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1 Laboratoire de Biologie Médicale MEDIBIO N document : PG-MU M A N U E L DE P R É L È V E M E N T DOCUMENT A DIFFUSION MAITRISEE Remis le :./.../... à...(nom du receveur) par...(nom du donneur) en...exemplaire(s) Signature du donneur : Je m'engage à restituer tous les exemplaires de ce document sur simple demande du laboratoire, notamment en cas d'évolution de version. Je m'engage également à signaler au laboratoire dans les plus brefs délais toute perte d'un ou plusieurs exemplaires de ce document. Signature du receveur : PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION

2 Table des matières 1 RECOMMANDATIONS GÉNÉRALES Pourquoi être à jeun? Pourquoi prélever à certaines heures? Analyses nécessitant des conditions particulières Comment et pourquoi identifier le prélèvement et les Fiches de prélèvement de biologie médicale? (annexe 8.6 «Fiches de prélèvement de biologie médicale») Identification minimale des prélèvements et échantillon transmis... 5 A Identification des tubes ou des échantillons...5 B Sur la feuille de suivi Fiches de prélèvement de biologie médicale Fiche de consentement pour les examens génétiques Comment gérer les demandes d'examens sans ordonnance LES DIFFÉRENTS TYPES DE RECUEILS ET LA PRÉPARATION DU PATIENT Préconisations patients Les tests dynamiques HGPO (HyperGlycémie Provoquée par voie Orale) Test de O Sullivan Dosage de la Prolactine Test à la LH RH (*) Test à la TRH (*) avec dosages de la Prolactine, de la TSH ou de la GH Test au Synacthène (*) avec dosage de cortisol et/ou 17OHprogestérone Test au peptide C (*) avec dosage de glucose et peptide C Hélikit Les suivis thérapeutiques Formulaires de consentement LES PRÉLÈVEMENTS Les prélèvements veineux Matériel utilisé : Avant le prélèvement A Préleveurs externes (infirmières libérales)...11 B Préleveurs internes Choix des tubes Modalités des prélèvements sanguins Protocoles particuliers Temps de saignement Prélèvements pour hémoculture (*) Paludisme (*) Gaz du sang Les prélèvements bactériologiques Généralités A Salle de prélèvement bactériologique B Responsabilités C Matériel utilisé Prélèvements vaginaux chez la femme Prélèvement urétraux chez l'homme Autres prélèvements de la sphère uro-génitale A Prélèvement urétral chez la femme B Pour la recherche de l Herpès : PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 1/79

3 C Recherche de Papillomavirus chez la femme D Autres prélèvements bactériologiques de la région périnéale (prépuce, vulve, péri-anal...) : code PEAU Autres prélèvements bactériologiques A Prélèvement de peau B ECBU, coproculture, crachats C Prélèvements ORL, oculaires D Autres prélèvements bactériologiques Les prélèvements mycologiques, parasitologiques, virologiques Recherche de dermatophytes sur la peau Recherche de dermatophytes au niveau des ongles Recherche de dermatophytes au niveau du cuir chevelu (teigne) Test de Graham (recherche d'oxyures par scotch test) Recherche de Demodex folliculorum Recherche de gale (Sarcoptes scabiei) Recherche de Pytiriasis versicolor par scotch-test Recherche d Herpès virus : Les prélèvements dans le cadre d'un bilan hématologique Myélogramme Biopsie ostéo-médullaire Ponction ganglionnaire Frottis cervico-vaginal Généralités A Salle de prélèvement bactériologique B Responsabilités C Matériel utilisé Déroulement A Frottis en milieu liquide : B Frottis sur lame : Test de Hühner CONSERVATION ET TRANSPORT DES ÉCHANTILLONS CATALOGUE DES PRINCIPALES ANALYSES MEDIBIO CONDUITE À TENIR EN CAS D'INCIDENT DE PRÉLÈVEMENT OU D'ACCIDENT D'EXPOSITION AU SANG INTÉRÊT CLINIQUE DES EXAMENS DE ROUTINE ANNEXES Annexe : Liste des analyses à conditions particulières (SFBC 2011) Analyses nécessitant un horaire particulier (rythme nycthéméral) Analyses nécessitant un régime alimentaire particulier Autres analyses à conditions particulières Analyses spécialisées nécessitant un traitement pré-analytique particulier Annexe Consentements «Consentement en vue d'un examen» Dépistage sanguin du risque accru de trisomie 21 fœtale Annexe : liste des principales interférences et variations physiopathologiques Annexe : Préconisations patients Objet et domaine d application Définitions et abréviations Références Responsabilités Descriptif PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 2/79

4 RECUEIL D'URINES POUR ECBU Recueil d urines pour compte d Addis Hématies Leucocytes par Minute (HLM) Recueil des URINES DE 24 HEURES Recueil et fixation des urines pour étude cytologique Recueil des selles :Coproculture, Examen parasitologique des selles, Clostridium difficile, Adenovirus, Rotavirus Scotch test Recherche de sang dans les selles Recueil de sperme Spermoculture Préconisations pour la réalisation d'un test de Hühner(test post-coïtal) Recherche de drogues urinaires EXPECTORATION RECHERCHE DE BILHARZIOSE URINAIRE Test HELIKIT (Test respiratoire pour le dépistage d Helicobacter pylori) Stéatorrhée, créatorrhée, examen fonctionnel de la digestion Legionella pneumophila : Recherche de l antigène urinaire TRP : Taux de reabsorption du Phosphore ELASTASE DANS LES SELLES Epreuves dynamiques Classement et archivage Annexe : Fiche de prélèvement de biologie médicale Conservation des échantillons biologiques Conservation pré-analytique A Chimie-enzymologie sanguine...68 B Hormones sanguines C Marqueurs Protéines D Hématologie E Hémostase F Immuno-hématologie G Médicaments H Biologie du LCR I Gazometrie arterielle J Chimie-enzymologie urinaire K Bactériologie Conservation post-analytique Annexe : élimination des déchets PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 3/79

5 Ce manuel a pour objectif de guider les préleveurs dans leurs pratiques quotidiennes. Il permet d'avoir une vue d'ensemble de l'organisation mise en place au sein du laboratoire afin que les examens soient réalisés dans des conditions optimales. 1 Recommandations générales 1.1 Pourquoi être à jeun? Extrait de la plaquette d'information 2008 créée par Bio-Log et LABAC (Association des Laboratoires d'analyses de Biologie Accrédités COFRAC) Certains dosages varient après le repas parce que l alimentation apporte elle-même certains des éléments dosés (ex : triglycérides, glucose, ) Après un repas, la qualité du sérum ou du plasma est modifiée (trouble, viscosité). Ces modifications de la qualité des prélèvements peuvent perturber le fonctionnement des appareils d analyse de plus en plus sensibles et précis. De manière générale, le jeûne est recommandé pour l ensemble des analyses. Voir en annexe 8.4 «Liste des principales interférences et variations physiopathologiques» 1.2 Pourquoi prélever à certaines heures? Le cycle nycthéméral a une influence importante sur certains paramètres biologiques (ex : cortisol, prolactine) et dans ce cas le prélèvement doit être fait à des heures particulières de la journée. Pour d autres paramètres, l influence est modérée mais réelle. 1.3 Analyses nécessitant des conditions particulières Voir en Annexe 8.1 «Liste des analyses à conditions particulières» et «Analyses BPR avec traitement pré-analytique particulier» 1.4 Comment et pourquoi identifier le prélèvement et les Fiches de prélèvement de biologie médicale? (annexe 8.6 «Fiches de prélèvement de biologie médicale») Identification minimale des prélèvements et échantillon transmis Toutes les précautions doivent être prises pour identifier correctement le patient y compris en établissement de santé (utilisation de bracelets électroniques...). Quelque soit l analyse, doivent impérativement figurer : A Identification des tubes ou des échantillons sexe, nom, prénom, DDN +/- nom de JF B Sur la feuille de suivi patient : nom, prénom, DDN, +/- nom de JF, adresse, sexe +/- téléphone date et heure de prélèvement PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 4/79

6 identification du préleveur identification du prescripteur nombre de tubes prélevés et nature du prélèvement (case : sang, urines, autre) transmission des résultats : urgent, à téléphoner, à faxer, à poster, pharmacie, laboratoire renseignements cliniques (Traitement par AVK, héparinothérapie, dosage des médicaments, DDR, autres) Ces indications, vérifiées par le préleveur doivent être parfaitement lisibles. Ces éléments sont utilisés pour différencier les homonymes, lier le patient à ses antériorités et attribuer les valeurs de références adaptées (homme, femme, enfant). «Attention certains patients peuvent présenter les mêmes nom, prénom et date de naissance, d où la nécessité de préciser l adresse et voire le lieu de naissance, pour la validation des cartes de groupages sanguins». L absence ou l erreur d identification du prélèvement ou de l échantillon constitue un critère de non-conformité et est enregistrée comme telle dans le système qualité des laboratoires : elle peut entraîner la non exécution des actes Fiches de prélèvement de biologie médicale Associées aux échantillons, elles sont obligatoires. Elles sont mises à disposition dans les boites de prélèvements. Nous vous demandons de les compléter et d y préciser tous renseignements cliniques et thérapeutiques susceptibles d aider à la compréhension des résultats des analyses Fiche de consentement pour les examens génétiques Elle est spécifique pour les examens de génétique et de dépistage de la Trisomie 21 Fœtale par les marqueurs sériques maternels. Si nécessaire, le laboratoire peut à votre demande vous en fournir. Annexes 8.2 "Consentements» 1.5 Comment gérer les demandes d'examens sans ordonnance Le document «Enregistrement des demandes formulées oralement» doit être rempli par le patient responsable majeur après qu'il ait pris connaissance des modalités du prélèvement et de rendu des résultats, du montant à payer... A noter qu'il convient d'obtenir le nom du médecin traitant (indispensable pour les sérologies HIV) pour avoir un correspondant médical en cas de résultats pathologiques. 2 Les différents types de recueils et la préparation du patient 2.1 Préconisations patients Voir en Annexe 8.5 "Préconisations patients"» PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 5/79

7 2.2 Les tests dynamiques Certains examens nécessitent de prévoir un temps de réalisation plus ou moins important (ex : HGPO), ou un jour précis. Pour l ensemble de ces tests, la réalisation au laboratoire est recommandée. Faire les temps indiqués sur l ordonnance. En l absence d indication, il est préférable de vérifier auprès du prescripteur les temps souhaités HGPO (HyperGlycémie Provoquée par voie Orale) But du test : stimuler la sécrétion d insuline et freiner la sécrétion hypophysaire de la GH. Indications : dépistage des états diabétiques, évaluation de l insulino-sécrétion, diagnostic de l acromégalie et suivi thérapeutique, confirmation de diabète gestationnel, diagnostic étiologique des hypoglycémies. Dosage : glycémies à 4 temps différents pour les femmes enceintes et les autres patients. Modalités de l examen : Le patient doit être à jeun depuis 10 h. Poser si possible un cathéter et prélever un tube fluorure (= temps 0 minutes). Administrer par voie orale : 75 g de glucose chez l'adulte 100 g pour une femme enceinte. 1,75 g/kg de poids corporel (sans dépasser 75g) chez l'enfant Prélever de nouveau aux temps : 60, 120 et 180 minutes pour la femme enceinte. 30, 60, 90, 120, 150 et 180 minutes pour les autres patients. Recueil des urines : 0, 60, 120 et 180 minutes (pour 75g de glucose - absence de recueil pour les femmes enceintes) Test de O Sullivan Principe : évaluation de la glycorégulation. Indications : dépistage du diabète gestationnel. Dosage : glycémie. Modalité de l examen : La patiente doit être à jeun de préférence Prélever un tube fluorure pour une glycémie initiale. Administrer à la patiente par voie orale 50 g de glucose (T0). Laisser la patiente au repos pendant une heure. Si la patiente ne désire pas rester au laboratoire, lui faire signer une décharge (l'éditer à partir d'alysé). Prélever un tube fluorure une heure après ingestion du glucose (T60) Dosage de la Prolactine Le prélèvement doit être effectué à jeun, entre 8 heures et 12 heures, chez un sujet au repos depuis au moins 15 minutes et non stressé. PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 6/79

8 Différentes méthodes de prélèvement peuvent être utilisées : 1/Prolactine après repos pendant (15-20min). mettre le patient au repos pendant 15-20mn prélever à T + 20 minutes. 2/ Prolactine poolée Prélever au temps T0 Mettre la patiente au repos puis prélever aux temps 15 et 30 min. Un seul dosage sera réalisé après mélange des trois sérums prélevés à T0 et T15 et T30 minutes. 3/ Test à la TRH avec dosage de prolactine voir test au TRH Test à la LH RH (*) Prise de rendez-vous indispensable : ce test est réalisé par une infirmière ou un médecin biologiste Chez la femme, le prélèvement doit se faire dans la première partie du cycle (entre J3 et J5), sans traitement œstroprogestatif (arrêter depuis 1 mois minimum, de préférence 2 mois), et ne pas être enceinte. Patiente à jeun et au repos T0 : Prélever 1 tube Injecter en intraveineuse 100mg de LH-RH Stimu-LH (délivrée en Pharmacie hospitalière sur ordonnance et apportée par le patient) à T+ 30 et à T+ 60 minutes : Prélevement Test à la TRH (*) avec dosages de la Prolactine, de la TSH ou de la GH Prise de rendez-vous obligatoire : ce test est réalisé par une infirmière ou un médecin biologiste Entre J3 et J5 du cycle, sans traitement œstroprogestatif depuis 1 mois. Patient à jeun et au repos depuis 30 minutes. T0 : prélèvement T0, T+30 et T+ 60 minutes. Prélever 1 tube Injecter en intraveineuse lente (1 à 2 minutes) 250mg de stimu-tsh (délivrée en pharmacie hospitalière sur ordonnance, apportée par le patient) à T+ 30 et à T+ 60 minutes : Prélevement PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 7/79

