L histoire des cartes d identité génétique

Transcription

1 L histoire des cartes d identité génétique 1985 Alec Jeffreys met en évidence les VNTR 1987 Début des tests ADN aux EU 1989 Début des tests au Canada 1

2 Exemple de l analyse simple locus 2

3 Exemple de l analyse simple locus Suspect 1 Suspect 2 empreinte 3

4 Les limites de l analyse avec les VNTR: Demande beaucoup de temps Demande un ADN d excellente qualité (non dégradé) 4

5 Les minisatellites (<16pb) Fragments amplifiés de 250 à 900 pb Distribués dans l ensemble du génome Les STR Répétitions de di, tri ou tétranucléotides Fragments amplifiés de l ordre de 200 pb Très fréquents dans le génome (0.5% ADN total) Utilisables avec de l ADN dégradé Limitation : les contaminations 5

6 Analyse de l ADN mitochondrial ADN circulaire de petite taille D origine purement maternelle Très peu de variations 6

7 Identification des restes des Romanoff 7

8 Identification des restes des Romanoff Août 1917 la révolution russe commence - la famille royale est capturée et emprisonnée - elle comprend : le Tsar Nicolas II et la Tsarine, les enfants : Alexandra, Olga, Tatyana, Anastasia, Nicholi 16 juillet 1918 les Romanoff sont assassinés peu après minuit Les corps sont - transportés dans un wagonnet de mine - mis dans une fosse au bord de la route - recouverts de chaux vive et de terre 8

9 Identification des restes des Romanoff Juillet 1991 on découvre des cadavres dans une fosse commune près d Ekatarinbourg Ils correspondent aux restes de 9 personnes On détermine le sexe, l âge et le statut social de 9 personnes 1992 les analyses ADN commencent Analyse avec les microsatellites Analyse avec l ADN mitochondrial 9

10 Détermination du sexe Amplification d une séquence du gène de l amélogénine Il est porté dans la partie commune X et Y Sur l X un fragment de 106 pb est produit Sur l Y un fragment de 112 pb est produit Ceci permet de confirmer la présence du corps de 4 hommes et 5 femmes 10

11 Analyse par microsatellites Utilisation de 5 microsatellites correspondant à des répétitions de tétranucléotides : HUMTHO1 HUMVWA31 HUMF13A1 HUMFES/FPS HUMACTPB2 11

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14 Les résultats de l analyse: Les squelettes 4 et 7 sont parents des squelettes 3, 5 et 6 Les squelettes 1, 8 et 9 correspondent aux serviteurs Comment prouver que ce sont les restes des Romanoff? 14

15 Analyse de l ADN mitochondrial *la séquence nucléotidique de la région hypervariable de l ADN mitochondrial permet de tester l hypothèse *Le prince Philip d Angleterre est parent de la tsarine Alexandra *Les descendants de Louise de Hesse-Cassel sont parents du Tsar Nicolas II 15

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18 Les conclusions de l analyse: Les squelettes 4 et 7 sont ceux du Tsar et de la Tsarine Les squelettes 3,5 et 6 sont ceux de leurs enfants Les squelettes 1, 8 et 9 sont ceux des serviteurs Le squelette 2 est celui du Dr Botkin 18

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20 Les sources d ADN : 20

21 Le test ADN en électrophorèse capillaire 21

22 a) 11 marqueurs utilisés en test ADN b) ADN «mélangé» provenant de deux origines différentes (seul le canal vert est présent) 22

23 Exemple de l utilisation des tests ADN USA versus Raymond Jenkins 23

24 Le meurtre, 4 juin 1999 Dennis Dolinger est retrouvé mort dans sa cave Il a reçu 25 coups de couteau Il y a du sang dans la cave, rez de chaussé, 1 er et 2 ème étage de sa maison Son portefeuille a disparu 24

25 Dennis Dolinger Sa vie publique Politicien local Combat les revendeurs de drogue 25

26 Steven Watson Musicien de rue Drogué Casier judiciaire important Drogue Vols Bagarres de rue 26

27 Les preuves contre Watson Il est arrêté en utilisant la carte de crédit de Dolinger le lendemain du meurtre Il est en possession du portefeuille de Dolinger. Il a sur lui des traces de sang 27

28 Le crime est résolu Watson est arrêté Il est accusé de meurtre Il est envoyé en prison en attendant le procès 28

29 Les tests ADN mettent en évidence un autre meutrier Le FBI rejette la possibilité que l ADN provienne de Watson. Habile déduction :c est quelqu un d autre qui est coupable! 29

30 Recherche sur l ADN Le profil ne correspond à aucune des données de la banque CODIS Une correspondance est trouvée dans une autre banque avec l ADN de Raymond Jenkins Jenkins est accusé du meutre Jenkins est mis en prison et en attente de son procès depuis janvier

31 La suite Les preuves contre Watson sont rejetées Il est libéré Il disparaît de la circulation 31

32 Examen critique des résultats des tests ADN La police scientifique récupère le matériel biologique sur les lieux du crime. Le laboratoire en tire un profil ADN sur 13 marqueurs. Les statisticiens recherchent la probabilité de trouver au hasard ce même profil pour une autre personne de la population. 32

33 Les aléas du test Les contaminations: elles peuvent se produire à différents moments, prélèvement, extraction, amplification et électrophorèse. Attention aux témoins positifs et négatifs La dégradation de l ADN augmente le risque d erreurs Quel protocole suit le laboratoire? 33

34 Les mythes sur les tests ADN L ADN d un individu est unique Le test n est basé que sur 13 marqueurs La recherche des allèles est objective L interprétation est humaine! Les scientifiques sont neutres et on travaille bien dans tous les labos Hum, hum! 34

35 Le test ADN est une confirmation et non unepreuvede culpabilité 35

36 Il faudra différencier Confirmation d identité Le suspect est identifié dans un premier temps par des preuves autres que l ADN Le test ADN ne vient que confirmer une identité Test ADN uniquement Le suspect est identifié par des comparaisons d ADN avec les bases de données On peut exclure d autres suspects 36

37 Les cas de recherche dans les banques de données ADN Comparaison d un profil d ADN avec des banques de données Si les profils sont identiques, on a un suspect On recommence les tests avec d autres marqueurs Si le nouveau profil est encore identique avec celui du suspect il est mis en examen 37

38 Attention dans le deuxième cas nous avons affaire uniquement à une coïncidence statistique! En 1989 à l US open de golf, 4 joueurs ont fait un trou en un coup la probabilité d un tel résultat est de 1/ (1,000,000,000,000,000) La signification diminue avec l augmentation de la taille des banques de données 38

39 Conclusions: Les tests ADN doivent être interprétés avec prudence Il faut augmenter le nombre de marqueurs Il ne faut pas faire dire n importe quoi à la statistique Il faut faire renouveler les tests par des laboratoires indépendants L interprétation des tests doit être faite par des experts extérieurs au laboratoire où ils ont été réalisés 39