VZV EBV. AdV CMV HHV7 HHV8. Virus BK HSV1 HSV2. R-gene trousses de PCR en Temps-Réel HHV6
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- Tristan Rochefort
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1 INFECTIONS VIRALES POST-TRANSPLANTATION HSV1 EBV CMV HHV7 HHV8 VZV HSV2 HHV6 Virus BK AdV R-gene trousses de PCR en Temps-Réel Détectent et Quantifient les principaux virus impliqués dans les infections des immuno-déprimés en une seule série.
2 Stratégies de prise en charge des infections viral Caractéristiques La gamme transplant R-gene vous offre la possibilité de mesurer la charge virale de l ensemble des virus suivants : CMV, EBV, HHV6, Adenovirus, BK Virus, HSV1, HSV2, VZV, HHV8... Offre adaptée pour des stratégies préventives, préemptives ainsi que pour le suivi thérapeutique des patients. Confirmation d une infection active Les infections virales représentent une complication majeure de la transplantation. Les tests de PCR en temps réel permettent une détection rapide et spécifique des virus avant l apparition de symptômes cliniques, enjeu crucial pour la prise en charge de l infection, le maintien du greffon et la survie du patient. Avant le traitement Pour les prélèvements très faiblement positifs, un suivi quantitatif montrant une augmentation significative de la charge virale peut être un indicateur précoce d une infection active. Pendant le traitement Les mesures de la charge virale et de sa cinétique sont des indicateurs de l efficacité du traitement. Après le traitement Le suivi de la charge virale peut être utile au décours du traitement pour dépister une éventuelle rechute. GAMME R-gene Points Clés DEPISTAGE * Les programmes d extraction et d amplification communs à toute la gamme R-gene permettent l analyse simultanée des échantillons pour l ensemble des virus suivants : CMV, EBV, HHV6, Adenovirus, BK Virus, HSV1, HSV2, VZV, HHV7, HHV8. QUANTIFICATION La solution transplant R-gene fournit une gamme de quantification complète pour les virus suivants : CMV, EBV, HHV6, Adenovirus, BK Virus, HSV1, HSV2, VZV, HHV7, HHV8. PROCEDURE HARMONISEE Les trousses R-gene permettent au sein d une même série de : Quantifier plusieurs virus pour un même patient Quantifier un seul virus pour plusieurs patients *Non utilisable pour le dépistage des donneurs
3 MWS R-gene FEATURES es chez les immuno-déprimés Gamme R-gene Toutes les trousses R-gene utilisent la technologie 5 nucléase TaqMan et contiennent : - Un premix spécifique d amplification - 4 Standards de quantification (QS) - Un contrôle d extraction/inhibition - Un contrôle de sensibilité - Un contrôle négatif (eau qualité PCR) Descriptif CMV R-gene a CMV HHV6,7,8 EBV R-gene HSV1 HSV2 VZV Adenovirus BK virus R-gene a R-gene R-gene R-gene Technologie Technique des sondes d hydrolyse 5 nucléase TaqMan Protocole Protocole identique pour tous les virus Pathogènes Détectés CMV CMV, HHV6, HHV7 EBV HSV1, HSV2, VZV Adenovirus BK virus HHV8 Type d échantillons* Contrôles inclus Gamme de linéarité Unités de mesure Délai d obtention des résultats Conservation de la trousse Sang total, plasma, sérum, LCR, liquide amniotique, biopsie, urine, LBA, tissu, culture cellulaire, frottis gynécologiques cutanés ou muqueux, échantillons ORL et ophtalmologiques, selles Contrôle Positif, Contrôle Négatif, Contrôle Interne et Contrôle de sensibilité Large gamme de quantification corrélée avec les spécificités de chaque virus (cf. notices techniques) Nombre de copies de virus / ml d échantillon. Possibilité de convertir en UI/ml si applicable 1h30 après extraction -18 C/-22 C Instruments validés* Extraction : Amplification: NucliSENS easymag (biomérieux) ABI (Applied Biosystem) MagNA Pure Compact (Roche Diagnostics) LightCycler (Roche), Rotor-Gene (Qiagen) MagNA Pure LC system (Roche Diagnostics) Dx Real-Time System et CFX96 (bio-rad) MagNA Pure 96 system (Roche Diagnostics) DNA Engine Opticon et I-cycler (bio-rad) QIAamp DNA blood mini kit (Qiagen) Stratagene (Agilent) QIAamp MinElute virus spin kit (Qiagen) Versant kpcr AD (Siemens) QIAcube (Qiagen) SmartCycler (Cepheid) m2000sp (Abbott) Versant kpcr SP (Siemens) BioRobot EZ1 Workstation (Qiagen) Statut Pour diagnostic in vitro, marquage CE en Europe * Dépend des tests a Produits appartenant à la liste B LNE/G-MED
4 POLYVALENCE Trousses validées sur les principales plateformes de PCR temps réel. Trousses validées sur de nombreux systèmes d extraction automatisés. Trousses validées sur de nombreux types de prélèvements. CARACTERISTIQUES Marquage CE. Présence des contrôles d extraction et d inhibition. Contrôle d extraction commun à toute la gamme. Technologie 5 nucléase Taqman. Production suivant les normes cgmp. FONCTIONNEMENT Réactifs prêts à l emploi. Détection de la cible virale et du contrôle d inhibition en un seul tube. Programme d amplification commun pour des analyses multi-cibles. Protocoles uniformes sur chaque plateforme d extraction et d amplification.