9 2.2.6 Test au Synacthène (*) avec dosage de cortisol et/ou 17OHprogestérone. Prise de rendez-vous indispensable : le test est effectué par une infirmière ou un médecin biologiste. Patient à jeun, au repos depuis 15 minutes Prélever au temps T0 aussi proche que possible de 8 heures du matin Injecter en intramusculaire une ampoule de synacthène immédiat (0, 25 mg) prescrite par le médecin et apportée par le patient. (Injection IV si patient sous AVK) Prélever ensuite aux temps T + 30 minutes et T + 60 minutes en respectant la prescription, le patient étant resté au repos dans l intervalle de temps. Contre-indications : asthme et sujets allergiques Test au peptide C (*) avec dosage de glucose et peptide C Prise de rendez-vous indispensable : le test est effectué par une infirmière ou un médecin biologiste. Patient à jeun. Prélever au temps T0. Injecter en intraveineuse une ampoule de glucagon (1 mg) prescrite par le médecin et apportée par le patient. Prélever ensuite aux temps T + 10 minutes et T + 30 minutes. Si test long : T0, T+10, T+30, T+60, T+120, T+180 et T+240 minutes Hélikit Buts du test : recherche de présence d Helicobacter pilori, suivi thérapeutique. Dosage : envoyé au laboratoire Cerba Conditions initiales : être à jeun, ne pas fumer, ne pas se brosser les dents avant l'examen Mise en œuvre : - Suivre les indications du kit. 2.3 Les suivis thérapeutiques Voir annexe «Liste des analyses à conditions particulières» PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 8/79

10 2.4 Formulaires de consentement Pour les demandes d'analyses sans ordonnance, voir annexe «Enregistrement des demandes formulées oralement»: Pour les analyses génétiques, Voir : Annexe "consentement en vue d'un examen génétique" Annexe Dépistage sanguin du risque accru de trisomie 21 foetale Liens vers : Génotypage Rhésus foetal D consentement Cerba Caractéristiques génétiques Caryotype post-natal Etude du gène CFTR (mucoviscidose) PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 9/79

11 3 Les prélèvements 3.1 Les prélèvements veineux Matériel utilisé : Corps de pompe garrot, coton conditionné Aiguilles, embouts, flacons stériles Seringues à usage unique : 2, 5, 10 et 20 ml montées.(im) -cathéter- dispositif à ailettes Tubes à prélèvements BD Vacutainer : tubes secs avec activateur de la coagulation et gel 3,5 et 8,5 ml de vide (bouchon jaune) tubes secs avec activateur de coagulation, 4ml de vide (bouchon rouge) tubes citratés 2,7 ml de vide (bouchon bleu) tubes EDTA K2, 4 ml de vide (bouchon violet) tubes héparinate de Lithium, 3ml de vide avec gel (bouchon vert pâle) tubes héparinate de Lithium sans gel,4ml de vide (bouchon vert) tubes fluorure de sodium /EDTA disodique 4ml de vide tubes neutres sans additif (purge et fluides biologiques autres que le sang), 3ml de vide (bouchon transparent). Alcool 70 %, Biseptine (pour les bébés) ou Bétadine Boîte récupératrice d'aiguilles et poubelle pour déchets non contaminés. Dakin (en cas d Accident d'exposition au sang AES) +/- : flacons à hémoculture (aérobies et anaérobies), Compresses stériles, gants, Sparadrap hypoallergénique Stéristrip, dispositif Surgicut, adulte et enfant, lancettes, lames, Tensiomètre, Chronomètre, Papier filtre, Thermomètre électronique NB : avant de prendre en charge le patient, il est nécessaire de vérifier la présence de tout le matériel indispensable au prélèvement Avant le prélèvement A Préleveurs externes (infirmières libérales) Le laboratoire fournit le matériel de prélèvement nécessaire dans des coffrets unitaires conformes à l ADR. Les «Fiches de prélèvement de biologie médicale» sont placées dans ces coffrets. Veiller à n utiliser que des tubes non périmés : pour vous aider, la Date Limite d Utilisation est visible sur l étiquette collée sur tous les tubes. N hésitez pas à nous retourner les coffrets anciens pour des échanges. PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 10/79

12 Après avoir vérifié que les conditions pré-analytiques étaient satisfaisantes (jeûne ), vous pourrez vérifiez le type du tube à prélever en vous reportant au document «Choix des tubes» ci-après, que nous vous fournirons à votre demande. Remplissage de la Fiche de prélèvement de biologie médicale :Compléter la Fiche de prélèvement de biologie médicale (Annexe Fiche de prélèvement de biologie médicale) en n oubliant pas les indications concernant directement le patient et qui pourraient influer sur la qualité et l interprétation des résultats : Jeûne Posologie et heure de la dernière prise pour les dosages de médicaments, Objectifs thérapeutiques (INR) Date et heure de prélèvement Date Dernières Règles... Merci enfin de bien vouloir noter vos coordonnées de façon à ce que l on puisse vous contacter en cas de problèmes concernant le prélèvement. B Préleveurs internes Le préleveur, muni de l'ordonnance et de la planche d étiquettes s'assure de l identité du patient (nom, prénom et date de naissance) et vérifie l intégralité de la prescription (pas d erreur ou oubli paramètre), le code médecin et le suffixe «U» pour les urgents. Il s'assure que le patient est confortablement installé et le rassure si besoin. Il vérifie la conformité des conditions de prélèvement : État de jeûne Dernière prise de médicaments, ou injection (pour les héparinémies) Périodes de repos pour les paramètres le nécessitant. Date des dernières règles. Il s'enquiert de l'existence d'une éventuelle thérapeutique et sollicite, si nécessaire, des informations cliniques complémentaires et note ces informations sur la fiche de renseignements. Il sélectionne les tubes à prélèvements (nature, contenance et nombre) en fonction des analyses prescrites (Cf «Choix des tubes») et du système veineux observé. LORSQUE LA PRISE EN CHARGE PRE-ANALYTIQUE PEUT SE FAIRE RAPIDEMENT (PRELEVEMENT AU SEIN DU LABORATOIRE ET CENTRIFUGATION DANS LES 2 HEURES), LA GLYCEMIE EST PRELEVEE SUR TUBE SEC : LA SECRETAIRE ACCUEILLE ALORS LE CODE «G» ET NON «GG». PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 11/79

13 3.1.3 Choix des tubes Se reporter à la plaquette «Choix des couleurs de tubes» EN CAS DE DOUTE :POUR TOUS LES EXAMENS TRANSMIS AUX LABORATOIRES BPR ( OU CERBA, CONSULTER LES CATALOGUES CORRESPONDANTS Modalités des prélèvements sanguins SE NETTOYER LES MAINS ENTRE CHAQUE PATIENT (SOLUTION ANTISEPTIQUE A DISPOSITION) Antisepsie de la peau à l'aide d'un coton imprégné de solution antiseptique. (Si prélèvement pour alcoolémie, utiliser une lingette d antiseptique pour prélèvement ECBU ou de la Bétadine ) Pose du garrot et recherche de la veine. Utilisation d'aiguille stérile à usage unique obligatoire. Utiliser les tubes à prélèvement en fonction des analyses prescrites (Cf «Choix des tubes»). Une fois que l'on est dans la veine, desserrer le garrot, prélever le ou les tubes. Retirer l aiguille tout en comprimant la veine avec un coton. Retourner délicatement plusieurs fois chaque tube (ne pas agiter) Le patient assure la compression pendant 1 minute en temps normal et 2 à 3 minutes s il est sous anticoagulant (apposer un coton sec pour la compression des patients sous traitement anticoagulant) Pour le prélèvement à la seringue : répartir le sang dans les tubes en respectant l ordre des tubes. Ne jamais pousser sur le piston (risque accru d hémolyse) Pour les jeunes enfants, veiller à ne pas prélever plus que nécessaire. Le tube citraté utilisé en routine présente déjà un faible volume (2,7 ml). NB. Respecter l ordre de prélèvement des tubes suivant : BLEU ROUGE/JAUNE VERT MAUVE GRIS Le tube citrate Tube de purge doit impérativement être correctement rempli jusqu à la bande dépolie. si prélèvement à l ailette. Bouchon coiffant à refermer d' 1/4 de tour en cas de rupture du vide. Tourner et pousser le bouchon vers le bas. Attention, signaler une rupture du vide sur les tubes citratés (sparadrap autour du tube) car risque d'impact sur le résultat d'hémostase PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 12/79

14 Élimination de l'aiguille : Les aiguilles doivent être obligatoirement éliminées dans les containers jaunes collecteurs à DASRI («Procédure d élimination des déchets»), immédiatement après le prélèvement et au vu du patient. Le recapuchonnage est interdit. Il est également proscrit d introduire la main à l intérieur du container. Cf «Annexe "élimination des déchets"» Il est rigoureusement interdit de replacer les aiguilles utilisées dans les coffrets : risque d AES par le personnel du laboratoire à l ouverture du coffret. Dans la mesure du possible, nous vous remercions de remplir complètement les tubes : le bon remplissage des tubes est en effet un critère important dans la standardisation des conditions pré-analytiques et donc des résultats d analyses. Il est à noter qu aucune analyse ne pourra être effectuée sur un tube CITRATE (bleu) mal rempli ou coagulé, ou sur un tube EDTA (violet) coagulé. Identification des prélèvements Selon la législation en vigueur, applicable à tous les préleveurs et correspondants (même externes au laboratoire), il est impératif de noter sur TOUS les échantillons les : Sexe Nom Prénom Date de naissance Nom de jeune fille indispensable pour les tubes EDTA susceptibles d'être utilisés en Immuno-Hématologie : le laboratoire devra obtenir au maximum le nom de naissance NE PAS OUBLIER QUE TOUS LES ÉCHANTILLONS DOIVENT ÊTRE IDENTIFIÉS AVEC SEXE, NOM, PRÉNOM, DATE DE NAISSANCE 3.2 Protocoles particuliers Temps de saignement Méthode de DUKE substituée par l évaluation de la fonction plaquettaire par mesure du temps d occlusion capillaire : Prélever un tube citraté Homogénéiser par un seul retournement Mettre un sparadrap autour du bouchon (pas de centrifugation) Coller l étiquette : TS Transférer sur le site de Melun Méthode d IVY sensibilisée : (*) L aspirine doit être arrêtée 7 à 10 jours avant, les corticoïdes peuvent entraîner une modification. Placer le bras du patient sur un accoudoir, en exposant la face antérieure de l'avant bras. PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 13/79

15 Désinfecter la peau à l alcool Installer le brassard du tensiomètre sur le haut du bras et appliquer une pression permanente de 40mm Hg. Avec un dispositif Surgicut, faire une incision horizontale sur la face antérieure de l avant bras, à 5cm au dessous du coude en évitant les veinules superficielles. Déclencher le chronomètre. Après une période de 30 secondes, éponger avec du papier filtre en tamponnant légèrement en périphérie pour ne pas gêner la formation du clou plaquettaire. Éponger le sang toutes les 30 secondes jusqu'à ce que le sang ne tache plus le papier filtre. Arrêter le chronomètre, le temps de saignement est déterminé par le temps arrondi à 30 secondes. Mettre éventuellement un stéristrip Noter le temps écoulé depuis l incision jusqu à l arrêt du saignement sur la fiche résultat. NB : Valeur normale jusqu à 8 min ; entre 8 et 10 min : refaire le test à l autre bras, allongement > 10 min contrôlé, prévenir le biologiste. Remarque : Pour les enfants de 5 mois à 15 ans, utiliser un dispositif SURGICUT JUNIOR. Le protocole reste le même. Toutefois les pressions suivantes sont recommandées en fonction du poids du nouveau-né : 1 30 mm Hg > ou égale à 2kg 2 25 mm Hg entre 1kg et 2kg (chez le prématuré) Valeur normale 1.30 à 9 minutes Prélèvements pour hémoculture (*) Matériel : 2 flacons (1 aérobie et 1 anaérobie), dispositif à ailettes ou seringue de 10cc ou corps de pompe spécial hémoculture, compresses stériles bétadinées, thermomètre, gants. Noter les renseignements nécessaires sur la fiche de suivi : l heure du prélèvement, température du patient au moment du prélèvement, l antibiothérapie éventuelle. Se laver les mains, mettre les gants Réaliser le prélèvement de préférence lors d'un pic fébrile, avant le début d une antibiothérapie. En cas d impossibilité, prélever l échantillon immédiatement avant l administration de la dose d antibiotique. Retirer la capsule en plastique, désinfecter soigneusement Nettoyer très soigneusement le site de ponction en utilisant une compresse bétadinée. Laisser agir l'antiseptique. Prélèvement standard avec l adaptateur adéquat pour les flacons : Remplir en premier le flacon pour culture aérobie (vert) puis celui pour culture anaérobie (orange) (10 ml de sang par flacon) puis les autres tubes éventuels. PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 14/79

16 Prélèvement à la seringue : inoculer en premier le flacon pour culture anaérobie (orange) puis celui pour culture aérobie (vert). Homogénéiser les flacons par 2 ou 3 retournements, les laisser à température ambiante Paludisme (*) Noter les renseignements nécessaires sur la fiche de renseignements : Notion de fièvre Zone géographique avec date de retour Chimio- prophylaxie : nom, durée du traitement, interruption éventuelle Antécédent d accès palustre Prélever en systématique un tube sur EDTA Éventuellement, réaliser un frottis à partir du sang capillaire : Masser l extrémité du majeur. Désinfecter avec de l alcool à 70. Piquer la pulpe du doigt avec un vaccinostyle. Recueillir une goutte sur deux lames différentes et réaliser les étirements pour les frottis sanguins. Sécher le doigt du patient. Identifier les lames et les apporter rapidement en technique Gaz du sang Matériel nécessaire : antiseptique (type bétadine) gants à usage unique matériel stérile (aiguille intra veineuse, seringue à usage unique de 3 ml héparinée, compresses stériles) ruban adhésif (petit élasto) glace pour le transport étiquettes, nécessaire pour élimination des déchets de soin Ponction : Noter la température du patient Remplir bon d'examen, date et heure, T, service, conditions d'oxygénation (attendre 15 à 30 minutes si le patient vient d'être placé sous oxygène) Se laver les mains Préparer le matériel PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 15/79

