Concerne : Résultats des confrontations de Biologie Médicale: Série 3 Mycologie 2012 Nombre de réponses reçues : 235 sur 248 participants

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1 Association de Biologie Praticienne 70 avenue des Gobelins PARIS - Tél : Fax : secretariatabp@orange.fr Enregistrée à la Préfecture de la Région de l Ile de France, délégation à la formation professionnelle, sous le N SIRET : APE 913 E Dr Annick DATRY Service de Parasitologie et Mycologie Hôpital Pitié Salpêtrière 47 bd de l Hôpital Paris Tél : annick.datry@psl.aphp.fr Paris, le 27 novembre 2012 Cher confrère, Concerne : Résultats des confrontations de Biologie Médicale: Série 3 Mycologie 2012 Nombre de réponses reçues : 235 sur 248 participants 1) Echantillon 1 (bouchon bleu) Il s agit d une jeune femme de 25 ans qui présente une lésion desquamante au niveau du second orteil du pied droit Résultats Microsporum gypseum Techniques d identification Le prélèvement a été ensemencé sur milieu de Sabouraud-chloramphénicol-actidione. Examen macroscopique +++ Examen microscopique : prélever un fragment de la colonie que l on dilacère dans 2 gouttes de lactophénol ou bleu-lactophénol, ou utiliser la technique du scotch. On recherche au microscope les éléments caractéristiques des dermatophytes : filaments, microconidies, macroconidies et ornementations particulières Caractéristiques morphologiques : - Voir annexe Thérapeutique recommandée Terbinafine crème pendant 2 semaines au moins Commentaires concernant les réponses - Réponses exactes : Microsporum gypseum, 150 fois - Réponses inexactes ou incomplètes : - Microsporum canis, 24 fois - Microsporum praecox, 20 fois - Microsporum persicolor, 13 fois - Trichophyton mentagrophytes, 12 fois - Epidermophyton floccosum, 9 fois - Microsporum audouini, 3 fois - Trichophyton rubrum, 2 fois - Trichophyton verrucosum, 2 fois, - Trichophyton erinacei, 1 fois - Microsporum fulvum, 1 fois - Pas de réponse, 1 fois - Réponse non retournée, 13 fois

2 2) Echantillon 2 (bouchon vert) Il s agit d une patiente africaine âgée de 30 ans qui présente des lésions au niveau des ongles des pieds Résultats Fusarium oxysporum Techniques de laboratoire utilisées Ensemencement sur milieu de Sabouraud - chloramphénicol sans actidione Même technique d identification que pour l échantillon Caractéristiques morphologiques - Voir annexe Thérapeutique recommandée Le traitement médical est très difficile. La terbinafine et le voriconazole sont peu efficaces Commentaires concernant les réponses - Réponses exactes : - Fusarium oxysporum et spp, 193 fois - Réponses inexactes ou incomplètes : - Mucor sp, 35 fois - Acremonium spp, 15 fois - Trichophyton rubrum, 11 fois - Trichophyton spp, 6 fois - Scytalidium spp 3 fois - Alternaria sp, 1 fois - Trichosporon spp, 1 fois - absence de réponse, 4 fois - Réponse non retournée, 13 fois 3) Echantillon 3 (à Ensemencer) Ecouvillon rectal chez un patient en réanimation Résultats Candida guillermondii Techniques de laboratoire utilisées Ensemencer sur milieu de Sabouraud-chloramphénicol et Sabouraud-chloramphénicol-actidione ou ensemencement direct sur milieu chromogène (Chromagar) Caractéristiques morphologiques - Voir annexe Thérapeutique recommandée Il est recommandé de traiter par fluconazole (antifongigramme souhaitable) Commentaires concernant les réponses - Réponses exactes : - Candida guillermondii, 189 fois - Réponses inexactes ou incomplètes : - Candida famata, 25 fois - Saccharomyces spp, 6 fois - Candida spp, 3 fois - Candida parapsilosis, 2 fois - Candida glabrata, 2 fois - Cryptococcus laurentii, 2 fois - Candida albicans, 1 fois - Candida krusei, 1 fois - Culture stérile, 1 fois - Pas de réponse, 3 fois - Réponse non retournée, 13 fois

