Dioxyde de carbone avec une gamme de concentrationjusqu à 1,5 g/l (A39 modifiée par Oeno 21/2003 et complete par la résolution Oeno 3/2006)
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- Thibaud Gilbert
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1 Méthode OIV-MA-AS Méthode Type II avec une gamme de concentrationjusqu à 1,5 g/l (A39 modifiée par Oeno 21/2003 et complete par la résolution Oeno 3/2006) 1. Principe de la méthode 1.1. Cas des vins tranquilles (surpression de CO 2 0,5 x 10 5 Pa) 1 Le volume de vin prélevé sur l'échantillon amené au voisinage de 0 C est versé dans un excès suffisant de solution titrée d'hydroxyde de sodium pour avoir un ph de On titre avec une solution acide en présence d'anhydrase carbonique. La teneur en dioxyde de carbone est déduite du volume versé pour passer de ph 8,6 (forme carbonate acide) à 4,0 (acide carbonique). Un titrage témoin effectué dans les mêmes conditions sur le vin décarboniqué permet de tenir compte du volume de solution d'hydroxyde de sodium consommé par les acides du vin Cas des vins pétillants et des vins mousseux L'échantillon de vin à analyser est amené au voisinage de son point de congélation. Après soutirage d'un certain volume destiné à servir de témoin après décarbonication, on alcalinise le reste de la bouteille pour fixer tout le CO 2 sous forme de carbonate neutre. On titre avec une solution acide en présence d'anhydrase carbonique. La teneur en dioxyde de carbone est déduite du volume de solution acide versée pour passer de ph 8,6 (forme carbonate acide) à ph 4,0 (acide carbonique). Un titrage témoin effectué dans les mêmes conditions sur le vin décarboniqué permet de tenir compte du volume de solution d'hydroxyde de sodium consommé par les acides du vin. 2. Description de la méthode 2.1. Cas des vins tranquilles (surpression de dioxyde de carbone 0,5 x 10 5 Pa). 1 1 bar = 10 5 Pascal (Pa) OIV-MA-AS : R2006 1
2 Appareillage Agitateur magnétique ph mètre Réactifs Solution d'hydroxyde de sodium 0,1 M. Solution d'acide sulfurique 0,05 M. Solution d'anhydrase carbonique à 1 gramme par litre Mode opératoire Refroidir l'échantillon de vin aux environs de 0 C ainsi que la pipette de 10 ml servant à son prélèvement. Prélever dans un vase cylindrique de 100 ml, 25 ml de solution 0,1 M d'hydroxyde de sodium ; ajouter 2 gouttes de solution aqueuse d'anhydrase carbonique à 1 g par litre. Y introduire 10 ml de vin au moyen de la pipette refroidie à 0 C. Placer le vase cylindrique sur l'agitateur magnétique, mettre en place l'électrode et le barreau magnétique et procéder à une agitation modérée. Lorsque le liquide est revenu à la température ambiante, verser par affusion lente la solution 0,05 M d'acide sulfurique jusqu'à ph 8,6. Continuer les affusions d'acide sulfurique 0,05 M jusqu'à ph 4,0. Soit n ml le volume utilisé entre ph 8,6 et 4,0. Procéder par ailleurs à l'élimination du CO 2 sur 50 ml environ de l'échantillon de vin par agitation sous vide pendant 3 minutes, en réchauffant la fiole dans un bain d'eau à 25 C environ. Appliquer sur 10 ml de vin décarboniqué le mode opératoire ci-dessus : soit n ml le volume utilisé Expression des résultats 1 ml de solution titrée d'acide sulfurique 0,05 M correspond à 4,4 mg de dioxyde de carbone. La quantité de dioxyde de carbone, en grammes par litre de vin, est donnée par : 0,44 (n n ). Elle est exprimée avec 2 décimales. Remarque : Dans le cas des vins peu chargés en CO 2 (CO 2 < 1 g/l), l'addition d'anhydrase carbonique pour catalyser l'hydratation du CO 2 n'est pas nécessaire. OIV-MA-AS : R2006 2
