Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard Mode d'emploi

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1 Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard Mode d'emploi CE Réservés aux diagnostiques in vitro. Biomatrica, Inc Oberlin Drive, Suite 120 San Diego, CA ĖTATS UNIS

2 Sommaire Produits Sanguins RNAgard et Renseignements Relatifs Aux Commandes 3 Contenu du Kit 3 Conditions de Conservation 3 Information sur la Sécurité 4 Utilisation Prévue 4 Introduction 4 Collection et Conservation d'échantillon 5 Procédure de Purification d'arn 5 Matériaux et Équipement Nécessaire mais Non-fourni 5 Remarques Importantes 5 Protocole pour la Purification d'arn 6 Limitations de l'utilisation du Produit 8 Sommaire de Purification ARN 9 Résultats Attendus Annexe A. Stabilité dans l'expression des Gènes 10 Annexe B. Rendement ARN Elevé et La Pureté 12 Annexe C. Purification d'arn Répétable and Reproductible 13 Guide de Dépannage 16 Assistance Technique 18 Glossaire des Symboles 18 Page 2 sur 18 Doc. No. 8301, Rév C

3 Produits Sanguins RNAgard et Renseignements Relatifs Aux Commandes Description Quantité Numéro de Catalogue Les Tubes de prélèvement Sanguin 50 tubes CE RNAgard Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard 50 préparations CE Réactifs Sanguins RNAgard 100 ml CE Tampon RNAgard Pour Précipitation Sanguine 50 préparations CE Les commandes peuvent être passées en ligne sur par à ou par téléphone au service client Biomatrica au Contenu du Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard (50 préparations) Catalogue No. CE Composant Tampon RNAgard Pour Précipitation Sanguine Tampon de Resuspension ǂ Tampon de Lavage 1* Tampon de Lavage 2* Bouteille d'eau Exempte de RNase DNase I, Exempte de RNase; Poudre Lyophilisée Tampon DNase I Eau Stérilisée (Eau Resuspension DNase I) Quantité 180 ml 21 ml 25 ml 15 ml 12 ml 1 X flacon 2 X 2,5 ml 1 ml Colonnes de Purification 50 Tubes de Prélèvement de 2 ml 2 X 100 ǂ Non compatible avec les réactifs désinfectants contenant de l'eau de javel. Contient de l'isothiocyanate de guanidine. Se référer à la page 5 pour des informations sur la sécurité. * Le tampon de lavage 1 et le tampon de lavage 2 sont fournis sous forme de concentrés. Avant d'utiliser pour la première fois, diluer avec de l'éthanol (96-100%, Réactif de Qualité Analytique ou degré de pureté p. a.) selon les volumes indiqués sur les bouteilles. Conditions de Conservation À réception du kit (expédié à température ambiante), retirer le flacon de DNase I lyophilisé, la poudre lyophilisée exempte de RNase et conserver à une température de 2-8 C. Page 3 sur 18 Doc. No. 8301, Rév C

4 Après avoir reconstitué l'aliquote de la DNAse I lyophilisée, conserver la solution à -20 C. Conserver tous les autres composants du Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard à température ambiante (18-25 C). Ne pas congeler. Renseignements liés à la Sécurité Adopter des précautions universelles lors de la manipulation de ce produit. Le contenu de ce kit peut provoquer une irritation des yeux, des voies respiratoires et de la peau. 1. En cas d'inhalation accidentelle, déplacer vers une source d'air frais et consulter un médecin. 2. En cas de contact avec la peau, laver immédiatement à l'eau et au savon et bien rincer. 3. En cas de contact avec les yeux, rincer immédiatement et abondamment à l'eau pendant au moins 15 minutes et consulter un médecin. 4. En cas d'ingestion accidentelle, consulter immédiatement un médecin. 5. Consulter la FDS en cas d'ingestion accidentelle ou de contact avec la peau. Toutes les informations liées aux FDS sont disponibles sur Utilisation Prévue Le Kit de Purification d'arn Sanguin est destiné à la purification d'arn intracellulaire à partir d'échantillons de sang humain recueillis et conservés dans des Tubes de Prélèvement sanguin RNAgard. Lorsqu'il est utilisé en association avec des Tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard dans le cadre du Système Sanguin RNAgard, le Kit de Purification Sanguin RNAgard fournit des rendements élevés en ARN pur, avec des niveaux d'adn génomique très faibles. L'ARN purifié convient aux applications RT-PCR utilisées dans les tests de diagnostic moléculaire. La performance du système sanguin RNAgard n'a été caractérisée que pour les transcrits de gènes C-FOS et IL1-. L'utilisateur est responsable de la caractérisation des performances du système RNAgard pour d'autres applications. Introduction Les études de recherche clinique exigent souvent la collecte d'échantillons de sang sur plusieurs sites géographiques sous une vaste gamme de conditions. Les Tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard sont conçus pour la conservation immédiate d'arn intracellulaire dans des échantillons de sang humain, proposant une méthode efficace pour la collecte, le transport et la conservation normalisée de spécimens de sang total. L'intégrité de l'arn et les niveaux de transcription des gènes sont conservés durant 14 jours à température ambiante lorsque le sang entier est conservé dans des tubes Page 4 sur 18 Doc. No. 8301, Rév C