17 Mettre le poignet du patient en extension et repérer l artère radiale avec le majeur et l'index Asepsie rigoureuse et large de la zone à ponctionner d'un mouvement circulaire (compresses stériles bétadinées) Attendre une minute de temps de contact Mettre les gants non stériles et en bétadiner les doigts servant à repérer l'artère Lorsque l' artère est perçue avec ses 2 doigts, ponctionner obliquement à 45, la pointe de l aiguille face au courant artériel.(biseau vers le haut) Ponctionner progressivement jusqu à l apparition de sang rouge vif rythmé par le pouls dans la seringue. Il est inutile de tirer sur le piston car la pression artérielle permet au sang de monter dans la seringue Prélever 2 à 3 ml de sang (minimum 1 ml) Retirer l aiguille et comprimer immédiatement l artère pendant 5 min avec une compresse imbibée d antiseptique Chasser les bulles d'air de la seringue en la tapotant Obturer la seringue avec un bouchon Poser un pansement compressif non circulaire sur l artère Préparer la seringue dans un sachet avec de la glace et le bon de labo Transmissions et transport de la seringue au labo immédiatement Nettoyer et ranger le matériel et se laver les mains 3.3 Les prélèvements bactériologiques Généralités A Salle de prélèvement bactériologique Elle est verrouillable et garantit une isolation phonique et visuelle. Une propreté rigoureuse des locaux et ustensiles doit y régner (poubelles spécifiques pour déchets et papiers jetables). B Responsabilités Les prélèvements sont réalisés sous la responsabilité du biologiste et sont pratiqués par le personnel autorisé (cf procédure «prélèvements»). Lorsque le prélèvement est effectué par le patient, la personne présente à l'accueil remet les préconisations et le matériel nécessaires. C Matériel utilisé gants à usage unique : LE PORT DES GANTS EST OBLIGATOIRE spéculum stérile en plastique à usage unique pour les prélèvements vaginaux écouvillons gélosés, écouvillon sec (pour la lame, la mesure du ph, l'examen direct) ou milieux de type e-swab éventuellement, milieu de transport et écouvillons spéciaux pour la recherche de Chlamydiae et mycoplasmes papier ph pour les prélèvements vaginaux lames PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 16/79

18 la FEUILLE DE RENSEIGNEMENTS DOIT ÊTRE COMPLÉTÉE au moment du prélèvement LES ECHANTILLONS ET LES LAMES DOIVENT IMPERATIVEMENT ETRE IDENTIFIES L horodatage du prélèvement ou du recueil, de l acheminent et de la réception de chaque échantillon au laboratoire ainsi que l identification de toutes les personnes qui accomplissent ces tâches sont essentiels Prélèvements vaginaux chez la femme Installer la patiente en position gynécologique le préleveur vérifie que la patiente n'a pas effectué de toilette intime ni appliqué de traitement local (crème, ovules, gels, savons...) avant le prélèvement Éviter de prélever lors de la période menstruelle car la flore est modifiée : reporter l'examen en cas de saignements abondants En cas de difficultés pour visualiser le col, demander à la patiente de placer ses poings serrés sous ses fesses avant de réintroduire le spéculum. Le prélèvement doit être réalisé avant ou à distance de tout traitement antibiotique (> 2 jours pour les germes banaux, > 15 jours pour les chlamydiae) PENSER A TOUJOURS IDENTIFIER LES PRELEVEMENTS GRACE AUX ETIQUETTES PATIENT (indiquer la localisation : endocol ou PV) ET LES LAMES (nom, numéro de dossier et PV) Recherche de streptocoque B chez la femme enceinte : ne pas utiliser de spéculum s'il existe une notion de col modifié ou de contractions rapprochées et en cas d'antécédent de prématurité le prélèvement se fait au niveau du 1/3 inférieur de la cavité vaginale Privilégier les dispositifs de type E-swab : prélever un écouvillon et le casser dans le milieu liquide Sinon prélever un écouvillon gélosé et un écouvillon sec pour faire une lame Identifier écouvillons et lames Prélèvement cervico-vaginal +/- Chlamydia +/- Mycoplasmes Privilégier les dispositifs de type E-swab : prélever un écouvillon au niveau de l'endocol et du vagin (y compris culs de sacs vaginaux) et le casser dans le milieu liquide utiliser un écouvillon sec pour la mesure du ph Sinon : prélever un écouvillon gélosé au niveau de l'endocol un écouvillon gélosé au niveau des culs de sacs vaginaux et du vagin PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 17/79

19 un écouvillon sec pour faire une lame et mesurer le ph à partir des secrétions vaginales Recherche de Chlamydia : elle peut être rajoutée à l'initiative du biologiste. Chez la femme enceinte, elle n'est faite que sur demande explicite du médecin : c est alors le biologiste qui décide. La recherche se fait au niveau de l'endocol mais chez la petite fille, elle peut être faite au niveau vaginal. utiliser les écouvillons fournis avec le milieu PCR-Media (bouchon jaune) le premier écouvillon sert à nettoyer le col afin d'éliminer l'excès de glaire et de mucus. Jeter cet écouvillon après usage Introduire le deuxième écouvillon dans le canal endo-cervical, effectuer délicatement environ 5 rotations dans le même sens en évitant le contact avec les parois vaginales Dévisser le bouchon du milieu PCR media et introduire l'écouvillon dans le tube. Casser l'écouvillon dans le milieu de culture (le point de cassure au niveau de la tige est matérialisé par un trait noir) Transporter et conserver à température ambiante Recherche de Mycoplasmes : Prélever idéalement au niveau de l'endocol un écouvillon sec qui sera déchargé dans le flacon de transport Prélèvement vaginal seul Chez l'enfant et la jeune vierge : le prélèvement se fait sans spéculum, en dégageant bien, manuellement, la fente vaginale et en introduisant directement les écouvillons. Privilégier les dispositifs de type E-swab : prélever un écouvillon au niveau du vagin (y compris culs de sacs vaginaux) et le casser dans le milieu liquide utiliser un écouvillon sec pour la mesure du ph Sinon : un écouvillon gélosé au niveau des culs de sacs vaginaux et du vagin un écouvillon sec pour faire une lame et mesurer le ph à partir des secrétions vaginales Prélèvement urétraux chez l'homme Le prélèvement doit être réalisé avant ou à distance de tout traitement antibiotique (> 2 jours pour les germes banaux, > 15 jours pour les chlamydiae) La recherche de mycoplasmes ne peut se faire que sur prescription explicite du médecin : ne pas hésiter à le contacter pour lui proposer ces analyses. La recherche de Chlamydia peut se faire à l'initiative du biologiste (privilégier la recherche au niveau du 1er jet urinaire) PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 18/79

20 Le patient ne doit pas avoir uriné dans l'heure précédant le prélèvement (à faire de préférence le matin). Remplir la feuille de renseignements cliniques (notamment présence d'un écoulement) Privilégier les dispositifs de type E-swab : prélever un écouvillon au niveau du méat urinaire et le décharger dans le milieu liquide Sinon : prélever 1 écouvillon fin mis dans le milieu de transport gélosé (ne pas utiliser de milieu de transport impose un transport rapide < 2h à température ambiante) + 1 écouvillon sec pour faire la lame Recherche de Chlamydia : utiliser les écouvillons fournis avec le milieu de transport Cobas PCR Female Swab Sample Packet (bouchon jaune) tourner environ 5 fois un des deux écouvillons au niveau du méat urinaire et le décharger dans le milieu de transport (le point de cassure au niveau de la tige est matérialisé par un trait noir). Recherche de Mycoplasmes : Prélever un écouvillon fin sec qui sera déchargé dans le flacon de transport Autres prélèvements de la sphère uro-génitale A Prélèvement urétral chez la femme Installer la patiente en position gynécologique. Libérer le méat urinaire et réaliser les mêmes prélèvements que pour l homme. Le protocole est identique aussi pour la recherche de Chlamydiae, Mycoplasmes et Trichomonas. B Pour la recherche de l Herpès : Repérer les vésicules et prélever avec un écouvillon au niveau du plancher de celles-ci en frottant fort à l aide d un écouvillon. Faire 2 étalements circulaires (1cm de diamètre) sur 2 lames avec le même écouvillon. Si une recherche par PCR est demandée, décharger l'écouvillon dans un milieu de transport M4RT. N.B : le prélèvement par PCR est hors nomenclature. C Recherche de Papillomavirus chez la femme cf protocole de prélèvement du frottis cervico-vaginal en milieu liquide D Autres prélèvements bactériologiques de la région périnéale (prépuce, vulve, péri-anal...) : code PEAU Remplir la feuille de renseignements cliniques (notamment présence d'un écoulement) PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 19/79

21 Privilégier les dispositifs de type E-swab : prélever un écouvillon au niveau du méat urinaire et le décharger dans le milieu liquide Sinon : prélever 1 écouvillon fin mis dans le milieu de transport gélosé (ne pas utiliser de milieu de transport impose un transport rapide vers le site analytique < 2h à température ambiante) + 1 écouvillon sec pour faire la lame Autres prélèvements bactériologiques Le préleveur vérifie que le patient n'a pas appliqué de traitement local antibiotique ou antiseptique avant le prélèvement Le prélèvement doit être réalisé avant ou à distance de tout traitement antibiotique (> 2 jours pour les germes banaux) Remplir la feuille de renseignements cliniques Penser à bien identifier les échantillons et les lames Privilégier les dispositifs de type E-swab : prélever un écouvillon et le décharger dans le milieu liquide Sinon : prélever 1 écouvillon gélosé (ne pas utiliser de milieu de transport impose un transport rapide vers le site analytique < 2h à température ambiante) + 1 écouvillon sec pour faire la lame. A Prélèvement de peau Vérifier s'il est nécessaire de réaliser un prélèvement mycologique avec une recherche de dermatophytes en parallèle : interroger le patient pour savoir si le médecin s'attend à un rendu dans un mois, noter si la lésion est compatible avec une mycose (lésion de la peau glabre avec desquamation périphérique, atteinte d'un ongle, plaque alopéciante du cuir chevelu...) Prélever au centre de la lésion en insistant sur d'éventuelles zones purulentes B ECBU, coproculture, crachats se reporter aux préconisations patients C Prélèvements ORL, oculaires au niveau de l œil : prélever au niveau des conjonctives et de l'angle interne de l œil si blépharite (croûtes palpébrales, cils) : prélever des cils à la pince stérile prélèvement de gorge : Abaisser la langue (abaisse-langue) PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 20/79

22 Frotter l'écouvillon sur la surface de chaque amygdale et toute la surface pathologique en évitant le contact avec la langue ou la muqueuse jugale. Si épiglottite, ne pas faire le prélèvement Prélèvement d'oreille : écouvillonner le conduit auditif externe Prélèvement de nez : écouvillonner les 2 fosses nasales en cas de recherche du bacille de BORDET GENGOU (coqueluche) : Écouvillonner jusque dans le naso-pharynx (exclusivement au labo) (utilisation d'un milieu M4RT) cf module de formation D Autres prélèvements bactériologiques Suivre le même protocole. En cas de doute, se renseigner auprès d'un biologiste 3.4 Les prélèvements mycologiques, parasitologiques, virologiques Remplir la feuille de renseignements cliniques: ancienneté des lésions, traitement préalable, contact avec les animaux, prurit... METTRE DES GANTS POUR LE PRELEVEMENT Recherche de dermatophytes sur la peau Arrêt de tout traitement anti-mycosique depuis au moins 7 jours Prélèvement effectué à la curette ou au vaccinostyle par grattage en périphérie des lésions suspectes. Recueillir les squames dans une boite de Pétri stérile (prendre soin de bien la fermer). en cas de lésions suppuratives (levuroses en particulier), utiliser un écouvillon Recherche de dermatophytes au niveau des ongles arrêt de tout traitement anti-mycosique depuis au moins 21 jours Enlever grâce à un coupe-ongle, l'ongle atteint pour dégager la jonction entre la zone saine et la zone pathologique. Prélèvement à la curette ou au vaccinostyle par grattage à ce niveau et recueil des squames dans une boite de Pétri stérile (prendre soin de bien la fermer). Si la zone jonctionnelle n'est pas accessible (ongle non décollé ou atteint dans son intégralité), gratter la surface de l'ongle grâce à la curette ou au vaccinostyle Recherche de dermatophytes au niveau du cuir chevelu (teigne) Arrêt de tout traitement anti-mycosique depuis au moins 21 jours PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 21/79

23 Noter le type de fluorescence si une lumière de Wood est disponible lors du prélèvement Prélèvement de quelques cheveux à la pince stérile en périphérie de la lésion alopéciante (utiliser des ciseaux pour ne conserver que la racine du cheveu) + Prélèvement à la curette ou au vaccinostyle par grattage en périphérie des lésions suspectes. Recueillir les squames et les cheveux dans une boite de Pétri stérile (prendre soin de bien la fermer) Test de Graham (recherche d'oxyures par scotch test) Cf annexe «Préconisations patients» Recherche de Demodex folliculorum Les demodex sont à la base des cils (blépharite) Arracher quelques cils et les recueillir dans une boite de Pétri stérile Recherche de gale (Sarcoptes scabiei) Rechercher la notion d'un prurit souvent très intense et à recrudescence nocturne, symptomatologie identique dans l'entourage Rechercher les lésions : au niveau de localisations évocatrices (zones de peau fine) : espaces interdigitaux, face antérieure des poignets, coude, aisselles, pli fessier, ombilic, mamelons... les lésions sont souvent très polymorphes : papules, vésicules, pustules, «sillon» caractéristique mais rare Prélever la sérosité après ouverture des sillons et vésicules cutanés et raclage (scratching-test). Déposer cette sérosité sur une lame et recouvrir d'une lamelle. Faire parvenir rapidement au site technique Recherche de Pytiriasis versicolor par scotch-test Prélever des squames cutanées à l'aide d'un scotch adhésif transparent au niveau des lésions hypo ou hyper-pigmentées. Coller le scotch sur une lame et la faire parvenir au site technique Recherche d Herpès virus : Repérer les lésions vésiculaires, percer les vésicules et gratter le fond à l'aide d'un écouvillon. Faire 2 étalements circulaires (1cm de diamètre) sur 2 lames avec le même écouvillon. PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 22/79

24 Il est possible de fixer les lames à l'acétone S il n y a pas de lésion, la recherche peut s effectuer au niveau de l endocol. Si recherche par PCR : décharger l' écouvillon sur milieu M4RT fourni par Cerba. 3.5 Les prélèvements dans le cadre d'un bilan hématologique Fait par un médecin biologiste, sur rendez-vous Les indications du prélèvement ainsi que le contexte clinico-biologique doivent être mentionnées sur l'ordonnance Les analyses complémentaires éventuelles doivent être précisées (immunophénotypage, biologie moléculaire, cytogénétique, culture des progéniteurs...) Myélogramme Le descriptif du geste est consultable en ligne : lien (SFH 2003) vers : Guide_Bonnes_Pratiques des ponctions médullaires Biopsie ostéo-médullaire Lien vers procédure SFH : Réalisation d'une biopsie ostéo-médullaire Ponction ganglionnaire Matériel nécessaire : aiguille fine, seringue de 5 ou 10 cc, compresses stériles, désinfectants (type Bétadine), sérum physiologique ou alcool 70 Préparer une seringue (sans aiguille) remplie d'air Aseptiser soigneusement la peau (compresse stérile imbibée de Bétadine) Maintenir le ganglion suspect entre deux doigts Faire pénétrer une aiguille fine dans le ganglion en la tournant doucement pour bien «carotter» le prélèvement. Récupérer l'aiguille, la monter sur la seringue Chasser l'air de la seringue pour projeter le prélèvement sur une lame Étaler le prélèvement pour obtenir un frottis grâce à une deuxième lame Recommencer la manœuvre afin de disposer de 2 3 lames analysables Comprimer si besoin, nettoyer la peau au sérum physiologique ou à l'alcool 70 PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 23/79