3 2.2. Cas des vins pétillants et des vins mousseux Appareillage Agitateur magnétique. ph mètre Réactifs Solution d'hydroxyde de sodium à 50 p. 100 (m/m). Solution d'acide sulfurique 0,05 M. Solution d'anhydrase carbonique à 1 gramme par litre Mode opératoire Sur la bouteille de vin à analyser, tracer un repère au niveau du remplissage et la refroidir jusqu'à début de congélation. Laisser la bouteille se réchauffer légèrement, tout en l'agitant, jusqu'à disparition des cristaux de glace. Déboucher rapidement et mettre de côté, dans une éprouvette graduée, 45 à 50 ml de vin qui serviront au dosage témoin. Le volume exact de ce prélèvement, v ml, sera déterminé par lecture sur l'éprouvette après son retour à la température ambiante. Ajouter, sitôt le prélèvement effectué, 20 ml de solution d'hydroxyde de sodium à 50 p dans la bouteille pour une contenance de 750 ml. Attendre que le vin soit revenu à la température ambiante. Placer dans un vase cylindrique de 100 ml, 30 ml d'eau distillée bouillie et 2 gouttes de la solution d'anhydrase carbonique à 1 g/l. Y ajouter 10 ml de vin alcalinisé. Placer le vase sur l'agitation magnétique, mettre en place l'électrode et le barreau magnétique et procéder à une agitation modérée. Verser par affusion lente la solution d'acide sulfurique 0,05 M jusqu'à ph 8,6. Continuer les affusions d'acide sulfurique 0,05 M jusqu'à ph 4,0. Soit n ml le volume utilisé entre ph 8,6 et 4,0. Procéder par ailleurs à l'élimination du CO 2 sur les v ml de vin, mis à côté pour le dosage témoin, par agitation sous vide pendant 3 minutes, en réchauffant la fiole dans un bain d'eau à 25 C environ. Prélever 10 ml de vin décarboniqué dans 30 ml d'eau distillée bouillie, ajouter 2 à 3 gouttes de solution d'hydroxyde de sodium 50 p. 100 pour amener le ph à Appliquer ensuite le mode opératoire ci-dessus. Soit n ml, le volume d'acide sulfurique 0,05 M versé Expression des résultats OIV-MA-AS : R2006 3
4 1 ml de solution d'acide sulfurique 0,05 M correspond à 4,4 mg de dioxyde de carbone. Vider la bouteille de son vin alcalinisé et déterminer à 1 ml près le volume initial du vin en la remplissant avec de l'eau jusqu'au trait de repère, soit V ml. La quantité de dioxyde de carbone en grammes par litre de vin est donnée par : 0,44 (n n ) x V v + 20 V - v Elle est exprimée avec 2 décimales Calcul de la surpression théorique La surpression à 20 C, Paph 20, exprimée en Pascals, est donnée par la formule : Q Paph 1,951 x 10 5 (0,86 0,01A) (1 0,00144 S) 20 Patm avec : Q = Teneur en grammes de CO 2 par litre de vin A = Titre alcoométrique du vin à 20 C S = Teneur en sucres du vin en grammes par litre Patm = Pression atmosphérique, exprimée en Pascals 2.4 Remarque Le mode opératoire ci-dessous peut être employé à titre usuel pour des vins contenant moins de 4 g par litre de dioxyde de carbone. Il est nécessaire de disposer de deux échantillons du vin à analyser. Ouvrir l un des échantillons après l avoir refroidi aux environs de 5 C et ajouter immédiatement 5 ml d une solution d hydroxyde de sodium à 50% (m/m), pour 275 ml d échantillon. Boucher aussitôt et mélanger. Prélever 10 ml de vin ainsi traité dans un vase cylindrique