5 RNAgard et peut facilement être purifié avec le kit de purification d'arn Sanguin RNAgard. Prélèvement et Conservation des Échantillons Les Tubes de Prélèvement Sanguins RNAgard contiennent un réactif de préservation chimique breveté qui lyse les cellules sanguines, inactive les nucléases et immobilise la synthèse de l'arn, conservant ainsi les niveaux de transcrits d'arn. Une fois que l'arn est purifié à l'aide du Kit de Purification d'arn RNAgard, il est approprié d'utiliser une analyse d'expression des gènes à l aide des technologies telles que la RT-PCR et des biopuces d'expression. Procédure de Purification d'arn Matériaux et Équipements Nécessaires mais Non- fournis Tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard (Réf. No. CE ) Éthanol (96-100%) Pipettes * (5 µl - 3 ml) Embout de pipettes stérilisées, exempte de RNase faisant barrière aux aérosols Tubes Coniques de 50 ml Tubes Microfuge de 1,5 ml Agitateur Vortex* Centrifugeuse * - vitesse variable capable d'atteindre à x g Agitateur * - incubateur 400 tr/min Bain-marie ou bloc chauffant à 70 C * S assurer que les instruments ont été vérifiés, entretenus et étalonnés régulièrement selon les recommandations du fabricant. Remarques Importantes Avant Démarrage: S assurer que le sang a été prélevé dans les Tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard conformément aux instructions de la rubrique «Procédure de Préparation des Échantillons pour l Analyse» du Mode d'emploi des Tube de Prélèvement Sanguin RNAgard. Prévoir au moins 2 heures entre la collecte du sang et le démarrage du processus de purification. Afin de maximiser le rendement en ARN, prévoir au moins 8-12 heures de conservation à température ambiante avant purification de l'arn. Le Tampon de Lavage 1 et le Tampon de Lavage 2 sont fournis sous forme de concentré; il faut les reconstituer avec les quantités d'éthanol à % indiquées sur les étiquettes des flacons avant utilisation. La DNase I est sensible à la dénaturation physique. Lors de la reconstitution de poudre lyophilisée, mélanger délicatement par inversion; ne vortexer pas la solution DNase I. Page 5 sur 18 Doc. No. 8301, Rév C

6 S assurer que les Tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard soient équilibrés à température ambiante avant démarrage du processus de purification d'arn. Protocole pour la purification de l'arn 1. Inverser le Tube de Prélèvement Sanguin RNAgard au moins 5 fois pour assurer un bon mélange, puis retirer le capuchon et verser le contenu du tube dans un tube conique de 50 ml propre. 2. Pipeter 3 ml du Tampon de la Précipitation Sanguine RNAgard dans le tube conique de 50 ml pour porter le volume total à ~ 12 ml et remettre le capuchon au tube. 3. Incuber 15 minutes à température ambiante en mode de centrifugation ( tr/min). 4. Vortexer le tube conique de 50 ml vigoureusement (vitesse maximale) pendant au moins 30 secondes, en veillant à ce que la solution se déplace vers le haut du tube pour un bon mélange du contenu. 5. Centrifuger le tube à x g pendant 30 minutes à température ambiante dans un rotor à godets oscillants. Remarque: La centrifugation peut également être effectuée à x g pendant 10 minutes en utilisant un rotor à angle fixe sans impact sur le rendement ou la qualité de l'arn. 6. Eliminer soigneusement le surnageant et tourner le tube (renversé) sur du papier absorbant pendant 1-2 minutes. Remarque: Un culot translucide rougeâtre devrait être visible au fond du tube. 7. Nettoyez les autres gouttes de liquide du bord du tube avec du papier absorbant propre. 8. Ajoutez 350 μl de tampon de resuspension dans le tube et vortexer 5-10 fois pour remettre en suspension le culot. 9. Ajoutez 250 μl d'éthanol à 100% dans le tube et vortexer 3-5 fois pour mélanger le contenu du tube. 10. Transférer la solution dans une colonne de purification propre, remettre le capuchon et centrifuger pendant 1 minute à x g. Remarque: Pour toute centrifugation (étapes 10 à 23), utiliser une microcentrifugeuse de table. 11. Eliminer le tube de collecte et placer la colonne dans un tube de collecte de 2 ml propre. 12. Ajouter 400 μl de Tampon de Lavage 1 dans la colonne, remettre le capuchon et centrifuger à x g pendant 1 minute. Page 6 sur 18 Doc. No. 8301, Rév C

