REPARATION DE L'ADN et CANCER
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- Anne-Marie Durand
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1 REPARATION DE L'ADN et CANCER L2 CO1 Médecine moléculaire 05/11/12 Anne DUMAY
2 PLAN I-Altération de l'adn 1) Stress génotoxiques 2) Altération de l'adn 3) Mutation et conséquences II- Réponse cellulaire à un stress génotoxique 1) Prévention 2) Réponse (arrêt du cycle cellulaire, réparation de l ADN, Tolérence, Mort cellulaire) III- Réparation de l'adn et cancer 1) MMR / syndrome de Lynch 2) NER / Xeroderma Pigmentosum 3) rec V(D)J / lymphome folliculaire non hodgkinien
3 I- ALTERATION DE L ADN I-1) Stress génotoxique = agent toxique pour le génome. Stress endogènes - Activité métabolique, stress oxydatif - Réplication ADN Stress exogènes - Rayonnement cosmique - Elèments radioactifs (uranium ) - Emanations gazeuses (radon ) -Expositions (médicales ou industrielles) à des irradiations ou agents chimiques - Rayonnement UV
4 I- ALTERATION DE L ADN Exemple de stress endogène: réplication de l ADN Mésappariement Mésappariement
5 I- ALTERATION DE L ADN Exemple de stress exogène: UV UVA ( nm) => Dommage majoritaire: UVB ( nm), UVC ( nm) => majoritairement dimères de pyrimidines: => risque transition CG-AT Cyclobutanes pyrimidines (plus fréquents: T-T) 6-4 photoproduits (plus fréquents: T-C)
6 I- ALTERATION DE L ADN I-2) Altération de l'adn - Site abasique / rupture liaison glycosidique entre base et désoxyribose - Modification de base ex: oxydation (8-oxoG) désamination (C désaminée = U) - Mésappariement - Dimère de pyrimidines / liaison covalente entre bases adjacentes - Adduit sur base azotée - Coupure simple ou double brin
7 I- ALTERATION DE L ADN Stress génotoxique = Agent, d'origine endogène ou exogène, responsable de l'altération de l ADN pouvant conduire à la formation de mutations. stress génotoxique Altération de l'adn (dommage, lésion...) = Modification chimique ou structurale, non héréditaire, de l ADN. =altération Mutation = Modification irréverssible et transmissible de l'information génétique (séquence ADN). =mutation
8 I- ALTERATION DE L ADN I-3) Mutation = modification irréversible et transmissible de l'information génétique (séquence ADN). - Substitution de base (transition ou transversion) - Délétion - Insertion - Réarrangement chromosomique
9 I- ALTERATION DE L ADN Exemple : Stress génotoxique = Réplication, ADN polymérase Substitution = mutation Insertion = mutation Mésappariement = altération Mésappariement = altération
10 I- ALTERATION DE L ADN I-3) Mutation et conséquences - Avantages: Principe même de l évolution - Désavantages: - Maladies génétiques => résulte d 1 mutation ex: drépanocytose, (T / A => VAL / GLU) / gène codant pour chaîne ß - Cancérogenèse => résulte d une accumulation de mutations
11 CONCLUSION - I stress génotoxique =altération (lésion, dommage ) =mutation Prolifération contrôlée prolifération ou survie anormale
12 II- REPONSE CELLULAIRE A UN STRESS GENOTOXIQUE II-1) Prévention ADN polymérase: - Activité polymérase Activité exonucléase 3-5
13 II- REPONSE CELLULAIRE A UN STRESS GENOTOXIQUE II-1) Prévention Mélanine: - Pigment secrété par les mélanocytes => protection / UV-B
14 II- REPONSE CELLULAIRE A UN STRESS GENOTOXIQUE II-2-a) Arrêt du cycle cellulaire Arrêt du cycle cellulaire Réparation de l ADN Tolérence Mort cellulaire
15 II- REPONSE CELLULAIRE A UN STRESS GENOTOXIQUE II-2-a) Arrêt du cycle cellulaire empêche la réplication d ADN endommagé, empêche la transformation de dommages en mutations fournit du temps aux mécanismes de réparation. État quiescent
16 II- REPONSE CELLULAIRE A UN STRESS GENOTOXIQUE II-2-a) Arrêt du cycle cellulaire Exemple: Influence des UV sur le cycle cellulaire Temps (hrs): UV + UV 20J/m² G1 S G2 Phase S S G2 G1 G0
17 II- REPONSE CELLULAIRE A UN STRESS GENOTOXIQUE II-2-b) Réparation de l ADN Arrêt du cycle cellulaire Réparation de l ADN Tolérence Mort cellulaire
