Manuel de prélèvement des échantillons biologiques

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1 Laboratoire de Biologie Médicale Manuel de prélèvement des échantillons biologiques Rédaction Validation du contenu Approbation de la forme Nom(s) et Fonction(s) Date de signature G. SALAMA (Biologiste) B. RIVIERE (Chef de service laboratoire) P. MARAVAL (Qualiticien) 29/05/ /05/ /05/2015

2 TABLE DES MATIERES PRESENTATION DU LABORATOIRE... 2 COMMENT VENIR?... 2 HORAIRE D OUVERTURE AU PUBLIC... 2 POUR NOUS CONTACTER... 2 RECOMMANDATIONS PRE-ANALYTIQUES... 3 MODALITES D'ACCES AU CATALOGUE DES ANALYSES DE BIOLOGIE MEDICALE... 3 ACCES INTRANET DEPUIS UN SITE DU CHIC CASTRES MAZAMET :... 4 ACCES INTERNET DEPUIS L EXTERIEUR DU CHIC CASTRES MAZAMET:... 6 RECOMMANDATIONS POUR LES PRELEVEMENTS SANGUINS... 7 PRELEVEMENT VEINEUX... 8 PRELEVEMENT CAPILLAIRE... 8 RECOMMANDATIONS POUR LES PRELEVEMENTS URINAIRES... 9 CONDITIONS D'ACCEPTATION DES TUBES D'HEMOSTASE UTILISATION DES DIFFERENTS ECOUVILLONS DE PRELEVEMENT BIOLOGIQUE CONSIGNES A RESPECTER SELON L'ANALYSE DE BIOLOGIE MEDICALE RECOMMANDATIONS SUR LES PRELEVEMENTS A L ATTENTION DES PATIENTS ACTE DE PRELEVEMENT PRELEVEMENTS SANGUINS RECHERCHE DE CRYOGLOBULINES TABLEAU RECAPITULATIF DES TESTS DYNAMIQUES HGPO : HYPERGLYCEMIE PROVOQUEE PAR VOIE ORALE TEST A LA LH-RH TEST AU SYNACTHÈNE IMMÉDIAT (CF. NOTE 3) TEST AU TRF RECOMMANDATIONS GENERALES POUR LES PRELEVEMENTS DE MICROBIOLOGIE HEMOCULTURES - ANAEROBIE AEROBIE IDENTIFICATION DES ECHANTILLONS : INFORMATIONS OBLIGATOIRES : ÉTIQUETAGE DES ECHANTILLONS : RENSEIGNEMENT DE LA FEUILLE DE PRESCRIPTION : DOCUMENTS DEVANT ACCOMPAGNER LA PRESCRIPTION ELIMINATION DES DECHETS SUITE AUX PRELEVEMENTS BIOLOGIQUES TRANSPORT DES ECHANTILLONS IDENTIFICATION D UNE DEMANDE URGENTE DE BIOLOGIE MEDICALE CONDITIONNEMENT DES ECHANTILLONS BIOLOGIQUES AVANT TRANSPORT TRANSPORT SUR L HOPITAL DU PAYS D AUTAN (HPA) VIA LE PNEUMATIQUE TRANSPORT DES ECHANTILLONS BIOLOGIQUES DES SITES ANNEXES VERS L'HPA LES BONS DE PRESCRIPTION UTILISABLES DANS LES SERVICES DE SOINS DOCUMENTS ANNEXES

3 PRESENTATION DU LABORATOIRE COMMENT VENIR? o Situation géographique : Le Laboratoire de biologie médicale se situé au rez-de jardin Accès à partir du Hall d accueil central o Bus Libellus : Ligne n 10 / Fréquence environ 1bus par heure HORAIRE D OUVERTURE AU PUBLIC o Du lundi au vendredi : 7h30 12h00 et 14h00 17h00 Prélèvements sur rendez-vous : o Du lundi au vendredi : 7h30 11h30 et 14h30 16h30 POUR NOUS CONTACTER o Téléphone : o Fax : o Mail : labo@chic-cm.fr 2

4 RECOMMANDATIONS PRE-ANALYTIQUES MODALITES D'ACCES AU CATALOGUE DES ANALYSES DE BIOLOGIE MEDICALE Le catalogue informatique des analyses de biologie médicale est consultable en ligne selon deux modalités différentes selon le lieu de connexion : Accès Intranet depuis un site du CHIC Castres - Mazamet Accès Internet depuis l extérieur du CHIC Castres - Mazamet 3

5 ACCES INTRANET DEPUIS UN SITE DU CHIC CASTRES MAZAMET : Adresse du catalogue : 4

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7 ACCES INTERNET DEPUIS L EXTERIEUR DU CHIC CASTRES MAZAMET: Adresse du site internet du CHIC Castres Mazamet : 6