7 13. Eliminer l'effluent, placer la colonne dans le même tube de collecte de 2 ml et centrifuger à x g (ou vitesse maximum) pendant 1 minute pour sécher la colonne. 14. Eliminer le tube de collecte et placer la colonne dans un tube de collecte de 2 ml propre. 15. Réaliser le traitement DNase: a. Si DNase I est utilisé pour la première fois, préparer la solution mère DNase I en ajoutant 300 μl d'eau stérilisée exempte de RNase (fournie) à la poudre lyophilisée DNase I (Exempte de RNase) et mélanger délicatement par inversion; ne pas vortexer. Faire un aliquote de l'enzyme DNase I et conserver à -20 C pour une conservation à long terme. Remarque: La solution DNase I peut être congelée / décongelée jusqu'à trois fois sans perte d'activité. b. Préparer la solution DNase I diluée en combinant 5 μl de DNase I et 95 μl de Tampon DNase I pour chaque échantillon, puis mélangez délicatement par inversion. (Ajouter 10% lors de la préparation des solutions pour échantillons multiples). c. Ajouter 100 μl du mélange DNase I Mix dans chaque colonne et incuber à température ambiante pendant minutes. d. Pendant le traitement avec DNase I, préchauffer l'eau exempte de RNase à 70 C pour l'élution de l'arn. 16. Ajouter 400 μl de Tampon de Lavage 1 à la colonne, placer le capuchon, incuber à température ambiante pendant 30 secondes et centrifuger à x g pendant 1 minute. 17. Jeter le tube de prélèvement et placer la colonne dans un tube de prélèvement propre. 18. Ajouter 350 μl de Tampon de Lavage 2 à la colonne, placer le capuchon et centrifuger à x g pendant 1 minute. 19. Répéter l'étape 18 avec une deuxième dose de 350 μl de Tampon de Lavage 2, sans changer de tube de prélèvement. 20. Jeter le tube de prélèvement, placer la colonne dans un tube de prélèvement de 2 ml propre et centrifuger à x g (ou vitesse maximum) pendant 2 minutes pour sécher la colonne. 21. Retirer la colonne de purification du tube et placer-la dans un tube microfuge exempte de RNase de 1,5 ml (non fourni dans le kit) pour éluer l'arn. 22. Ajouter 100 μl d'eau exempte de RNase préchauffée à 70 C à la colonne, placer le capuchon et incuber pendant 1 minute à température ambiante et centrifuger pendant 1 minute à x g pour éluer l'arn. 23. Pour une concentration d'arn maximale, réappliquer la solution éluée à la colonne et centrifuger pendant 1 minute à x g. Pour un rendement maximal en ARN, répéter l'étape 22 avec 100 μl d'eau exempte de RNase. Page 7 sur 18 Doc. No. 8301, Rév C

8 Contraints d'emploi du Produit 1. Le Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard n'a pas été caractérisé pour la purification d'arn provenant d'échantillons de sang non prélevés et conservés dans des Tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard. 2. Le Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard a été optimisé pour la purification à partir de 2,5 ml de sang recueilli dans des Tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard. Si les 2,5 ml de sang n'ont pas été aspirés dans les Tubes de Prélèvement Sanguins RNAgard, le rendement et la qualité de l'arn pourraient être affectés. 3. Le Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard n'a pas été optimisé pour la purification molécules d'arn de petites tailles telles que les miarn. Page 8 sur 18 Doc. No. 8301, Rév C

