G.O. : CHAPMAN : Lecture : Composition : g/l d eau distillée. Peptone pancréatique d organe 10 Extrait de viande 10 Chlorure de sodium 5 Agar 20

Transcription

1 G.O. : g/l d eau distillée Peptone pancréatique d organe 10 Extrait de viande 10 Chlorure de sodium 5 20 ph = 7.5 CHAPMAN : g/l d eau distillée Peptones 11,0 Extrait de viande 1,0 Chlorure de sodium 75 Mannitol 10,0 Rouge de phénol 0, ph = 7,4 Rouge de phénol :

2 DRIGALSKI : g/l d eau distillée Peptones 15 Extrait de viande 3 Extrait de levure 3 Lactose 15 Désoxycholate de sodium 1 Thiosulfate de sodium 1 Cristal violet 1 Bleu de bromothymol (BBT) 0,02 11 ph = 7,4 BBT : B.C.P. : g/l d eau distillée Peptones 5 Extrait de viande 3 Lactose 10 Bromocrésol pourpre 0, ph = 6,8 BCP :

3 HUGH ET LEIFFSON. : Détermination de la Voie d attaque des glucides. /L d eau distillée Tryptone BBT NaCl KHPO 4 2 g 30 mg 0.3 g 2. ph = 7.1 BBT : VF : Détermination du type respiratoire. g/l d eau distillée Base viande foie Glucose ph=7,4 30 g 2 g 6 g

4 D.L : Désoxycholate Lactosée g/l d eau distillée Peptones 10 Lactose 10 Citrate de sodium 1 Rouge neutre 0.03 Désoxycholate de sodium 1 Chlorure de sodium 5 Hydrogénophosphate de K 2 11 ph = 7.3 Rouge Neutre : CLED : Cystine Lactose Electrolyt Deficient Peptones Extrait de viande Peptone pepsique de viandei L-cystine Lactose Bleu de bromothymol ph = 7.3 4g 3 g 40 mg g 20 mg 13. Rôle : Bleu de bromothymol

5 Gélose à l ADN au bleu de toluidine: Recherche de la DNAse thermorésistante. ADN 2 g Bleu de toluidine à 0.1mol/L 3 ml Tampon Tris ph 9 à 50 mmol/l 1 L Chlorure de calcium 1 ml Chlorure de sodium ph= 9 Réaliser 3 puits : 1 puits : 4 gouttes de bouillon cœur cervelle chauffé 15 min à 100 C. 1 puits : 4 gouttes du bouillon cœur cervelle non chauffé 1 puits : 4 gouttes d eau stérile Schéma : Recherche de la coagulase libre : Bouillon cœur cervelle : Mode opératoire de la recherche : Protéose Peptone Infusion de cervelle de veau Infusion de cœur de boeuf Glucose Chlorure de sodium Hydrogénophosphate de Na g 2. ph= 7.4 Principe :

6 Baird Parker : Permet l isolement et la numération de Staphylococcus aureus en milieu alimentaire Peptone Extrait de viande de boeuf 4 g Extrait de levure 2 g Pyruvate de sodium Glycocolle 12 g Emulsion de jaune d œuf 50 cm 3 Tellurite de potassium 0. Chlorure de lithium 20 g ph= 7.2 Slidex Staph Plus : Recherche de marqueurs de surface chez Staphylococcus Mode opératoire et principe de la recherche :

7 Lysine Fer : Recherche de la production d H 2 S, la Lysine Décarboxylase (LDC) et de la Lys Désaminase (LDA) chez les bactéries fermentant le glucose. Composition du: Peptones Extrait de levure 3 g L-Lysine Glucose Bromo crésol pourpre (BCP) 20 mg Thiosulfate et citrate de Fer III mg ph = 6.7

8 Urée-tryptophane (urée indole) Recherche de la production d indole, de l uréase et de la TDA. (tryptophane désaminase Urée 3 g L-Tryptophane Ethanol à 95 % Rouge de Phénol 0,16 mg NaCl Hydrogénophosphate de potassium Dihydrogénophosphate d ammonium ph= 7,0

9 Recherche de la lysine décarboxylase L.D.C. En tube fin Extrait de levure L-Lysine Glucose BCP NaCl Ethanol 3 g 0,16 mg ph= 6.8 Gélatinase Attention ceci n est pas un milieu mais un test permettant la recherche de la gélatinase.

10 Citrate de Simmons : Recherche de l utilisation du citrate comme seule source de Carbone. Composition du: Citrate de sodium Bleu de bromothymol 0.08 g Chlorure de sodium Sulfate de magnésium 0.2 g Hydrogénophosphate de K Dihydrogénophosphate d ammonium 1 ph= 7,1 BBT Clark et Lubs : Test du VP (Vosges Proskauer) ou la recherche de l acétoïne et du RM (Rouge de Méthyle) pour voir l évolution du ph en milieu glucosé. Peptone Glucose Hydrogénophosphate de K ph= 7,5 4 g

