR Santé Stic, d une fixation dans du liquide de Bouin. La population analysée est A cytomic core facility dedicated to clinical research. CHU Dijon conforme aux données bibliographiques avec 7% de mutations, à la famille des organométalliques comme les dérivés du Platine. dont 77% sont situées dans le codon 1 (11GA, 11GT, 11GC, Laboratoire Biostatistique Santé, Hospices Civils de Lyon, Nous avons analysé leur potentiel anticancéreux via des expérimentations in vitro et in vivo. Nous avons ainsi montré que l un de excellente corrélation est observée entre les techniques PCR- 1GA, 1GT, 1GC) et % dans le codon 1 (11GT). Une UMR5558, Université Lyon I Auteur : G. Faure, M.C. Béné, V. Latger-Cannard, K. Montagne, M. De Carvalho, F. Plénat, E. Luporsi, T. Lecompte Laboratoire de Biostatistique, Université Montpellier 1, BES- ces composés, le RDC11, a une activité anticancéreuse comparable à celle du Cisplatine sur des modèles tumoraux syngéniques cas. Globalement, les techniques concordent dans 75 cas sur LP et HRM, dont les résultats concordent dans 99% des PIM, CHU de Nîmes Affiliation(s) : Pôle Laboratoires, Commission REDIF, CHU caroline.truntzer@clipproteomic.fr ou xénogreffes (glioblastomes) tout en présentant deux avantages 81, probablement en relation avec les mutations rares non recherchées en PCR-Taqman. Les techniques les plus rapides sont Nancy Brabois importants : une toxicité plus faible et une activité sur des lignées Résumé : A l image des développements faits autour des données de génomique et transcriptomique, les outils statistiques les techniques PCR-Taqman et HRM, la PCR-LP nécessitant CLCC Alexis Vautrin, Nancy résistantes au Cisplatine, répondant ainsi aux limites du Cisplatine. CICP-Cancérologie, Nancy propres à la protéomique connaissent actuellement un essor considérable. Plusieurs laboratoires de recherche en mathématiques Par ailleurs, nous avons analysé le mode d action du RDC11 sur une double digestion enzymatique longue. A terme, la technique g.faure@chu-nancy.fr, thomas.lecompte@chu-nancy.fr des gliomes. Nos travaux ont démontré que le RDC11 agit via des HRM pourrait constituer une technique de screening permettant Résumé : The cytomics concept covers the diverse means allowing for an extensive analysis of cell subsets characteristics down to Pour centraliser leurs forces et répondre au mieux aux besoins appliquées travaillent en parallèle sur ce type de données. mécanismes d action multiples. L un de ces mécanismes implique d identifier rapidement les échantillons porteurs de mutations, la le stress du réticulum endoplasmique et en particulier le facteur technique PCR-Taqman permettant de confirmer ces résultats et pro-apoptotique CHOP. Cette activation s effectue indépendamment de p5. D autres mécanismes d action originaux ont été d identifier la mutation. the level of individual cells. Cytomics covers a broad array of multiparametric (from 5 to at least 0) definition of various immunophequeurs protéiques, un réseau national d analyse statistique des Discussion : Les résultats obtenus montrent une excellente cor- des cliniciens souhaitant identifier et valider de nouveaux biomar- identifiés par le biais d une analyse globale et comparative des notypic and functional parameters of cell subpopulations. It allows données de protéomique clinique se constitue. Ce réseau se crée rélation entre les techniques utilisées. Leur utilisation en routine transcriptomes de cellules traitées au RDC11 ou au cisplatine, to assign cells to a well defined cell lineage, characterize their à l initiative de plusieurs équipes de chercheurs impliquées dans diagnostique est validée et permet de disposer de méthodes complémentaires qui garantissent un haut niveau de qualité de diag- démontrant l existence de mécanismes communs et divergeants. differentiation stage and evaluate their functional capacities, such des développements méthodologiques et dans l application de ces as activation, ageing, pathological status. Cytomics through the méthodes en protéomique clinique, tout particulièrement dans le Le RDC11 fait l objet d expérimentations additionnelles dans le nostique moléculaire. combination of morphological and immunological markers, can be domaine de la cancérologie. but de l amener jusqu au stade de développement préclinique. En complément du RDC11, nous avons identifié d autres composés applied to normal or pathological cells (lymphocytes, monocytes, L objectif majeur de ce réseau est de lever les différents verrous spécifiques à l analyse statistiques de ces données. Seront Fonction du gène Cdx au cours de l émergence avec des mécanismes moléculaires différents, suggérant qu ils endothelial cells, platelets, microparticles ) from peripheral blood, pourraient avoir un spectre d action différent de celui du RDC11, des leucémies aigües. bone marrow, biological fluids, and from cells eluted from tissues. abordés les aspects de pré-traitement des données, d erreurs de ouvrant ainsi de nouvelles opportunités en terme de chimiothérapies. Cytomic studies of discrete and rare cells can now be used as a biomarker approach for diagnosis, follow-up and prognostic studies tion des études, de puissance des études visant à l identification mesure, de contrôle de qualité, de reproductibilité, de planifica- Auteur : B. Renouf, T. Saandi, I. Duluc, E. Martin, E. Solary, J.N. of patients with various chronic or acute pathologies of inflammatory or neoplastic origin. Rare events detection and quantification d intégration des données clinico-biologiques. L adaptation des Génotypage KRAS dans les cancers colorectaux Freund, C. Domon-Dell ou à la validation de biomarqueurs, de sélection des modèles et is the future challenge of clinical research which can now be conceivable with the new array of commercially available equipments. che sera une priorité. techniques de PCR-LP, PCR-Taqman et HRM. claire.domon@inserm.fr méthodes statistiques usuelles à ce nouveau domaine de recher- métastatiques : analyse comparative par les Affiliation(s) : INSERM U68, Strasbourg This cytomics core facility will include three complementary equipments for multiparametric characterization of rare events: la méthodologie vers le patient. exprimé spécifiquement dans l intestin chez l adulte et qui exerce L axe majeur du réseau demeure la recherche translationnelle, de Résumé : Contexte : Cdx est un facteur de transcription qui est - A multilaser multicolour flow cytometer allowing to use new fluorochromes and develop new techniques for the definition of discrete nal. Récemment, une expression ectopique de Cdx a été mise une fonction de suppresseur de tumeur dans l épithélium intesti- Auteur : A.S. Chrétien 1, M. Husson 1, M. Rouyer 1, C. Ramacci 1, P. Genin, A. Leroux, J.L. Merlin 1 en évidence dans 80% des leucémies aigües myéloïdes et lym- 6 7