25 3.6 Frottis cervico-vaginal Généralités A Salle de prélèvement bactériologique Elle est verrouillable et garantit une isolation phonique et visuelle. Il y règne une propreté rigoureuse des locaux et ustensiles (poubelles spécifiques pour déchets et papiers jetables). B Responsabilités Les prélèvements peuvent être réalisés par un médecin ou un biologiste habilité. C Matériel utilisé gants à usage unique : LE PORT DES GANTS EST OBLIGATOIRE spéculum stérile en plastique à usage unique brosse à usage unique et milieu de conservation (ThinPrep PAP test) la feuille de renseignements doit être complétée au moment du prélèvement Déroulement Installer la patiente en position gynécologique Ne pas prélever lors de la période menstruelle En cas de difficultés à visualiser le col, réintroduire le spéculum en demandant à la patiente de placer ses poings serrés sous ses fesses. A Frottis en milieu liquide : utiliser la brosse prévue à cet effet introduire les soies centrales de la brosse dans l'orifice de l'endocol assez profondément pour que les soies les plus courtes soient en contact avec le col. Faire tourner la brosse plusieurs fois dans le sens des aiguilles d'une montre Rincer la brosse dans le flacon de solution de conservation en poussant la brosse plusieurs fois au fond du flacon. Pour finir, tourner vigoureusement la brosse pour libérer ce qui reste de substance. Ne pas laisser la tête de la brosse dans le flacon. Identifier le prélèvement. B Frottis sur lame : Faire 3 lames à l'aide d'une spatule de Ayre et d'un écouvillon : 1 lame en prélèvement au niveau du vagin (avec spatule) 1 lame en prélèvement au niveau de l'exocol (avec spatule), à la jonction endo - exocol 1 lame en prélèvement au niveau de l'endocol (avec écouvillon) PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 24/79

26 Laisser sécher les lames à plat; les identifier (nom et localisation) Fixer ensuite rapidement avec le fixateur adéquat. 3.7 Test de Hühner Le prélèvement se fait sur rendez-vous au niveau d'un site analytique S'assurer du bon respect des préconisations (cf «préconisations patients») Installer la patiente en position gynécologique Après pose d'un spéculum, mise à jour du col utérin et nettoyage de l'exocol si besoin à l'écouvillon. Apprécier le degré d'ouverture du col et l'abondance de la glaire (de 0 à +++) Introduire un cathéter adapté de type Aspiglaire dans l'endocol. Aspirer doucement la glaire : la dépression ne doit être ni trop forte (risque de saignement ou de mélange de la glaire de l'endocol et de l'exocol) ni trop faible (absence d'aspiration de la glaire qui est un milieu très visqueux) Un prélèvement au niveau de l'exocol et du vagin permet une interprétation dynamique de la progression des spermatozoïdes, notamment lorsque ceux-ci ne sont pas retrouvés au niveau de l'endocol. Le transport de la glaire doit être rapide pour ne pas retarder l'examen microscopique qui doit être immédiat. 4 Conservation et transport des échantillons Les conditions de conservation sont un maillon essentiel de la qualité des résultats. Nous vous demandons de prendre toutes les précautions utiles, par ex : ne pas déposer les coffrets près de la bouche de chauffage ou de climatisation de votre véhicule, sur le tableau de bord, Il est également recommandé de stocker dans le véhicule le minimum de coffrets non-utilisés afin d éviter d éventuels chocs thermiques préjudiciables à la bonne conservation des anticoagulants contenus dans les tubes. - Délai et stockage des échantillons, délais pour prescrire analyse supplémentaire, répétition des analyses en raison d'une défaillance analytique ou des analyses complémentaires du même échantillon primaire : Annexe "Conservation des échantillons biologiques" Certaines analyses nécessitent une centrifugation rapide : cf catalogue Medibio et BPR et PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 25/79

27 5 Catalogue des principales analyses Medibio Pour les analyses les plus courantes, se référer à la fiche couleurs de tubes ( 3.1.3) Lien : Catalogue des analyses Medibio et BPR 6 Conduite à tenir en cas d'incident de prélèvement ou d'accident d'exposition au sang en cas d hématome important, de tentatives multiples ou de douleur sur le trajet nerveux : rassurer le patient, appliquer un traitement local d appoint, ou un pansement alcoolisé, changer de préleveur si nécessaire lui proposer de nous recontacter à terme pour contrôler l évolution ne pas hésiter à faire intervenir un biologiste renseigner l informatique au niveau des renseignements cliniques avec la mention : «prélèvement difficile» renseigner l informatique avec le code «COM» (texte libre non éditable) en cas de malaise : surélever les jambes du patient le stimuler lui proposer à boire, un sucre +/- avec de l alcool de menthe renseigner l informatique En cas d'accident d'exposition au sang (AES) : cf page suivante PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 26/79

28 7 Intérêt clinique des examens de routine Lien vers le site : PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 27/79

29 8 Annexes 8.1 Annexe : Liste des analyses à conditions particulières (SFBC 2011) LISTE DES ANALYSES NÉCESSITANT D'ÊTRE À JEUN (minimum 8h, 1 verre d'eau) ACIDES GRAS HELIKIT (ne pas boire ni fumer) APOLIPOPROTÉINES A1 ET B HOMOCYSTÉINE BILAN LIPIDIQUE (Cholestérol, LDL, NORDIN (index de) : avec ou sans Triglycérides) hydroxyproline CROSS-LAPS sérum et urines CTX NTX (TELOPEPTIDES N-Terminal collagène EAU LIBRE : clairance I) : urines FER SATURATION TAUX DE REABSORPTION TUBULAIRE DU PHOSPHORE GASTRINE (10 h de jeûne minimum) TESTOSTERONE BIODISPONIBLE GLUCOSE A JEUN XYLOSE Analyses nécessitant un horaire particulier (rythme nycthéméral) ACTH le matin, à jeun, non stressé +/- 16 et 24h. A congeler dans l heure. Aldostérone Le matin Corticostérone, Composé S (11- Le matin entre 7 et 10h désoxycortisol), 21-désoxycortisol, DOC (11- désoxycorticostérone) Cortisol (Composé F) Cross-laps Cycle glycémique C-peptide Insuline 17-hydroxy Pregnénolone et Pregnénolone Sulfate Prolactine PTH (parathormone) Rythme nycthéméral : prélever à 8h (taux maximal), à 16-17h (taux minimal) ou 24h Le matin avant 9h toujours à la même heure (taux maximal la nuit) à jeûn Bien respecter les heures du cycle Le matin entre 7 et 10h (taux maximal) Entre 8 et 12 heures à jeun et après un repos de 20 minutes, en première partie de cycle chez la femme Prélèvement le matin Pyridinoline et désoxypyridinoline urinaires Maximum le soir ou la nuit : 2 ème urines du matin (toujours à la même heure) Rénine-Aldostérone Le matin entre 7 et 10h position : PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 28/79

30 Analyses nécessitant un horaire particulier (rythme nycthéméral) position debout : après 1h de déambulation position couchée : après 1 h minimum de repos, allongé en salle de prélèvement régime normosodé Noter traitements (antihypertenseurs-spironolactone) si impossible de les arrêter Sulfate de DHA, Déhydroépiandrostérone (DHEA) Le matin T3, T4, TSH Le matin Analyses nécessitant un régime alimentaire particulier Aldostérone (sang et urines) Ammoniémie CATHÉCHOLAMINES ET DÉRIVÉS METHOXYLES: Cathécholamines et dérivés méthoxylés (plasma ou urines) Ac.homovanilique (HVA) (urines), Ac. Vanylmandélique (VMA) (urines) Régime normosodé ( mmol/24h de natriurèse) Ne pas fumer dans les 6 heures précédant le prélèvement Éviter dans les 48 heures avant le prélèvement et pendant la période de recueil des urines de 24h, la consommation de banane, vanille, thé, café, chocolat surtout agrumes, tomates Sérotonine et Ac. 5-hydroxy indol acétique (5HIA)(plasma et urine Éviter dans les 48 heures précédant le dosage la consommation de banane, chocolat, fruits secs, agrumes, avocat, tomate, prune, kiwi, ananas, mollusques Autres analyses à conditions particulières PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 29/79

31 Catégories d'analyses Conditions de prélèvement Renseignements à obtenir Bactériologie, mycologie, parasitologie à distance de toute thérapeutique antibiotique (48 heures) ou antifongique (21 jours pour les ongles et cheveux, 7 jours pour la peau) fiche de renseignements remplie par le patient (recueil à domicile) fiche de renseignements annotée par le préleveur (prélèvement au laboratoire) Hémoculture Au moment du pic thermique fiche de renseignements à remplir Prélèvements génitaux Scotch test ni toilette, ni rapport sexuel Fiche de renseignements à dans les 24 heures précédentes, remplir éviter la période des règles Le matin au réveil sans être allé à la selle Spermoculture Test de HUHNER De préférence au laboratoire et impérativement si spermogramme associé Au moment du pic ovulatoire ou selon prescription Fiche de renseignements remplie par le patient Date des dernières règles, thérapeutique en cours, heure du rapport, fiche de renseignements à remplir par le préleveur PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 30/79

32 Catégories d'analyses Conditions de prélèvement Renseignements à obtenir Agglutinines irrégulières Coagulation, Hémostase COCKROFT (clairance estimée de la créatinine) HBPM (Fraxiparine, Lovenox, Fragmine, Clivarine, Innohep, Fraxodi ) si dosage Héparinémie ou anti-xa : Prélèvement 4 à 5 heures après l'injection Protéine C, S : à distance d un traitement par AVK (sauf prescription contraire) ou 1 mois après arrêt du traitement AVK AT III : à distance d un traitement par héparine ou d'une prise d'oestrogènes (1 mois) Anticoagulant circulant (ne pas faire chez patient en cours de traitement à l'héparine) Temps de saignement pas de prise d'anti-agrégants plaquettaires depuis 7 à 10 jours sauf sur prescription explicite Préciser la date d'une éventuelle injection d'anti-d (Rophylac ) Traitement anti-coagulant en cours Antécédents (thrombose, hémorragies) Traitement éventuel Age, sexe, poids Drogues : A faire impérativement au laboratoire, protocole dépistage urinaire strict de recueil : s'assurer du recueil effectif au (amphétamines, laboratoire, couleur du recueil (pour éviter benzodiazépines, dilution par eau, vérifier éventuellement par barbituriques, mesure de la densité), température cannabis, cocaïne, morphine/opiacés, métamphétamines, ecstasy, méthadone, antidépresseurs tricycliques) Electrophorèse de l'hémoglobine Date, heure et lieu du recueil, traitement médicamenteux Age, origine ethnique, transfusions éventuelles Electrophorèse des protéines A distance des produits de contrastes iodés : pic migrant en alpha, bêta ou gamma Les traitements antibiotiques peuvent donner une fausse bisalbumine PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 31/79

33 Catégories d'analyses Glucose-6- phosphate déshydrogénase (G6PD) et Pyruvate Kinase Conditions de prélèvement Ne pas réaliser après une transfusion sanguine (intervalle : 3 semaines) Renseignements à obtenir Groupe sanguin Nécessité de deux déterminations sur deux prélèvements distincts pour délivrer une carte de groupe sanguin Sexe, date de naissance, nom de naissance, nom marital, prénom Hormonologie de la reproduction (FSH, LH, ESTRADIOL, PROGESTERON E, PROLACTINE, BHCG, analyses spécialisées) Médicaments : Digoxine, Phénytoïne(Di- Hydan ), Carbamazépine(T égrétol ), Phénobarbital, Théophylline, Ac.valproique (Dépakine ) Dosage en phase résiduelle : juste avant une nouvelle prise Date des dernières règles, fiche de renseignements annotée par le préleveur Posologie, date et heure de la dernière prise, fiche de renseignements annotée par le préleveur Antibiotiques : Vancomycine et aminosides :Amikacine (Amiklin ), Gentamycine (Gentalline ), Nétilmycine (Nétromicine ), Tobramycine (Nebcine Tobrex ) Dosage en phase résiduelle : 30min avant une nouvelle injection au moment du pic sérique : 30min après la fin d'une injection de 30min Posologie, date et heure de la dernière injection, fiche de renseignements annotée par le préleveur Notion d'insuffisance rénale Test au LHRH Du 2 ème au 5 ème jour du cycle Absence de traitement œstroprogestatif depuis 1 mois PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 32/79

34 Catégories d'analyses Trisomie 21 : dépistage au 2 ème trimestre Conditions de prélèvement De la 15ème semaine d'aménorrhée à la 18ème semaine d'aménorrhée (soit 14SA révolues à 17SA+6jours) Renseignements à obtenir Attestation du médecin complétée : date de naissance, date de la grossesse, poids, tabagisme, gémellité, date du prélèvement, renseignements échographiques, nom et adresse du médecin prescripteur, + Consentement éclairé signé Trisomie 21 : De la 111S+0jours à 13S+6jours d aménorrhée dépistage au 1 er trimestre Typage HLA Uniquement dans le cadre de l association HLA- Maladies Prélèvements particuliers ou délicats : guide BPR ou CERBA Numéro de réseau périnatalité Attestation du médecin complétée : date de naissance, date de la grossesse, poids, tabagisme, gémellité, date du prélèvement, renseignements échographiques, nom et adresse du médecin prescripteur + Consentement éclairé signé Consentement éclairé PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 33/79