5 Principe des trousses R-gene de PCR en temps réel Glossaire IC = Contrôle Interne W0 = EAU CT = Crossing Threshold QS = Standard de Quantification SC = Contrôle de Sensibilité IC échantillon (10µL) W0 (10µL) EXTRACTION ECHANTILLON EXTRAIT + IC EAU EXTRAITE + IC Distribution dans le prémix prêt a l emploi (15µL) AMPLIFICATION EN TEMPS RÉEL Longueur d onde de lecture 530nm CT de la charge virale de l échantillon 560nm CT [IC Echantillon] INTERPRETATION DES RESULTATS 560nm CT [IC W0] 530nm CT de l Extraction + Amplification Controle Négatif du virus Principe de la quantification du virus QS1 QS2 QS3* QS4 SC Prémix prêt à l emploi INTERPRETATION 530nm 530nm 530nm 530nm Courbe standard du virus *Utilisez seulement le QS3 si vous importez la courbe standard. 530nm contrôle de sensibilité CT [IC Echantillon] CT [IC WO] + 3 L échantillon est correctement extrait et ne contient pas d inhibiteur (1). (1) Voir notice technique
6 NOM PRODUIT CONDITIONNEMENT REF Juin 2013 / /007/FR/A / BIOMERIEUX, le logo bleu et ARGENE, easymag, NucliSENS et R-gene sont des marques déposées ou des dénominations commerciales qui appartiennent à biomérieux S.A. ou à l une de ses filiales / biomérieux SA RCS Lyon / Photos : Comeuroconcept, C. Ganet / Imprimé en France / THERA Conseil / RCS Lyon B CMV R-gene a CMV R-gene a 90 tests B 1 trousse : Quantification CMV R-gene a 90 tests trousses : Extraction et Quantification CMV HHV6,7,8 R-gene a CMV HHV6,7,8 R-gene a 140 tests B 1 trousse : Quantification CMV HHV6,7,8 R-gene a 140 tests trousses : Extraction et Quantification EBV R-gene EBV R-gene 90 tests B 1 trousse : Quantification EBV R-gene 90 tests trousses : Extraction et Quantification ADENOVIRUS R-gene ADENOVIRUS R-gene 90 tests B 1 trousse : Quantification ADENOVIRUS R-gene 90 tests trousses : Extraction et Quantification HSV1 HSV2 VZV R-gene HSV1 HSV2 VZV R-gene 180 tests B 1 trousse : Quantification HSV1 HSV2 VZV R-gene 180 tests trousses : Extraction et Quantification BK Virus R-gene BK Virus R-gene 90 tests B 1 trousse : Quantification BK Virus R-gene 90 tests trousses : Extraction et Quantification Pour plus d informations, contactez votre représentant biomérieux local. biomérieux fabrique ses réactifs en conformité avec les normes ccgmp et ISO 13485, biomérieux a conclu un accord de licence sur la PCR en temps réel avec les sociétés F.Hoffmann-La Roche Ltd et Roche Molecular Systems, Inc. En conséquence, l achat de ces produits permet à l acheteur d effectuer l amplification et la détection de séquences d acides nucléiques avec les méthodes décrites dans certains brevets de Roche («5 Nuclease Detection patents and Chemically-Modified Hot Start Enzymes patents») afin de réaliser un diagnostic in vitro humain. L achat de ces produits ne confère aucun droit général ni aucune licence d aucun type, différent de ce droit spécifique d utilisation. Utilisation diagnostic in vitro, marquage CE en Europe Lire attentivement les instructions figurant sur l étiquetage et/ou la notice d utilisation des produits de diagnostic in-vitro mentionnés. biomérieux S.A Marcy l Etoile France Tel. : +33 (0) Fax : +33 (0) a Produits appartenant à la liste B LNE/G-MED
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