CAS DE DISCORDANCE FOETOPLACENTAIRE

Transcription

1 CAS DE DISCORDANCE FOETOPLACENTAIRE 1 Maud BLANLUET Dr Anne-Claude TABET Laboratoire de Cytogénétique Hôpital Robert Debré, Paris

2 PRISE EN CHARGE DES CHORIOCENTÈSES À ROBERT DEBRÉ EN 2011 : Prélèvement de villosités choriales = biopsie de trophoblastes (BT): SA Voie vaginale, trans-abdominale possible Fausses couches : 1-2% Milieu de transport : RPMI Examen direct : 48h Culture cellulaire : 2 flacons (milieux avec collagène) > j 2

3 CAS DE MME P. Contexte : 43 ans, G2P2 Signes d appels échographiques à 12 SA : - Hygroma - Nuque 2,5 mm (marqueurs sériques : 1/497) - Mains bottes avec os des avant-bras courts et incurvés + β-hcg à 0,24 MoM : basse BT à 13 SA le 23/03/2011 Caryotype fœtal 3

4 RÉSULTATS : EXAMEN DIRECT Caryotype : Formule chromosomique 46,XY 10 mitoses analysées 4 mitoses caryotypées Marquage RHG FISH sur examen direct systématique : - Interphasique : 20 noyaux / 60 : 3 signaux noyaux / 60 : 2 signaux 18 - Métaphasique : Toutes les mitoses : 46,XY 4

5 FISH SUR EXAMEN DIRECT Marquage CEP18a Tel18pv Noyaux : Disomiques et trisomiques Mitoses : Toutes disomiques 5

6 RÉSULTATS : CULTURE Caryotype : Formule chromosomique 47,XY, mitoses analysées 5 mitoses caryotypées Marquage RHG et GTG 100% des cellules issues de culture: Trisomie 18 libre et homogène 6

7 FISH SUR CULTURE Marquage CEP18a Mitoses et Noyaux trisomiques 7

8 CONCLUSION DU CAS CLINIQUE Résultats : - Examen direct : Caryotype normal FISH avec noyaux trisomiques en mosaïque sans mitose trisomique - Culture : Caryotype anormal avec trisomie 18 Discordance foeto-placentaire Examen foetopathologique : Malformations évocatrices de trisomie 18 : > Mains bottes, reins en fer à cheval, atrésie de l œsophage, artère ombilicale unique 8

9 MÉCANISME Examen direct : Mise à profit de la capacité du cytotrophoblaste à se diviser spontanément > Reflet cellules trophoblastiques Culture : Multiplication des cellules de l axe mésenchymateux > Reflet cellules embryonnaires 9

10 MÉCANISME Trophoblaste Syncytiotrophoblaste Cytotrophoblaste Examen direct Placenta Axe mésenchymateux Culture de BT Morula Bouton Embryonnaire Epiblaste Mésenchyme extra-embryonnaire Amnios Culture de LA Chorion Embryon Amnios Hypoblaste Vésicule vitelline 10

11 DISCORDANCES FŒTOPLACENTAIRES BT Faux + Faux - BT anormale Fœtus normal BT normale Fœtus anormal Mosaïque confinée au placenta Discordance foetoplacentaire vraie 1-2% à 11 SA Plus rare 11

12 INTERPRÉTATION Fœtus atteint, Placenta normal 2 cas de figure envisageables : 1- Non disjonction mitotique post-zygotique : Survenue tardive de l anomalie dans le bouton embryonnaire 2 - Non disjonction méiotique zygotique : Survenue précoce de l anomalie avec correction de trisomie dans le trophoblaste 12

13 INTERPRÉTATION 2 Correction de trisomie Trophoblaste Sain Syncytiotrophoblaste Cytotrophoblaste Axe mésenchymateux Atteint Examen direct Mitoses N Noyaux mosaïque Culture de BT Mitoses an Morula 1 : Sain 2 : Atteint Epiblaste Mésenchyme extra-embryonnaire Atteint Culture de LA Mitoses an 1 Anomalie Bouton Embryonnaire Atteint Hypoblaste Amnios 13

14 EVOLUTION DES PRATIQUES : EN 2013 À ROBERT DEBRÉ Prenatal BoBs : Prenatal BACs-on-Beads + Culture BT > Caryotype + «Ecrasi» : Précaution supplémentaire Fraction du prélèvement frotté entre deux lames de verre > FISH éventuelle 14

15 PRENATAL BOBS Détection aneuploïdies 13, 18, 21, X et Y + 9 syndromes microdéletionnels > Vialard et al., 2011 > Shaffer et al., 2011 Extraction d ADN sur BT, LA ou sang BT : ADN issu cellules trophoblastiques et axe mésenchymateux > représentatif placenta et embryon Avantages : - Robuste, informatif et rapide - Pas ou peu de faux + - Reflet ensemble feuillets - Evite accident de culture Inconvénients : - Ne détecte pas triploïdies - Contamination maternelle si > 90% - Seuil détection mosaïques : 20% - Détection ciblée 15

16 CONCLUSION En 2011 : Culture de BT systématique pour compléter l examen direct > Si échec / doute : amniocentèse Evolution technique : BoBs - Mise en évidence plus rapide des discordances foetoplacentaires - Mais culture de BT reste indispensable 16

17 MERCI POUR VOTRE ÉCOUTE ATTENTIVE! 17