8 RECOMMANDATIONS POUR LES PRELEVEMENTS SANGUINS Tube silice 7ml avec gel Tube sec Citrate de sodium CTAD COAG Stocker à l abri de la lumière Sérologies : Hépatites A B C, HIV, Lyme, Syphilis, Mycoplasma pneumonie, Toxoplasmose, Rubéole, CMV, EBV, MNI Marqueurs: ACE, CA19.9, CA15.3, CA125, AFP, PSAt et PSAl Protéînes : Électrophorèse des protéines, immunofixation, Béta2Microglobuline, Ig A, Ig G, Ig M, Pré albumine (bilan nutritionnel) Auto-immunité : Fact. rhumatoïde, ACAN, ADN, ENA, ACAT, Anti TG, Anti TPO Divers : IgE tot et spécifiques, Stalertest Médicaments : Lithium Deuxième tube si analyses expédiées Cryoglobulines : Prélèvement et Transport à 37 c (Voir QUAL-MOP-300) Toxicologie : Expédiée au CHU de Toulouse Pose du garrot < 3 minutes Remplir impérativement jusqu au trait de jauge TP, INR, TCA, fibrinogène D dimères, ATIII Activité anti-xa (HBPM) Activité anti-xa (Héparine) Activité anti-xa (Orgaran) 2 tubes supplémentaires si : Facteurs II V VII VIII IX X XI XII Facteur Willebrand Recherche d anticoagulants circulants Délai d acheminement < 4h Tube Héparinate de lithium 7ml avec gel 1 tube REMPLI suffi pour réaliser les analyses cicontre Héparine de lithium 5ml sans gel Biochimie : BES complet, bilans hépatiques et pancréatiques, CRP, Acide urique, Haptoglobine, Magnésium et Phospore, Bilan lipidique. Divers : Fructosamine, Procalcitonine, Vit D Profil nutritionnel : Albumine, Orosomucoïde Marqueurs cardiaques : Troponine, Myoglobine, Pro BNP Médicaments & Toxicologie : Vancomycine, Tégrétol, Dépakine, Alcool, Phénobarbital, Paracétamol, Gentamicine, Amikacine, Vancomycine, Digoxine Hormonologie : TSH, T4, T3, Cortisol, FSH, LH, Oestradiol, Prolactine, Progestérone, Testostérone, HCG, Bilans anémie : Ferritine, Fer+CTF Vit B12, Folates TRANSPORT IMMEDIAT ou <1h à +4 c Ca ionisé, Lactates Méthémoglobine (< 3 heures) Carboxyhémoglobine VS (vitesse de sédimentation) Tube de purge A utiliser avant un prélèvement avec un système à ailettes Tube Gris Glycémie EDTA NFS Plaquettes Réticulocytes, Schizocytes Paludisme, Filaires Kleihauer 2ème tube si : Hémoglobine glyquée Électrophorèse de l hémoglobine Parathormone Ammoniémie Transport immédiat ou <1h à +4 c) Seringue à gazométrie Transport immédiat < 1h à +4 c Gazométrie Lactates, Ca ionisé Carboxyhémoglobine Méthémoglobine 7

9 PRELEVEMENT VEINEUX ORDRE DE PRELEVEMENT: POSITION DU TUBE Toujours plus bas que le point de ponction Bras incliné vers le bas. But : Permet de vérifier le niveau de remplissage. Évite le reflux de sang vers la veine. Étiquette vers le bras du patient But : Visualiser le niveau de remplissage Ne pas tourner le tube sur l aiguille But : Évite la torsion du manchon de protection de l aiguille perce-bouchon (lors des prélèvements multiples, risque de «fatigue» pouvant entraîner une fuite de sang) HOMOGENEISATION 5 retournements lents PRELEVEMENT CAPILLAIRE ORDRE DE PRELEVEMENT VOLUME MINIMUM 400µL HOMOGENEISATION 10 retournements lents 8

10 RECOMMANDATIONS POUR LES PRELEVEMENTS URINAIRES Tube ou flacon Nombre Examens réalisés Remarque Tube ou flacon Nombre Examens réalisés Remarque 1 1 Biochimie urinaire, micro-albuminurie Ag Légionelle, Ag pneumocoque, ph, densité, pigments et sels biliaires 2 Drogues urinaires Fiche A bleue Prescriptions courantes Case : A5 Biochimie urine Noter diurèse Fiche B1 jaune Microbiologie Case : B.14 Urines Fiche A bleue Prescriptions courantes Case : A6 Toxicologie Vert olive 5 ml 1 1 ECBU, culot urinaire Fiche B1 jaune Microbiologie Case : B.14 Urines Respecter le seuil minimum de remplissage (risque de faux négatif) Beige 5ml 2 Electrophorèse des urines, protéinurie de Bence Jones, chaines légères, B2 microglobuline 3 Urines à congeler Fiche E blanc Protéines Case : E2 Globulines Noter diurèse Fiche A bleue Prescriptions courantes Case : A6 Toxicologie Pot bleu 120 ml 1 Recherche de Bk dans les urines (40 ml minimum) Fiche B1 jaune Microbiologie Case : B.16 BK Beige 11ml 1 Analyses d'urines expédiées Fiche D blanc Endocrinologie et métabolismes Case : D9 Dosages urinaires Noter diurèse Pot rouge 60 ml Recueil d'urines pour réaliser une bandelette urinaire de dépistage. Si le test-ci est positif et si un ECBU est nécessaire prélever l'urine dans un tube vert olive avec l'aide de la canule de transfert (dans les conditions décrites ci-dessus). 1 Pour l ECBU, dans le cas de volumes très faible d urine (enfants très petits), prélever l urine dans un tube beige de 5 ml et envoyer immédiatement au laboratoire 9

11 CONDITIONS D'ACCEPTATION DES TUBES D'HEMOSTASE Au niveau de la référence TUBE «NORMAL» Niveau de remplissage Entre PL6 et 78P TUBE «PEDIATRIQUE» Niveau au dessous duquel l échantillon ne doit pas être accepté 10