15 phoblastiques (AML et ALL). Dans un modèle d irradiation/greffe de moelle chez la souris, Cdx exerce une fonction oncogénique dans le contexte ectopique des cellules hématopoïétiques. Le but de notre travail est de comprendre comment le gène homéotique Cdx exerce ses fonctions opposées : suppresseur de tumeurs et anti-prolifératif dans l intestin, oncogénique et prolifératif dans le tissu hématopoïétique. Notre hypothèse est que la fonction de Cdx dépend du contexte cellulaire. Notre objectif consiste à caractériser les partenaires moléculaires de Cdx dans les cellules hématopoïétiques. Méthode : Les partenaires de Cdx ont été purifiés par la technique de TAP-Tag (Tandem Affinity Purification) dans la lignée leucémique humaine K-56 et la lignée cancéreuse colique humaine HCT116 et identifiés par spectrométrie de masse (collaboration avec l équipe du Dr Alain Van Dorsselaers, LSMBO UMR 7509). Nous étudions la fonctionnalité de l interaction entre Cdx et ses partenaires par une approche de perte ou de gain de fonction dans les cellules hématopoïétiques en analysant la prolifération cellulaire, l apoptose et le pouvoir clonogénique. Résultats : Actuellement, deux protéines ont retenu notre intention : une hélicase et un membre de la famille des facteurs de transcription GATA. L étude de l importance des partenaires de Cdx pour l expression du pouvoir oncogénique de Cdx dans les cellules leucémiques est en cours. Discussion : Bloquer l action oncogénique de Cdx en empêchant son interaction avec ses partenaires pourrait constituer une approche thérapeutique nouvelle et originale des leucémies myéloblastiques et lymphoblastiques aiguës. Membrane Hsp7 from tumor-derived exosomes mediates p-stat dependent function of myeloid suppressor cells through the TLR-MyD88 pathway. Auteur : F. Chalmin, S. Ladoire, G. Mignot, J. Vincent, L. Apetoh, C. Rébé, F. Ghiringhelli Affiliation(s) : INSERM U866, équipe «Avenir», Faculté de Médecine et de Pharmacie, Dijon gregoire.mignot@free.fr Résumé : Myeloid suppressor cells (MDSCs) have been identified in humans and mice as a population of immature myeloid cells with ability to suppress T cell activation. MDSCs, which accumulate in tumor bearing hosts, have been shown to contribute to cancer development in mice and humans. Recent evidence suggests that the transcriptional factor Stat is constitutively activated in many mouse and human cancer cells : tumors that constitutively express phosphorylated-stat (p-stat) release some tumor derived factors that induced Stat activation in myeloid cells, a phenomenon leading to MDSCs accumulation and immune suppressive activity. However, the exact nature of these factors has not been investigated. Here, we studied the factors released by tumor cell lines that constitutively expressed p-stat and induced MDSCs suppressor activity in a Stat dependent manner. Surprisingly, we showed that tumor derived exosome (TDE) -and not a tumor derived soluble factor- determines MDSCs Stat-dependent suppressive activity. Moreover, we could demonstrate that, in both mice and humans, membrane Hsp7 from TDE triggers Stat activation in MDSCs in a TLR/MyD88 dependent manner through an autocrine production of IL-6. Accordingly, targeting exosome production in vivo using dimethylamiloride blunts the suppressive activity of MDSC and enhanced the efficacy of cyclophosphamide treatment in three different mouse tumor models. Finally, we also demonstrated that this mechanism supporting suppressive MDSCs activity is relevant in cancer patients. Collectively, our findings show for the first time in both mice and human settings that membrane TDE associated Hsp7 restrained tumor immune surveillance by supporting MD- SCs suppressive functions. Modulation of tumor molecular response to cetuximab by PTEN silencing in HNSCC cell line : impact on angiogenesis. Auteur : J. Mriouah 1, C. Boura 1, C. Ramacci 1,, J.L. Merlin 1,, B. Faivre 1 Affiliation(s) : 1 EA PREDICTHER-SIGRETO, Faculté de Médecine, Nancy Université. Unité de Biologie des tumeurs, Centre Alexis Vautrin, Nancy jihane.mriouah@pharma.uhp-nancy.fr Résumé : Background: Cetuximab has been shown to be very potent for treatment of many cancers, including HNSCC in association with radiotherapy. However, several resistance mechanisms to targeted therapies have been reported, among which loss of PTEN expression. VEGF overproduction phenomenon is also reported in resistance mechanisms. As a main regulator of PIK/AKT signalling pathway and because this pathway is involved in angiogenesis control, we believe that a loss of PTEN expression can lead to the overproduction of vascular endothelial growth factor (VEGF) and contribute to resistance to cetuximab. Methods: CAL7 human HNSCC cell line, sensitive to cetuximab, was transfected by PTEN-siRNA and exposed to cetuximab ( sipten CAL7 cells). Cell growth inhibition and cytotoxicity were evaluated using MTT assays and cells countings. Western blot and Bioplex phospho-proteins array (BPA) assays were performed to evaluate PTEN and EGFR downstream signalling phosphoproteins expression. 48 hours after exposure to cetuximab, the culture media were collected to serve as conditioned medium (CM) for aortic ring culture. Aortic ring sprouting was investigated by microscopy. The secretion of molecular proteins involved in angiogenesis regulation was evaluated in CM using BPA and Proteome Profiler Array assay. Results: In cells exposed to cetuximab, a significant increase in cell proliferation and signalling proteins phosphorylation was observed in sipten-cal7 cells, correlated with a significant oversecretion of VEGF. Surprisingly, CM from these sipten-cal7 cells did not induce sprouting of endothelial cells (EC) in aortic rings. CM molecular characterisation shows changes in angiogenic balance. Conclusions: In this study, we showed that loss of PTEN expression in CAL7 HNSCC cells leads to an increase in cell viability and in VEGF secretion. We also show that VEGF is not the only key protein involved in this angiogenic switch. The complexity level of angiogenesis regulation could explain the failure of cetuximab treatment in sipten-cal7 cells. Session Nouvelles approches chirurgicales Réalité virtuelle et robotique : nouvelles technologies appliquées à la recherche et au traitement des cancers. Auteur : L. Soler 1, M. de Mathelin, D. Mutter 1, J. Marescaux 1 Affiliation(s) : 1 IRCAD, 1 place de l hôpital, STRASBOURG LSIIT (UDS), IRCAD, 1 place de l hôpital, STRASBOURG luc.soler@ircad.u-strasbg.fr Résumé : Les nouvelles technologies de la réalité virtuelle et de la robotique offrent un nouvel espoir dans la lutte contre le cancer. En effet, ces outils peuvent non seulement être utilisés de façon bénéfique dans la mise au point de nouveaux traitements, mais également dans la prise en charge opératoire actuelle des patients quelle soit radiologique ou chirurgicale. Nous avons ainsi développé un ensemble d outils logiciels permettant dans une première étape préopératoire la modélisation D et le suivi 4D des patients (Projet Européen FP7 PASSPO). Le logiciel VR-Render téléchargeable gratuitement, offre ainsi la possibilité de visualiser très rapidement et de façon tridimensionnelle les images DICOM précliniques ou médicales. Le logiciel VR-Anat permet quand à lui de délimiter de façon automatisée les structures anatomiques et pathologiques contenues dans l image. Le résultat peut alors être superposé à l image initiale et visualisé en D avec VR-Render. Le logiciel VR-Planning permet ensuite de planifier en la simulant, la thérapie opératoire de destruction tumorale, qu elle soit une thermoablation percutanée, ou bien un acte chirurgical de résection. De façon peropératoire, le logiciel AR-Surg offre enfin la possibilité de guider le praticien dans son geste par la réalité augmentée qui fournit une vision en transparence du patient. Au delà des outils logiciels, les outils robotiques complètent l assistance opératoire par une assistance au geste. Pour la destruction par thermoablation, les projets en cours de développement nous ont permis d aboutir à des premiers prototypes de robots d insertion d aiguilles pour le petit animal et pour les patients. Sur le plan chirurgical, nous avons également développé de nouveaux systèmes robotisés pour la chirurgie mini-invasive et transluminale. Ces systèmes intègrent essentiellement l automatisation des gestes par l asservissement visuel permettant d atteindre précisément une tumeur grâce au suivi automatique temps réel du mouvement des organes du patients. L utilisation préclinique sur le petit animal pour le traitement de cancers colorectaux, ou clinique pour des pathologies cancéreuses digestives et endocrines, montre un bénéfice réel de ces systèmes en offrant un meilleur diagnostique, une meilleure localisation des lésions et un geste plus précis. 0 novembre Figure 1 : Modélisations D précliniques et cliniques des structures anatomiques et pathologiques. 8 9