35 *** Congélation Bleu clair : centrifugation rapide à +4 C Analyses spécialisées nécessitant un traitement pré-analytique particulier ACTH*** Réaliser les prélèvements sur tubes EDTA réfrigérés Centrifugation immédiate à +4 C(si impossible, placer l'échantillon dans la glace immédiatement après le prélèvement) Congélation rapide*** Ammoniémie*** Calcitonine Charges virales HIV, HCV, HBV Réaliser les prélèvements sur tubes EDTA Centrifugation immédiate(si impossible, placer l'échantillon dans la glace immédiatement après le prélèvement) à +4 C Congélation rapide*** Centrifugation à +4 C après formation du caillot Prélever 2 tubes EDTA par charge virale avec au moins 2ml dans chaque tube Faire parvenir à BPR dans la journée Coagulation spécialisée*** (Facteurs, Willebrand, RPCA, AT3, Prot C et S) Centrifuger 15 mn à 2500 g - Décanter puis re-centrifuger 15 mn à 2500 g Décanter et préparer 2 aliquots de 2 ml dans 2 tubes Congeler rapidement*** Gastrine HLA27 Immunophénotypage lymphocytaire Numération CD4/CD8 Centrifugation à +4 C après formation du caillot Prélever le plus proche possible de l'heure d'expédition du prélèvement Transmettre les renseignements cliniques ainsi que la numération leucocytaire, le nombre total de globules blancs et de lymphocytes (en valeur absolue), L'échantillon doit parvenir au laboratoire dans les 30 heures qui suivent le prélèvement (du lundi au jeudi matin), Urines : Sérotonine, 5HIA, Adrénaline et NorA., Métanéphrine et Normétanéphrine Mutations des gènes F II, V, BCR- ABL, de l'hémochromatose Envoyer l'échantillon stabilisé à ph = 2 Pour les urines de 24 heures : Stabiliser le recueil en ajoutant ml de 6N HCl puis aliquoter un échantillon de 4 ml pour envoi, Prélever sur tube EDTA et l'envoyer à 4 C sous 24h. Homocystéine Acide lactique Calcium ionisé*** Centrifuger immédiatement ou Conserver les échantillons sur de la glace Si possible, ne pas utiliser de garrot lors du prélèvement. Centrifuger dans les 15 minutes qui suivent le prélèvement. Centrifugation immédiate sans ouvrir le tube, transvaser plasma dans deuxième tube sec vacutainer en utilisant aiguille longue Congélation rapide *** Magnésium érythrocytaire ou globulaire Utiliser un tube sans gel. Centrifuger après prélèvement ; Décanter en rejetant le plasma; Conserver que le culot globulaire à température ambiante. NSE*** Centrifugation dans l'heure qui suit le prélèvement. Congélation rapide*** PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 34/79

36 8.2 Annexe Consentements «Consentement en vue d'un examen» CONSENTEMENT EN VUE D UN EXAMEN DES CARACTERISTIQUES GENETIQUES (décret n du 23 juin 2000) Je soussigné(e) M Né(e) le.. à.. Demeurant à :.. Reconnais avoir été informé(e) par le Dr sur les examens des caractéristiques génétiques qui seront réalisés à partir du sang qui m a été prélevé, dans le but de confirmer ou infirmer le diagnostic de maladie génétique. Je donne mon consentement pour ce prélèvement et je reconnais avoir reçu l ensemble des informations conformément aux articles R et R du code de la Santé Publique permettant la compréhension de cet acte biologique et sa finalité. Fait à.le (SIGNATURE) CONTACT : Dr Frank MENTZ f.mentz@labm-medibio.fr Dr Benoît CUILLERIER b.cuillerier@labm-medibio.fr MEDIBIO Laboratoire d Analyses de Biologie Médicale, 5 bd du Chinchon Montargis Tél. : Fax. : medibio@labm-medibio.fr PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 35/79

37 8.2.2 Dépistage sanguin du risque accru de trisomie 21 fœtale PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 36/79

38 PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 37/79

39 8.3 Annexe : liste des principales interférences et variations physiopathologiques Pour toutes les analyses spécialisées, se reporter au(x) guide(s) fournis par le(s) laboratoire(s) spécialisé(s). Document non exhaustif. Analyses demandées Interférences médicamenteuses Interférences alimentaires Autres facteurs physiopathologiques (effort physique, grossesses, pathologies, ) ACE Pathologies bénignes digestives (cirrhose) et pulmonaires, tabagisme, I.rénale chronique : Acide homovanilique Acide vanylmandéliq ue (VMA) Banane, vanille, thé, café, chocolat : Acide urique Diurétiques qui modifient l excrétion urinaire de l acide urique et anticancéreux : Hypo-uricémiants, Alphaméthyldopa, déféroxamine, dobésilate de calcium, vitamine C : Régimes hyperprotidiques et hypercaloriques, et après ingestion d alcool : Période de jeûne prolongé : En cas de fièvre : Pendant l été : (5 à 7 % plus élevé que l hiver) Pendant phase folliculaire : 5 premiers mois de la grossesse : Fumeurs : Corrélation positive avec le poids chez les adultes (nette surtout pour les poids > 80 kg) Aldostérone Alpha foetoproteine (AFP) Régime normosodé Rythme nycthéméral, concentration maximale le matin Au cours de la grossesse : - à partir de la 12 ème semaine de gestation. dans le sang maternel les variations sont fonction de différentes situations normales ou pathologiques : le poids de la parturiente la présence d un ou plusieurs fœtus les troubles rénaux du fœtus et/ou la présence de malformations fœtales Les taux sont très élevés à la naissance et dans les premiers mois, en particulier chez le prématuré, puis diminuent progressivement pour atteindre les valeurs de l adulte vers l âge de 8 mois. PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 38/79

40 Analyses demandées Interférences médicamenteuses Interférences alimentaires Autres facteurs physiopathologiques (effort physique, grossesses, pathologies, ) Amylase Aspirine, diurétiques, corticostéroïdes, contraceptifs oraux, indométacine et dérivés morphiniques... : Défaut d élimination rénale : Remarque : La salive et la sueur étant particulièrement riches en amylase attention à toute contamination, du prélèvement ou des réactifs Antithrombine Oestrogènes : 2 microglobuline Transplantations rénales ou hépatiques : des taux sériques. Grossesse et pré-éclampsies : Exercice physique intense : des taux urinaires. Bilirubine De nombreux médicaments ou leur métabolites peuvent induire une interférence analytique Jeûne : Remarque : Eviter la stase veineuse et très grande sensibilité de la bilirubine à la photo oxydation par la lumière (oxydation température dépendante) Calcium Traitements au long cours par les diurétiques thiazidiques : Jeûne : Exercice physique intense : Patient debout : du calcium total Grossesse : Remarque : Eviter la stase veineuse et l utilisation de gants talqués Cholestérol Anticoagulant : Alimentation : nécessité d un jeûne strict de 12 heures avant toute détermination Alcool : Obésité : Grossesse : surtout dans les dernières semaines Cycle menstruel : Variation Stress : Fumeurs : Cortisol Traitements oestrogéniques : Corticothérapie : Jeûne prolongé : Remarque : Sevrage alcoolique chez les éthyliques, une semaine avant les dosages Grossesse : Fumeurs : Stress : Insuffisance hépatique sévère : Cycle nycthéméral : maximum à 8h PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 39/79

41 Analyses demandées Interférences médicamenteuses Interférences alimentaires Autres facteurs physiopathologiques (effort physique, grossesses, pathologies, ) Créatinine Créatine Kinase (CK) D-Dimères Salicylés, certains diurétiques, acides ascorbique : Antiépileptiques :. Médicaments administrés en intramusculaire : (pouvant être importante en cas d injections répétées) Certains traitements hypocholestérolémiants : Thrombolytiques Jeûne et régime végétarien : Régimes riches en protides : Effort physique intense : Anorexies mentales : Fumeurs : Cycle nycthéméral : maximum à 8h et 16h Grossesse et chez le sujet alité : Exercice physique intense : Couleur de peau Noire : Digoxine Electrophorèse des protéines Vérapamil,quinidi ne, -bloquants, amiodarone, antiac., charbon activé, hydroxydes d aluminium, cholestyramine, salazopyrine, phénobarbital, phénytoïne, diurétiques hypokaliémiants, laxatifs, insuline, glucocorticoïdes, amphotéricine B, sels de calcium : ou selon les cas Régimes végétariens : à court terme, (à long terme, sans effet). Grossesse : de la clairance. Insuffisance rénale : de la ½ vie Troubles thyroïdiens : des concentrations plasmatiques chez les hypothyroïdiens. Malabsorptions intestinales : de la biodisponibilité des digitaliques. Insuffisance cardiaque : de l élimination. Grossesse : Exercices physiques prolongés : Patient debout : Remarque : Eviter la stase veineuse Estradiol Estrogènes : Examen bactério, parasito et mycologique A effectuer à distance d'un traitement antibactérien ou fungique PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 40/79

42 Analyses demandées Interférences médicamenteuses Interférences alimentaires Autres facteurs physiopathologiques (effort physique, grossesses, pathologies, ) Fer Fibrinogène Contraception orale (progestérone) : Vitamine C : l'absorption Traitement par desferrioxamine: Fer complexé non mesurable Thrombolytiques : Aliments enrichis en fer et vitamines : Régime végétarien : Grossesse : sous l effet de la progestérone ou par déficit en fer. Cycle nycthéméral : maximum le matin. Cycle menstruel : minimale après la menstruation Insuffisance hépato-cellulaire et CIVD (coagulation intra-vasculaire disséminée) : Grossesse : Syndromes inflammatoires et néphrotiques : Patients VIH séro-positifs et VIH : Stress : Gamma Glutamyl Transferase (GT) Antiépileptiques (phenobarbital, phenytoine), certains hypolipémiants, contraceptifs oraux, antidepresseurs :. L alcool surtout en ingestion chronique : Gaz du sang Bronchodilatateurs, diurétiques barbituriques, oxygénothérapie, modifient les paramètres respiratoires. Repas : Alcalose post-prandiale Exercice physique: du ph artériel et de la PCO 2 Altitude : Fumeurs : de la PO 2 Glucose Corticoïdes : Alimentation : nécessité d un jeûne strict de 8 heures avant toute détermination L alcool (ingestion chronique), la caféine : Cigarette avant la prise de sang, exercice physique, stress :. PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 41/79

43 Analyses demandées Interférences médicamenteuses Interférences alimentaires Autres facteurs physiopathologiques (effort physique, grossesses, pathologies, ) HDL Oestrogènes (pilule oestroprogestative, traitement substitutif de la ménopause), corticothérapie: Progestatifs (type norstéroïdes androgéniques) : Alcool : de la fraction HDL3 Exercice physique : Grossesse : modification des HDL Tabac, Obésité : Hémoglobine Glyquée Acide acétylsalicylique, dérivés de l éthanol : Patients non diabétiques en état d insuffisance rénale : Hors technique HPLC : attention aux hémoglobinopathies Hydroxyprolinurie viande, gelée, gélatine dans les 48 heures précédant le dosage : LDH Exercice physique :. Grossesse : au cours du 3 ème trimestre Magnésium Alimentations parentérales prolongées :. Remarque : Eviter la stase veineuse Cas de stress chronique : Métanéphrines Traitement par bêta bloquants Chocolat, banane, agrumes, thé, café : PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 42/79

44 Analyses demandées Interférences médicamenteuses Interférences alimentaires Autres facteurs physiopathologiques (effort physique, grossesses, pathologies, ) Numération Formule Sanguine Anémies, thrombopénies, ou agranulocytoses immunoallergiques ou toxiques : Antimitotiques, antibiotiques, antiviraux, diurétiques, antalgiques, antiinflammatoires, sels d or, antithyroïdiens, anticonvulsivants, antiulcéreux, psychotropes, antidiabétiques, héparine, etc Hyperéosinophilie iatrogène: Certains antibiotiques, antifongiques, psychotropes, antiépileptiques, antidiabétiques oraux, cytotoxiques, produits iodés, antiinflammatoires, héparine, etc : Grossesse : de l hémoglobine, et de la leucocytose avec polynucléose au cours du 3 ème trimestre. Altitude : de l hémoglobine et du nombre de globules rouges circulants Exercice physique intense : du nombre des globules rouges, de globules blancs et du taux de l hémoglobine. Stress, exposition au froid, tachycardie paroxystique, exposition au soleil et aux rayons UV : de la leucocytose Origine : Neutropénie modérée chez les noirs d Afrique, des Caraïbes et chez les juifs yéménites et polyglobulie microcytaire observée chez les populations originaires du pourtour méditerranéen Fumeurs : de l hémoglobine, du VGM et hyperagrégabilité plaquettaire et de la leucocytose avec polynucléose. Ethylisme chronique : du VGM Cycle nycthéméral : Hémoglobine diminue l après-midi Anémies macrocytaires : Antifoliques, analogues puriques ou pyrimidyques : Ph. Alcalines Oestrogènes et les hypolipémiants : Anticoagulants oraux, antiépileptiques : Malnutrition : Grossesse : chez la femme enceinte à partir de la 20ème semaine. Enfants en période de croissance : Obésité : (surtout chez les femmes en surpoids) PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 43/79

45 Analyses demandées Interférences médicamenteuses Interférences alimentaires Autres facteurs physiopathologiques (effort physique, grossesses, pathologies, ) Porphyrines fécales Consommation de légumes verts et de viande rouge saignante dans les 72 h précédent le dosage : Potassium Antiinflammatoires non stéroidiens, bêta-bloquants : variations chez certains patients Consommation excessive de fruits, de réglisse : Exercices physiques prolongés : Exposition prolongée à la chaleur : Pose du garrot trop longue : Antiprolactine : Prolactine Certains antidépresseurs, anxiolytiques et antiémétiques type Primpéran : En post-prandial : Stress : De nombreux médicaments modifient le taux de prolactine Protéine C Hypocoagulants oraux de type antivitamines K : Protéine S Hypocoagulants oraux de type antivitamines K, Oestrogènes : Protéines totales Régimes végétariens : à court terme, (mais à long terme, ils sont sans effet). Malnutrition : Baisse globale des protides sanguins. Grossesse : Exercices physiques prolongés : Patient debout : Remarque : Eviter la stase veineuse PSA et PSA Libre Manipulations prostatiques : Recherche de sang dans les selles Éviter le prélèvement lors des épisodes de constipation sanglante, hémorroïdes, règles... PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 44/79

