Mesure du débit de filtration glomérulaire
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- Noël Théodore Bois
- il y a 7 ans
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1 Mesure du débit de filtration glomérulaire La clairance de l inuline, "gold standard"? A. Hadj-Aïssa Service d Exploration Fonctionnelle Rénale et Métabolique Lyon Université Claude Bernard Lyon 1
2 Caractéristiques d un marqueur idéal pour la mesure du DFG Éliminé par filtration exclusive Pas d élimination extrarénale Non toxique Non métabolisable Non lié aux protéines N interfère pas sur la fonction rénale Facile à doser
3 Propriétés pharmacocinétiques des principaux marqueurs du DFG Inuline Créatinine Iothalamate DTPA EDTA Iohexol PM (Da) Demi-vie D élimination (min) Liaison protéique (%) 0 0 < < 2 Espace de distribution LEC Eau totale LEC LEC LEC LEC 125I-iothalamate DTPA = 99mTc-Acide diéthylènethiaminepenta-acétique EDTA = 51Cr-Acide éthylènediaminetetra-acétique Rahn KH. J Hypertens, 1999, 17 :
4 Clairance de la créatinine
5 N = 1588, 765 femmes-823 hommes, ans (A. Hadj-Aïssa, 2004) Créatininémie (µmol/l) Clairance de l inuline (ml/min/1,73m 2 )
6 200 n = 2850 Clairance de la créatinine (ml/min/1,73m 2 ) Clairance de l inuline (ml/min/1,73m 2 ) A. Hadj-Aïssa, 2008
7 n = Clairance de la créatinine Clairance de l inuline 2,5 2 1,5 1 0, Clairance de l inuline (ml/min/1,73m 2 ) A. Hadj-Aïssa, 2008
8 Technique actuelle du dosage de la créatinine Réaction de Jaffé Jaffe, M, Z. physiol. Chem.,1886, 10,391
9 Conditions opératoires pour 6 automates d utilisation courante (Roche, Bayer, Beckman, ) Réactifs Conditions Calibrant NaOH Surfactant Acide picrique Température Longueur d onde Préincub. bi-réactif Durée mesure 80 à 694 mmol/l Présent ou absent 4 à 49 mmol/l 37 C 505 nm + 1 à 3 complémentaires Mono ou bi-réactif 160 à 300 sec 25 sec en mono, 90 à 120 sec en bi propre à chaque fabricant
10 Clairance de marqueurs exogènes
11 Techniques - 1 Perfusion continue avec recueil des urines Perfusion continue sans recueil des urines Décroissance plasmatique
12 Techniques - 2 Perfusion continue avec recueil des urines Technique de référence Inconvénients Recueil des urines sur de courtes périodes Perfusion continue
13 Techniques - 3 Perfusion continue sans recueil des urines Au plateau de concentration plasmatique de l inuline, débit perfusé (DP) = débit excrété (UV) D où C = UV/P = DP/P Technique très alléatoire, abandonnée
14 Techniques - 4 Décroissance plasmatique Facilité d exécution, mais nécessite en cas d IRC des prises de sang tardives Coût et inconvénients des traceurs radioactifs Plusieurs méthodes de calcul de la décroissance plasmatique Inutilisable pour mesurer des variations aigues du DFG
15 Clairance de l inuline Historique Réalisation pratique Interprétation Difficultés Indications Contre indications
16 Jolliffe N, James A. Shannon JA, Smith HW Am J Physiol, 1932, 100: Shannon JA and Smith HW. J Clin Invest 1935,14: Le glucose est librement filtré, mais il est réabsorbé, car source d énergie Les sucres, autres que le glucose et métaboliquement inertes, ne doivent pas être réabsorbés. Le xylose? Il est légèrement réabsorbé Des sucres de PM plus élevés ont moins de chance d être réabsorbés : inuline? L inuline injectée chez le poisson aglomérulaire n est pas retrouvée dans les urines Confirmation par microponction Gutman Y et al, Sci 1965, 147: 753 Harris CA et al, Am J Physiol, 1974, 227: 972
17 G.A. Rose, Brit Med J, 1969, 2, 91-93
18 RAHN KH, J Hypertens, 1999, 17 :
19 L'inuline est un fructane, un polysaccharide de fructose d origine végétale. Il est particulièrement abondant dans la racine de chicorée dont il est extrait industriellement. On le trouve aussi dans d'autres végétaux appartenant à la famille des Asteraceae tel que les topinambours ou les oignons de dahlias, la bardane, la grande aunée et l échinacée.
