EFFET DES RAYONNEMENTS IONISANTS SUR UN COMPLEXE DU RÉCEPTEUR D ESTROGÈNE AVEC L ADN.
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- Gilbert Roberge
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1 EFFET DES RAYONNEMENTS IONISANTS SUR UN COMPLEXE DU RÉCEPTEUR D ESTROGÈNE AVEC L ADN. Viktorie Štísová Stephane Goffinont Melanie Spotheim Maurizot Marie Davídková stisova@ujf.cas.cz
2 Mécanisme de fonction d estrogène Steroid receptor homodimer binding to DNA Bound steroid hormone Free steroid hormone Step 2 Nucleus Step 1 Cytoplasmic steroid hormone receptor with bound heat shock protein Step 3 Step 4 Activation Step 6 Transcription mrna Heat shock protein Step 5 Translocation of cytoplasmic receptor complex into nucleus Step 7 Biological response Step 8 New protein Target cell
3 Thérapie hormonale estradiol tamoxifen coactivateur coactivateur
4 Système étudié Complexe spécifique formé par: Protéine - réceptor d'estrogène alpha (RE) ADN - élement de récepteur d'estrogène (ERE) Ligand - estradiol (E2), tamoxifen (TAM) ERE
5 Stabilité du RE ERE complexe ADN dans le complexe ADN libre complexe irradié ERE irradié + RE ERE + RE irradié
6 Stabilité du RE ERE complexe Pourcentage Percentage de l'adn DNA dans in complexe irradiated complexecomplex irradié irradiated ERE irradié DNA+ + RE non-irradiated nonirradiéer irradiated ERE nonirradié ER+ non-irradiated + RE irradié DNA D (Gy)
7 Stabilité du RE ERE complexe Protéine irradiée dimère monomère monomère monomer dimère dimer D (Gy)
8 Stabilité du RE ERE complexe Protéine irradiée Probabilité relative de réaction
9 Stabilité du RE ERE complexe ADN irradié 90 pourcentage percentage Gy 1 kgy 1,5 kgy 80 FSB FSB+ARB
10 Effet protective d interaction entre ADN et protéine ADN: Effet de masquage probabilité relative de réaction probabilité relative de réaction
11 Effet protective d interaction entre ADN et protéine ADN: Effet de fléchissement 0,16 0,12 0,08 0,04 0 FSB ADN free DNA libre ADN bent courbé DNA ADN bound lié DNA relative probabilité probability relativeof de reaction réaction A G G T C A C A G T G A C C T 0,25 0,2 0,15 0,1 0,05 relative probabilité probability relative of de reaction réaction 0 ARB ADN free DNA libre ADN bent courbé DNA ADN bound lié DNA A G G T C A C A G T G A C C T
12 Effet protective d interaction entre ADN et protéine RE: Effet de masquage RE lié RE extrait probabilité relative de réaction probabilité relative de réaction RE lié RE extrait
13 Effet de ligand Déplacement de bandes correspondant au RE-ERE complexe Différences de mobilité Différences en conformation du complexe Effet sur les dommages? radioinduites?
14 Effet de ligand Complexe RE-ERE-ligand irradié 120 Pourcentage percentage de l'adn DNA dans in le complexe no sans ligand estradiol tamoxifen D(Gy)
15 Effet de ligand ERE irradié + RE nonirradié estradiol Pourcentage de l'adn dans le complexe tamoxifen Pourcentage de l'adn dans le complexe
16 Effet de ligand ADN irradié + RE nonirradié Gel d'agarose Plasmid relaché surenroulé
17 Effet de ligand ADN irradié + RE nonirradié Gel d'agarose 1,2 1 SSB per plasmid 0,8 0,6 0,4 0,2 ethanol tamoxifen estradiol D (Gy)
18 Effet de ligand ERE nonirradié + RE irradié estradiol tamoxifen Pourcentage de l'adn dans le complexe Pourcentage de l'adn dans le complexe
19 Effet de ligand L addition de ligand Pourcentage percentage de l'adn DNA dans in complexe estradiol avant before estradiol après after tamoxifen avant before tamoxifen après after D (Gy)
20 Résumé Le complexe RE - ERE est detruit par irradiation Dommage d RE modifie la formation du complexe avec efficacité plus importante que le dommage d ERE Liason du ligand influence la radiolyse du complexe
21 Remerciement Grant n. 1P05OC085 du Ministère de Jeunesse, Sport et Education de la République Tchèque Faculté des Sciences Nucléaires et de Physique, UTT Prague financement de Electricité de France COST action P9 Radiation damage in biomolecular systems program de colaboration scientifique tchèque-francais Barrande Group de Dr. Mélanie Spotheim-Maurizot CBM CNRS, Orléans
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