16 Figure : Guidage per-opératoire par réalité augmentée pour le foie, le pancréas et les parathyroïdes. L exérèse endoscopique de l adéno-carcinome nasal permet de réécrire son histoire diagnostique et thérapeutique. Auteur : R. Jankowski Affiliation(s) : CHU Nancy r.jankowski@chu-nancy.fr Résumé : L adénocarcinome nasal est un cancer qui se développe (presque) exclusivement chez les personnes exposées à la poussière de bois avec un risque faible dès la première année d exposition qui devient majeur après 0 ou 0 ans d exposition. L absence de dépistage systématisé, son apparition fréquente après l âge de la retraite, la banalité des signes d appel entraînent un diagnostic souvent tardif. Le traitement de référence associe l exérèse chirurgicale par voie craniofaciale à la radiothérapie post-opératoire, avec une morbidité assez lourde et une survie autour de 60% à 5 ans. La majorité des récidives surviennent avant la ème année. L exérèse par voie endonasale endoscopique a permis de préciser le comportement particulier de cette tumeur : le pédicule d origine se trouve dans la fente olfactive et donne naissance à un corps tumoral volumineux qui refoule le labyrinthe ethmoïdal et la cloison nasale et comble la cavité nasale : l envahissement de la fosse cérébrale antérieure au travers de la lame criblée se fait à partir du pédicule et représente probablement le facteur pronostique majeur (1). Ces données sont visibles radiologiquement. L aspect TDM et IRM de cette tumeur est suffisamment caractéristique pour permettre d évoquer son diagnostic (). Une nouvelle classification T est en cours d élaboration pour décrire ce comportement tumoral. L exérèse endoscopique de ces tumeurs centrée sur la fente et la fosse olfactive (et non plus sur le labyrinthe ethmoïdal) améliore significativement la morbidité chirurgicale et dans l état actuel de notre expérience le pronostic (survie à ans de 8%). Par ailleurs le développement initial de ces tumeurs dans la fente olfactive devrait conduire à un dépistage beaucoup plus facile et systématisé reposant sur un examen simple au cabinet ORL par nasofibroscopie, et en cas de doute un TDM : toute opacité de la fente olfactive est suspecte, surtout chez les travailleurs du bois. Enfin une prévention basée sur le lavage des fosses nasales à l eau salée est envisageable. Références : 1. Endoscopic surgery reveals that woodworkers adenocarcinomas originate in the olfactory cleft. R Jankowski, T Georgel, JM Vignaud, B Hemmaoui, B Toussaint, P Graff, L Geoffrois, P Henrot, MC Kaminsky. Rhinology 007 ; 45 : CT assessment of woodworkers nasal adenocarcinomas confirms origin in the olfactory cleft. T Georgel, R Jankowski, P Henrot, C Baumann, S Kacha, B Toussaint, P Graff, MC Kaminsky, L Geoffrois, JM Vignaud. AJNR Am J neuroradiol 009 ; 0 (7) : Résumés des communications affichées Thème Épidémiologie N 1 L obésité viscérale : un facteur pronostique indépendant chez les patients porteurs d un cancer colorectal métastatique traités en 1ère ligne par bevacizumab. Auteur : B. Guiu, J.M. Petit, F. Bonnetain, S. Ladoire, S. Guiu, J.P. Cercueil, D. Krausé, P. Hillon, C. Borg, B. Chauffert, F. Ghiringhelli Affiliation(s) : CHU le Bocage et Centre Georges-François Leclerc, Dijon boris.guiu@chu-dijon.fr Résumé : Contexte : L obésité est un facteur de risque de cancer colorectal. Le tissu adipeux secrète des facteurs pro-angiogéniques qui peuvent accélérer la croissance tumorale. La plupart des patients porteurs d un cancer colorectal métastatique reçoivent une chimiothérapie associée à un anti-angiogénique (bévacizumab) en 1 ère ligne. Le but de cette étude était de déterminer si le BMI, le taux de graisse sous-cutanée (GS) et le taux de graisse viscérale (GV) avaient une influence sur la réponse et la survie des patients métastatiques traités par bevacizumab en 1 ère ligne. Méthode : Entre 00 et 008, 80 patients ont été traités par chimiothérapie et bevacizumab en 1ère ligne au centre Georges-François Leclerc à Dijon. Nous avons mesuré la graisse sous-cutanée et la graisse viscérale sur les scanners pré-thérapeutiques. Le BMI, le taux de GS et le taux de GV ont été corrélés au taux de réponse à mois, au temps jusqu à progression (TTP) et à la survie globale (OS). Résultats : Durant le suivi (médiane=4 mois ; 95% IC, 19-0 mois), nous avons observé 64 progressions et décès. Le BMI, la GS et la GV étaient plus élevés chez les non répondeurs (p=0.00, p=00 et p=00001 respectivement). Des valeurs de BMI, de GS ou de GV supérieures à la médiane étaient significativement associées à l absence de réponse à mois. Le TTP était significativement plus faible chez les patients avec un BMI élevé (9 vs.1 mois, p=0.01) ou un taux de GV élevé (9 vs. 14 mois, p=0.0008). Un taux de GV élevé était associé à une OS plus faible (p=0.049). En analyse multivariée, un taux élevé de GV était indépendamment associé avec la réponse à mois, le TTP et l OS (p=0.008, p=0.005 et p=0.07 respectivement). Conclusion : Dans cette étude, l obésité viscérale est un facteur prédictif de mauvaise réponse et un facteur pronostique majeur chez les patients métastatiques traités en 1 ère ligne par bévacizumab. Nos résultats restent à confirmer dans une cohorte de validation. N Systemic neoadjuvant versus adjuvant treatment in breast cancer: population-based case-control study using relative survival. RC Auteur : S. Dabakuyo 1,,4, A. Arnaud, G. Créhange, P. Maingon, M.L. Poillot 1,4, P. Arveux 1,4, F. Bonnetain 1,,4 Affiliation(s) : 1 Breast and Gynecologic Cancer Registry of Côte d Or, Centre Georges François Leclerc, Dijon Biostatistics and Epidemiology Unit, Centre Georges François Leclerc, Dijon Radiotherapy Department, Centre Georges François Leclerc, Dijon 4 EA 4184, Faculty of Medicine, University of Burgundy, Dijon, France.Centre Georges François Leclerc, Dijon sdabakuyo@dijon.fnclcc.fr Résumé : Background: Despite clinical trials, the efficacy of neoadjuvant chemotherapy remains uncertain. Based on the Côte d Or breast cancer registry data, a case-control study was undertaken to study the efficacy of neoadjuvant chemotherapy, using relative survival (RS) as the primary end point. Methods: Cases were defined as receiving invasive primary neoadjuvant chemotherapy followed by surgery and radiotherapy, whereas controls underwent surgery followed by adjuvant chemotherapy and radiotherapy. The patients were matched for cancer American Joint Committee on Cancer (AJCC) stage, age ( 50 vs >50 years), date of diagnosis ( vs ) and the oestrogen receptors status (OR). The reverse Kaplan Meier method was used to estimate the potential follow-up time. The Kaplan Meier method and log rank test were used to estimate and compare the overall survival (all deaths). Multivariate Cox proportional hazards modelling was applied to assess the independent prognostic effect for overall survival (OS). RS was used to estimate excess mortality ratio in a generalized linear model with a Poisson error structure. Results: Based on registry data, 184 patients were matched. The median potential follow-up time was 10 years [8 1] and 11 years [7 14] for cases and controls, respectively (logrank p value = ). At the cut-off date, 9 (%) and 9(4%) deaths had occurred in cases and controls, respectively (logrank p value = 0.514). OS at 1, 5 and 10 years were respectively 96%, 8% and 64% for cases and 97%, 7% and 6% for controls. RS at 1, 5 and 10 years were respectively 99%, 8% and 69% for cases and 99%, 76% and 60% for controls. Multivariate analyses showed that the use of neoadjuvant chemotherapy, independently of AJCC stage, age, date of diagnosis, OR status and SBR, did not influence OS (HR=0.84[ ], p=0.488) and RS (HR=0.9 [ ], p=0.80). Conclusions: Despite a favorable trend, this population-based case-control study failed to show any influence of neoadjuvant chemotherapy on survival. 0 1