18 II- REPONSE CELLULAIRE A UN STRESS GENOTOXIQUE II-2-b) Réparation de l ADN Altérations ADN: mésappariement modification de base pontage inter/intra-brin cassure double brin modification de base perte de base C C Mécanismes de réparation: MMR (MisMatch Repair) BER (Base Excision Repair) Réparation immédiate NER (Nucleotid Excision Repair) Recombinaison homologue NHEJ (Non Homologous End Joining) Recombinaison homologue: - Conversion génique, - SSA, - SDSA, BIR. BER (Base Excision Repair) cassure simple brin Recombinaison homologue
19 II- REPONSE CELLULAIRE A UN STRESS GENOTOXIQUE II-2-b) Réparation de l ADN Exemple: NHEJ (Non Homologous End Joining)
20 II- REPONSE CELLULAIRE A UN STRESS GENOTOXIQUE II-2-b) Réparation de l ADN Exemple: Recombinaison homologue (Modèle de Szostak) Ligature Conversion génique Ligature
21 II- REPONSE CELLULAIRE A UN STRESS GENOTOXIQUE II-2-c) Tolérence Arrêt du cycle cellulaire Réparation de l ADN Tolérence Mort cellulaire
22 II- REPONSE CELLULAIRE A UN STRESS GENOTOXIQUE II-2-c) Tolérence TLS = Synthèse d ADN translésionnelle RH = recombinaison homologue TLS => intervention d une famille d ADN polymérases spécifiques du type de dommage (ex: pol eta / dommages UV) Termine réplication => 2 nd chance
23 II- REPONSE CELLULAIRE A UN STRESS GENOTOXIQUE II-2-d) Mort cellulaire Arrêt du cycle cellulaire Réparation de l ADN Tolérence Mort cellulaire
24 II- REPONSE CELLULAIRE A UN STRESS GENOTOXIQUE II-2-d) Mort cellulaire Apoptose: mort cellulaire programmée (volontaire) - condensation, fragmentation de la chromatine - modification de la composition lipidique de la membrane plasmique, bourgeonnement - démentellement de la cellule sous forme de corps apoptotiques Intégrité des organites corps apoptotiques Condensation de la chromatine Fragmentation de l ADN Condensation du cytoplasme Segmentation en vésicules (D après Roche) Elimination de cellules potentiellement dangereuses pour l organisme
25 II- REPONSE CELLULAIRE A UN STRESS GENOTOXIQUE II-2-d) Mort cellulaire Exemple: Influence des UV l apoptose Temps (hrs): UV 20J/m² G1 G2 S SubG1 SubG1 SubG1
26 CONCLUSION II cellule stress génotoxique Prévention cellule endommagée Prolifération contrôlée Arrêt du cycle cellulaire Réparation de l ADN cellule mutante Tolérence Mort cellulaire => risque cancérogenèse
27 CONCLUSION II Exemple de voie de signalisation: Effecteurs Transducteurs Censeurs Signal Différents mécanismes de réponse, action concertée
28 III-MECANISME DE REPARATION DE L ADN ET CANCER -Syndrome de Lynch - Xeroderma pigmentosum, -Syndrome de Cockayne, - Trichothiodystrophie - Anémie de Fanconi - Syndrome de Werner - Syndrome de Bloom -Syndrome de Rothmund- Thomson - RS-SCID - Lymphome folliculaire - Syndrome de Nimègue - Cancer du sein héréditaire - Li-Fraumeni - Syndrome de Louis-Bar C C Mécanismes de réparation: MMR (MisMatch Repair) BER (Base Excision Repair) Réparation immédiate NER (Nucleotid Excision Repair) Recombinaison homologue NHEJ (Non Homologous End Joining) Recombinaison homologue: - Conversion génique, - SSA, - SDSA, BIR. BER (Base Excision Repair) Recombinaison homologue
29 III-MECANISME DE REPARATION DE L ADN ET CANCER III-1) Syndrome de Lynch MMR + MMR - => Instabilité microsatellites MMR -
30 III-MECANISME DE REPARATION DE L ADN ET CANCER III-1) Syndrome de Lynch HNPCC = Hereditary non-polyposis colon cancer Cause: Mutation dans gènes MSH2, MLH1, MSH6, PMS2 ou PMS1. Produits de ces gènes impliqués dans le MMR (MisMatch repair) déficience MMR instabilité génétique cancer déficience MMR Instabilité microsatellites C C MMR (MisMatch Repair) BER (Base Excision Repair) Réparation immédiate NER (Nucleotid Excision Repair) Recombinaison homologue NHEJ (Non Homologous End Joining) Recombinaison homologue: - Conversion génique, - SSA, - SDSA, BIR. BER (Base Excision Repair) Recombinaison homologue