46 Analyses demandées Interférences médicamenteuses Interférences alimentaires Autres facteurs physiopathologiques (effort physique, grossesses, pathologies, ) Sérotonine Banane, chocolat, fruits secs, agrumes, avocat, tomate dans les 48 h précédent le dosage : Sodium Corticoïdes au long cours : Diurétiques thiazidiques : Influence d un régime hypersodé ou au contraire d un régime désodé prolongé. TCA AVK, hirudine (ou ses dérivés), thrombolytique, antifibrinolytiques, antithrombotiques mélagatran / ximélagatran : Allongement du TCA Syndrome inflammatoire, grossesse, taux élevé de facteur VIII et chez certains patients ayant une résistance à la protéine C activée : TCA mesuré peut être plus court que celui du témoin normal Déficit constitutionnel ou acquis en facteurs VIII, IX, XI, XII, et dans une moindre mesure en facteurs II, V, X et/ou en fibrinogène ; en cas d insuffisance hépatocellulaire ou de CIVD (coagulation intravasculaire disséminée), en cas de présence d anti-viii ou anti-ix et en cas de carence en vitamine K : Allongement du TCA Temps de saignement Aspirine, anti agrégants plaquettaires : Temps de Thrombine Antithrombines type hirudine, antithrombotiques (mélagatran / ximélagatran) ; traitements fibrinolytiques: Allongement du temps de thrombine Insuffisance hépato-cellulaire ou de CIVD (coagulation intra-vasculaire disséminée) : Allongement du temps de thrombine Hypofibrinogénémies (dans lesquelles le fibrinogène fonctionnel et le fibrinogène antigène sont abaissés dans les mêmes proportions) et dysfibrinogénémies (dans lesquelles le taux de fibrinogène fonctionnel est abaissé tandis que le taux de fibrinogène antigène est normal) : Allongement du temps de thrombine Présence d héparine non fractionnée, de taux significativement élevés de produits de dégradation de la fibrine : Allongement du temps de thrombine PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 45/79

47 Analyses demandées Interférences médicamenteuses Interférences alimentaires Autres facteurs physiopathologiques (effort physique, grossesses, pathologies, ) TP De nombreux médicaments sont susceptibles d interférer dans le métabolisme des AVK et de potentialiser ou réduire l effet anticoagulant des AVK (se référer au dictionnaire Vidal ) ; ces interférences peuvent conduire à des variations de l INR. Choux, choux-fleurs, brocolis, foie de porc, volaille, alcool, et vin : A éviter pendant le traitement Déficit constitutionnel ou acquis en facteurs II, V, VII, X et/ou en fibrinogène ; en cas d insuffisance hépato-cellulaire ou de CIVD (coagulation intra-vasculaire disséminée) et en cas de carence en vitamine K : Abaissement du taux de prothrombine. Antithrombines type hirudine, antithrombotiques (mélagatran / ximélagatran) : Abaissement du taux de prothrombine. Transaminases : (ASAT - ALAT) Antiépileptiques, hypolipémiants, contraceptifs oraux, Roaccutane :. L alcool en ingestion chronique : Grossesse : Déficit en vitamine B6, patients dialysés : Exercice physique : (surtout d ASAT). TRIGLYCERI DES Traitements antihypertenseurs, contraceptifs oraux (oestroprogestatifs fortement dosés en œstrogènes) ; glucocorticoïdes, la cyclosporine chez les patients transplantés : Alimentation : nécessité d un jeûne strict de 12 heures avant toute détermination Alimentation riche en glucides à absorption rapide, alimentation riche en graisse saturée, boissons alcoolisées :. Utilisation d huile avec des acides gras mono ou polyinsaturés : Grossesse : Obésité : Fumeurs : Alcoolisme chronique : PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 46/79

48 Analyses demandées TSH Interférences médicamenteuses Corticothérapie : Abolition des pics nocturnes de TSH Dopamine : Amiodarone : Interférences alimentaires Autres facteurs physiopathologiques (effort physique, grossesses, pathologies, ) Grossesse : au 1 er trimestre Etats dépressifs : Abolition des pics nocturnes de TSH Insuffisance surrénalienne : Stress : T4 pouvant aller jusqu à 13% dans les 9 heures suivant la prise de lévothyrox Rythme nycthéméral, concentration maximale le matin UREE VS Références : Bioqualité Corticothérapie : L aspirine et les antiinflammatoires non stéroïdiens : Régime végétarien :. Régime hyperprotidique : Grossesse : Effort physique prolongé : Cas d hypercatabolisme protidique (jeûne, fièvre,...) : La vitesse de sédimentation est modérément accélérée en fin de grossesse et en période menstruelle La polyglobulie et la présence abondante de cryoglobulines : Empêchement de la sédimentation des hématies, quelle que soit la pathologie. L hypofibrinémie, l hypohaptoglobinémie et l agammaglobulinémie : Empêchement de la V.S. d augmenter L anémie : «L'exploration de la thyroïde» Cahier de formation Bioforma n 14 La période post-prandiale : 8.4 Annexe : Préconisations patients Objet et domaine d application Cette fiche d instruction décrit les conditions à respecter pour réaliser un prélèvement dans de bonnes conditions. Elle s applique aux prélèvements réalisés par le patient et dont la liste suit : CBU, BK, Chlamydiae, mycoplasmes urinaires, Pose d un urinocol ADDIS ou HLM Recueil des URINES DE 24 HEURES Cytologie urinaire PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 47/79

49 Recherche de Drogues urinaires Coproculture, examen parasitologique des selles, recherche de Clostridium difficile, adenovirus, rotavirus, recherche de sang dans les selles, scotch test Expectoration Spermogramme, spermoculture, test de huhner Helicobacter pylori Stéatorrhée, chimie des selles, examen fonctionnel de la digestion créatorrhée. Legionella pneumophila TRP ou taux de réabsorption du Phosphore Elastase Epreuves dynamiques Sans objet Définitions et abréviations Références Rémic 2010, Fiches de la phase pré-analytique : Responsabilités La responsabilité globale des préconisations à suivre appartient au patient. La personne présente à l'accueil est responsable de la vérification des conditions de recueil Descriptif PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 48/79

50 RECUEIL D'URINES POUR ECBU LABORATOIRES BIOPLUS MEDIBIO MEDI+ RENSEIGNEMENTS CLINIQUES : EXAMEN CYTOBACTERIOLOGIQUE URINAIRE Nom :. Prénom :.. Date de naissance : Etiquette Dr : Date :.. / / Heure : h. Contexte clinique : Fièvre Dialyse Grossesse(.. e mois) Sensation de brûlure Sonde urinaire Diabète Douleurs au niveau des reins ou du dos Urinocol Malformation urinaire Traitement antibiotique en cours : OUI NON Si oui lequel? depuis quand?... Renseignements divers :. PRECONISATIONS POUR LE PRELEVEMENT 1ères urines du matin ou si possible au moins 4h après miction o Se laver les mains. o Faire une toilette intime soigneuse (lingette désinfectante ou savon antiseptique). o Eliminer le premier jet dans les toilettes o Uriner ensuite dans le flacon stérile fourni par le laboratoire (sans toucher les parois ni l intérieur du couvercle) et le refermer soigneusement. Ne pas soulever l'opercule blanc. o Indiquer sur le flacon vos nom, prénom, date et heure d émission. o Le flacon doit être acheminé au laboratoire dans l heure qui suit. En cas d impossibilité, il peut être conservé 12h au réfrigérateur (+4 C). o Le recueil doit être fait à distance de toute thérapeutique antibiotique et l éventuel contrôle après traitement doit être fait au moins 48 heures après l arrêt du traitement. Si recherche de Chlamydiae ou de mycoplasmes est demandée, recueillir le premier jet dans un flacon distinct de celui utilisé pour le CBU Pour la recherche de BK dans les urines, recueillir un échantillon des premières urines du matin, 3 jours consécutifs. Recueil des urines par pose d un urinocol : o se laver les mains, mettre des gants et allonger l'enfant sur le dos o Nettoyer soigneusement le méat urinaire et le périnée à l'aide de lingettes désinfectantes (décalotter si possible le petit garçon). Rincer et sécher o appliquer soigneusement l urinocol afin qu il n y ait pas de fuite d urine possible o contrôler régulièrement : un urinocol resté en place 60 minutes doit être changé o toute contamination même légère par des selles rend l examen impraticable o détacher l'urinocol de la peau et et le fermer en rabattant la zone collante sur l'urinocol. o Introduire l urinocol refermé dans le flacon à CBU et acheminer le tout au laboratoire dans l heure PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 49/79

51 Recueil d urines pour compte d Addis Hématies Leucocytes par Minute (HLM) Intérêt : Cette analyse consiste à mesurer le débit des hématies et des leucocytes passant dans les urines. Ce recueil s effectue sur la totalité des urines émises en 3 heures. Préconisations pour le prélèvement : 3 heures avant le lever habituel : Vider la totalité de la vessie dans les toilettes. Boire un grand verre d eau. Noter l heure sur le flacon fourni par le laboratoire (T0) Se recoucher et rester allongé au repos pendant 3 heures. 3 heures après (le plus exactement possible): Uriner dans le flacon fourni par le laboratoire pour recueillir la totalité des urines. Identifier le flacon avec votre nom et prénom si cela n'a pas été fait par le laboratoire. Le flacon doit être acheminé au laboratoire le plus rapidement possible et au maximum dans un délai de 4 heures. Nb : Dans l'intervalle des trois heures, toutes les urines doivent être récupérées dans le flacon. PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 50/79

52 Recueil des URINES DE 24 HEURES Intérêt : Ce recueil permet l'analyse de certains paramètres de biochimie ou d hormonologie urinaire. Régimes alimentaires : pour sérotonine et 5HIA urinaires : éviter dans les 48 heures précédant le dosage la consommation de banane, chocolat, fruits secs, agrumes, avocat, tomate. Pour Hydroxyprolinurie : éviter dans les 48 heures précédant le dosage la consommation de viande, de gelée ou de gélatine. Pour Métanéphrines et catécholamines : régime alimentaire excluant chocolat, banane, agrume et comprenant une consommation modérée de thé et de café dans les 48 heures précédant le recueil. Le traitement par les bêta-bloquants peut interférer dans le dosage. Pour acide homovanilique (HVA) et acide vanyl-mandélique (VMA) : éviter dans les 48 heures précédant le dosage la consommation de banane, vanille, chocolat. Pour aldostérone urinaire : préciser le cas échéant, régime normosodé ou régime sans sel. Pour les autres paramètres : pas de régime particulier Préconisations pour le prélèvement : Au lever : Vider la totalité de la vessie dans les toilettes et noter l heure sur le flacon Pendant 24 heures : Recueillir la totalité des urines dans le flacon jusqu à l heure indiquée au départ y compris les dernières urines à l heure indiquée. Conserver le flacon bouché au frais à 4 C. Si le flacon s avère insuffisant, recueillir le surplus d urines dans un flacon propre (bouteille d eau minérale, par exemple). Identifier le(s) flacon(s) avec votre nom et prénom si cela n'a pas été fait par le laboratoire. La totalité des urines de 24 heures doit être acheminée au laboratoire le jour du recueil des dernières urines dans un délai maximal de 4 heures. PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 51/79

53 Recueil et fixation des urines pour étude cytologique Le recueil a lieu exclusivement au laboratoire. L échantillon à analyser doit être préalablement issu de la deuxième miction du matin, ou de la fin de la première miction en éliminant le premier jet, après avoir fait boire et marcher le patient 30 minutes à 1 heure auparavant. Ne jamais examiner les urines des 24 heures et les urines de la première miction. L échantillon doit être transmis immédiatement en technique. Questionnaire : (il est indispensable de remplir ce questionnaire et de le rapporter au laboratoire) NOM : PRENOM : Signes d'infection urinaire : brûlures, fièvre... OUI NON Présence de sang dans les urines OUI NON Traitement en cours (chimiothérapie, radiothérapie) OUI NON Antécédent de chirurgie de la prostate OUI NON Antécédent de chirurgie de la vessie OUI NON PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 52/79

54 Recueil des selles :Coproculture, Examen parasitologique des selles, Clostridium difficile, Adenovirus, Rotavirus. NOM : PRENOM : Intérêt : La coproculture et l examen parasitologique des selles ont pour objet de mettre en évidence l'agent responsable d'une diarrhée infectieuse.(bactérie, parasite, virus, ) Préconisations pour le prélèvement : Cet examen est à effectuer, si possible, lors des épisodes diarrhéiques et de préférence le matin. Il est préférable de faire cet examen à distance de tout traitement notamment antibiotique ou au moins 48 heures après l arrêt de la thérapeutique lors d un contrôle après traitement. Recueillir un échantillon de selles (au minimum de la taille d une noix) dans le flacon fourni par le laboratoire. Pour les nourrissons, éviter de transmettre la couche et, en cas de diarrhée, poser un urinocol afin d éviter toute contamination par les urines. Identifier le flacon avec votre nom et prénom ainsi que cette fiche si cela n'a pas été fait par le laboratoire. Le flacon doit être acheminé au laboratoire dans les deux heures. Questionnaire : (il est indispensable de remplir ce questionnaire et de le rapporter au laboratoire) Notion d un voyage récent à l étranger OUI NON Si OUI date : et lieu : Douleurs abdominales, diarrhées OUI NON Fièvre OUI NON Contrôle après traitement OUI NON Antibiotique en cours OUI NON Contrôle dans le cadre de la Médecine du travail OUI NON Notion de contamination alimentaire (repas pris en collectivité, etc ) OUI NON Antécédents parasitaires connus OUI NON PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 53/79

55 Scotch test Intérêt : Ce test permet de mettre en évidence les œufs d Oxyures (vers intestinaux), très fréquents chez les enfants et très contagieux, entraînant des démangeaisons et troubles du sommeil. Préconisations pour le prélèvement : A effectuer au lever AVANT la toilette et les premières selles. Utiliser le matériel fourni par le laboratoire : lames et scotch transparent. Appliquer le coté adhésif sur les plis de la marge anale et le maintenir en appuyant quelques secondes. Appliquer le morceau de scotch sur la lame en verre Renouveler l opération avec une seconde lame Replacer les 2 lames dans l étui. Identifier l'étui avec votre nom et prénom si cela n'a pas été fait par le laboratoire. Transmettre l étui au laboratoire. Recherche de sang dans les selles Régime alimentaire : Pas de régime alimentaire particulier Contextes particuliers : Ne pas faire le test en cas d'hémorroïdes sanglantes, de constipation sanglante, de règles ou de sang dans les urines. Attendre la fin des saignements avant de réaliser l'examen Préconisations : Identifier les flacons à l aide du nom et du prénom si cela n a pas été fait par le secrétariat du laboratoire Recueillir les selles dans les flacons fournis par le laboratoire Garder à température ambiante et transmettre au laboratoire dans les 2 heures. Ou garder au réfrigérateur et transmettre au laboratoire dans les 8 heures. PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 54/79