17 N quity of cutaneous HPV infection and the frequency of occult N 5 SQ0B dans un rapport similaire à celui observé entre tumeurs HPV infections. In particular beta HPV prevails in both immunocompetent and immunosuppressed subjects and in both healthy manière dépendante de la dose de photons par rapport à la HPV-positives et négatives. La lignée SCC90 est sensible de Prevalence of human papillomavirus (HPV) Structure fonction des oncoprotéines de genotypes in eyebrow hairs, healthy skin, benign skin, SCC and melanoma. However, the number of infecting papillomavirus humains oncogènes. lignée résistante de référence SQ0B. La surexpression d APPcutaneous lesion, nonmelanoma skin cancers and beta HPV types and/or specific HPV types, may be involved in a BP1 dans les cellules SCC90 s accompagne d une augmentation de la résistance aux radiations ionisantes (SF Gy=0.91) melanoma of nonimmunosuppressed individuals, sub-group of skin cancer. renal transplant recipients and HIV-infected patients Auteur : K. Zanier, A. Ould Sidi M hamed Ould Sidi, S. Charbonnier, en comparaison aux cellules SCC90 transfectées avec un vec- M. Masson, T. Ristriani, K. Luck, S. Fournane, Y. Nominé, teur contrôle (SF Gy=0.46). RC G.Travé Thème Discussion : APP-BP1 semble jouer un rôle dans la radiosensibilité des cellules SCC90. Il convient de déterminer si cet effet Auteur : F. Aubin 1, C. Biver-Dalle 1, J.B. Ruer 1, J.S. Guerrini 1, T. Affiliation(s) : Equipe Oncoprotéines, CNRS-UMR 7175-LC1, Gheit, C. Mougin 1, J.L. Prétet 1, M. Tomassino Cancérogenèse viro-induite ESBS, Strasbourg dépend de l activité transcriptionnelle de p5 ou passe par une Affiliation(s) : 1 Université de Franche Comté, EA181, IFR1 gtrave@titus.u-strasbg.fr voie indépendante. De manière intéressante, un inhibiteur du et Centre Hospitalier Universitaire, Service de Dermatologie, Résumé : Papillomaviral E6 proteins participate to disruption of complexe APP-BP1/Uba- récemment décrit suggère que la N 4 Besançon cell-cycle controlling pathways for the sake of viral replication. cascade de NEDDYlation est une cible thérapeutique potentielle Expression des transcrits précoces d HPV16. IARC, Lyon To achieve this they have evolved the capacity to bind (and often pour le traitement des cancers. degrade) many cellular proteins. Some E6 proteins also bind francois.aubin@univ-fcomte.fr nucleic acids of particular structures, such as four-way DNA N 7 Résumé : Although the role of HPV infection in skin cancer is Auteur : J.L. Prétet 1, M. Saunier 1, C. Chaveriat 1, V. Dalstein, E. junctions. On the other hand, E6 sequences display relatively suggested, the ubiquity of cutaneous HPV infection may indicate that HPV have no relevance in the genesis of skin cancer. NS1 cellular targets identification. Schwarz, C. Mougin 1 strong variations throughout the different papillomavirus strains. Affiliation(s) : We conducted different studies in different groups of patients EA181, IFR1, Université de Franche-Comté, Besançon in tropism and pathogenicity observed for the different HPV It is expected that these variations contribute to the variations and skin lesions with healthy skin controls and eyebrow hairs to Auteur : N. Paul evaluate the prevalence of cutaneous HPV infection. Laboratoire Pol Bouin, CHU Reims,INSERMUMR- strains. Here we discuss several aspects of this topic in light of, W. Raffelsberger 1, L. Brino 1, A. Marchini, O. Poch S90,Université de Reims Champagne-Ardenne, Reims the recent structural and functional data obtained on the HPV Materials and Methods: In a first study, 5 squamous cell carcinomas (SCC) from 40 renal transplant recipients (R), 50 E6 protein. Affiliation(s) : 1 IGBMC, Laboratoire de Biologie et Génomique DKFZ, Heidelberg Allemagne Intégratives, Strasbourg benign epithelial skin lesions from 50 R with no history of jean_luc.pretet@univ-fcomte.fr DKFZ, Heidelberg, Allemagne N 6 skin cancer and 51 SCC from immunocompetent patients were Résumé : Contexte : La charge virale (CV) en papillomavirus npaul@igbmc.fr investigated using PCR with two pairs of primers (MY09±MY11 humains (HPV) ainsi que l intégration (estimée en déterminant Rôle du gène codant l Amyloid β Precursor-Binding Résumé : Oncolytic viruses are strongly emerging as alternative and FAP59±FAP64). In a second study, 100 patients with cutaneous malignant melanoma diagnosed between 00 and 006 du gène E6) de l ADN d HPV peuvent prédire un risque de lé- lignée cellulaire cancéreuse de l oropharynx HPVtaneous chemically induced and xenografts tumours in labora- le ratio du nombre de copies du gène E / nombre de copies Protein 1 (APP-BP1) dans la radiosensibilité d une cancer therapies (1,). They can reduce the incidence of spon- were included. Complementary wide excision (healthy skin) was sions (pré)cancéreuses du col de l utérus incidentes (CV>00eg positive. tory animals, while showing no apparent side effects (4,5). NS1, performed in 85 patients and was used as internal control. In HPV16/10 cellules) ou prévalentes (CV>0.000eg HPV16/10 a multifunctional protein, is considered to be a major mediator of third study, the prevalence of HPV DNA in eyebrow hairs was cellules ou E/E6>0,5) (Saunier et al. 008). Par ailleurs, le parvovirus induced cytotoxicy (6). However, the molecular mechanisms by which NS1 affects viral and cell transcription and investigated in 6 HIV/AIDS patients 6, 50 immunocompetent processus de carcinogenèse induit par les HPV est lié à une Auteur : S. Guihard, C. Macabre, L. Ramolu, G. Noël, J. Abecassis, A. Jung cytotoxicity remain poorly understood. In order to investigate subjects and 50 R. After DNA extraction, 68 different HPV dérégulation de l expression des gènes précoces E, E6 et E7. types were studied using a multiplex PCR combined with microarray primer extension. transcrits E et E6 d HPV16 était corrélé à la charge virale ou Notre objectif a été de déterminer si le niveau d expression des Affiliation(s) : EA40, Laboratoire de Biologie Tumorale, the role of NS1, besides the well caracterized transcriptional Results: HPV DNA was detected in 64% of SCC and 79% of à l intégration. Centre Paul Strauss, Strasbourg activity on the parvoviral p8 promoter, we used an integrative benign epithelial lesions from R (ns) and only in 7% of Méthode : Des PCR temps réel ciblant les gènes E, E6 et albumine ont été utilisées pour mesurer la CV et évaluer le ratio Résumé : Contexte : Le papillomavirus humain (HPV) est un sguihard@strasbourg.fnclcc.fr approach. It allowed us to intersect results from transcription profiling and chipchip experiments to identify potential targets SCC from immunocompetent patients (p <0.05). Significantly of NS1 on a genomewide level. more mucosal HPV were present in SCC from R. However, E/E6. Des techniques de qpcr ont été développées pour facteur de risque pour la survenue de carcinome épidermoïde the prevalence of cutaneous HPV was similar between these mesurer l expression des transcrits E, E6 et BM dans des de l oropharynx. Ces tumeurs infectées par HPV sont supposées être particulièrement radio-sensibles. Nous avions précé- Tomanin R. and Scarpa M Why do we need new gene therapy References 1 groups (4.5%, 6%, and 1% respectively). We did not observe any statistical significant difference in terms of HPV DNA prélèvements infectés par un HPV à haut risque. 9 abritaient demment identifié le gène APP-BP1 comme étant spécifique- viral vectors? Characteristics, limitations and future perspec- cellules de frottis cervico-utérins. Nous avons sélectionné 86 prevalence in melanoma (8.8%) and in healthy skin from wide de l ADN d HPV16. Des ARN ont été extraits à partir de 98 ment sous-exprimé dans ces tumeurs. APP-BP1 est un membre tives of viral vector transduction. Current gene therapy. 