12 UTILISATION DES DIFFERENTS ECOUVILLONS DE PRELEVEMENT BIOLOGIQUE Photo et désignation Utilisation recommandée Ecouvillons fournis par le laboratoire du CHIC Ecouvillon sécable avec tube - Transwab à bouchon violet Recherche de bactéries Ecouvillon sécable avec tube -VCM à bouchon rouge Recherche de Mycoplasmes urogénitaux Ecouvillon sécable avec tube eswab à bouchon rose Recherche de Chlamydiae trachomatis (excepté urines 2 et liquides de ponction) Ecouvillon sécable avec tube -virocult à bouchon vert Recherche de virus (sauf papillomavirus) Ecouvillon avec tube de transport conique à bouchon rouge Recherche de coqueluche par PCR et de Chlamydiae trachomatis sur liquide de ponction Ecouvillon sec avec tube à bouchon rouge Usage interne au laboratoire ou prélèvements à visée médico-légale Ecouvillons fournis pas le laboratoire d Anatomo-pathologie Brosse avec tube DNA PAP Cervical Sampler à bouchon blanc Recherche de papillomavirus 2 Chlamydiae sur urines : envoyer 5 à 10 ml d urines du premier jet dans un pot bleu 11

13 CONSIGNES A RESPECTER SELON L'ANALYSE DE BIOLOGIE MEDICALE ETAT DE JEUNE : S'assurer de l'état de jeûne du patient Le respect d'un jeûne strict de 12 heures, est indispensable avant toute exploration du métabolisme des glucides, des lipides et bilan ferrique. En dehors de ces analyses, le jeûne permet plus facilement une comparaison des résultats, notamment lorsque les analyses sont effectuées à plusieurs reprises, il est donc recommandé même s'il n'est pas indispensable. En cas de doute se renseigner auprès du biologiste. RYTHME CIRCADIEN : La concentration de certaines hormones fluctue au cours de la journée : ce phénomène est lié à la variation du métabolisme pendant les périodes diurnes et nocturnes et pendant le sommeil. L'ACTH a une concentration maximale entre 7h et 9h et le Cortisol entre 6h et 8h. Le dosage de ces deux paramètres doit donc être réalisé le matin. CYCLE MENSTRUEL : Le profil hormonal varie au cours du cycle menstruel. Le dosage de la Delta 4 Androstènedione, la Testostérone et le DHEA-S doivent s'effectuer en début de cycle. Pour les dosages de FSH, LH, Œs l'ordonnance, sinon le transcrire après avoir interrogé la patiente. LA PROLACTINE Le prélèvement doit être effectué à jeun, entre 8 et 12 h (taux minimal) chez un sujet reposé et non stressé, en début de cycle chez la femme (2ème à 5ème jour de cycle). La pose d'un cathéter est parfois nécessaire en différant de 20 mn le prélèvement de la pose. On peut également réaliser 3 prélèvements à 15 minutes d'intervalle sur lesquels la prolactine sera dosée (correspond à la prescription : «pool prolactine»). TRAITEMENTS Pour TP et INR et exploration de la thyroïde (TSH, T3, T4), indiquer le traitement sur l'ordonnance. En l'absence de traitement le mentionner également sur l'ordonnance. Devant toute demande d'analyse spécialisée, non courante demander si le patient suit un traitement et indiquer le (s) nom (s) du ou des médicaments. DOSAGE DE MEDICAMENT La posologie, la date et l heure de la dernière prise doivent être connues et reportées sur la prescription. Pour un dosage en résiduel, le prélèvement doit être effectué avant la prise suivante, s assurer que le patient n a pas pris le traitement juste avant la prise de sang. 12

14 RECOMMANDATIONS SUR LES PRELEVEMENTS A L ATTENTION DES PATIENTS Certains recueils d échantillons biologiques sont réalisés directement par les patients, vous trouverez donc ci-dessous des documents à leur attention leur expliquant comment procéder. Recueil des urines pour un ECBU - instructions pour le patient Recueil des selles - instructions pour le patient Recueil des urines de 24h - instructions pour le patient Recueil d'expectorations et de sécrétions broncho-pulmonaire - instructions pour le patient QUAL-COS-127 QUAL-COS-128 QUAL-COS-118 QUAL-COS

15 ACTE DE PRELEVEMENT PRELEVEMENTS SANGUINS DEFINITION La ponction veineuse consiste à introduire un dispositif de prélèvement dans le système veineux périphérique, en vue d un recueil sanguin. Réalisation sur prescription médicale, selon les recommandations des biologistes et des concepts d hygiène. RECOMMANDATIONS Appliquer les précautions «standard», Préserver le capital veineux, Ne pas prélever sur le bras d un patient ayant subi un curage ganglionnaire, Ne pas prélever sur le bras d un patient avec fistule artério-veineuse, Ne pas prélever sur le bras d un patient perfusé. CRITERES DE CHOIX DU DISPOSITIF DE PRELEVEMENT Choisir le diamètre de l aiguille en fonction du capital veineux du patient ; Choisir un dispositif à ailettes pour les veines difficiles à prélever. MATERIEL Collecteur à OPCT ; Sac déchets DASRI et DAOM (jaune + noir) pour le tri à la source ; 1 plateau ; Solution hydroalcoolique ; Protection à usage unique ; Corps de pompe à usage unique ou réutilisable ; 1 garrot ; 1 champ non stérile ; 1 corps de prélèvement Vacutainer ; Aiguilles éclipse sécurité ou unités de prélèvement à ailettes protégées ; Tubes de prélèvement ; Compresses stériles ; Gants à usage unique non stériles ; 1 pansement adhésif stérile. PRODUIT À UTILISER POUR LA PREPARATION CUTANEE : Si présence d une peau visuellement propre : la préparation cutanée peut être réalisée par deux applications successives d un antiseptique alcoolique ; Si présence d une peau visuellement souillée : réaliser une préparation cutanée en 4 temps : o Respecter la gamme de produits ; o Détersion avec un savon antiseptique ; o Rinçage à l eau stérile ; o Séchage avec des compresses stériles ; o Antisepsie avec antiseptique alcoolique de la même gamme : respecter le temps de séchage spontané (30s). 14