11 Kligler Hajna: Recherche de l utilisation du lactose, de la fermentation du glucose et de la production d H 2 S. Peptone 1 Extrait de viande 3 g Extrait de levure 3 g Peptone pepsique de viande Glucose Lactose Rouge de Phénol g Chlorure de sodium Sulfate de fer II 0.2 g Thiosulfate de sodium 0.3 g 1 ph= 7,5 Rouge de Phénol : Mannitol Mobilité Nitraté : Recherche de l utilisation du mannitol, de la réduction des nitrates (mise en évidence de la nitrate réductase) et de la mobilité. Hydrolysat trypsique de caséine Mannitol 7. Rouge de Phénol 0.04 g Nitrate de potassium 3. ph= 7,6 Rouge de Phénol : Eau peptonée : Recherche de l utilisation d un glucide, rajouté extemporanément, avec ou sans production de gaz. Peptone Chlorure de sodium Rouge de Phénol Cloche de Durham ph= 7, g Rouge de Phénol :

12 Gélose Columbia au sang frais : Milieu d isolement enrichi pour les Streptocoques. Il permet la lecture du caractère hémolytique. Mélange spécial de peptones 23 g Amidon Chlorure de sodium Sang 50 cm 3 ph= 9 BGT (Bouillon Glucosé tamponné) : Bouillon riche pour les Streptocoques en particulier Peptones Extrait de viande Glucose Chlorure de sodium Dihydrogénophosphate de K Hydrogénophosphate de Na 23 g 2 g 4 g 2, 0,7 g 8,3 g ph= 7,4

13 B.E.A. : Milieu d'isolement sélectif des Streptocoques D (entérocoques et non entérocoques) g/l d eau distillée Bio-Trypcase 17 Bio-Thione 3 Extrait de levure 5 Bile de boeuf 10 Chlorure de sodium 5 Citrate de sodium 1 Esculine 1 Citrate de fer ammoniacal 0.5 Azide de sodium ph = 7,1 Hektoen : Permet l isolement des Salmonelle, Shigella, Yersinia. g/l d eau distillée Peptone Extrait de levure 3 g Lactose Saccharose Salicine 2 g Citrate de Fer III 10. Sels biliaires 9 g Fuchsine acide 0. BBT 0.065g NaCl Thiosulfate de sodium 13 g ph= 7.3 Les colonies à centre noir H 2 S + Les colonies bleus ou vertes n utilisent aucun glucide du milieu. La couleur bleue peut être due à l utilisation du Citrate. Les colonies Jaunes utilisent un pou plusieurs Glucides (Lac et Sac, Lac et Sal, ) BBT

14 S.S. Salmonella Shigella Milieu sélectif permettant l isolement d'entérobactéries pathogènes. Il est très utilisé pour la recherche de Salmonella dans les selles et les denrées alimentaires peu pour les Shigella car trop sélectif. g/l d eau distillée Extrait de viande de boeuf 5 Bio-polytone 5 Sels biliaires 8,5 Lactose 10 Citrate de sodium 8,5 Thiosulfate de sodium 8,5 Citrate ferrique 1 Vert brillant 0,330 mg Rouge neutre 0,025 13,5 colonies rouges : lactose + colonies incolores : lactose colonies à centre noir : H 2 S + ph = 7,0 E.M.B. : Permet la culture et l isolement des bactéries Gram g/l d eau distillée Peptone Lactose Eosine Bleu de méthylèn KHPO 3 ph= g g 1 Les bactéries centre foncé ou un aspect métallique. Lactose + Dans le cas contraire les bactéries sont lactose -. Certains Gram + peuvent pousser sur ce type de milieu.

15 T.C.B.S. Thiosulfates Citrate Bile Saccharose Peptone Extrait de levure Saccharose 20 g Citrate de sodium Citrate de fer III Bile de Bœuf 8 g BBT 40 mg Bleu de thymol 40 mg Thiosulfate de sodium Chlorure de sodium 14 g ph= 8.6 Rôle : Permet l isolement des Vibrio cholerae Les colonies jaunes : Les colonies bleues vertes :.. Centre noir H 2 S + Pas de centre noir H 2 S - Les Vibrio cholerae apparaissent sous forme de... CETRIMIDE Rôle : Peptone de gélatine Peptone de caséine Bromure de tétradonium (cétrimide) Acide nalidixique Sulfate de potassium Chlorure de magnésium 16 g 0.2 g 15 mg 1.4 g ph= 7.1

16 KING A Peptone dit A Glycérol Sulfate de sodium Chlorure de magnésium purifié ph= g g Rôle : Mise en évidence de la pyocianine de Pseudomonas aeruginosa La pyocianine bleuit le milieu. Une coloration rouge traduit la production de pyorubine à partir de la pyocianine. KING B Peptone dit B Glycérol Hydrogénophosphate de potassium Sulfate de magnésium hydraté purifié ph= g g Rôle : Mise en évidence de la pyoverdine de Pseudomonas aeruginosa La pyoverdine jaunit le milieu. Cette molécule présente une fluorescence à 340 nm.. TSN: Dénombrement des Clostridium Sulfito Réducteur ou de C perfringens. Tryptone Extrait de levure Citrate de fer ammoniacal Sulfate de néomycine Sulfate de polymyxine Sulfite de sodium mg 20 mg 12 g ph= 7.2