56 Recueil de sperme NOM : PRENOM : NOM DE LA PARTENAIRE : Intérêt : Ce prélèvement permet l'étude de tous les paramètres du sperme. Il est effectué sur rendezvous impérativement au laboratoire aux horaires qui vous auront été indiqués ou exceptionnellement au domicile du patient (dans le cas de contrôle de vasectomie par exemple). Matériel : réceptacle pour spermogramme à l exclusion de tout autre dispositif y compris pour les recueils exceptionnels au domicile du patient. Préconisations pour le prélèvement : Le prélèvement doit être effectué après une abstinence sexuelle de 3 à 5 jours. Ne pas utiliser de préservatif si le prélèvement a lieu au domicile. Videz votre vessie Effectuez un lavage soigneux des mains au savon liquide. Se laver très soigneusement le gland avec les mains et le savon liquide ou avec une lingette désinfectante remise par le laboratoire. Recueillir la totalité de l éjaculât dans le flacon stérile mis à disposition par le laboratoire (Ne rien perdre du prélèvement ou le mentionner lors de l enregistrement du dossier). Identifier le flacon avec votre nom et prénom si cela n'a pas été fait par le laboratoire. Noter impérativement l heure du recueil en cas de recueil à domicile. Si le flacon doit être acheminé au laboratoire, il doit être apporté dans un délai inférieur à 30 minutes. Questionnaire : (il est indispensable de remplir ce questionnaire) Combien de jours d abstinence avez-vous respecté :? Cet examen fait il partie d une exploration de stérilité OUI NON Travaillez-vous en contact avec des produits toxiques (plomb, pesticides, rayons X, )? OUI NON Avez vous eu de la fièvre ou un traitement antibiotique dans les deux mois précédents cet examen? OUI NON Avez vous des antécédents d infections uro-génitales ou d interventions chirurgicales uro-génitales? OUI NON Contrôle de vasectomie OUI NON PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 55/79

57 Spermoculture Recueil au laboratoire avant aux horaires qui vous auront été indiqués ou au domicile du patient. Matériel : réceptacle stérile pour spermogramme Le prélèvement doit être effectué après une abstinence sexuelle de 3 à 5 jours. Ne pas utiliser de préservatif. Le prélèvement doit être proscrit en cas de traitement antibiotique en cours. Videz votre vessie. Effectuez un lavage soigneux des mains au savon. Se laver très soigneusement le gland avec les mains et le savon liquide ou avec une lingette désinfectante remise par le laboratoire. Recueillir la totalité de l éjaculât dans le flacon stérile mis à disposition par le laboratoire Identifier le flacon avec votre nom et prénom si cela n a pas été fait par le laboratoire. Noter impérativement l heure du recueil en cas de recueil à domicile.. Rapporter le flacon dans l heure qui suit au laboratoire. PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 56/79

58 Préconisations pour la réalisation d'un test de Hühner(test post-coïtal) L objectif de ce test est d étudier les capacités de mobilité et de survie des spermatozoïdes dans le mucus cervical après un rapport sexuel, en période pré-ovulatoire. Ce test se fait sur rendez vous pris au laboratoire auprès du biologiste Il nécessite : De respecter un délai d abstinence sexuelle préalable de 3 à 5 jours précédant le test D avoir un rapport sexuel la veille au soir tard ou le matin tôt du jour ou vous avez rendez vous (8 à 12 heures de délai avant l examen) De rester allongée au moins 30 minutes après le rapport Ne pas faire de toilette vaginale profonde et ne pas prendre de bain chaud entre le rapport et le moment du prélèvement. De noter sa température, le matin de l examen D indiquer sa date des dernières règles ou le jour du cycle D indiquer les thérapeutiques hormonales en cours. PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 57/79

59 Recherche de drogues urinaires Protocole de dépistage des drogues suivantes : amphétamines, cannabis (THC), cocaïne, morphine/opiacés, benzodiazépines, barbituriques, métamphétamines, MDMA (ecstasy), méthadone, antidépresseurs tricycliques le recueil des urines s effectue exclusivement au laboratoire, selon un protocole de recueil permettant de s assurer de l absence de fraude. Le préleveur prendra en charge le patient et transmettra immédiatement en technique le flacon, sitôt le recueil effectué. EXPECTORATION - recueil exclusivement le matin (sauf dérogation ponctuelle) en l absence de toute thérapeutique antibiotique - émission de l expectoration à l occasion d un effort de toux profonde spontanée ou d un effort de toux profonde provoquée (par kinésithérapie) - recueil dans le flacon stérile remis à cet effet. - Transmission du flacon au laboratoire dans un délai de 2 heures maximum à température ambiante. PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 58/79

60 RECHERCHE DE BILHARZIOSE URINAIRE Recueil des urines de fin de miction ou mieux totalité des urines après un effort physique (sautillement) Ne pas conserver au réfrigérateur, rapporter au laboratoire dans les 2 heures Test HELIKIT (Test respiratoire pour le dépistage d Helicobacter pylori) prise de rendez vous au laboratoire de préférence entre 8 et 9 heures 30 délivrance du kit en pharmacie patient à jeun et ne devant pas avoir fumé le matin de la réalisation de l examen arrêt du traitement avant la réalisation du test : - inhibiteurs pompe à protons (IPP) 2 semaines avant (Mopral, Inexium, Lanzor, Ogast, Eupantol, Inipomp, Pariet ) - antibiotique 4 semaines avant rester environ 45 minutes au laboratoire. PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 59/79

61 Stéatorrhée, créatorrhée, examen fonctionnel de la digestion Intérêt : dosage des lipides totaux : recherche de stéatorrhée dosage de l azote fécal : recherche de créatorrhée. Régime : pour stéatorrhée, ne pas consommer d huile de paraffine Préconisations : recueillir la totalité des selles de 24 heures et transmettre le recueil au laboratoire dans les meilleurs délais. Legionella pneumophila : Recherche de l antigène urinaire Recueillir un échantillon des urines et transmettre cet échantillon au laboratoire dans la journée. PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 60/79

62 sujet à jeûn depuis la veille TRP : Taux de reabsorption du Phosphore * vider la vessie et jeter les urines * faire boire à 8 heures le matin 250 ml d eau de Volvic * 1 heure après l ingestion, prélever un tube vert (2 ml de plasma) * recueillir la totalité des urines entre 8 et 10 heures * dosage de la créatinine et des phosphates dans le sérum et les urines. ELASTASE DANS LES SELLES Recueillir un échantillon de selles (environ 10 g) Faire parvenir rapidement au laboratoire Remboursé par la Sécurité Sociale PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 61/79

63 Epreuves dynamiques Epreuve d hyperglycémie provoquée (en dehors de la grossesse) : ingestion de 75 grammes de glucose chez l adulte, 1.75g de sucre/kg de poids chez l enfant sans dépasser 75 grammes, prises de sang et recueil des urines toutes les demi-heures sur 2 ou 3 heures selon la prescription médicale. Test de O SULLIVAN (dépistage) : ingestion de 50 grammes de glucose, prises de sang à T0 et 1 heure. Test de O SULLIVAN (confirmation) : ingestion de 75 grammes de glucose, prises de sang à T0 et 2 heures. Test de O SULLIVAN (confirmation) : ingestion de 75 grammes de glucose, prises de sang à T0, 1 et 2 heures. Epreuve d hyperglycémie provoquée (femme enceinte) : ingestion de 100 grammes de glucose, prises de sang et recueil d urines à T0, 1, 2 et 3 heures. Test au SYNACTHENE : à réaliser à 8 heures du matin, prise de rendez vous indispensable, injection intramusculaire (IM) de synacthène à apporter par le patient sauf si est sous anti-coagulant (intra-veineuse IV). Prises de sang à T0, 30 et 60 minutes. Test à la LH RH : prise de rendez vous indispensable, entre J3 et J6 du cycle chez la femme, en l absence de traitement oestro-progestatif, à jeun, injection intraveineuse de LH RH (délivrée en pharmacie hospitalière et apportée par le patient), prélever aux temps indiqués sur l ordonnance. En l absence d indication, il est préférable de vérifier auprès du prescripteur les temps souhaités : LH-RH : temps classiques Test à la TRH : prise de rendez vous indispensable, à jeun (risque de vomissements), injection intraveineuse de TRH (délivrée en pharmacie hospitalière et apportée par le patient), prélever aux temps indiqués sur l'ordonnance. En l absence d indication, il est préférable de vérifier auprès du prescripteur les temps souhaités : TRH : temps classiques si 2 temps : 0 et 30 / si 3 temps : Possibilité pour le test au TRH d injection d une ampoule de Métoclopramide au temps 90 et dosages de la prolactine aux temps et 180. Test au glucagon avec dosage du peptide C : A jeun, injection IV d'une ampoule de 1 mg de glucagon et dosages de la glycémie et du peptide C aux temps 0' - 10' - 30'. Si test long, dosages aux temps 0' - 10' - 30' - 60' - 120' - 180' - 240' Dosages de la PROLACTINE poolée : prises de sang à T0, T15 et T30 minutes. PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 62/79

64 Dosages de RENINE ou ALDOSTERONE debout et couché : le patient reste allongé au laboratoire pendant 1 à 2 heures (selon ordonnance) puis on effectue la 1 ère prise de sang. Le patient marche ensuite 1 heure et l on effectue la seconde prise de sang Classement et archivage Les règles de classement et d archivage des documents sont décrits dans la procédure «Gestion des enregistrements et archivage». PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 63/79

65 8.5 Annexe : Fiche de prélèvement de biologie médicale (arrêté du 20/06/2003) PRELEVEMENT Effectué le : J J / M M / A A A A à 0 0 h 0 0 par : Déposé le : J J / M M / A A A A à 0 0 h 0 0 MENTIONS OBLIGATOIRES PATIENT (étiquette possible) M. Mme Mlle Enfant fille ou garçon NOM :... Prénom :...DDN : J J / M M / A A A A NJF :... (indispensable pour groupe et RAI) Adresse : n :... Rue :... Code postal :... Ville :... Téléphone :... MEDECIN :... ordonnance jointe ou déjà transmise. Il est indispensable de noter sur les tubes NOM, Prénom, DDN du patient Retirer l'aiguille usagée de la boîte. RENSEIGNEMENTS CONCERNANT L'ASSURE 1 ère prise en charge N de SS : X X X X X X X X X X X X X clé : X X Nom et adresse de la caisse de SS : ALD Invalidité Maternité (mois de grossesse :..) AT ANALYSES PRESCRITES (si ordonnance non jointe) Nombre d'ordonnances :... RENSEIGNEMENTS CLINIQUES (utiles à la validation et à l'interprétation des examens) Anticoagulant : AVK Héparine ou HBPM Médicament :... Posologie :... Dernière prise à :... Créatinine demandée poids du patient :... Dosage hormonal date des dernières règles : J J / M M / A A A A Chimiothérapie en cours Autres renseignements cliniques :... RESULTATS urgents à téléphoner à faxer à poster dépôt en pharmacie laboratoire CARACTERISTIQUES DU PRELEVEMENT Prélèvement difficile Patient à jeun Post-prandial Nature des échantillons : Sang Urines Autre :...Nbre d'échantillons : PARTIE RESERVEE AU LABORATOIRE Heure de réception : 0 0 h 0 0 Contrôlé par :... Prélèvement conforme : oui non PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 64/79

66 8.6 Conservation des échantillons biologiques Conservation pré-analytique Les échantillons non centrifugés doivent être conservés à température ambiante selon les recommandations ci-dessous.. Après centrifugation, le sérum ou le plasma doivent être analysés dans le temps recommandé pour le sang total si l échantillon n est pas stocké en utilisant un gel séparateur ou un filtre dans le tube primaire. Quand le plasma ou le sérum doit être conservé au réfrigérateur ou congelé, il doit tout d abord être décanté SAUF SI TUBE A GEL. (1) A Chimie-enzymologie sanguine Analytes Conservation maximale avant centrifugation Sans décantation Conservation maximale après centrifugation Température ambiante Avec décantation +2/+8 C -20 C Amylase (1) 4 jours 4 jours 7 jours 7 jours 1 an CPK (2) 7 jours 7 jours 2 jours 7 jours 4 semaines Gamma GT (2) 1 jour 1 jour 7 jours 7 jours 1 an LDH (5) 6 heures 6 heures 7 jours 7 jours 6 semaines Lipase (2) 12heures 12 heures 7 jours 7 jours 1 an Phosphatases 4 jours 4 jours 7 jours 7 jours 2 mois Alcalines (2) TGO (1) 7 jours 7 jours 4 jours 7 jours 3 mois TGP (1) 4 jours 4 jours 3 jours 7 jours 7 jours Acide urique (1) 7 jours 7 jours 3 jours 7 jours 6 mois Albumine (2) 6 jours 6 jours 2,5 mois 5 mois 5 mois Ammoniémie (1) 15 minutes en EDTA 15 minutes en EDTA 15 minutes 2 heures 3 semaines cf préconisations BPR Apolipoproté 1 jour 3 jours 2 mois ine a & b (1) Bilirubines (12,14) 1 jour 1 jour 1 jour 7 jours 6 mois PAS D'EXPOSITION PROLONGEE A LA LUMIERE PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 65/79

67 Analytes Conservation maximale avant centrifugation Sans décantation Conservation maximale après centrifugation Température ambiante Avec décantation +2/+8 C -20 C Calcium 15 minutes 15 minutes 2 heures Cf préconisations ionisé (1) BPR Calcium 2 jours 2 jours 7 jours 3 semaines 8 mois total (1) Chlore (1) 1 jour 1 jour 7 jours 7 jours 1 an Cholesterol 2 jours 2 jours 2 jours 7 jours 3 mois hdl (1) Cholesterol 1 jour 1 jour 1 jour 7 jours 3 mois ldl (1) Cholesterol 7 jours 7 jours 7 jours 7 jours 3 mois total (1) CO2- Bicarbonates ( 1,14) 6 heures 6 heures 1 jour 7 jours Deux semaines Créatinine (1) 2 jours 2 jours 7 jours 7 jours 3 mois CRP (2) 7 jours 7 jours 15 jours 2 mois 3 ans Cuivre (2) 7 jours 7 jours 1 an 1an 1 an Fer (6,7,14) 1 jour 1 jour 7 jours 3 semaines 1 an Glucose sur 1 jour 1 jour 2 jours 7 jours 1 jour tube fluoré (2) Glucose sur tube hépariné ou sec (12) 2 h 2 h 2 jours 7 jours Magnésium (1) 1 jour 1 jour 7 jours 7 jours 1 an Phosphore (8) 6 heures 6 heures 1 jour 4 jours 1 an Potassium (5,7,14,18) 6 heures 6 heures 1 semaine 1 semaine 1 an Protides (2) 1 jour 1 jour 1 jour pour électrophorèse 6 jours pour dosage 7 jours pour électro. 4 semaines pour dosage 3 semaines pour électrophorèse 1 an pour dosage Sodium (1) 4 jours 4 jours 2 semaine 2 semaines 1 an PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 66/79