16 TECHNIQUE : Vérifier l identité du patient ; Installer le patient ; Demander au patient s il a un site préféré ; Pratiquer une hygiène des mains avec un PHA ; Installer la protection sous le bras du patient ; Poser le garrot sans trop le serrer ; Repérer la veine ; Mettre le bras de préférence en position déclive ; Procéder à la préparation cutanée ; Réaliser à nouveau une hygiène des mains ; Mettre les gants ; Piquer avec le biseau vers le haut ; Introduire l aiguille sur un centimètre maximum ; Présence d un reflux ; Positionner le tube sur l adaptateur ; Retirer le garrot (après avoir prélevé le 1 er tube, si possible); Respecter l ordre de prélèvement des tubes Cf page Erreur! Signet non défini. Retourner le tube pour homogénéiser le contenu suivant les recommandations; Au retrait de l aiguille, pratiquer une compression afin d éviter un hématome ou de réduire un épanchement sous cutané Éliminer immédiatement l aiguille dans le collecteur ; Mettre en place un pansement stérile ; Coller les étiquettes sur les tubes ; Placer les tubes dans la poche plastique en veillant à mettre la prescription dans la poche latérale afin d éviter toute contamination des documents en cas de rupture d un tube ; Respecter les délais d acheminement vers le laboratoire ; Ôter les gants et réaliser une hygiène des mains ; Réinstaller le patient si nécessaire ; 15

17 RECHERCHE DE CRYOGLOBULINES Le prélèvement doit être effectué dans 2 longs tubes de 7 ml à bouchon rouge préalablement chauffés à 37 C. Ils doivent être maintenus à cette température jusqu à leur traitement au laboratoire. Le respect de ces conditions est indispensable pour obtenir des résultats fiables. Le laboratoire met à la disposition des services prescripteurs un container thermostaté contenant les tubes de prélèvement. En pratique, lorsque vous souhaitez effectuer une recherche de cryoglobulines : Prévenir le laboratoire au moins une demi-heure avant d effectuer le prélèvement Venir chercher le container au laboratoire Effectuer le prélèvement dans les tubes contenus dans le container Replacer les tubes dans le container et ramener le tout rapidement au laboratoire. 16

18 TABLEAU RECAPITULATIF DES TESTS DYNAMIQUES TEST DYNAMIQUE Analyse Code Stimulation Temps Tube O'SULLIVAN n est plus réalisé, en cas de prescription, réaliser le test HGPO temps T0, T60, T120 HGPO Glycémies 420 G GH 2240 Insuline 1167 Glucose 75g / Per Os 0, 30, 60, 90, 120, 150, 180 J Peptide C 1168 TEST A LA LH-RH FSH 1051 LH 1041 Stimu-LH 50 2 ampoules / IV 0, 30, (60) VE TEST AU SYNACTHÈNE IMMÉDIAT 3 Cortisol 1031 VE 17 OH Progestérone 2282 DHEA Libre 2280 Synacthène Immédiat 0,25 mg / IM 0, 30, 60 J TEST AU TRF GH 2288 Prolactine 1026 TSH 1011 Stimu-TSH 1 ampoule / IV lente 0, 30, 60 J 0, 30 VE IM = IntraMusculaire / IV = IntraVeineuse / Per os = par la bouche J = tube gélosé bouchon Jaune / VE = tube sec bouchon Vert (héparinate de lithium 7 ml avec gel) / G = tube bouchon Gris 3 Suite à une rupture de stock signalée à l ANSM (2013), ce test n est plus disponible à ce jour ( ) 17

19 HGPO : HYPERGLYCEMIE PROVOQUEE PAR VOIE ORALE PREPARATION DU PATIENT Apport normoglucidique dans les 3 jours qui précèdent le test Les traitements interférant sur la glycémie doivent, si possible, être arrêtés : o Hyperglycémiants : Corticoïdes, estrogènes, diurétiques, inhibiteurs calciques, β bloquants, phénytoïne, colchicine o Hypoglycémiants : Aspirine, IMAO, quinine, disopyramide Sujet à jeun depuis la veille PRECAUTIONS PENDANT L EPREUVE Ne pas fumer Repos strict, allongé si possible Epreuve effectuée exclusivement le matin L'épreuve est ininterprétable si le sujet a vomi ou s'est alimenté pendant l'épreuve MATERIEL Matériel à perfusion : perfuseur, prolongateur, cathéter Corps de pompe Adaptateur Chlorure de sodium injectable Boisson glucosée à 75g (parfum orange ou citron). Garrot Antiseptique Gants de soins non stériles à usage unique Compresses stériles Produit hydro alcoolé Pansement adhésif Chronomètre Tubes fluorés (G) TECHNIQUE Hygiène des mains Préparation du matériel Hygiène des mains Mettre les gants Placer le garrot Désinfecter la zone choisie Poser un cathéter (Sur le CHIC, selon QUAL-MOP-335 Pose, Gestion et Surveillance des Cathéters Veineux Périphériques) Optionnel, à l appréciation du préleveur Prélever un tube pour glycémie (G) (temps 0) (Cf. Prélèvements sanguins si le cathéter n est pas posé) Enlever le garrot Enlever l'adaptateur et brancher la perfusion (dans le cas d une pose de cathéter) Faire absorber en moins de 5 minutes, 75 g de glucose (1 flacon de boisson glucosée) (En cas d un prescription à 100 g de glucose mesurer 133,3 ml de boisson glucosée). Enclencher le chronomètre Identifier le tube : identité du patient (Coller l étiquette du patient) et noter T0 Prélever un tube (G) pour la glycémie aux temps suivants (selon prescription médicale): T30; T60, T90, T120, T150, T180, (T240). 18