4, excision (4.4%). The distribution of HPV genera and types was échantillons. de la cascade de NEDDYlation, et sa fonction est requise pour 577, 004 similar in melanoma and HS, and beta-hpv were predominant Résultat : La proportion d échantillons exprimant des transcrits la répression de l activité transcriptionnelle de p5. Parato K, Senger D, Forsyth PA, Bell J. Recent progress in the (0.6% and 1.8%). HPV DNA was detected in 86% of 6 HIVinfected patients, 76% of 50 immunocompetent subjects (ns) tée par le ratio E/E6. L expression des transcrits E et E6 est Méthode : Les niveaux d expressions de gènes d intérêt ont été battle between oncolytic viruses and tumours. Nature Reviews E et/ou E6 augmente avec la CV et avec l intégration reflé- Cancer. 5:965976, 005 and 90% of 50 immunosuppressed R (ns). However, the maximale dans le groupe d échantillons dont la CV est supérieure à 0.000eg ; elle est aussi maximale dans le groupe supérieures par q-pcr. La surexpression d APP-BP1 a été colytic virotherapy: a century of promise, a decade of progress. mesurés dans des lignées tumorales des voies aérodigestives Liu T. C., Galanis E. and Kim D. Clinical trial results with on- median number of infecting beta HPV types was significantly higher in HIV-infected patients (4 types) and in R (4.5 types) d échantillons avec un 0,5<E/E6<0,8. De plus, l expression réalisée par transfection de cellules. La radiosensibilité des modèles cellulaires a été évaluée par test de prolifération cellulaire tice. 4, , 007 Current opinion in molecular therapeutics. Nature clinical prac- than in immunocompetent subjects (.7 types). In HIV-infected des transcrits codant E6 apparaît étroitement liée à la CV alors patients, we did not observe any correlation between HPV DNA que l expression des transcrits codant E semble plutôt liée à et test de survie clonogénique après irradiation aux photons. 4 Cornelis J.J., Deleu L., Koch U. and Rommelaere J., Parvovirus oncosuppression. In: J.R. Kerr, S.F. Cotmore, M.E. Bloom, prevalence and CDC clinical staging, HIV viral load, CD4 cell l intégration. Résultats : L analyse des niveaux d expression du transcrit count, and antiretroviral therapy. In R, HPV DNA detection Discussion : Ces données suggèrent que l expression des E6/E7, et des gènes INK4A p16 et CIP1/WAF1 p1 nous a permis R.M. Linden and C.R. Parrish, Editors, Parvoviruses, Hodder was not influenced by the immunosuppressive treatment (rapamycin-sirolimus versus ciclosporine, unpublished data). 5 transcrits précoces d HPV16, et en particulier celle de E6, est de sélectionner les lignées SQ0B (HPV-négative) et SCC90 Arnold, London (006), pp d avantage conditionnée par la charge virale que par le niveau (HPV-positive) comme modèles d étude. De plus, APP-BP1 Cornelis J. J., Lang S. I., StrohDege A. Y., Balboni G., Dinsart Discussion: Our data do not support a role of HPV infection in d intégration. est sous-exprimé dans la lignée SCC90 par rapport à la lignée C., Rommelaere J.. Cancer gene therapy through autonomelanocarcinogenesis, Altogether, our results confim the ubi-

18 mous parvovirusmediated gene transfer. Current gene therapy 004;4(): Nüesch, J. (005). Regulation of nonstructural protein functions by differential synthesis, modification and trafficking, p In M. E. Bloom, S. F. Cotmore, R. M. Linden, C.R. Parrish, and J. R. Kerr (ed.), Parvoviruses. Hodder Arnold, London, United Kingdom. Thème Cibles thérapeutiques N 8 Down-regulation of UH1 by epigallocatechin gallate induces apotosis in Jurkat cells by reexpressing tumor suppressor genes. Auteur : M. Achour 1, M. Alhosin 1, E. Anselm 1, G. Fuhrmann 1, J. Peluso, D. Muller, T. Chataigneau 1, V.B. Schini-Kerth 1, C. Bronner 1 Affiliation(s) : 1 UMR CNRS 71, Laboratoire de Biophotonique et Pharmacologie, Strasbourg UMR CNRS 700, Laboratoire d Innovation Thérapeutique, Université de Strasbourg, Faculté de Pharmacie, Strasbourg mayada.achour@pharma.u-strasbg.fr Résumé : Objectives: The aim of the present study was to investigate the role of UH1 (Ubquitin-like containing PHD and Ring Finger domains 1) in the mechanism of action of epigallocatechin gallate (EGCG) induced-apoptosis and re-expression of tumor suppressor genes. EGCG, the major polyphenol of green tea extracts, exhibits anti-cancer activities through as yet unknown mechanisms but probably involving re-expression of tumor suppressor genes. UH1 is known for its cell cycle regulation function, for its anti-apoptotic properties and for its crucial role in the epigenetic code inheritance. Indeed, UH1 is characterized by the presence of the SRA (Set and Ring Associated) domain able to recognize hemi-methylated DNA and to recruit DNMT1 (DNA methyltransferase 1) for faithful duplication of DNA methylation patterns. Methods: Apoptosis was assessed by flow cytometry. Expression of UH1, DNMT1, p16 INK4A and p7 were determined by Western blot analysis. Results: We showed, in the T-lymphocyte leukemic cell line Jurkat, that down-regulation of UH1 by EGCG, up-regulated tumor suppressor genes such as p16 INK4A and p7. Moreover, we observed that over-expression of UH1 down-regulated the p7 expression in the presence of EGCG and counteracted the apoptotic effects of EGCG. We have also observed, by sitedirected mutagenesis experiments, that preventing the NKR Finger of the SRA domain to flip out the methyl cytosine from the DNA helix, leads to an inability of UH1 to down-regulate p7 expression. Conclusions: Together these results show that down-regulation of UH1 by EGCG is involved in the mechanism of action of polyphenol-induced apoptosis thanks to a re-expression of tumor suppressor genes such as p16 INK4A and p7. We propose that EGCG is able to hinder the cancer signature to be perpetuated from cell generation to generation by down-regulating UH1. N 9 Evaluation du potentiel anticancéreux de dérivés tétrasulfurés naturellement présents dans l ail et l oignon sur des cellules de cancer du sein. Auteur : E. Viry, A. Anwar, M. Diederich, C. Jacob, G. Kirsch, D. Bagrel Affiliation(s) : LIMBP, Université Paul Verlaine, Institut Jean Barriol FR CNRS 84, Metz viry@univ-metz.fr Résumé : Depuis des décennies, certaines espèces d Allium, comme l ail et l oignon, ont largement été utilisées comme remède à de nombreuses pathologies. Des études épidémiologiques ont pu mettre en évidence l existence d une corrélation existant entre la consommation de ces plantes et l observation d effets bénéfiques sur la santé. Notamment, la consommation d ail contribuerait à réduire la fréquence d apparition de certains types de cancer (estomac, intestin, ). En plus de ces effets préventifs, des travaux récents, utilisant des modèles cellulaires et animaux de cancer, ont révélé l existence d une activité thérapeutique de certaines espèces d Allium. Ces effets bénéfiques ont pu être attribués à la présence de composés organosoufrés (COS) tels que les allyl- et propyl- polysulfures. Lors de cette étude, nous nous sommes intéressés à deux COS qui restent encore peu étudiés à ce jour, les diallyl- (DAS 4 ) et dipropyl- (DPS 4 ) tétrasulfures. Nous avons montré que ces composés étaient capables d inhiber, de manière irréversible, les phosphatases Cdc5 in vitro. Ces phosphatases sont des enzymes clés qui interviennent dans la progression du cycle cellulaire en régulant l activité des kinases dépendantes des cyclines par une déphosphorylation très spécifique. Les Cdc5 sont des cibles thérapeutiques intéressantes car leur surexpression, notamment dans le cancer du sein, a pu être corrélée au développement de résistance à certains agents anticancéreux ainsi qu à un mauvais pronostic. Suite aux résultats obtenus in vitro, nous avons voulu évaluer le potentiel anticancéreux des composés DAS 4 et DPS 4 sur des cellules d adénocarcinome mammaire humain : MCF-7 (lignée sensible) et Vcr-R (lignée résistante à la vincristine). La croissance des cellules sensibles et résistantes est apparue significativement altérée par ces deux composés. Cette activité antiproliférative a pu être associée à un blocage des cellules en phase G -M. Cette étude suggère donc que l inhibition des phosphatases Cdc5 par les COS contribuerait à leur activité anticancéreuse. N 10 Ensembles flous pour la définition de profils d expression différentielle : application à des