31 III-MECANISME DE REPARATION DE L ADN ET CANCER III-2) Xeroderma pigmentosum UVA ( nm) => Dommage majoritaire: UVB ( nm), UVC ( nm) => majoritairement dimères de pyrimidines: => risque transition CG-AT Cyclobutanes pyrimidines (plus fréquents: T-T) 6-4 photoproduits (plus fréquents: T-C)
32 III-MECANISME DE REPARATION DE L ADN ET CANCER => Hydrolyse liaison N-glycosidique BER (Base Excision Repair) => Incision en 5 Réparation des bases modifiées (uraciles, 8-oxoG, 3méthylA ) (Flap endonuclease 1)
33 III-MECANISME DE REPARATION DE L ADN ET CANCER III-2) Xeroderma pigmentosum NER (Nucleotid Excision Repair) UV Dimère de pyrimidines
34 III-MECANISME DE REPARATION DE L ADN ET CANCER III-2) Xeroderma pigmentosum Quantification des dommages après irradiation UVB 1000J/m² XP control AI Otto T Magnaldo, Cancer research (1999) vol 59 p
35 III-MECANISME DE REPARATION DE L ADN ET CANCER III-2) Xeroderma pigmentosum Cause XP: mutation gène XP (pour Xeroderma Pigmentosum) ou ERCC (pour Excision Repair Cross Complement) : XpA, XpB (ou ERCC3), XpC, XpD (ou ERCC2), XpE, XpF (ERCC4), XpG (ERCC5) => Déficience NER. MMR (MisMatch Repair) BER (Base Excision Repair) Réparation immédiate NER (Nucleotid Excision Repair) => Sensibilité accrue aux UV => instabilité génétique => cancer de la peau. C C Recombinaison homologue NHEJ (Non Homologous End Joining) Recombinaison homologue: - Conversion génique, - SSA, - SDSA, BIR. BER (Base Excision Repair) Recombinaison homologue
36 III-MECANISME DE REPARATION DE L ADN ET CANCER III-3) lymphome folliculaire non Hodgkinien Ganglion lymphatique
37 III-MECANISME DE REPARATION DE L ADN ET CANCER -S-S- -S-S- III-3) lymphome folliculaire non Hodgkinien Lymphocytes B anticorps - BCR (B Cell Receptor) = immunoglobuline membranaire - anticorps = immunoglubulines secrétées => Détection antigène natif et aide à la destruction L H H L Répertoire de clones de lymphocytes 10 8 clones différents => 10 8 gènes d immunoglobulines? Réunion de 2 chaînes différentes => 10 8 =10 4 x10 4 gènes? -S-S- -S-S- -S-S- -S-S-
38 III-MECANISME DE REPARATION DE L ADN ET CANCER III-3) lymphome folliculaire non Hodgkinien lymphocyte Stem cell => formation des gènes codant pour les récepteurs BCR ou TCR par recombinaison illégitime : recombinaison V(D)J (Variable Diversity Joining) Lymphocyte DNA Stem cell DNA
39 Principe: 1- Réarrangement D/J 2- Réarrangement DJ/V Transcription Maturation du pré-messager Traduction Maturation de la protéine => Chaîne H
40 Similitudes avec mécanisme de réparation NHEJ (Non Homologous End-joining)
41 III-MECANISME DE REPARATION DE L ADN ET CANCER -S-S- -S-S- III-3) lymphome folliculaire non Hodgkinien Recombinaison V(D)J: - chaîne H: 51 segments V x 27 D x 6 J possibilités - chaîne L: 40 V x 5 J, ou 30 V x 4 J 320 chaînes possibilités. L H H L Appariement des chaînes lourdes et légères: x 320 au moins Ig différentes. -S-S- -S-S- -S-S- -S-S-
42 III-MECANISME DE REPARATION DE L ADN ET CANCER III-3) lymphome folliculaire non Hodgkinien Défaut réarrangement V(D)J => Translocation chromosomique t(14;18) p q Bcl-2 IgH t(14,18) région codante de Bcl-2 (ch18q21) sous contrôle d un enhencer d IgH (ch14q32) surexpression de Bcl-2 protection accrue vis à vis de l'apoptose, survie incontrôlée de LB lymphome
43 III-MECANISME DE REPARATION DE L ADN ET CANCER Cancer = maladie caractérisée par une prolifération cellulaire anormale au sein d un tissu puis de l organisme entier. Propriétés acquises: - immortalité - division cellulaire incontrôlée - perte d homéostasie tissulaire - capacité de susciter l angiogénèse - pouvoir d invasion, de migration
44 III-MECANISME DE REPARATION DE L ADN ET CANCER Hormonothérapie Anticorps monoclonaux Anti-métabolites Inhibiteur de la mitose (poison fuseau ) Anti-angiogénique (néovascularisation) Agents alkylants Intercalants de l ADN Inhibiteur topoisomérases Radiothérapie (rayons)
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