Projet GLUTEN. Centre wallon de Recherches agronomiques Départements Sciences du vivant et Valorisation des productions

Transcription

1 Projet GLUTEN Recherche de ressources génétiques d épeautre et de blé ayant une moindre incidence sur l intolérance au gluten et développement d outils de sélection; étude de l impact de la sélection et des conditions culturales sur la maladie cœliaque.

2 Début du projet : 1 er juillet 2014 Collaboration de 2 départements (1 et 4) et de 3 unités (1, 2 et 14) Collaborateurs : - D. Mingeot : CRA-W, D1 - U1: Génie biologique (coordinatrice) - E. Escarnot : CRA-W, D1 - U2: Amélioration des espèces et biodiversité - G. Sinnaeve : CRA-W, D4 - U14: Technologies de la transformation des produits - P. Bertin : UCL - ELI - Earth and Life Institute Personnel engagé sur le projet : - B. Dubois, doctorant, D1 - U1: Génie biologique - X. Seffer, technicien, D1 - U2: Amélioration des espèces et biodiversité et D4 - U14: Technologies de la transformation des produits

3 Maladie cœliaque : maladie auto-immune Prédisposition génétique Protéines du gluten reconnues par le système immunitaire Inflammation, atrophie villosités intestinales, malabsorption, Grande diversité au niveau des protéines du gluten Objectif du projet : Analyse de la diversité existant chez l épeautre Mise en évidence d accessions se démarquant par leur contenu immunogène In fine : Développement de variétés consommables par les patients cœliaques

4 Matériel de départ : constitution d une collection internationale Plus de 500 accessions (provenance : CRA-W et banques de ressources génétiques) Exploitée selon 3 axes distincts et complémentaires

5 1 er axe : biologie moléculaire Etude contenu immunogènes (ADN) D. Mingeot et B. Dubois (D1-U1) 2 ème axe : Immunologie et phytotechnie Etude contenu immunogènes (protéines) et influence de la phytotechnie E. Escarnot et X. Seffer (D1-U2) 3 ème axe : Qualités technologiques Etude qualités technologiques des accessions G. Sinnaeve et X. Seffer (D4-U14)

6 1 er axe : biologie moléculaire - méthodologie Etude de diversité génétique : sélection d un nombre réduit d accessions d épeautre contrastées (11) Etude des séquences exprimées d α-gliadines (ADNc) Analyse de leur composition en épitopes toxiques (4 majeurs) Développement de marqueurs d expression

7 1 er axe : biologie moléculaire - résultats Plus de 450 séquences clonées et séquencées Grande variabilité observée dans la composition des épitopes Mutations supprimant leur toxicité Publication en cours de rédaction Développement de marqueurs ciblant les épitopes intacts : en cours Application sur les accessions de la collection

8 2 ème axe : Immunologie et phytotechnie - méthodologie Etude du contenu immunogène des protéines d α-gliadine ELISA sandwich Western Blot Etude de l influence de l apport d azote sur le contenu immunogène Par ELISA, Western Blot et marqueurs d expression

9 2 ème axe : Immunologie et phytotechnie - résultats ELISA : mise au point effectuée, analyses en cours Bonne corrélation avec résultats de biologie moléculaire Western Blot : mise au point effectuée, analyses à venir Phytotechnie : essai implanté en champs 8 modalités d apport d azote

10 3 ème axe : Qualités technologiques des accessions - méthodologie Spectrométrie infrarouge (NIR) Estimation teneur en eau, en protéines et dureté sur l ensemble de la collection Echantillons en cours de préparation Redman : Evaluation des propriétés de gonflement des protéines Sur une centaine d accessions en tout Essais HPLC sur quelques accessions contrastées Variations au sein de sous-groupes protéiques? Influence des techniques de panification Fermentation courte et longue (levure industrielle Vs levain) Analyse en ELISA et HPLC

11 Merci de votre attention