MYCOLOGIE Confrontation N 01/2014 Rapport final 03/04/2014

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1 Association de Biologie Praticienne 70 avenue des Gobelins PARIS - Tél : Fax : secretariatabp@orange.fr Enregistrée à la Préfecture de la Région de l Ile de France, délégation à la formation professionnelle, sous le N SIRET : NAF 9994Z Dr Annick DATRY Consultant chargé de la fabrication des échantillons et de l exploitation des résultats Anne-Marie Fihman Responsable scientifique Coordonnateur MYCOLOGIE Confrontation N 01/2014 Rapport final 03/04/2014 Nombre de réponses reçues : 248 sur 254 1) Echantillon A(bouchon bleu) : MYC14-1A (culture) Il s agit d un jeune homme de 18 ans qui présente des lésions squameuses au niveau des espaces interorteils Résultats Trichophyton mentagrophytes var. interdigitale Techniques d identification Le prélèvement a été ensemencé sur milieu de Sabouraud-chloramphénicol-actidione. Examen macroscopique +++ Examen microscopique : prélever un fragment de la colonie que l on dilacère dans 2 gouttes de lactophénol ou bleu-lactophénol, ou utiliser la technique du scotch. On recherche au microscope les éléments caractéristiques des dermatophytes : filaments, microconidies, macroconidies et ornementations particulières Caractéristiques morphologiques : - Voir annexe Thérapeutique recommandée Terbinafine crème pendant 2 semaines au moins Commentaires concernant les réponses - Réponses exactes : Trichophyton mentagrophytes ou interdigitale, 196 fois - Réponses inexactes ou incomplètes : - Trichophyton rubrum, 38 fois - Trichophyton sp, 8 fois - Epidermophyton floccosum, 2 fois - Scytalidium sp, 1 fois - Pas de réponse, 3 fois - Réponse non retournée, 6 fois Page 1 sur 12

2 2) Echantillon B (bouchon vert) : MYC14-1B (culture) LBA chez un patient âgé de 63 ans qui présente une pneumopathie Résultats Paecilomyces variotii Techniques de laboratoire utilisées Ensemencement sur milieu de Sabouraud - chloramphénicol sans actidione Même technique d identification que pour l échantillon Caractéristiques morphologiques - Voir annexe Thérapeutique recommandée Le traitement médical repose sur le voriconazole en première intention (800mg/jour en 2 prises séparées de 12h et loin des repas à J1 puis, 400mg/jour en 2 prises idem), Commentaires concernant les réponses - Réponses exactes : Paecilomyces variotii ou Paecilomyces sp, 123 fois - Réponses inexactes ou incomplètes : - Cladosporium sp, 67 fois - Fusarium sp, 22 fois - Scopulariopsis sp, 7 fois - Acremonium sp, 5 fois - Penicillium sp, 4 fois - Cladophialophora sp, 3 fois - Scedosporium sp, 3 fois - Aspergillus sp, 2 fois - Acrophialophora fusispora, 1 fois - Beauveria sp, 1 fois - Chaetomium, 1 fois - Chrysosporium, 1 fois - Monilia sitophila, 1 fois - Scytalidium sp, 1 fois - Trichoderma sp, 1 fois - Non identifié/pas de réponse, 4 fois - Réponse non retournée, 6 fois Page 2 sur 12

3 3) Echantillon C MYC14-1C (à Ensemencer) Ecouvillon rectal chez une patiente hospitalisée en hématologie Résultats Candida kefyr Techniques de laboratoire utilisées Ensemencer sur milieu de Sabouraud-chloramphénicol et Sabouraud-chloramphénicol-actidione ou ensemencement direct sur milieu chromogène (chromagar) Caractéristiques morphologiques - Voir annexe Thérapeutique recommandée Il est recommandé de traiter par fluconazole (antifongigramme souhaitable) Commentaires concernant les réponses - Réponses exactes : - Candida kefyr, 233 fois - Réponses inexactes ou incomplètes : - Candida sp, 7 fois - Cryptococcus sp, 2 fois - Stephanoascus ciferri, 2 fois - Prototheca sp, 1 fois - Sacharomyces sp, 1 fois - Levure non identifiée / Pas de réponse, 2 fois - Réponse non retournée, 6 fois Page 3 sur 12

4 ANNEXE 1 Trichophyton mentagrophytes var interdigitale Ce dermatophyte est la variété anthropophile de T. mentagrophytes. Cette variété est strictement anthropophile et se transmet comme T. rubrum par l intermédiaire de lieux publics humides (piscine, sauna ). Elle donne des onyxis et des dermatophyties des pieds (intertrigos interdigitoplantaires). Les atteintes des grands plis sont exceptionnelles et elle ne donne pas d atteinte des cheveux ou des poils. Elle peut être responsable de dyshidrose palmaire d origine allergique Diagnostic mycologique Aspect macroscopique Sa croissance est rapide : colonie plane, poudreuse devenant rapidement duveteuse ; couleur blanc à crème au recto, jaune, rouge ou brune au verso ; elle peut être d emblée duveteuse et on doit la différencier de T. rubrum, surtout si le revers est rouge-brun. Aspect microscopique - Filaments en raquettes avec de nombreuses ramifications courtes à angle droit donnant un aspect en «croix de Lorraine». - Très nombreuses microconidies rondes disposées en acladium sur les ramifications. - Macroconidies en massue inconstantes voire absentes. - Ornementations particulières Les vrilles apparaissent vers le 8 ème jour et sont inconstantes Les organes pectinés en «bois de cerf» sont en général absents Page 4 sur 12

