2. DENOMBREMENT PAR LES METHODES CLASSIQUES- LES STAPHYLOCOQUES
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- Jonathan Gauvin
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1 CLASSIQUES- LES STAPHYLOCOQUES CARACTERES GENERAUX DES STAPHYLOCOCCUS Microcoques Gram + en grappes Immobiles Non sporulés Catalase + Oxydase - Souvent pigmentés Fermentent glucose Aéro-anaérobies facultatifs Staphylococcus aureus, S. epidermidis, S. saprophyticus, etc
2 CLASSIQUES- Staphylococcus aureus CARACTERES GENERAUX Fermente le mannitol NaCl 150 g/l Entérotoxines + Leucocidine + Hémolysines Et aussi Coagulase + Thermonucléase
3 CLASSIQUES- Staphylococcus aureus RECHERCHE 1. Enrichissement : NaCl + mannitol 2. Isolement Milieu Chapman NaCl + Mannitol + Rouge de phénol Milieu Baird Parker + additifs 3. Identification Coagulase / Thermonucléase
4 Staphylococcus aureus Coagulase + Thermonucléase +
5 CLASSIQUES- LES ENTEROCOQUES CARACTERES GENERAUX Paires ou chaînettes Gram + Catalase - Oxydase - Non sporulés Anaérobies facultatifs/microaérophiles Homofermentaires Résistent aux sels biliaires Croissance à 45 C Streptococcus, Enterococcus Enterococcus faecalis
6 CLASSIQUES- LES ENTEROCOQUES RECHERCHE DES ENTEROCOQUES FECAUX 1. Culture en milieu liquide Bouillon de Rothe : glucose + Na azide Confirmation bouillon de Litsky : azide + éthyl violet et/ ou isolement sur milieu solide : Milieu de Slanetz (Na azide, Triphényl Tétrazolium Chlorure) 2. Identification Sérologie : Classification de Lancefield
7 CLASSIQUES- LES ANAEROBIES SPORULEES CARACTERES GENERAUX Bacilles Gram + Souvent mobiles Catalase - Mésophiles Réduisent sulfite en sulfure Production CO 2 et H 2 S Clostridium perfringens, C. botulinum, C. tetanii
8 CLASSIQUES- LES ANAEROBIES SPORULEES RECHERCHE DES ANAEROBIES SPORULEES 1. Traitement thermique 2. Isolement Rosenow liquide + cystéine + paraffine : fermentation glucose / gaz / protéolyse VF semi-solide + Na hyposulfite + sulfate Fe FeS Gélose spécifique C. perfringens : o résazurine + Na thioglycolate o tryptone + sulfite + néomycine + polymyxine 3. Identification Spores / Hydrolyse gélatine etc / toxicité
9 CLASSIQUES- Listeria monocytogenes CARACTERES GENERAUX Bacille Gram + Oxydase - Catalase + Non sporulé Anaérobie facultatif Mobile Production acide lactique + acétoïne Fermentation mannitol, rhamnose, xylose ph 5,5 à 9 Psychrotrophe NaCl 10% Hémolyse
10 CLASSIQUES- Listeria monocytogenes RECHERCHE 1. Enrichissement Bouillon Fraser : acide nalidixique + Acriflavine 2. Isolement sur géloses Milieux sélectifs au Chlorure de Lithium 3. Identification API Hémolyse Fermentation xylose et rhamnose Gélose CHROMagar
11 CLASSIQUES- FLORE SPORULEE AEROBIE CARACTERES GENERAUX Bacilles Gram + Catalase + Aérobies Mésophiles Résiste à la pasteurisation Toxi-infection : Bacillus cereus plusieurs entérotoxines
12 CLASSIQUES- FLORE SPORULEE AEROBIE RECHERCHE 1. Traitement thermique 2. Isolement D.T.A. Milieu spécifique de Mossel : polymyxine,jaune d œuf, mannitol, rouge de phénol 3. Identification Bacillus cereus Spores, hémolyse, mobilité
13 CLASSIQUES- FLORES D ALTERATION FLORE LIPOLYTIQUE Gélose Huile + bleu Victoria Gélose tributyrine FLORE INDOLOGÈNE Bouillon peptoné sans indole + réactif de Kovacs
14 CLASSIQUES- FLORES D ALTERATION FLORE LACTIQUE Gram + Anaérobies facultatifs Homofermentaires ou hétérofermentaires Exigeants Contaminants mais pas pathogènes Milieu Rogosa et Sharpe Streptococcus, Leuconostoc, Pediococcus, Lactobacillus
15 CLASSIQUES- LEVURES ET MOISISSURES CARACTERES GENERAUX Eucaryotes Mycelium Spores non thermorésistantes Aérobies ph 3 à 5
16 CLASSIQUES- LEVURES ET MOISISSURES RECHERCHE Examen microscopique Isolement sur milieux solides + Chloramphénicol + Oxytétracycline + Actidione + Benzimidazole, thiabendazole
17 2. CONCLUSIONS SUR LES METHODES CLASSIQUES CONTAMINATION BANALE + PATHOGENES FLORES INDICATRICES ANALYSE QUANTITATIVE ET/OU QUALITATIVE MILIEUX SELECTIFS
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