20 Si un cathéter a été posé, à chaque prélèvement : Hygiène des mains Mettre les gants Stopper le goutte à goutte de la perfusion Placer le garrot Placer un adaptateur sur le corps de pompe, purger le prolongateur Prélever un tube pour glycémie (G) Enlever le garrot Enlever l'adaptateur et rebrancher la perfusion Remettre le goutte à goutte Identifier le tube : identité du patient (Coller l étiquette du patient) et noter le temps en minutes du prélèvement Transmettre le tube au laboratoire Sinon (sans pose de perfusion) à chaque prélèvement procéder selon le Chapitre Prélèvements sanguins page 14. A la fin du test jeter le cathéter dans la boite récupératrice pour aiguilles et le matériel à perfusion dans la poubelle à déchets contaminés (sacs jaunes). Au cours de cette épreuve, on peut associer les dosages d'insuline, d hormone de croissance (GH) et / ou Peptide C (prélevés sur tube gélosé (J)) 19

21 TEST A LA LH-RH PREPARATION DU PATIENT Sujet à jeun depuis 12 heures Au repos depuis 30 min. MATERIEL Matériel à perfusion : perfuseur, prolongateur, cathéter Corps de pompe Adaptateur Chlorure de sodium injectable 1 ampoule de RELEFACT LH-RH 0,1 mg 1 seringue Garrot Antiseptique Gants de soins non stériles à usage unique Compresses stériles Produit hydro alcoolé Pansement adhésif Chronomètre Tubes gélosé bouchon vert (VE) TECHNIQUE a) Temps 0 (T0) Hygiène des mains Préparation du matériel Hygiène des mains Mettre les gants Placer le garrot Désinfecter la zone choisie Poser un cathéter (Sur le CHIC, selon QUAL-MOP-335 Pose, Gestion et Surveillance des Cathéters Veineux Périphériques) Introduire dans une veine un cathéter et le fixer avec un pansement adhésif Prélever un tube (VE) (temps 0) Enlever le garrot Enlever l'adaptateur et brancher la perfusion Injecter 1 ampoule de RELEFACT LH-RH 0,1 mg au niveau du dispositif de la perfusion. Augmenter le débit de la perfusion pendant quelques secondes Enclencher le chronomètre Identifier le tube : identité du patient (Coller l étiquette du patient) et noter T0 b) Temps 30 minutes (T30) 30 minutes après injection : Hygiène des mains Mettre les gants Stopper le goutte à goutte de la perfusion Placer le garrot 20

22 Placer un adaptateur sur le corps de pompe, purger le prolongateur Prélever un tube (VE) pour le dosage de la LH ou FSH (T30) Enlever le garrot Enlever l'adaptateur Jeter le cathéter dans la boite récupératrice pour aiguilles et le matériel à perfusion dans la poubelle à déchets contaminés (sacs jaunes) Identifier le tube : identité du patient (Coller l étiquette du patient) et noter le temps en minutes du prélèvement Transmettre sans délai le tube au laboratoire c) Cas particulier Ce test peut être associé au test au TRH dans ce cas, à T0 injecter successivement l ampoule de RELEFACT LH-RH 0,1 mg et l'ampoule de Stimu-TSH 21

23 TEST AU SYNACTHÈNE IMMÉDIAT (CF. NOTE 3) PREPARATION DU PATIENT Sujet à jeun depuis 12 heures Test effectué le matin à 8 h. MATERIEL Matériel à perfusion : perfuseur, prolongateur, cathéter Corps de pompe Adaptateur Chlorure de sodium injectable Synacthène Immédiat (1 ampoule de 0,25 mg stockée à = +4 C) 1 seringue et 1 aiguille IM Garrot Antiseptique Gants de soins non stériles à usage unique Compresses stériles Produit hydro alcoolé Pansements adhésifs Chronomètre Tubes gélosés bouchon vert (VE) ou Jaune (J) selon le test TECHNIQUE a) Temps 0 (T0) Sortir l ampoule de Synacthène 30 min avant utilisation Hygiène des mains Préparation du matériel Hygiène des mains Mettre les gants Placer le garrot Désinfecter la zone choisie Poser un cathéter Sur le CHIC, selon QUAL-MOP-335 Pose, Gestion et Surveillance des Cathéters Veineux Périphériques) Optionnel, à l appréciation du préleveur et Obligatoire si l injection est en IV Prélever un tube (VE) pour le dosage du cortisol ou tube (J) pour la 17 OH Progestérone ou DHEA Libre (T30) (temps 0) Enlever le garrot Enlever l'adaptateur et brancher la perfusion (dans le cas d une pose de cathéter) Injecter par voie IM, 1 ampoule de Synacthène Immédiat (0,25 mg) Si le patient est sous anticoagulant, faire l injection en IV. Enclencher le chronomètre Régler le goutte à goutte (dans le cas d une pose de cathéter) Identifier le tube : identité du patient (Coller l étiquette du patient) et noter T0 22