5 ANNEXE 2 Paecilomyces variotii Ces champignons cosmopolites sont saprophytes du sol et des végétaux en décomposition. Chez l homme, ils sont responsables de kératites et d endophtalmies, d endocardites, de pneumopathies et d atteintes systémiques chez l immunodéprimé. Deux espèces sont particulièrement incriminées en pathologie humaine : P. variotii et P. lilacinus. Diagnostic mycologique A l examen direct, on observe des filaments mycéliens septés, de 2à 3 µm de diamètre La culture est rapide à 27 et 37 C sur milieu de Sabouraud sans actidione. A l examen macroscopique, On observe des colonies poudreuses, planes avec quelques touffes de mycélium aérien blanchâtre, de couleur jaune brun à olive au verso, jaune à brun au recto. A l examen microscopique, on voit : - des filaments hyalins de 3 à 5 µm de large ; - des conidiophores portant des branches compactes en verticilles ou irrégulières ; - des phialides longues, mesurant à 35 x 2,5 à 5µm, avec une base renflée et un col long et fin de 1 à 2 µm de large ; - conidies hyalines à jaunes, à paroi lisse, subglobuleuses à allongées, mesurant 3-15 x 2-5 µm, en chaînes très longues ; - des chlamydospores souvent présentes, isolées ou en chaînes courtes, brunes, lisses ou parfois rugueuses, mesurant 4 à 10 µm. Page 5 sur 12

6 ANNEXE 3 Candida kefyr Candida kefyr a été isolé de produits laitiers fermentés. Chez l homme C. kefyr est saprophyte de la peau et de la muqueuse respiratoire et peut provoquer des abcès pulmonaires ou des septicémies. Il représente environ 1% des levures isolées chez l homme Diagnostic mycologique Ensemencement sur Sabouraud avec ou sans actidione ou sur milieu Chromagar. Examen macroscopique : - Sur milieu de Sabouraud, colonie blanche à crème, crèmeuse, lisse, parfois finement réticulée ; - Sur milieu Chromagar, colonie rose sale Examen microscopique Levures ovoïdes ou allongées, mesurant 3-5 x 7-10 µm Test de blastèse : absence de filamentation Sur PCB ou RAT, pseudofilamentation bien développée pour certaines souches, plus rudimentaire voire absente pour d autres. Assimilation des sucres : - Galactose, saccharose, lactose,raffinose, positive - Maltose négative Page 6 sur 12

7 ANNEXE 4 : Illustrations Echantillon A (bouchon bleu) Trichophyton mentagrophytes var. interdigitale Lésion au niveau des espaces inter orteils Examen direct du prélèvement Culture sur milieu Sabouraud Trichophyton mentagrophytes Aspect microscopique Page 7 sur 12

8 Echantillon B (bouchon vert) Paecilomyces variotii Culture sur milieu de Sabouraud Culture sur milieu de Malt Paecilomyces variotii Examen direct de la culture Page 8 sur 12

9 Echantillon C: Candida kefyr Culture sur milieu Chromagar Culture sur milieu Sabouraud Milieu Chromagar Milieu Sabouraud Examen direct de la culture Page 9 sur 12

10 ANNEXE 5 : Diagrammes Echantillon A (bouchon bleu) Trichophyton interdigitale MYCOSES Nbre de réponse 248 sur 254 % Identification des mycoses Trichophyton mentagrophytes ou interdigitale ,03 Trichophyton rubrum 38 15,32 Trichophyton sp 8 3,23 Epidermophyton floccosum 2 0,81 Scytalidium sp 1 0,40 Pas de réponse 3 1,21 TOTAL ,00 Page 10 sur 12

11 Echantillon B (bouchon vert) Paecilomyces sp. ou variotii MYCOSES Nbre de réponse 248 sur 254 % Identification des mycoses Paecilomyces sp. ou variotii ,60 Cladosporium sp ,02 Fusarium sp. 22 8,87 Scopulariopsis sp. 7 2,82 Acremonium sp. 5 2,02 Penicillium sp. 4 1,61 Cladophialophora sp 3 1,21 Scedosporium sp. 3 1,21 Aspergillus sp 2 0,81 Acrophialophora fusispora 1 0,40 Beauveria sp 1 0,40 Chaetomium 1 0,40 Chrysosporium sp. 1 0,40 Monilia sitophila 1 0,40 Scytalidium dimidiatum(contaminant) 1 0,40 Trichoderma sp 1 0,40 Non identifié/pas de réponse 5 2,02 Total ,00 Page 11 sur 12

12 Echantillon C (à Ensemencer) Candida kefyr MYCOSES Nbre de réponse 248 sur 254 % Identification des mycoses Candida kefyr ,95 Candida sp 7 2,82 Cryptococcus sp. 2 0,81 Stephanoascus ciferri 2 0,81 Prototheca sp. 1 0,40 Saccharomyces sp. 1 0,40 Pas de réponse/levure non identifiée 2 0,81 Total ,00 Page 12 sur 12