données de transcriptomique du cancer colorectal. Auteur : S. Benadberrahmane, M.D. Devignes, M. Smaïl-Tabbone, A. Napoli, O. Poch, N.H. Nguyen, W. Raffelsberger Affiliation(s) : LORIA, CNRS UMR 750, INRIA, Nancy Université, Nancy IGBMC, CNRS UMR 7104, INSERM, Université de Strasbourg, Strasbourg benabdsi@loria.fr Résumé : Les approches haut-débit de la transcriptomique sont utilisées massivement de nos jours pour tenter de comprendre les dérèglements moléculaires qui conduisent aux cancers. L analyse des données d expression repose le plus souvent sur l identification d ensembles de gènes partageant des comportements transcriptionnels similaires. L approche que nous proposons vise à tenir compte d une part du point de vue et des connaissances du biologiste, d autre part du caractère bruité des signaux de transcription. Notre méthode consiste à spécifier des profils d expression différentielle (PED), puis à classer les gènes dans ces profils selon une logique d affectation floue. Considérons un ensemble de gènes étudiés sur n situations différentes. Une mesure est proposée pour quantifier la variation d expression d un gène entre deux situations. Pour toute paire de situations, on définit ensuite trois ensembles d expression différentielle (EED) contenant des gènes qui sont : soit surexprimés, soit sous-exprimés, soit exprimés autant dans une situation par rapport à une autre. L appartenance d un gène à tel ou tel EED est calculée selon une logique floue. Un PED sera défini comme une combinaison d EED. Sachant que l on peut définir [n(n-1)/] PED différents, certains PED peuvent être étudiés en priorité du fait de leur signification biologique. La méthode a été appliquée à gènes étudiés dans des tissus sains, des tumeurs colo-rectales et des lignées cellulaires. Le calcul montre que les gènes se répartissent de façon floue dans 11 PED, avec partage des gènes entre PED différents. L apport de la méthode a été testé en comparant les résultats de classification fonctionnelle obtenus avec le logiciel DAVID, d une part sur l ensemble des gènes étudiés, d autre part sur les ensembles de gènes contenus dans chaque PED. Les résultats révèlent que certaines interprétations fonctionnelles des données d expression peuvent être reliées à des comportements transcriptionnels particuliers. N 11 Molecular interactions between human tumoral and endothelial cells : effect of EGFR blockade. Auteur : V. Jouan-Hureaux, C. Boura, J.L. Merlin, B. Faivrer Affiliation(s) : EA PREDICTHER-SIGRETO, Faculté de Médecine, Nancy Université, Nancy valerie.jouan-hureaux@pharma.uhp-nancy.fr Résumé : Overexpression of the epidermal growth factor receptor (EGFR) plays a key role in the development of head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC). Blockade of this receptor with specific inhibitors decreases the tumoral cell proliferation, survival and differentiation and induces an anti-angiogenic effect attributed to the inhibition of VEGF secretion by tumor cells. Recent studies have demonstrated that tumor-associated endothelial cells (EC) overexpressed EGFR and are responsive to EGF. Thus, EGFR inhibitors could have direct antiangionenic effect due to their direct interaction on tumor-associated EC. In this study, we investigated the potential of cetuximab to affect the molecular signalling between tumoral and endothelials cells and its impact on angiogenesis induced by conditioned media (CM). Methods: Metabolic activity and proliferation of HUVEC in presence of cetuximab in culture media were analyzed using MTT and Hoechst assays respectively. CM were obtained from culture of CAL7 or FaDu cell lines. Analysis of angiogenesisrelated proteins in CM was performed using Proteome Profiler arrays. For in vitro angiogenesis assays, HUVEC were allowed to grow in CM and capillary structures were analyzed by fluorescence microscopy. Results: Direct exposure of HUVEC at low concentrations of cetuximab had no effect on their proliferation, while inducing a significant decrease in tumor cells proliferation. CM collected from culture of tumor cells in presence of cetuximab did not influence HUVEC metabolic activity. Cetuximab modulate the release of angiogenesis mediating proteins such as VEGF or MMP9 by tumor cells and in these conditions induced changes in HUVEC capillary behavior. Conclusion: Cetuximab had no direct anti-angiogenic effect on non-tumor-ec. Nevertheless, tumor cells treated by cetuximab modifed the secretion of angiogenic factors that could interfere with endothelial cells network. This could explain in part the therapeutical efficacy of cetuximab by normalizing the tumor vascularisation and offering a better access to chemotherapeutic drugs into the tumor tissue or a better sensibility to radiotherapy. 4 5

19 N 1 Etude du pouvoir radiosensibilisant du gefitinib et des mécanismes potentiellement impliqués sur des modèles de gliomes. Thème Marqueurs diagnostiques & pronostiques N 14 IR spectral imaging of peritumoral areas in human skin cancer biopsies. N 15 IR spectral imaging for a new type of histopathological study of colon adenocarcinomas. Auteur : S. Pinel, M. Vandamme, J.L. Merlin, F. Plénat, P. Chastagner N 1 Auteur : D. Sebiskveradze 1, V. Vriab, C. Gobinet 1, E. Ly 1, M. Manfait 1, P. Jeannesson 1, O. Piot 1 Auteur : A. Travo 1, P. Jeannesson 1, R. Wolthuis 1, C. Gobinet 1, M. Manfait 1, J. Bara, M. Forgue-Lafitte, O. Piot 1 Affiliation(s) : DDB: a potential and promising cancidate in MéDIAN, CNRS UMR 67 MEDyC, IFR 5, Affiliation(s) : 1 CNRS, UMR 67, Univ. de Reims Champagne-Ardenne, Reims Affiliation(s) : EA PREDICTHER SIGRETO, Laboratoire Université de Reims Champagne-Ardenne, Reims diagnosis of breast cancer. d Histopathologie Expérimentale et Moléculaire, Faculté de CReSTIC, Université de Reims Champagne-Ardenne, Châlons-en-Champagne INSERM, U-48, CHU Saint Antoine, Paris Médecine, Nancy Université, Nancy adrian.travo@etudiant.univ-reims.fr pinel.sophie@aliceadsl.fr david.sebiskveradze@univ-reims.fr Auteur : V. Minig, Z. Kattan, S. Grandemange, N. Touche, L. Résumé : Scientific background: FTIR spectral imaging (FTIR- Résumé : Contexte : 40% des gliomes malins présentent une Domenjoud, P. Bécuwe Résumé : Context: Infrared (IR) micro-spectral imaging is an SI) is emerging as a promising tool for generating an automated surexpression de l EGFR 1, associée à une plus grande radiorésistance des tumeurs,. Les inhibiteurs de l EGFR semblaient and to provide spatially resolved information on the basis of composition of tissues. We reported previously that FTIR-SI efficient label-free optical method to analyze biological samples and non subjective histology based on the whole biochemical Affiliation(s) : EA SIGRETO, Université Henri Poincaré - Nancy Université, Nancy donc des thérapies prometteuses pour traiter ces tumeurs. their biochemical composition. This method has the potential to of colon carcinomas is highly efficient to reproduce histology Mais les premiers résultats cliniques se sont avérés décevants becuwe@scbiol.uhp-nancy.fr characterize cancerous tissues independently of visual morphology. directly from paraffin-embedded (PE) tissue sections but also et les mécanismes de réponse ou de non-réponses restent à éclaircir 4-5. Résumé : Background: Despite advances in cancer research, mechanisms involved in the breast tumor progression are not IR microimaging could thus be developed as a sensitive, nondestructive and objective diagnostic tool in clinical oncology. to provide relevant information on the intra-tumor heterogeneity that cannot be revealed by classical histology. Our study aimed Dans ce contexte, nous avons étudié sur des modèles de well defined. Our study reports the identification of the Damaged The discrimination between tumoral and peritumoral tissues relies on the highlighting of subtle IR spectral differences. proach for histopathological recognition, with a particular em- at a further exploration