24 b) Temps 30 et 60 minutes (T30, T60) 30 minutes après injection : Hygiène des mains Mettre les gants Stopper le goutte à goutte de la perfusion Placer le garrot Placer un adaptateur sur le corps de pompe, purger le prolongateur Prélever un tube (VE) pour le dosage du cortisol ou tube (J) pour la 17 OH Progestérone ou DHEA Libre (T30) Enlever le garrot Enlever l'adaptateur et rebrancher la perfusion Identifier le tube : identité du patient (Coller l étiquette du patient) et noter le temps en minutes du prélèvement Transmettre le tube au laboratoire 60 minutes après injection : Procéder de la même façon que pour le temps 30 et à la fin du test jeter le cathéter dans la boite récupératrice pour aiguilles et le matériel à perfusion dans la poubelle à déchets contaminés (sacs jaunes). 23

25 TEST AU TRF PREPARATION DU PATIENT Sujet à jeun depuis 12 heures (sans thé, ni café) Au repos depuis 30 min. MATERIEL Matériel à perfusion : perfuseur, prolongateur, cathéter Corps de pompe Adaptateur Chlorure de sodium injectable Stimu-TSH (1 ampoule de 2 ml soit 250 µg) stockée à = + 4 C) 1 seringue Garrot Antiseptique Gants de soins non stériles à usage unique Compresses stériles Produit hydro alcoolique Pansement adhésif Chronomètre Tubes bouchon vert (VE) si TSH, Prolactine Tube bouchon jaune (J) si hormone de croissance TECHNIQUE a) Temps 0 (T0) Hygiène des mains Préparation du matériel Hygiène des mains Mettre les gants Placer le garrot Désinfecter la zone choisie Poser un cathéter (Sur le CHIC, selon QUAL-MOP-335 Pose, Gestion et Surveillance des Cathéters Veineux Périphériques) Prélever un tube (VE) pour la TSH et la prolactine et/ou un tube (J) pour la GH (temps 0) Enlever le garrot Enlever l'adaptateur et brancher la perfusion Désinfecter le site de prélèvement avec une compresse imbibée d antiseptique. Injecter une ampoule de Stimu-TSH au niveau du dispositif de la perfusion. Enclencher le chronomètre Identifier le tube : identité du patient (Coller l étiquette du patient) et noter T0 Oter les gants & Hygiène des mains Régler le goutte à goutte b) Temps 30 minutes (T30) (30 minutes après injection) Hygiène des mains Mettre les gants Stopper le goutte à goutte de la perfusion 24

26 Placer le garrot Placer l adaptateur et le corps de pompe, purger le prolongateur Prélever un tube (VE) pour le dosage de la TSH ou de la Prolactine ou de la GH et/ou un tube (J) pour la GH (temps 30) Enlever le garrot Enlever l'adaptateur et ôter le cathéter dans le collecteur OPCT et le matériel à perfusion dans la poubelle à déchets contaminés (sacs jaunes). Identifier le tube : identité du patient (Coller l étiquette du patient) et noter le temps en minutes du prélèvement Oter les gants & Hygiène des mains Transmettre le tube au laboratoire Cas particulier : Ce test peut être associé au test LH-RH, dans ce cas, à to injecter successivement l ampoule Stimu-TSH et l ampoule de RELEFACT LH-RH 0,1 mg. 25

27 RECOMMANDATIONS GENERALES POUR LES PRELEVEMENTS DE MICROBIOLOGIE LE MOMENT DU PRELEVEMENT Un prélèvement à visée étiologique doit être effectué dès le début du processus infectieux. De préférence avant toute antibiothérapie locale ou générale. En cas d échec d un traitement préventif ou curatif institué sans analyse préalable, le traitement doit être si possible interrompu (fenêtre thérapeutique de 24 à 48 heures) sauf si la sévérité de l évolution ne le permet pas ou s il existe un risque d infections opportunistes chez un malade neutropénique ou immunodéprimé. LE SITE DE PRELEVEMENT Les sites anatomiques appropriés sont généralement les plus proches du foyer infectieux initial et des localisations secondaires ou ceux qui constituent la porte d entrée, les voies d excrétion ou d évacuation de l infection (il ne faut pas cependant prélever les liquides de drainage recueillis dans les collecteurs non représentatifs des micro-organismes présents dans les lésions profondes) Le préleveur mentionne de façon précise le ou les sites prélevés sur le bon de demande. UNE QUANTITE SUFFISANTE DE MATERIEL EST NECESSAIRE Des volumes insuffisants peuvent donner lieu à des résultats faussement négatifs. LES METHODES DE PRELEVEMENT Dans tous les cas, les prélèvements seront réalisés avec du matériel stérile à usage unique selon les règles d hygiène et d asepsie appropriées. L usage de l écouvillon doit être limité aux prélèvements des téguments et des muqueuses. La ponction, le cathétérisme, l abord chirurgical sont indiqués pour les suppurations d une séreuse, d un organe creux, d un tissu ou d une cavité abcédée. Ces prélèvements sont éventuellement complétés par des hémocultures en fonction du contexte clinique. Certains échantillons sont inutiles pour un examen bactériologique à visée diagnostique : sondes urinaires, liquides de colostomie, tuyaux de redon, dents, contenu intestinal, vomissements. D autres échantillons permettent d obtenir des cultures dont l interprétation est difficile ; ces prélèvements sont donc déconseillés : lésions buccales superficielles ou gingivales, ulcères variqueux, lésions gangreneuses superficielles et abcès péri rectaux. CONTAMINATION DES PRELEVEMENTS Des précautions particulières doivent être prises pour éviter la contamination des échantillons par les bactéries de l environnement ou commensales (ces bactéries ou levures pouvant inhiber la multiplication in vitro des bactéries pathogènes et être prises à tort pour les bactéries responsables de l infection) Les procédés de décontamination de surface comportent soit le simple rinçage avec du sérum physiologique stérile (recueil d une expectoration, prélèvement de plaie, d escarre, de brûlure..) soit l utilisation sur la peau ou même une muqueuse d une solution antiseptique (qui sera éliminée avec du sérum physiologique stérile). RECIPIENTS CONTENANT LES ECHANTILLONS & INFORMATIONS RÉCIPIENTS STÉRILES, À USAGE UNIQUE, ÉTANCHES o La fermeture des récipients doit être hermétique. 26