contenant 40 ml d eau et ajouter 3 gouttes de solution d anhydrase carbonique à 0,1 g/l. Titrer avec une solution d acide sulfurique 0,02275 M jusqu à ph 8,6, puis jusqu à ph 4,0 et relever le volume versé entre ph 8,6 et 4,0, soit n ml. Procéder par ailleurs à l élimination du dioxyde de carbone sur 25 ml environ de vin, prélevés sur le deuxième échantillon, par agitation sous vide durant 1 min. dans un flacon de 500 ml contenant III gouttes de solution d anhydrase carbonique. Ajouter 0,33 ml de solution d hydroxyde de sodium à 50% (m/m). Appliquer sur 10 ml de vin décarboniqué le mode opératoire ci-dessus. Soit OIV-MA-AS : R2006 4
5 n ml le volume utilisé, 1 ml H 2 SO 4 0,02275 M correspond à 200 mg de dioxyde de carbone par litre. Teneur du vin analysé en dioxyde de carbone, en milligrammes par litre : (n - n') x 200 x 1,013 Méthode de référence : BIBLIOGRAPHIE CAPUTI A, UEDA M., WALTER P, & BROWN T., Amer, J, Enol, Vitic., 1970, 21, , SUDRAUD P., F., O.I.V., 1973, n 350, GORANOV N., F.V., O.I.V., 1983, n 758, BRUN S, & TEP Y., F.V., O.I.V., 1981, n 736 & 1982, n 736 (bis), OIV-MA-AS : R2006 5
6 - Etude collaborative - Titrage du dioxyde de carbone dans les vins pétillants et mousseux - Rapport sur les résultats obtenus- Objectif de l étude L objectif de l étude est de déterminer les caractéristiques de répétabilité et de reproductibilité de la méthode de référence (MA-F-AS DIOCAR) pour le titrage du CO 2 dans les vins pétillants et mousseux. Les définitions de l OIV et les limites de CO 2 sont disponible dans la résolution OENO 1/2002. Besoins et objectifs de l étude La méthode de référence pour le titrage du CO 2 n incluant pas des données de précision, c'est à cette fin que ces essais collaboratifs ont été menés. En raison de la particularité analytique de cette méthode, le protocole de validation conventionnel n a pas pu être complètement respecté. Sur une bouteille d échantillon, on n a pu effectuer qu une seule détermination indépendante. Chaque bouteille a dû être considérée comme individuelle. Il n a donc pas été possible de procéder aux essais d homogénéité prévus d ordinaire dans le cadre des enquêtes préliminaires d une étude collaborative. Il a donc fallu travailler en étroite collaboration avec les producteurs afin d avoir un matériau d essai homogène. Les échantillons ont été prélevés dans un lot au cours du remplissage des bouteilles, directement sur la ligne de remplissage dans un court intervalle de temps, en supposant donc que le CO 2 avait été distribué de manière homogène dans toutes les bouteilles. L étude a été conçue comme une série de répétitions en aveugle. L anonymat complet des échantillons n a pas pu être garanti car les partenaires/producteurs impliqués dans l étude utilisaient différents types de bouteilles et/ou d obturateurs pour les différents échantillons. Il a donc fallu se fier à l honnêteté des laboratoires participant à l étude à qui on a demandé de réaliser une analyse indépendante des données, sans modification de ces données. Objet et domaine d'application 1. La méthode est quantitative. OIV-MA-AS : R2006 6
