Métabolisme des levures

Transcription

1 Introduction Ce TP a pour but de découvrir les deux types métaboliques des levures, la respiration puis la fermentation. Matériel nécessaire Console Foxy, réf Capteur CO 2, réf Sonde CO 2, réf

2 Matériel nécessaire Bioréacteur, réf Capteur O 2, réf Sonde O 2, réf Capteur Ethanol, réf Sonde Ethanol, réf

3 Raccorder la console Foxy au secteur 3

4 Connecter le capteur Oxymètre (O 2 ) 4

5 Connecter la sonde O 2 au capteur O 2 5

6 S assurer que la sonde O 2 est étalonnée Si elle ne l est pas, suivre la procédure d étalonnage 6

7 Connecter le capteur CO 2 mètre 7

8 Connecter la sonde CO 2 au capteur CO 2 mètre 8

9 S assurer que la sonde CO 2 est étalonnée Si elle ne l est pas, suivre la procédure d étalonnage 9

10 Connecter le capteur Ethanol 10

11 Connecter la sonde Ethanol au capteur Ethanol 11

12 S assurer que la sonde Ethanol est étalonnée Si elle ne l est pas, suivre la procédure d étalonnage 12

13 Raccorder le Bioréacteur au secteur et ôter le capot 13

14 Diluer environ 10 g de levures fraîches dans 1 Litre d'eau. Placer le récipient sur un agitateur magnétique, avec un bulleur, au minimum 48 heures (les levures doivent être affamées mais bien vivantes...) NB : avec des levures lyophilisées, ½ sachet par litre. Attention : si la concentration de levure est trop importante, cela risque d'obturer la membrane de la sonde à O 2 Préparation des levures 14

15 Préparer une solution de glucose à 10 g/l Préparation du glucose 15

16 Introduire la solution de levures affamées dans la cuve du bioréacteur 16

17 Remettre le capot et placer le barreau aimanté dans la cuve 17

18 Refermer le couvercle de la cuve Il doit se produire un débordement, qui assure l'absence d'air dans la cuve 18

19 Mettre l'interrupteur de l'agitation en position I 19

20 Introduire délicatement les sondes O 2, CO 2 et Ethanol dans le Bioréacteur 20

21 Montage 21

22 Connecter la console Foxy à l ordinateur 22

23 L Atelier Scientifique se lance automatiquement Choisir l Atelier Scientifique Sciences de la Vie et de la Terre Sélectionner le module Généraliste 23

24 Si un panneau Attention se trouve dans la partie gauche de la fenêtre, attendre que celui-ci disparaisse 24

25 Ce panneau signifie que le capteur CO 2 mètre et / ou le capteur Ethanol ne sont pas encore opérationnels Cliquer sur le panneau, la ou les fenêtres suivantes apparaissent puis cliquer sur OK 25

26 Glisser-déposer le capteur CO 2 mètre sur l axe des ordonnées 26

27 Cliquer sur CO2 eau 27

28 Glisser-déposer le capteur Oxymètre sur l axe des ordonnées 28

29 Cliquer sur O2 Eau 29

30 Glisser-déposer le capteur Ethanol sur l axe des ordonnées 30

31 Cliquer sur Ethanol dans l eau puis sur 20g/L 31

32 Glisser-déposer l horloge sur l axe des abscisses 32

33 Régler une durée égale à 10 min (par exemple) et un nombre de points égal à

34 Lancer l acquisition, cliquer sur le Feu tricolore La fenêtre ci-dessous, apparaît, il est alors possible de donner un nom à cette expérimentation Cliquer sur Lancer 34

35 Au bout de 2 minutes, injecter quelques ml de solution de glucose à l aide d une seringue dans l orifice prévu à cet effet 35

36 Exemple de courbe Conclusion Ce TP a permis de découvrir les deux types métaboliques des levures, la respiration en milieu aérobie puis la fermentation en milieu anaérobie. 36

37 -Le taux d oxygène (courbe rouge) décroît rapidement: les levures respirent et consomment tout l oxygène présent dans le bioréacteur. - Dès que le taux d oxygène est nul nous remarquons une croissance rapide du taux d éthanol (courbe rose): c est la fermentation. - Parallèlement nous constatons une forte croissance du taux de dioxyde de carbone (courbe verte). 37