20 Topinambour ou artichaut de Jérusalem
21
22 Actuellement le Polyfructosan (ou Sinistrin) a remplacé l inuline. C est un polymère du fructose de PM plus bas (3200) soluble dans l eau à température ambiante Extrait de urginea maritima Inutest
23 Clairance de l inuline Historique Réalisation pratique Interprétation Difficultés Indications Contre indications
24 108,30
25
26 Protocole de la clairance de l inuline par perfusion continue et recueil d urines Temps (min) Dose de charge Perfusion d entretien Urine Sang UT U1 U2 U3 U4 ST S1 S2 S3
27 Reproductibilité de la clairance de l inuline sur 3 périodes de recueil urinaires consécutifs de 30 min chacune (190 patients) % variation par rapport à la moyenne Moyenne + DS Moyenne - DS Moyenne des 3 périodes U1 U2 U3
28 Méthode de dosage enzymatique de l inuline inuline ou polyfructosan H 2 O 2 glucose 1 ère étape (60 min 37 C) oxydation du glucose et hydrolyse de l Inuline inulinase catalase H 2 O + O 2 glucose oxydase 2 ème étape (30 min 65 C) inactivation de la phosphogluco-isomérase endogène 3 ème étape (10 min) élimination du glucose résiduel 4 ème étape (10 min) détermination du fructose fructose gluconate incubation en milieu alcalin fructose glucose résiduel ATP NADP ATP hexokinase G 6 PDH hexokinase ADP NADPH ADP fructose-6-p 6-P-gluconate NADP PGI + G6PDH NADPH 6-P-gluconate
29 Méthode de dosage enzymatique de l inuline Sur microplaques de 96 puits (350 µl) Lecture avec un spectrophotomètre (340 nm)
30 Méthode de dosage enzymatique de l inuline (ou du polyfructosan) Spécifique Reproductible Peu coûteuse ( 0,20 par échantillon) Réalisable par tout laboratoire de biologie disposant d un spectrophotomètre L. Dubourg et al : Dosage enzymatique de l inuline : adaptation aux pratiques cliniques, SNP, 2007
31 Clairance de l inuline Historique Réalisation pratique Interprétation Difficultés Indications Contre indications
32 Exemple d épreuve correctement réalisée Débit urinaire Clairance inuline Clairance créatinine ml/min ml/min ml/min U2 16,07 63,9 74,8 U3 16,59 66,1 75,6 U4 15,60 68,5 75,7 Moyenne 16,09 66,15 75,34 Pour 1,73m
33 Clairance de l inuline Historique Réalisation pratique Interprétation Difficultés Indications Contre indications
34 La clairance de l inuline Difficultés techniques Mictions spontanées (parfois " miction " impossible) Mictions incomplètes Accès veineux Difficultés liées à la pathologie Uropathie : augmentation de l espace mort urinaire, résidu vésical post-mictionnel
35 Exemple d épreuve «miraculeusement» exploitable Débit urinaire Clairance inuline Clairance créatinine ml/min ml/min ml/min U2 5,59 57,8 70,2 U3 1,38 14,4 20,1 U4 10,18 108,6 121,1 Moyenne 5,71 60,2 70,5 Pour 1,73m
36 Exemple d épreuve ininterprétable Débit urinaire Clairance inuline Clairance créatinine ml/min ml/min ml/min U U U U Moyenne??? Pour 1,73m 2
37 Exemple d épreuve révélatrice d une augmentation de l espace mort urinaire (retard d élimination des substances exogènes) Débit urinaire Clairance inuline Clairance créatinine ml/min ml/min ml/min U2 5,60 20,1 170,4 U3 6,38 52,5 151,2 U4 6,18 108,6 121,1 Moyenne??? Pour 1,73m 2
38 Clairance de l inuline Historique Réalisation pratique Interprétation Difficultés Indications Contre indications
39 Indications Le "syndrome de Cockcroft " Bilan avant et après don de rein Bilan avant et après greffe non rénale Surveillance chimiothérapie néphrotoxique Morphologies extrêmes Associée à des mesures de réabsorption tubulaires Recherche de variations aigues du DFG Pharmacologie, essais thérapeutiques
40 Comparaison de la fonction rénale chez le donneur vivant apparenté et le receveur (enfant) Donneur Donneur Filtration Glomérulaire (ml/min) Avant Receveur ** Après Filtration Glomérulaire (ml/min/1,73m2) Receveur Avant Après Hadj-Aïssa A. et al, Arch Pédiatr, 1998, 5,
41 Indications Le "syndrome de Cockcroft " Bilan avant et après don de rein Bilan avant et après greffe non rénale Surveillance chimiothérapie néphrotoxique Morphologies extrêmes Associée à des mesures de réabsorption tubulaires Recherche de variations aigues du DFG Pharmacologie, essais thérapeutiques
42 Renal function during anaestesia Mercatello A, A. Hadj-Aïssa A., B. Coronel, J.F. Moskovtchenko Current Opinion in Anaesthesiology, 1992, 5: 442
43 Laville M, Hadj-Aïssa A, Pozet N, Labeeuw M, Zech P Restriction on use of creatinine clearance for measurement of renal functional reserve Nephron, 1989, 51 : inulin creatinine Clearance, ml/min/1.73m meal * * * * * Time, min
44 Hadj-Aïssa A, Bankir L, et al Influence of the level of hydration on the renal response to a protein meal Kidney Int 1992, 42 : Low hydration High hydration Time after protein meal
45 Clairance de l inuline Gold standard? Marqueur glomérulaire idéal Épreuve réalisable en 150 min Dosage devenu simple et peu coûteux Mais Nécessite du personnel (une infirmière pou 2 patients ), une équipe entraînée pour la réalisation, et l interprétation
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