7 2. la méthode est applicable pour le titrage alcoométrique du CO 2 dans les vins pétillants et mousseux pour vérifier le respect des normes. Matériaux et matrices L étude collaborative a porté sur 6 échantillons différents. Ceux-ci ont tous été envoyés en répliques en aveugle. Au total 12 bouteilles ont donc été distribuées aux participants. Tableau 1 : Echantillons et codes Echantillon Code bouteille Type Echant. A (Code 1 + 9) Vin mousseux Echant. B (Code 2 + 5) Vin pétillant Echant. C (Code 3 + 4) Vin mousseux Echant. D (Code ) Vin pétillant Echant.E (Code ) Vin pétillant Echant. F (Code ) Vin mousseux (rouge) Mesures de contrôle La méthode étudiée dans le présent document est déjà approuvée dans la pratique. Seules les données de précision manquantes devaient être déterminées par l étude collaborative. Il n a pas été nécessaire d effectuer d essai préliminaire car la plupart des laboratoires utilisaient déjà la méthode de référence pour leurs analyses usuelles. Méthode à suivre et pièces justificatives Toutes les pièces justificatives nécessaires ont été fournies aux participants (lettre d accompagnement, référence de la méthode d analyse, formulaire de réception de l échantillon et fiche de résultats). La détermination de la teneur de CO 2 devait être exprimée en g/l. OIV-MA-AS : R2006 7
8 Analyse des données 1. La détermination des valeurs aberrantes a été évaluée par le test de Cochran, le test de Grubbs unilatéral et le test de Grubbs bilatéral. 2. Une analyse statistique a été effectuée pour obtenir les données de répétabilité et reproductibilité 3. Les valeurs de HORRAT ont été calculées. Participants 13 laboratoires appartenant à plusieurs pays ont participé à l étude collaborative. On a attribué un code à chaque laboratoire. Les laboratoires participants ont une expérience reconnue dans l analyse du CO 2 dans les vins mousseux. Tableau 2 : Liste des participants. Landesuntersuchungsamt D Koblenz (Coblence) Landesuntersuchungsamt D Speyer Servicio Central de Viticultura y Enologia E Villafranca Del Pendes ESPAGNE Landesuntersuchungsamt D Oberschleißheim Chemisches Landes- u. Staatl. Veterinäruntersuchungsamt D Münster Bundesamt für Weinbau A-7000 Eisenstadt AUTRICHE Chemisches und Veterinäruntersuchungsamt D Fellbach Institut für Lebensmittelchemie und Arzneimittelprüfung D Mainz (Mayence) Institut für Lebensmittel, Arzneimittel und Tierseuchen D BERLIN Landesuntersuchungsamt D Trier (Trèves) Instituto Agrario di S. Michele I S. Michele all Adig ITALIE Ispettorato Centrale Repressione Frodi I Conegliano (Treviso) ITALIE BgVV D Berlin OIV-MA-AS : R2006 8
9 9. Résultats Pour la détermination du CO 2 les valeurs d incertitude sont calculées directement à partir des résultats soumis. Aux fins de l évaluation de l étude collaborative, le calcul de la valeur Horrat est pertinent. Pour tous les échantillons on a obtenu une valeur Horrat < 2 pour la reproductibilité et la répétabilité, ce qui est convaincant pour une étude collaborative. Le Tableau 3 donne les résultats du titrage de CO 2 par échantillon. Tableau 3 : Résumé des résultats du titrage de CO 2. CO 2 ECHANT. A ECHANT. B ECHANT. C ECHANT. D ECHANT. E ECHANT. F Moyenne[ g/l] 9,401 3,344 9,328 4,382 4,645 8,642 r [g/l] 0,626 0,180 0,560 0,407 0,365 0,327 sr [g/l] 0,224 0,064 0,200 0,145 0,130 0,117 RSDr % 2,379 1,921 2,145 3,314 2,803 1,352 Hor 0,893 0,617 0,804 1,109 0,946 0,501 R [g/l] 1,323 0,588 0,768 0,888 0,999 0,718 sr [g/l] 0,473 0,210 0,274 0,317 0,357 0,256 RSDR % 5,028 6,276 2,942 7,239 7,680 2,967 HoR 1,245 1,331 0,728 1,599 1,711 0,726 OIV-MA-AS : R2006 9
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