68 Analytes Conservation maximale avant centrifugation Sans décantation Conservation maximale après centrifugation Température ambiante Avec décantation +2/+8 C -20 C Triglycérides (1) 7 jours 7 jours 2 jours 7 jours 1 an Urée (1) 1 jour 1 jour 7 jours 7 jours 1 an B Hormones sanguines Analytes Conservation maximale avant centrifugation Sans décantation Conservation maximale après centrifugation Température ambiante Avec décantation +2/+8 C -20 C Cortisol (2) 7 jours 7 jours 7 jours 7 jours 3 mois Erythropoietine (1) 6-24h 6-24h 2 semaines 5 mois FSH (1) 7 jours 7jours 2 semaines 2 semaines 1 an FT3 (14) 1 jour 1 jour 1 jour 2 semaines 3 mois FT4 (14) 1 jour 1 jour 2 jours 8 jours 3 mois GH (1) 1 jour 1 jour 1 jour 8 jours 3 mois HCG (2) 1 jour 3 jours 1 an Insuline (11,14) 6 heures 6 heures 6 heures 3 jours 6 mois LH (2) 7 jours 7 jours 1 jour 3 jours 1 an Oestradiol (1) 1 jour 1 jour 1 jour 3 jours 1 an Parathormone (1,14) 3 jours 3 jours 2 jours 3 jours 4 mois Peptide c (1,14) 6 heures 6 heures 2 jours 3 jours 2 mois Progesterone (2) 7 jours 7 jours 1 jour 3 jours 1 an Prolactine (1) 2 jours 2 jours 5 jours 6 jours 1 an Testosterone (1) 7 jours 7 jours 1 jour 3 jours 1 an 1 j si femme 1 j si femme Thyroglobuline (1) 2 jours 2 jours 1 jour 3 jours 1 mois TSH (1) 7 jours 7 jours 1 jours 3 jours 3 mois PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 67/79

69 C Marqueurs Protéines Analytes Conservation maximale avant centrifugation (température ambiante) Sans décantation Conservation maximale après centrifugation Température ambiante avec décantation +2/+8 C -20 C ACE (2) 3 jours 3 jours 7 jours 7 jours 6 mois AFP (1) 7 jours 7 jours 3 jours 7 jours 3 mois BNP (1) 5 heures 5 jours 5 jours 5 jours C3-complément (2) 1 jour 1 jour 4 jours 8 jours 8 jours C4-complement (2) 1 jour 1 jour 2 jours 2 jours CA 125 (2) 3 jours 3 jours 3 jours 5 jours 3 mois CA 15-3 (1) 7 jours 5 jours 3 mois CA 19-9 (2) 7 jours 7 jours 7 jours 1 mois 3 mois CD tect (1) 3 jours 3 jours 7 jours 7 jours 1 an CYFRA 21-1 (1) 7 jours 7 jours 7 jours 1 mois 6 mois Facteurs 1 jour 3 jours 1 mois rhumatoides (2) Ferritine (1) 7 jours 7 jours 1 an Folates (14) 2 jours 2 jours 2 jours 3 jours 8 semaines Fructosamine (1) 12 heures 12 heures 3 jours 2 semaines 2 mois Haptoglobine (1) 8 jours 8 jours 3 mois 8 mois 3 mois HBA1C (1) 3 jours Immunoglobulines (1) 8 jours 8 jours 7 jours 7 jours 6 mois Myoglobine (14) 1 jour 1 jour 2 jours 1 semaine 3 mois NSE (1) 2 heures 2 heures 2 jours 3 jours 3 mois NT Pro BNP (2) 3 jours 6 jours 12 mois PSA libre (1, 15) 5 heures 30 5 heures heures 1 jour 1 mois PSA total (1) 1 jour 1 jour 7 jours 30 jours 3 mois Troponine T (1) 8 heures 8 heures 1 jour 7 jour 3 mois PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 68/79

70 D Analytes Hématologie Conservation maximale Sans décantation Température ambiante +2/+8 C -20 C Erythrocytes (2) 4 jours 4 jours 7 jours Formule leucocytaire (2) 12 heures 12 heures Ne pas conserver au réfrigérateur Hémoglobine (2) 4 jours 4 jours 7 jours Leucocytes (2) 7 jours 7 jours Ne pas conserver au réfrigérateur Plaquettes (2) 4 jours 7 jours Réticulocytes (2) 1 jour E Analytes Hémostase Conservation maximale avant centrifugation Conservation maximafle après centrifugation Sans décantation Température ambiante avec décantation +2/+8 C -20 C TP INR, Fibrinogène, AT3, Facteur II, Facteurs V, Facteur X (14,3) 12 heures 12 heures 12 heures 12 heures 2 semaines 4 heures 4 heures 4 heures 4 heures 2 semaines TCA 14,3) 6 heures 6 heures 6 heures 6 heures 2 semaines Autres marqueurs d hémostase (3) F Immuno-hématologie Analytes Conservation maximale avant centrifugation Sans décantation Conservation maximale après centrifugation Température ambiante avec décantation +2/+8 C -20 C GROUPE SANGUIN (16) 7 jours à +4 C 7 jours à +4 C 7 jours 2 semaines RAI (17) 72 heures 72 heures 72 heures PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 69/79

71 G Médicaments Analytes Conservation maximale avant centrifugation Conservation maximale après centrifugation Température ambiante +2/+8 C -20 C Benzodiazépines (2) 1 jour 1 jour 5 mois 5 mois Carbamazépine (2) 2 jours 2 jours 2 jours 7 jours 1 mois Ciclosporine sur 13 jours 13 jours 21 jours 13 jours EDTA (2) Digoxine (2) 2 semaines 3 mois 6 mois Gentamicine (2) 4 heures 4 heures 4 heures 4 semaines 4 semaines Lithium (2) 1 heure 1 heure 1 jour 7 heures 6 mois Phenobarbital (2) 2 jours 2 jours 6 mois 6 mois 6 mois Théophilline (2) 3 mois 3 mois 3 mois Acide valproïque (2) 2 jours 2 jours 2 jours 7 jours 3 mois H Biologie du LCR Analytes Température ambiante +2/+8 C -20 C Albumine (2) 1 jour 2mois 1an Glucose LCR (2) 5 heures 3 jours 1 mois IgG (2) 1 jour 7 jours Instable Leucocytes (2) 1-2 heures 3-5 heures Protides LCR (2) 1 jour 6 jours 1 an I Gazometrie arterielle GAZ DU SANG (2) Analytes CARBOXYHÉMOGLOBINE Conservation maximale avant analyse 15 minutes 15 minutes PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 70/79

72 J Chimie-enzymologie urinaire Analytes Conservation maximale Température ambiante +2/+8 C -20 C 5-HIA (1) 2 heures 2 jours 2 jours Acide urique (2) Instable à ph <7 4 jours si ph >8 Instable Instable Acide 7 jours 7 jours 1 an vanylmandélique (2) Albumine (1) 7 jours 1 mois 6 mois Amylase (1) 2 jours 10 jours 3 semaines Bandelettes (2) 1 heure Calcium (1) 2 jours 4 jours 3 semaines Catécholamines (2) 4 jours 4 jours 20 jours Créatinine (1) 2 jours 6 jours 6 mois Cuivre (1) 3 jours 7 jours 1 an Glucose (1) 2 heures 2 heures 2 jours Hydroxyproline (1) 5 jours 5 jours 5 jours Magnesium (1) 3 jours 3 jours 1 an Osmolalité (1) 3 heures 7 jours 3 mois Phosphore (1) 2 jours à ph <5 Porphobilinogènes PORPHYRINES (1) 4 jours A l abri de la lumière 7 jours A l abri de la lumière 1 mois A l abri de la lumière Potassium (1) 45 jours 2 mois 1 an Protides (1) 1 jour 7 jours 1 mois Sédiment urinaire (2) 1 heure Sodium (1) 45 jours 45 jours 1 an Urée (2) 2 jours 7 jours 4 semaines PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 71/79

73 K Bactériologie Prélèvements Température ambiante Conservation maximale +2/+8 C 37 C HÉMOCULTURES (4) 12 heures NON NON LCR (4) Pas de conservation : URGENCE!!!! Transport à température ambiante ECBU sur flacon non boraté (4) 2 heures 24 heures NON sur flacon boraté (4) 48 heures 48 heures NON SÉCRÉTIONS BRONCHO 2 heures NON NON PULMONAIRES (4) COPROCULTURES SANS 12 heures 24 heures NON PARASITO (4) SÉCRÉTIONS ANO-GÉNITALES E-Swab (4) 48 heures NON NON 24 heures pour le gonocoque écouvillon gélosé (4,19) 24 heures NON NON écouvillon sec (4) 2 heures NON NON MYCOPLASMES URO- GENITAUX 8 heures sur milieu UMMt 16 heures sur milieu UMMt NON SPERMOCULTURE (4) 2 heures NON NON SÉCRÉTIONS ORL OU OCULAIRES E-Swab (4) 48 heures NON NON écouvillon gélosé (4) 24 heures NON NON écouvillon sec (4) 2 heures NON NON PEAU ET PUS SUPERFICIELS (4) 6 heures NON NON E-Swab (4) 48 heures NON NON écouvillon gélosé (4) 24 heures NON NON écouvillon sec (4) 2 heures NON NON PUS PROFONDS (4) 2 h sans milieu de 6 heures NON PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 72/79

74 transport LIQUIDE ARTICULAIRE (4) 2 heures NON NON LIQUIDE ASCITE PLEURAL (4) 2 heures 6 heures NON CATHÉTER (4) 2 heures NON MYCOLOGIE CUTANÉE (4) NON Plusieurs jours NON PARASITOLOGIE DES SELLES 2 heures sinon préparation MIF CHLAMYDIAE URINAIRES (1) World health organization : use of anticoagulants in diagnostic laboratory invesigations (2) Reference Ranges for Adults and Children: Pre-Analytical Considerations Roche (3) Recommandations 2007: prélèvements destinés aux tests d'hémostase - GEHT (4) REMIC: référentiel en microbiologie médicale 2010 (5) Boyanton 2002 (6) CLSI H18 A4 (7) Tanner 2008 (8) Portugal, 2010 (9) Gobinet, 2000 (10) German Society for Clinical Chemistry Laboratory Medecine 2010 (11) M.J. Ellis et al./clinical Biochemistry 36 (2003) (12) Foucher, 2005 (13) Saunier, 2009, Feuillets de Biologie Clinique (14) Portugal, 2012 (15) Pironeme (16) G. Togni, C. Volken, G. Sabo, Forum Med Suisse n 6, 6 février 2002 (17) Cahier Bioforma n 26 Immuno-hématologie et groupes sanguins (18) Etude interne-2012 site de Vendôme (19) Préconisations fournisseurs : 24h PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 73/79

75 8.6.2 Conservation post-analytique Les échantillons sont conservés en respectant les conditions suivantes : Réfrigérateur : 2 à 8 C Congelé : < -18 C Température ambiante : C Secteur (type d analyse) Lieu de conservation Conditions de conservation Temps de conservation Possibilité d'effectuer un contrôle Hématologie Frottis sanguins Température ambiante Boîte Paillasse Hématologie Tubes bouchés Température ambiante 48h après jour de prélèvement Lames: 1 semaine 12 mois pour lames diagnostic ou suivi 30 ans pour lames diagnostic moelle* Selon conditions et durée de conservation des prélèvements (cf cidesssus) Coagulation Réfrigérateur ou température ambiante Tubes bouchés 48h après jour de prélèvement Biochimie Réfrigérateur ou température ambiante Tubes rebouchés 48h après jour de prélèvement 24h pour tubes fluorés Immunologie Enzymologie En sérothèque : Congélateur ou Réfrigérateur Aliquote à -20 C ou tubes rebouchés Un an pour la sérothèque 48h après jour de prélèvement le reste Mise en sérothèque obligatoire** : marqueurs tumoraux, sérologie virale, bactérienne et parasitaire Voir plus bas Tubes primaires décantés ou centrifugés avec gel Divers Groupes Réfrigérateur ou température ambiante Réfrigérateur ou température ambiante Tubes rebouchés Tubes bouchés 48h après jour de prélèvement 6 jours Selon conditions et durée de conservation des prélèvements (cf cidesssus) Tubes en plus Pré-identifiés Réfrigérateur ou température ambiante Tubes bouchés 48h après jour de prélèvement PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 74/79

76 Secteur (type d analyse) Lieu de conservation Conditions de conservation Temps de conservation Possibilité d'effectuer un contrôle Bactériologie : prélèvements, CBU, A, S Selon site Température ambiante 6 jours Échantillons urines de 24H Réfrigérateur ou température ambiante 7 jours écouvillons Paillasse bactériologie Température ambiante 7 jours Spermogramme Paillasse bactériologie Température ambiante 7 jours Liquides de ponction Paillasse bactériologie Température ambiante 7 jours Expectorations Bactériologie Cultures Lame coloration de Gram Paillasse bactériologie Paillasse de bactériologie paillasse bactériologie Température ambiante Température ambiante Température ambiante 7 jours 7 jours quand identif/atb Jusqu'au rendu des résultats Selon conditions et durée de conservation des prélèvements (cf cidesssus) Lame coloration de Ziehl Porte lame cartonné Température ambiante 1 an Lame coloration de SHORR (spermocytogramme ) Porte lame cartonné Température ambiante 1 an Concentration de parasitologie Paillasse bactériologie Température ambiante 10 jours Mycologie Mycologie Température ambiante 1 semaine BK par culture Réfrigérateur 1 semaine PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 75/79

77 Les échantillons en vue de diagnostics d affections bactériennes, virales, parasitaires, les marqueurs tumoraux ou les analyses transmises à des laboratoires spécialisés sont cryoconservés en sérothèque selon les principes décrits dans la fiche d instruction «gestion de la sérothèque» ou «conservation des souches bactériennes». * Afaqap-Archivage_en_ACP_-_retour_d_enquete_2006 ** Mise en sérothèque obligatoire : Examens biologiques Température de conservation Durée Marqueurs tumoraux <- 18 C 1 an Sérologie bactérienne <- 18 C 1 an Sérologie virale <- 18 C 1 an Sérologie parasitaire <- 18 C 1 an Biologie moléculaire : mycobactéries, hépatite B et C, Chlamydia, VIH - 80 C 1 an GBEA, Annexe C, arrêté du 26 novembre 1999 relatif à la bonne exécution des analyses de biologie médicale PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION Manuel de prélèvements-version 4 76/79

78 8.7 Annexe : élimination des déchets PHOTOCOPIE INTERDITE SANS AUTORISATION p 77/79