28 o o Le récipient dont la surface externe a été contaminée doit être soit remplacé, soit décontaminé (par trempage dans une solution javellisée) sinon un autre échantillon sera transmis au laboratoire. Il ne faut pas transporter une seringue avec son aiguille : celle-ci doit être retirée avec un dispositif de sécurité et la seringue purgée d air, re capuchonnée avec un bouchon stérile. CHAQUE RÉCIPIENT DOIT ÊTRE IDENTIFIÉ PAR UNE ÉTIQUETTE COMPORTANT o Le nom et prénom du malade, sa date de naissance o La nature et le site du prélèvement (éventuellement le numéro de l échantillon) ET DOIT ÊTRE ACCOMPAGNÉ D UNE PRESCRIPTION MENTIONNANT EN PLUS o La date et l heure du prélèvement o Les renseignements cliniques o Le but de l analyse o La nature et l origine précise de l échantillon o Les traitements en cours o L existence d affections associées o Grossesse en cours, etc. CES DONNEES SONT ESSENTIELLES o Sans aucune précision, une culture standard sera réalisée o En fonction de la demande du clinicien, des renseignements cliniques fournis et de l origine anatomique de l échantillon, des recherches supplémentaires pourront être entreprises pour trouver d autres bactéries potentiellement pathogènes. En conclusion, les questions posées par le clinicien et la nature des renseignements cliniques sont essentielles au bactériologiste pour orienter sa démarche analytique face à un échantillon. 27

29 HEMOCULTURES - ANAEROBIE AEROBIE QUAND? Sur prescription médicale Au moment des pics thermiques : 38,5 C, de préférence avant toute antibiothérapie. En hypothermie : < 36,5 C, de préférence avant toute antibiothérapie. Au moment des frissons, même si le patient est sous antipyrétique. COMBIEN? Une ou plusieurs (en règle générale : 2 à 3) espacées de 30 minutes Si recherche d endocardite : 6 à 9 prélèvements MATERIEL Matériel nécessaire au prélèvement sanguin (Cf. Prélèvements sanguins) Flacons à hémoculture : Anaérobie (Orange) + Aérobie (Vert) Flacons à hémoculture Aérobie seul en pédiatrie (si suspicion d anaérobies chez l enfant, prélever en plus un flacon Anaérobie) Corps de pompe pour hémoculture PROTOCOLE ATTENTION : Le prélèvement d hémoculture nécessite une technique rigoureuse afin d éviter la contamination de l échantillon ou du patient, une attention particulière doit être apportée à la désinfection de la zone de prélèvement Le prélèvement doit se faire suivant les recommandations applicables à un prélèvement sanguin (Cf. Prélèvements sanguins) tout en respectant les points suivant : Préparation des flacons : o Retirer les capuchons protecteurs des flacons et passer une compresse imbibée d antiseptique sur la membrane en caoutchouc du bouchon de façon mécanique. o La compresse peut rester sur la membrane jusqu au moment du prélèvement. Ordre et remplissage des flacons : o Remplir d'abord le flacon aérobie (vert) jusqu'à la ligne indicatrice (10ml) puis désadapter le flacon. o Remplir ensuite le flacon anaérobie (orange) et désadapter le flacon avant d'enlever l'aiguille (l'air ne doit pas entrer dans le flacon anaérobie) Il est possible de prélever ensuite des tubes classiques en utilisant un réducteur adapté à cet usage. Cas particulier: Service de Pédiatrie et de Néonatologie : En accord avec le médecin et selon le contexte clinique le flacon aérobie (vert) peut être utilisé seul avec un volume minimum de sang de 1 ml. Identification des flacons : Identifier les 2 flacons à hémocultures, ne pas coller d'étiquettes sur les codes-barres des flacons et noter les renseignements cliniques sur la prescription. Transport des flacons : Transport rapide au laboratoire des 2 flacons. Si le transport immédiat au laboratoire n'est pas possible (cas des prélèvements effectués hors site de l HPA) : CONSERVER LES FLACONS A TEMPERATURE AMBIANTE (20 C à 25 C) JUSQU A 24 H. 28

30 N IDENTIFICATION DES ECHANTILLONS : INFORMATIONS OBLIGATOIRES : Quelles que soient les analyses demandées, tout échantillon doit comporter au minimum et ce directement sur chaque contenant (tube, flacon, écouvillon, seringue,.) les informations suivantes concernant le patient : Le nom d usage (ou patronymique) Le prénom La date de naissance Pour les patients hospitalisés utiliser les étiquettes d identification courantes ou les étiquettes issues de la prescription déportée : NOM Prénom Sexe xx/xx/xxxx IPP IEP Ou Sexe NOM Prénom xx/xx/xxxx nf Num Nature du tube Pour les prélèvements effectués à l extérieur du CHIC Castres Mazamet et donc ne disposant pas d étiquettes patient pré-imprimées, les informations peuvent être écrite directement sur le contenant quand celui-ci dispose d un emplacement dédié (cas des tubes) ou sur une étiquette vierge (25 x 50 mm) qui sera ensuite apposée sur les contenants : Ou ÉTIQUETAGE DES ECHANTILLONS : Tubes : L étiquette doit être collée de façon à ne pas cacher l intérieur du tube (le technicien de laboratoire doit pouvoir vérifier l état de l échantillon). 29