9 Résumé de la Procédure de Purification d'arn Figure 3: Procédure de purification d'arn. Vue schématique de la purification d'arn à partir d'échantillons de sang humain recueillis dans des Tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard en utilisant le Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard. Page 9 sur 18 Doc. No. 8301, Rév C

10 Sang RNAgard jour 3 Sang RNAgard jour 14 Annexe A: Stabilité de l'expression des Gènes La préservation des profils d'expression des gènes dans le sang total jusqu'à 14 jours à température ambiante a été évaluée par l'analyse d'expression des gènes complète pour des donneurs de sang multiples. La figure 2 montre une comparaison représentative de profils d'expression pour plus de transcriptions entre sang entier frais (axes- X) et après 3 jours (A) ou 14 jours (B) de conservation à température ambiante (axes- Y). Les lignes vertes définissent les transcrits à partir du sang entier conservé avec des taux d'expression dans un changement 2 fois par rapport à des échantillons de sang fraîchement prélevés. La préservation des taux d'arn par le système sanguin RNAgard a été caractérisée en outre par une analyse RT-PCR des transcriptions pour les cytokines inflammatoires IL-1ß et C-Fos. Les niveaux d'arn de ces deux gènes ont été mesurés par les valeurs Ct par rapport au gène de référence ARN 18S (ΔCt). Les variations des valeurs de ΔCt par rapport aux valeurs du Jour 0 ont été exprimées en ΔΔCt. Les valeurs de ΔCt ont été conservées pendant 14 jours de conservation d'échantillon sanguin à température ambiante; les valeurs de ΔΔCt étaient comprises entre -1,0 et +1,0 (Figure 3). Des résultats similaires ont été obtenus pour des échantillons sanguins conservés pendant un mois à 2-8 C ou congelés à -20 C ou à -80 C (données non représentées). Contrôle-Sang RNAgard jour 0 Contrôle-Sang RNAgard jour 0 Figure 1: L'analyse de l'expression par Micro réseaux en transcription totale dans l'arn à partir d'échantillons de sang total humain. Le sang Humain a été prélevé dans des tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard à partir d'un donneur sain. L'ARN a été purifié après 0, 3 ou 14 jours de conservation à température ambiante. L'expression en transcription totale a été analysée à l'aide du réseau de supports de billes Human HT12 (Illumina Corp., San Diego, Californie) et les niveaux de transcription normalisés des échantillons conservés pendant 3 (A) ou 14 (B) jours (axes Y) étaient comparés aux niveaux de transcription à partir d'un échantillon de sang total frais provenant du même donneur (axes X). Page 10 sur 18 Doc. No. 8301, Rév C

11 ΔΔ Ct par rapport au jour 0 ΔΔ Ct par rapport au jour 0 IL1-β R stabilité de l'arn IL1-β par RT-PCR Stabilité de l'arn C-Fos par RT-PCR Jour 0 Jour 7 Jour 14 Jour 0 Jour 7 Jour 14 Figure 2: Analyse par RT-PCR de l'arn de IL1- et C-Fos obtenu à partir d'échantillons de sang humain prélevés et conservés dans des Tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard. Le sang a été extrait de 5 donneurs sains dans des Tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard et conservé à température ambiante (18-25 C). Aux jours 0, 7 et 14, l'arn a été purifié avec un Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard. Les taux de transcriptions C-Fos et IL1-β, normalisés aux transcriptions 18S, ont été déterminés par RT-PCR et exprimés en Δvaleurs Ct. La variation de ΔCt par rapport aux niveaux du même transcriptions dans des échantillons de jour 0 provenant du même donneur a été exprimée en ΔΔCt. Page 11 sur 18 Doc. No. 8301, Rév C