of the possibilities of the FTIR-SI ap- gliomes malins humains xénogreffés, le pouvoir radiosensibilisant d un anti-egfr, le géfitinib, en nous intéressant aux dys- DNA binding protein (DDB) as a new potential marker for breast tumor growth and its relation with the manganese superoxide dismutase (MnSOD), an antioxidant enzyme which is Method: We developed an algorithm based on fuzzy clustering phasis on secreted mucus. fonctionnements de la signalisation en aval du récepteur, ainsi techniques (FCM) which permits to automatically identify both Materiel and methods: Spectral acquisitions (Spotlight 00, qu aux effets sur l angiogenèse. already known to play a role in cancer. Previously, DDB was the tumoral areas and their normal counterparts. Perkin-Elmer) of human normal colon (n=7) and colon adenocarcinomas (n=9) PE tissue sections. No attempt was made to known to play a role in DNA repair and chromatin remodelling in Méthode : Sur nos modèles, nous avons recherché la présence Results and discussion: This approach has been directly performed on formalin-fixed paraffin-embedded tissue sections of remove paraffin. normal cells. However, its role in cancer was not described yet. d altérations oncogéniques touchant les voies dépendantes de In this study, we report the characterization of a new biological l EGFR. Pour deux lignées, nous avons étudié l effet antitumoral skin cancers (squamous cell carcinoma and melanoma), without Results: By referring to IR spectra originated from bovine purified mucins and human mucus extracted from benign cysts, activities of DDB in breast cancer cells. du géfitinib administré seul (75mg/kg/j, 5j/7) ou de façon concomitante à la radiothérapie fractionnée (Gy/j, 5j/7) et nous avons chemical dewaxing. The constructed IR color-coded spectral Methods: We developed in vitro models of breast cancer cells in images allow recovering the different histological structures we show that secreted mucus of the tissue sections exhibit the analysés les effets cellulaires (prolifération, mort cellulaire, angiogenèse par immunohistochimie) et moléculaires (expression which DDB and MnSOD expressions were modulated by RNA automatically and give access to interesting information on the spectral fingerprint of mucin glycoproteins. This permitted an in interference, antisense RNA or expression vector strategies to assignment of the IR images pixels to the tissular structures. situ localization of mucus-rich areas and of tissular structures des phosphoprotéines par Bioplex phosphoprotein array, study consequences on cell growth and invasiveness. Molecular For each pixel, FCM provides with membership values, permitting to nuance their assignment. Such data are very valuable for means clustering of spectral data. In addition, a clear distinction devoid of mucus by constructing color-coded images using a k- VEGF par ELISA). biology were used to define precisely the functional activity of DDB as transcriptional regulator. Résultats : Nos modèles de gliomes présentent une forte activation de l EGFR et des voies qui en dépendent. La perte de PTEN the pixels located at the interface between tumoral tissue and can be achieved between the apical and basal parts of mucus Results: We showed that DDB is only overexpressed in estrogen receptor (ER)-positive breast cancer cells and tumors. With between tumor and environmental normal tissue were identified of intracellular mucus. To discriminate normal from adenocar- its microenvironment. Thus, heterogeneous transitional areas secreting cells, containing respectively high and low amount est parfois retrouvée. Pour les deux lignées étudiées, malgré la perte de PTEN, le géfitinib seul bloque les voies dépendantes in vitro models of breast tumor cells in which DDB is downregulated or overexpressed, we demonstrated that this protein fied on hematoxylin-eosin staining or by conventional clustering exclusively on secreted mucus spectra, onto i) cm- on the examined tissue sections. These areas cannot be identicinoma colon tissues, a k-means subclustering was performed de l EGFR. Il induit un effet antitumoral rapide mais transitoire, associé à un remodelage du réseau vasculaire intratumoral is involved in the cell growth by activating the G1/S phase of IR data, such as K-means. They are characterized by a gradual increase of the membership value of the pixels, from tumor mucins, ii) cm-1, related to glycosylated content of 1, containing all the spectral features of mucus attributable to et une forte diminution de l expression du VEGF. Le gefitinib transition of the cell cycle. In addition, we purified and identified présente un pouvoir radiosensibilisant majeur et prolongé, DDB in a systematical proteomic analysis, which was done to to normal tissue to reach a maximum. Then, this value sharply mucins, iii) cm-1, related to secondary structure of probablement sous-tendu par son effet sur la vascularisation trap new potential transcription factors involved in the regulation decreases at the edge of the normal tissue. Experiments are mucin core proteins and iv) cm-1, related to sialylated content of mucins. In all cases, the subclusters are present tumorale. of the MnSOD gene. The DDB binding DNA sequence was underway to define the molecular assignments of the spectral characterized precisely into the proximal promoter of MnSOD Références : variations observed in these peritumoral areas. in both tissue types, but the samples can present significant gene. Functional analysis of this proximal promoter allowed us 1 differences of subcluster surface percentages that can be used Behin, Lancet, 00 to demonstrate that DDB regulates negatively the constitutive Barker, IJROBP, 001 (DS is a recipient of a doctoral fellowship from INCa.) to discriminate normal from tumoral tissues. These results reflect changes in carbohydrate and sialic acid contents as well expression of this gene. In addition, we showed that DDB Bonner, IJROBP Franceschi, Br J Cancer, Rich, J Clin Oncol, 004 exerts, at least in part, a control of breast cancer cell growth through its negative regulation of constitutive expression of the MnSOD gene. as in secondary structure of mucin core proteins between tissue types. Interestingly, k-means subclustering, performed on the amide bands only, indicates that changes in mucin secondary Conclusions: Taken together, these data give for the first time structure represent the most relevant spectral marker of mucus a supporting evidence that DDB may become a promising to discriminate colon adenocarcinomas from normal tissues. candidate as a predictive marker in breast cancer progression Conclusion: This study shows the possibility to use FTIR-SI to through its involvement in regulating cell cycle progression and study the mucin biochemical composition directly on PE tissue in transcriptional regulation of MnSOD, and that this molecular sections and to discriminate the normal tissues from adenocarcinomas mechanism may so have an important clinical interest in the samples on the basis of mucin secondary structure future. changes. Among this original result, this study demonstrates the potential of FTIR-SI for the discovery of new tumor markers, related to a label-free monitoring of biochemical heterogeneity 6 of tissue sub-types, not detectable with conventional histology. 7