31 Pots : L étiquette doit être collée sur le pot et non sur le couvercle. Ecouvillons : L étiquette doit être collée sur l étui et non pas sur le sachet. Hémocultures Seringues (gaz du sang) : La seringue ne doit pas être acheminée au laboratoire avec l aiguille (utiliser le bouchon pour capuchonner l aiguille). 30

32 Tests dynamique : marquer le temps : T0, T30min, RENSEIGNEMENT DE LA FEUILLE DE PRESCRIPTION : Le préleveur doit s identifier et noter la date et heure du prélèvement sur : o L ordonnance (ou la fiche de renseignements QUAL-ENR-005 pour les patients prélevés à l extérieur du CHIC Castres-Mazamet ou QUAL-ENR-519pour les laboratoires clients) o Le bon de prescription ou le bon de prescription déportée dans les cases prévues à cet effet Bon de prescription déportée Bon de prescription 31

33 DOCUMENTS DEVANT ACCOMPAGNER LA PRESCRIPTION Certaines analyses nécessitent des documents particuliers : Fiche de RC, Bon de consentement, téléchargeables à partir du Catalogue des analyses. Exemples : Consentement en vue d'un examen des caractéristiques génétiques d'une personne QUAL-ENR

34 ELIMINATION DES DECHETS SUITE AUX PRELEVEMENTS BIOLOGIQUES Les déchets produits lors d un prélèvement d échantillons biologiques sont considérés comme des DASRI. L'élimination de Déchets d'activités de Soins à Risques infectieux (DASRI) est soumise à la réglementation : Arrêté du 24 novembre 2003 définissant les conditionnements en fonction de la caractérisation des déchets Article R, du code de la santé publique précisant les règles d'étiquetage et de marquage des conditionnements Arrêté du 7 septembre 1990 indiquant les conditions et délais d'évacuation des déchets Les déchets souillés ne doivent pas être mélangés avec les ordures ménagères, les principes ci-dessous cités doivent être respectés. Les déchets issus des prélèvements effectués au sein du CHIC Castres-Mazamet doivent respecter le circuit définit dans la procédure QUAL-PRO-033 Gestion des déchets. Déchets non contaminés (emballage) Objets Piquants Coupants Tranchants (OPCT) Déchets contaminés = DASRI Déchets non OPCT 33

35 TRANSPORT DES ECHANTILLONS IDENTIFICATION D UNE DEMANDE URGENTE DE BIOLOGIE MEDICALE 1. COLLER UNE ETIQUETTTE SUR LA PRESCRIPTION 2. COLLER LES ETIQUETTTES SUR LES TUBES 3. METTRE LA PRESCRIPTION ET LES TUBES DANS LA POCHE KANGOUROU ROUGE 4. FAIRE PARVENIR LE PLUS RAPIDEMENT POSSIBLE LA PRESCRIPTION ET LES ECHANTILLONS AU LABORATOIRE DE BIOLOGIE MEDICALE CONDITIONNEMENT DES ECHANTILLONS BIOLOGIQUES AVANT TRANSPORT Les échantillons sont contenus dans les récipient primaires : les tubes, les flacons, les réceptacles des écouvillons, les portes lames, les récipients étanches, seringues, Bien fermer les flacons Placer les échantillons dans la poche kangourou Fermer la poche à l aide du Zip Placer la prescription dans le compartiment extérieur de la poche Les échantillons doivent être séparés de la prescription 1 Poche = 1 Prescription Les échantillons et la prescription doivent être identifiés TRANSPORT SUR L HOPITAL DU PAYS D AUTAN (HPA) VIA LE PNEUMATIQUE Les modalités sont décrites dans les documents ci-dessous. Transports par pneumatique sur l'hpa QUAL-FTH

36 TRANSPORT DES ECHANTILLONS BIOLOGIQUES DES SITES ANNEXES VERS L'HPA Les modalités sont décrites dans les documents ci-dessous. Transport des échantillons biologiques des sites annexes vers l'hpa Fiche de traçabilité du transport des échantillons biologiques QUAL-COS-080 QUAL-ENR

37 LES BONS DE PRESCRIPTION UTILISABLES DANS LES SERVICES DE SOINS Fiche A : Prescriptions courantes d'urgence (bon bleu) Fiche B1 / B2 : Microbiologie standard / Microbiologie-Virologie Spécialisée (bon jaune) Fiche C / F : Analyses Coûteuses ou à Prescription Particulière / Maladies Infectieuses et Pharmacocinétique (bon vert) Fiche D / E : Endocrinologie et Métabolismes / Protéines (Allergie, Immunologie, Marqueurs, Hémostase) (bon blanc) Fiche G : Allergie IgE spécifiques Fiche P : Analyses réalisées sur le gazomètre et en microméthode Fiche R : demande de Rajout secondaire d'analyses sur un précédent échantillon QUAL-ENR-212 QUAL-ENR-213 QUAL-ENR-214 QUAL-ENR-215 QUAL-ENR-312 QUAL-ENR-248 QUAL-ENR

38 DOCUMENTS ANNEXES Hygiène des mains Utilisation des antiseptiques Pose, Gestion et surveillance des Cathéters Veineux Périphériques QUAL-MOP-048 QUAL-MOP-320 QUAL-MOP