12 Annexe B: Rendement en ARN Elevés Le Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard permet l'isolement d'au moins 3 μg d'arn pour au moins 97% des échantillons de sang recueillis et conservés dans des Tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard. Comme illustre la Figure 4, on a obtenu des rendements élevés répétitifs en ARN (figure 4, A) avec une pureté élevée (Figure 4, B) à partir d'échantillons de sang provenant des mêmes 8 donneurs pendant 2 semaines de conservation d'échantillon de sang à température ambiante. Pureté de l'arn (A260/A280) Taux d'arn μg/ Tube de Prélèvement Sanguin Tubes de prélèvement sanguin RNAgard: Rendement en ARN par échantillon (μg) Jour 3 Jour 7 Jour 14 Tubes de prélèvement Sanguin RNAgard: Pureté de l'arn par Échantillon (A 260 /A 280 ) Jour 3 Jour 7 Jour 15 Figure 4: Rendement en ARN élevés et pureté. Le sang a été extrait de 8 donneurs sains dans des Tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard et conservé à température ambiante (18-25 C). Après 3, 7 et 15 jours, l'arn a été purifié à partir d'échantillons de sang en double par donneur, en utilisant le Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard. A: Le rendement en ARN par échantillon a été déterminé par la spectrophotométrie UV et présenté comme valeurs moyennes des échantillons en double par donneur. B: La pureté de l'arn pour tous les échantillons a été déterminée par la spectrophotométrie UV (A260 / A280). Page 12 sur 18 Doc. No. 8301, Rév C

13 Rendement en ARN (μg / 2,5 ml de sang) Annexe C: Purification répétable et reproductible dans l'arn La purification d'arn à partir d'échantillons de sang recueillis dans des Tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard en utilisant le Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard est hautement reproductible, comme l'illustrent les rendements d'arn similaires obtenus à partir des mêmes donneurs de sang par 3 opérateurs différents (figure 5). De façon similaire au rendement en ARN, la pureté et la qualité élevées de l'arn isolé sont très reproductibles, comme illustrer par les valeurs A260 / A280 consistantes entre 1,8 et 2,2 (Figure 6), ainsi que la teneur en ADN génomique en dessous de 0,10% (p / w) (Figure 7), indépendamment de l'opérateur parmi les 3 différents opérateurs qui a purifie l'arn dans les échantillons de sang. La reproductibilité du Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard a également été vérifiée par analyse des niveaux de transcriptions d'arn RT-PCR pour C-Fos et IL1-. Comme représenté sur la Figure 8, les niveaux d'arn des transcriptions C-Fos et IL1- par rapport à la transcription d'arn 18S témoin sont similaires, indépendamment de l'opérateur qui a traité les échantillons. Rendement d'arn reproductible et répétable par 3 opérateurs (A,B,C) Figure 5: Rendement d'arn reproductible. Le sang a été extrait de 8 donneurs sains dans des Tubes Sanguins RNAgard et conservé à température ambiante (18-25 C) pendant 3 jours. L'ARN a été purifié à partir d'échantillons de sang en double par donneur, par 3 opérateurs différents, en utilisant le Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard. Le rendement en ARN par échantillon a été déterminé par la spectrophotométrie UV et présentée comme valeurs moyennes des échantillons en double par donneur. Page 13 sur 18 Doc. No. 8301, Rév C

14 Pureté d'arn reproductible et répétable par 3 opérateurs Pureté de l'arn (A260/A280) ADN génomique (w/w) (%) Opérateur A Opérateur B Opérateur C Figure 6: Pureté reproductible de l'arn. Le sang a été extrait de 8 donneurs sains dans des Tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard et conservé à température ambiante (18-25 C). Après 3 jours de conservation, les échantillons ont été traités par 3 opérateurs en utilisant le Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard. La pureté ARN pour tous les échantillons a été déterminée par la spectrophotométrie UV (A260 / A280). Pureté d'arn reproductible et répétable par 3 opérateurs Opérateur A Opérateur B Opérateur C Figure 7: Pureté reproductible de l'arn. Le sang a été extrait de 8 donneurs sains dans des Tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard et conservé à température ambiante (18-25 C). Après 3 jours de conservation, les échantillons ont été traités par 3 opérateurs en utilisant le Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard. Le pourcentage de contamination par l'adn génomique a été déterminé pour tous les échantillons d'arn par amplification qpcr d'un amplicon d'adn génomique de RNAse P, par rapport à l'amplification de la même cible à partir d'entrées connues d'échantillons d'adn génomique. Page 14 sur 18 Doc. No. 8301, Rév C