20 N 16 TCRγ gene rearrangement in cutaneous T-cell lymphoma: comparative study of PCR with denaturing gradient gel electrophoresis and GeneScan analysis. RC Auteur : A.L. Goeldel 1,, P. Cornillet-Lefebvre, A. Durlach, P. Birembaut, P. Bernard 1, P. Nguyen, F. Grange 1 Affiliation(s) : 1 Department of Dermatology, Hôpital Robert Debré, Reims Laboratory of Haematology, Hôpital Robert Debré, Reims Laboratory of Histopathology, Hôpital Maison Blanche, Reims algoeldel@chu-reims.fr Résumé : The usefulness of T-cell receptor gene rearrangement (TCR-GR) analyses for differentiating cutaneous T-cell lymphoma (CTCL) from benign inflammatory disorders (BID) has been insufficiently studied to date. Our objective was to evaluate the diagnostic value of TCR-GR analyses, comparing polymerase chain reaction (PCR) with denaturing gradient gel electrophoresis analysis (DGGE) and BIOMED- standardized protocol PCR with GeneScan analysis (BIOMED--GS). Both were performed in 157 patients evaluated for initial features suggestive of CTCL between After clinical and histological review, the final diagnosis was CTCL in 77 cases, and BID in 80 cases. DGGE and BIOMED--GS had a similar diagnostic value for distinguishing CTCL from BID, with a sensitivity of 74% and 76.6%, respectively, and a specificity of 86.%. Positivity rates did not depend on the PCR method but varied according to the type of CTCL (7-75% in mycosis fungoides, % in Sézary syndrome, 40-60% in lymphomatoid papulosis and 100% in other types). The observed concordance between both methods was 90% and the kappa coefficient was We conclude that BIOMED--GS analysis of the TCRγ gene is as sensitive and specific as DGGE for CTCL diagnosis. In addition, BIOMED--GS is less time-consuming and gives more information concerning the size and nature of TCR-GR. N 17 Etude métabolomique des cancers séreux de l ovaire. RC Auteur : D. Ben Sellem, K. Elbayed, A. Neuville, B. Dillmann, M. Piotto, J.P. Bellocq, I.J. Namer Affiliation(s) : Projet CARMeN, Hôpitaux Universitaires de Strasbourg, Université de Strasbourg, Bruker Biospin Wissembourg bensellem_dorra@yahoo.fr Résumé : Introduction : Les cancers de l ovaire continuent à poser un défi aux cliniciens. Les récidives tumorales sont souvent résistantes et réfractaires à la chimiothérapie. Le but de cette étude est de caractériser métaboliquement les cancers séreux de l ovaire dans le but d une adaptation thérapeutique. Matériels et méthodes : échantillons biopsiques de cancers séreux de l ovaire, échantillons de tumeurs borderline séreuses et échantillons d ovaires normaux ont été analysés par la spectroscopie RMN HR-MAS. Les patientes étaient âgées de 1 à 81 ans (moyenne 6,5 ans) et n avaient bénéficié d aucun traitement en pré-opératoire. Les inserts analysés contiennent une masse de 18 mg (valeur médiane), et sont soumis à un test de 0min en rotation à 500Hz, sans altération visible de l intégrité des tissus. Résultats : Les analyses multivariées PCA et PLS-DA utilisant tous les métabolites n ont pas permis de distinguer les carcinomes séreux des contrôles. Les carcinomes séreux ont été divisés, selon le score anatomopathologique de Silverberg, en groupes : 1 er groupe de score élevé (1 biopsies) et éme groupe de plus bas score (9 biopsies). En utilisant les métabolites les plus discriminatifs, les carcinomes séreux de score Silverberg élevé ont pu être correctement séparés des tissus sains grâce à une simple PCA (R Y= 0,76, Q =0,6). Ce modèle statistique ainsi élaboré a pu classer les tumeurs borderline du côté des contrôles, alors que les cancers séreux de bas score ont été dispersés entre les composantes du modèle. Les cancers séreux du 1 er groupe présentaient une concentration plus élevée en alanine, acétate, choline, NAA, lysine et glutamate et plus faible en β-glucose que les tissus sains. Conclusion : Cette étude montre que les cancers séreux des ovaires forment un groupe très hétérogène. Cette hétérogénéité est potentiellement expliquée par une transition métabolique lors de la progression tumorale. N 18 Expression de l intégrine α5β1 et activité de la protéine p5 : une nouvelle approche de la chimiorésistance des glioblastomes. Auteur : D. Léger, A. Maglott, E. Martinkova, E. Cosset, S. Martin, M. Dontenwill Affiliation(s) : LBP, UMR71 CNRS, Université de Strasbourg, Faculté de Pharmacie, Strasbourg mdontenwill@unistra.fr Résumé : Les glioblastomes sont un défi majeur en oncologie : les progrès thérapeutiques restent mineurs malgré l association de chirurgie, radio- et chimiothérapies. L intégrine α5β1 a été identifiée comme une nouvelle cible thérapeutique. Nous avons mis en évidence un rôle important de cette intégrine dans la résistance de lignées de glioblastomes humains (U87MG) au Témozolomide (TMZ- drogue de référence en clinique). Les cellules U87MG sur-exprimant (U87-α5) ou sous-exprimant (U87- shα5) la sous-unité α5 de l intégrine présentent respectivement une résistance et une sensibilisation à cette drogue in vitro. L activation de la voie p5 est un élément majeur de la réponse des cellules au TMZ et provoque leur entrée en sénescence prématurée. L utilisation de PCR-arrays montre que le taux d expression de la sous-unité α5 détermine le degré d activation de la protéine p5 et la transcription de gènes cibles particuliers. Les cellules U87-shα5 ont une activité basale de p5 augmentée en absence de drogue qui est amplifiée en présence de TMZ par rapport aux cellules contrôles. Inversement dans les cellules U87- α5, la stimulation de p5 est minime en présence de TMZ. Le blocage de l activité de l intégrine α5β1 par des antagonistes spécifiques réactive la signalisation dépendante de p5 et restore la sensibilité des cellules à la drogue. Les voies de signalisation AKT et ERK, dépendantes de l intégrine, ne sont pas impliquées dans la régulation de la voie de p5 dans les cellules U87-α5. Nos données sont en accord avec l existence d une signalisation originale encore méconnue de l intégrine α5β1 régulant la voie de p5 et la résistance des glioblastomes au TMZ. D un point de vue clinique, une sous-population de patients porteurs de glioblastomes à fort taux d intégrine α5β1 et exprimant une protéine p5 fonctionnelle devraient bénéficier d une thérapie combinant le TMZ et un antagoniste de l intégrine α5β1. Des études précliniques en cours permettront de confirmer cette hypothèse. N 19 Valeur pronostique de l expression de STAT-P dans le cancer du recteum. Auteur : F. Monnien, M. Mercier, C. Borg, C. Mougin, J.F. Bosset, B. Kantelip Affiliation(s) : Service d anatomie et cytologie pathologiques, CHU Besançon fmonnien@chu-besancon.fr Résumé : Contexte : La protéine STAT (Signal Transducer and Activator of Transcription ) est impliquée dans le développement et la progression de nombreux cancers. L expression de STAT phosphorylée (STAT-p), forme active de la protéine, serait liée au stade d invasion tumorale et au mauvais pronostic du cancer colorectal. La littérature relative à la valeur pronostique de STAT-p dans ce type de cancer est rare et pratiquement inexistante pour les cancers du rectum seuls. A notre connaissance, dans le cancer colorectal, une seule étude a mis en évidence une relation entre l expression positive de STAT-p et une moins bonne survie globale. Méthode : Pour éclaircir le rôle de STAT dans le cancer du rectum, l expression immunohistochimique de STAT-p a été corrélé à la survie sans récidive et globale de 104 patients atteints d un cancer du rectum de stade III. Nous avons évalué la valeur pronostique de l expression de STAT-p en prenant en compte les facteurs pronostiques cliniques et les variables de confusion. La survie sans progression et la survie globale ont été estimées en utilisant la méthode de Kaplan-Meier et l analyse multivariée a été effectuée grâce à un modèle de Cox à risques proportionnels. Résultats : l expression nucléaire de STAT-p a été observée dans 5,6% des cas. En analyse univariée, STAT-p n était pas lié à la survie sans récidive mais apparaissait comme un facteur de meilleur pronostic concernant la survie globale (p=0.0). En analyse multivariée aucune relation n a été mise en évidence entre l expression de STAT-p et le pronostic. Discussion : ces résultats mettent en évidence un rôle de STAT-p dans les cancer du rectum de stade III et présentent STAT-p comme facteur de bon pronostic. Cependant, STAT-p n étant pas lié à la survie globale en analyse multivariée, son rôle paraît soumis à l influence d autres facteurs. Ce dernier aspect nécessite de poursuivre nos investigations. 8 9