Certificat en biotechnologie

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1 Certificat en biotechnologie Faculté des sciences et génie Département de biochimie, microbiologie et bio-informatique Techniques de culture cellulaire animale et végétale MCB crédits Trimestre : Automne 2012 Professeur : Marc Cloutier 1

2 Clientèle Ce cours s adresse spécifiquement aux étudiant(e)s inscrit(e)s au certificat en biotechnologie. Aucun préalable n est requis pour ce cours. Horaire Le cours a lieu les mardis de 18 h à 23 h dans les locaux du Cégep de Lévis-Lauzon (D-306 et A-354). Conformément au calendrier scolaire 2011, les cours débutent le 4 septembre et se terminent le 11 décembre. Il n y a pas de cours lors de la semaine de lecture. But du cours Fournir à l étudiant(e) l opportunité d acquérir des connaissances et habiletés techniques reliées à la culture cellulaire. Objectifs de Connaissance Décrire la biologie des cellules végétales et animales en culture. Comprendre le rôle des régulateurs de croissance en culture. Comparer les besoins nutritifs des cellules animales et tissus végétaux en culture. Décrire les facteurs physiques de l'environnement des cultures. Identifier les contaminations, leurs causes et leurs intérêts. Décrire le design d un laboratoire de culture de cellules, être familier avec l'opération, l'entretien et l'utilisation des hottes à flux laminaire, être familier avec l'entretien et l'utilisation de l'incubateur Expliquer les techniques et l'intérêt de la culture d'anthère, de pollen et d'ovules. Expliquer la technique et l'intérêt de la culture de protoplastes Décrire les avantages, les désavantages, les domaines d'intérêt et les applications de la culture de cellules animales. Objectifs d habiletés techniques Utiliser les techniques d'isolement des tissus et leur mise en culture Développer des habiletés à utiliser le laboratoire de culture de cellules de façon optimale Appliquer les techniques de sécurité reliées à la manipulation des cellules, des produits, des appareils servant à la culture de cellules et des déchets produits. Initier des cultures primaires par différentes méthodes. Maintenir différents types de cultures cellulaires en étant capable d évaluer la santé de la culture et sa croissance Quantifier des cultures cellulaires selon différentes méthodes. Utiliser les techniques de congélation et de décongélation des cellules 2

3 Formule Pédagogique Le cours de «Techniques de culture cellulaire animale et végétale» du Certificat en biotechnologie se donnera sous la forme de cours magistraux et de laboratoires. Des protocoles, des notes de cours et des documents audiovisuels seront utilisés pour faciliter l apprentissage. L étudiant(e) aura à lire les protocoles avant de se présenter aux travaux pratiques. Les protocoles seront effectués de façon individuelle. Matériel Nécessaire Carnet de laboratoire. Sarrau, gants et crayon marqueur. Pour l accès aux protocoles et autres documents, l étudiant(e) doit s inscrire au site suivant : virtuel.levinux.org Disponibilité L étudiant(e) pourra rejoindre le professeur par téléphone au (3544) et fixer une rencontre, au besoin. Le bureau du professeur est situé au CEGEP de Lévis-Lauzon, local A-300C. Vous pouvez également contacter le professeur via courrier électronique à l adresse suivante : marc.cloutier@clevislauzon.qc.ca Bibliographie MARGARA,J. Base de la multiplication végétative. Paris. Inra COLLIN, H.A.,EDWARDS,S.Plant cell culture. New York. Bios scientific R.IAN FRESHNEY. Culture of Animal cells. Hoboken. Wiley-Liss

4 Échéancier Automne 2012 semaine Théorie Laboratoire 1 11 sept Plan de cours, hémacytomètre et sécurité dans les laboratoires Techniques de comptage(1) et introduction au laboratoire de culture cellulaire 2 Milieu de culture végétal, hormones Le travail sous la hotte à flux laminaire(2) et Violette 14 sept végétales et techniques de multiplication africaine(5) multiplication végétative (15) Vendredi des végétaux 3 Comptage et culture primaire cal de carotte (3) et méristèmes (pratique) 18 sept 4 25 sept 5 2 oct 6 9 oct 7 16 oct Environnement et milieu de culture des cellules animales Environnement et milieu de culture des cellules animales EXAMEN Méristèmes(10) et décongélation et remise en culture des cellules en suspension(7,1) Renouvellement du milieu des cultures en suspension (7,2) Repiquage de la culture de cellules en suspension (7,3) et Culture primaire d embryon de poulet (8,1) Renouvellement du milieu des cultures en suspension (7,2) Congélation d une culture de cellules en suspension(7,4) et repiquage de la culture de cellules adhérentes primaires.(8,3) EXAMEN LABORATOIRE Comptage des cellules adhérentes primaires, effet des phytohormones,(16) isolement mécanique de protoplastes 8 Conférence et visite 23 oct 9 Semaine de lecture 10 6 nov Biologie des cellules en culture, différenciation et cellules cancéreuses. décongélation et remise en culture des cellules adhérentes (9,1) Renouvellement du milieu de culture des cellules adhérentes nov nov Cellules souches Culture d anthère et de pollen Culture de protoplastes (9,2) Isolement de cellules de cornées (11) et repiquage des violette africaines (5) Repiquage des cellules adhérentes par digestion enzymatique (9,3) Renouvellement du milieu de culture des cellules adhérentes (9,2) Congélation d une culture de cellules adhérentes (9,5) EXAMEN LABORATOIRE nov 14 4 déc déc Congélation et décongélation des cellules Contaminations et stérilisation EXAMEN observation des kératocytes et des cellules endothéliales. observation des embryons somatiques et repiquage de ces derniers, simulation et contamination (13) 4

5 Évaluation des apprentissages Examen théorique 1 Examen théorique 2 Évaluation de la méthode de travail en laboratoire #1 Évaluation de la méthode de travail en laboratoire #2 Résultats des manipulations + rapport 25 points 15 points Les cotes A à E seront distribuées de la façon suivante : A % C % A 90-94% C 70-73% A % C % B % D % B 80-82% D 50-59% B % E < 50% (ÉCHEC) Politiques d évaluation et valorisation de la langue La note de passage est de 50%. En cas d absence à une évaluation, l étudiant(e) doit référer aux règlements en vigueur à la Faculté des sciences et génie de l Université Laval. Pour connaître les diverses modalités de valorisation de la langue française, l étudiant(e) doit référer à la Politique de valorisation de la langue française du Département de biochimie et microbiologie, Faculté des sciences et génie. 5