15 ΔΔ Ct par Rapport à l'opérateur A ΔΔ Ct par Rapport à l'opérateur A IL1-β R stabilité de l'arn IL1-β par RT-PCR Stabilité de l'arn C-Fos par RT-PCR Opérateur A Opérateur B Opérateur C Opérateur A Opérateur B Opérateur C Figure 8: Caractérisation des niveaux de transcriptase C-Fos et IL1- par test RT-PCR. Le sang a été extrait de 8 donneurs sains dans des Tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard et conservé à température ambiante (18-25 C). Après 3 jours de conservation, les échantillons ont été traités par 3 opérateurs en utilisant le Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard. Les niveaux de transcriptions C-Fos et IL1-ß, normalisés aux transcriptions 18S ont été déterminés par RT-PCR dans des échantillons traités par l'opérateur B et l'opérateur C et montrés par rapport aux niveaux des mêmes transcriptions dans des échantillons traités à partir du même donneur par l'opérateur A, exprimée en ΔΔCt. Page 15 sur 18 Doc. No. 8301, Rév C

16 Guide de Dépannage Ce guide de dépannage contient des suggestions pour résoudre les situations suivantes. Les scientifiques du Support Technique de Biomatrica sont disponibles pour répondre aux questions liées aux informations et aux protocoles contenus dans ce manuel d'utilisation (voir page 16 pour les coordonnées ou visitez Situation Commentaire Raison / Suggestion Le sang semble coagulé ou précipité après conservation ou expédition. La formulation sanguine RNAgard dénature les protéines, qui précipitent avec le temps. La précipitation n'affecte pas les propriétés de stabilisation de l'arn pour la formulation. S assurer que l'échantillon est mélangé avant la procédure de purification d'arn, en inversant le tube 3-5 fois. Faible rendement en ARN L'ARN isolé est impur Raisons possibles: - Faible concentration de leucocytes dans l'échantillon de sang. - L'échantillon dans le Tube de Prélèvement Sanguin RNAgard n'a pas été mélangé complètement avant la purification de l'arn. - Choix du Tube de Prélèvement Sanguin. Raisons possibles: - Choix du tube de prélèvement sanguin. - Inactivation de la DNAse I conduisant à la contamination par l'adn génomique. - Les concentrations en leucocytes peuvent varier de 10 fois entre les donneurs, ce qui donne un large entendu de rendement en ARN. - Inverser le Tube de Prélèvement Sanguin RNAgard 3-5 fois immédiatement avant l'isolement de l'arn. - L'isolement d'arn avec le Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard a été optimisé avec le Tube de Prélèvement Sanguin RNAgard. Nous ne garantissons pas la qualité de l'arn stabilisé dans d'autres tubes de prélèvement sanguin. - L'isolement d'arn dans les Tubes de Prélèvement Sanguin RNAgard a été optimisé avec le Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard. La purification de l'arn recueilli dans des tubes de prélèvement Sanguin RNAgard avec d'autres produits n'est pas recommandée. - Après reconstitution de la DNAse I mélanger délicatement sans vortexer. Page 16 sur 18 Doc. No. 8301, Rév C

17 - La perte d'activité de la DNAse I conduisant à la contamination par l'adn génomique. - Après reconstitution de la DNAse I limiter les cycles de congélation / décongélation à 3. Page 17 sur 18 Doc. No. 8301, Rév C

18 Assistance Technique Biomatrica, Inc. s'engage à fournir une assistance technique exceptionnelle. Le Service Technique de Biomatrica est composé de scientifiques expérimentés ayant une expérience pratique en biologie moléculaire et utilisation des produits Biomatrica. Contacter Biomatrica directement avec toutes les questions concernant le Kit de Purification d'arn Sanguin RNAgard. Service d Assistance Technique Téléphone (Etats Unis): Site Web: support@biomatrica.com Glossaire des Symboles Harmonisés Numéro d'article Ne pas Réutiliser Numéro de LOT: Numéro de Lot Danger Date d'expiration. Utilisation avant la fin du mois indiqué Limitation de la température Tenir à l'abri de la lumière directe du soleil Consulter les instructions d'utilisation Fabricant Stérilisation par irradiation Stérilisation par technique aseptique Représentant autorisé dans la Communauté Européenne RNAgard est une marque déposée de Biomatrica Biomatrica Inc. Biomatrica Inc Oberlin Drive, #120 San Diego, CA 92121, ĖTATS UNIS. Page 18 sur 18 Doc. No. 8301, Rév C