3 ANNEXE 1 Microsporum gypseum C est un champignon cosmopolite d origine tellurique. Il peut être isolé du pelage des petits mammifères sauvages. Il représente moins de 1% des dermatophytes chez l homme. Il provoque des épidermophyties des parties découvertes et le poil ou le cheveu sont rarement parasités (absence de fluorescence sous lumière de Wood). Diagnostic mycologique Examen macroscopique La croissance de M. gypseum est rapide (6 jours). Les colonies sont extensives, plates, rayonnées montrant un aspect plâtreux, épais, de couleur beige à ocre au recto et au verso. Examen microscopique Les macroconidies sont très nombreuses, à parois minces et échinulées, en «tonnelets», à extrémités arrondies (40-60 x µm) Les microconidies piriformes sont rares. ANNEXE 2 Fusarium oxysporum Les Fusarium sont des champignons cosmopolites, retrouvés dans le sol, l air ou l eau. Ce sont des pathogènes de très nombreuses plantes (céréales, fruits, riz, canne à sucre ). Diagnostic mycologique La culture est rapide à 27 et 37 sur milieu de Sabouraud sans actidione Examen macroscopique Les colonies sont duveteuses à floconneuses, roses à pourpres. Examen microscopique Les conidiophores sont rares ou courts et ramifiés. Les phialides sont courtes, latérales et solitaires (8-20x3-5 µm).les macroconidies sont rares ou nombreuses. Les microconidies sont nombreuses en «fausses têtes» (5-12 x 2,2-3,5 µm). Les chlamydospores sont très nombreuses (5 à 15 µm). NB : Le diagnostic d espèces des Fusarium est difficile et est réalisé dans notre service par spectrométrie de masse.

4 ANNEXE 3 Candida guillermondii Cette levure a été isolée de l air, de l eau de mer, de produits alimentaires et du tube digestif de nombreux animaux. Chez l homme on la retrouve rarement dans le tube digestif, plus souvent sur la peau. Elle peut provoquer des mycoses cutanées, des onyxis et parfois des septicémies. Diagnostic mycologique Examen macroscopique Les colonies sont blanches, planes, lisses, brillantes, blanches à crèmes. Examen microscopique Les levures sont ovoïdes, de petite taille (2-4 X 3-6 µm). Diagnostic de genre Sur PCB ou RAT, il existe une pseudofilamentation courte avec des amas de blastospores aux articulations des bourgeons. Diagnostic d espèce Assimilation des sucres : nombreux sucres assimilés : galactose, saccharose, maltose, cellobiose, tréhalose, raffinose. Lactose négatif Réduction du tétrazolium positive Résistante à l actidione Sur milieu Chromagar les colonies sont roses et le diagnostic d espèce peut être réalisé par spectrométrie de masse.

5 ANNEXE 4 : Illustrations en images Echantillon 1 (bouchon bleu) Microsporum gypseum Lésion au niveau de l orteil Examen direct de la lésion

6 Culture sur milieu de Sabouraud Examen microscopique de la culture

7 Echantillon 2 (bouchon vert) Fusarium oxysporum et spp. 1- Culture sur milieu de Sabouraud 2- Examen microscopique de la culture

8 Echantillon 3 (à Ensemencer) Candida guillermondii 1- Culture sur milieu Chromagar 2- Examen direct de la culture

9 ANNEXE 5 : Diagrammes Echantillon 1 (bouchon bleu) Microsporum gypseum MYCOSES Nbre de réponse 235 sur 248 % Identification des mycoses Microsporum gypseum ,83 Microsporum canis 24 10,21 Microsporum praecox 20 8,51 Microsporum persicolor 13 5,53 Trichophyton mentagrophytes 12 5,11 Epidermophyton floccosum 9 3,83 Trichophyton rubrum 2 0,85 Trichophyton verrucosum (ochraceum) 2 0,85 Microsporum fulvum 1 0,43 Trichophyton erinasei 1 0,43 Non effectué au laboratoire 1 0,43 Total 235,00 100,00

10 Echantillon 2 (bouchon vert) Fusarium oxysporum et spp. MYCOSES Nbre de réponse 235 sur 248 % Identificatio des mycoses Fusarium oxysporum et spp ,13 Acremonium spp. 15 6,38 Trichophyton rubrum 11 4,68 Trichophyton spp. 6 2,55 Scytalidium spp. 3 1,28 Alternaria spp. 1 0,43 Aspergillus versicolor 1 0,43 Trichosporon spp. 1 0,43 Pas de réponse 3 1,28 Non effectué au laboratoire 1 0,43 Total 235,00 100,00

11 Echantillon 3 (à Ensemencer) Candida guillermondii MYCOSES Nbre de réponse 235 sur 248 % Identification des mycoses Candida guilliermondii ,43 Candida famata 25 10,64 Saccharomyces spp. 6 2,55 Candida spp. 3 1,28 Candida glabrata 2 0,85 Candida parapsilosis 2 0,85 Cryptococcus laurentii 2 0,85 Candida albicans 1 0,43 Candida krusei 1 0,43 Non effectué au laboratoire 3 1,28 Absence de culture ou d'éléments mycéliens 1 0,43 Total ,00