FACULTÉ DES SCIENCES ET TECHNOLOGIE DS du 13 janvier 2012 LES CALCULATRICES NE SONT PAS AUTORISEES. ÉPREUVE DE BIOCHIMIE L1S1 DURÉE : 1 h 30

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1 Page 1 sur 6 FACULTÉ DES SCIENCES ET TECHNOLOGIE DS du 13 janvier 2012 Questions de Cours 1- Donnez le principe de l électrophorèse sur couche mince. Une séparation électrophorétique ou électrophorèse est la séparation d un ensemble de molécules hétérogènes chargées qui soumises à l action d un champ électrique se déplacent vers le pôle de signe opposé à leur charge avec une vitesse proportionnelle à leur charge 2- Quels sont les différents types de molécules solubles dans l eau? - Les molécules polaires, pouvant établir des liaisons hydrogène avec l eau - Les molécules ioniques (sels) : l eau construit un écran de molécules d eau autour de l ion, l empêchant de se combiner à nouveau avec l ion de signe opposé. 3- Après avoir définit le terme «amphiphile», classez les molécules ci-dessous en fonction de leur caractère hydrophile ou hydrophobe ou amphiphile: Une molécule possédant des parties hydrophiles et d autres hydrophobes est dite amphiphile ou amphiphatique. Hydrophile Hydrophobe Amphiphile D, E A, B C, F

2 Page 2 sur 6 FACULTÉ DES SCIENCES ET TECHNOLOGIE DS du 13 janvier 2012 A CH 3 CH 3 CH 3 CH 3 CH 3 B CH 2 O CO R 1 CHO CO R 2 CH 3 CH 3 CH 3 CH 3 CH 2 O CO R 3 C CH 3 (CH 2 ) 7 - CH = CH (CH 2 ) 7 - COO - C E E F D R CO O CH 2 D R CO O CH O D H CH 2 O P O CH 2 C CH 2 OH A O - B OH B A F 4- Parmi les molécules de la question 3, indiquez en les entourant précisément les fonctions : A- Alcool primaire D- Ester de phosphate B- Alcool secondaire E- Amine C- Acide carboxylique F- Lactone 5- D après vous le globotriaosylcéramide est (réponse à justifier) : A- un phospholipide B- constitué de glucides et d acides gras C- constitué de glycérol et de trois acides gras D- constitué d une longue chaîne polysaccharidique E- de la famille des sphingolipides justification : triaosyl : 3 oses +céramide : constituant des sphingolipides

3 Page 3 sur 6 FACULTÉ DES SCIENCES ET TECHNOLOGIE DS du 13 janvier Exercices : Les glucides 6- Le traitement du globotriaosylcéramide par une α-glucosidase permet de libérer un trisaccharide réducteur et un céramide. Conclusions? Le globotriaosylcéramide est composé d un trisaccharide dont le glucose est lié par une liaison en α-1 avec le céramide. Le trisaccharide contient au moins 1 glucose. 7- Le trisaccharide est perméthylé puis subit une hydrolyse acide. Trois oses méthylés sont alors obtenus : le 2,3,4,6-tétraméthylgalactose ; le 2,3,6-triméthylglucose et le 2,3,6- triméthylgalactose. Dessinez ces oses. Quelles sont vos conclusions? Donc le trisaccharide est un galactopyranosyl 1 4 galactopyranosyl 1 4 glucopyranose On ne sait pas à ce stade l orientation des liaisons entre les 2 galactoses et le second galactose et le glucose 8- Le trisaccharide est soumis à l action d une α-galactosidase qui permet d obtenir un galactose et un disaccharide réducteur. Quelles sont vos conclusions? Comment vérifieriez-vous votre hypothèse? Le galactose situé à l extrémité du trisaccharide est lié à l autre galactose par une liaison en α, tandis que le galactose suivant est lié au glucose par une liaison en β qui n est pas détruite par l α-galactosidase et permet donc de libérer un galactose et un disaccharide composé d un galactose lié en β avec un glucose.

4 Page 4 sur 6 FACULTÉ DES SCIENCES ET TECHNOLOGIE DS du 13 janvier En utilisant une β-galactosidase qui doit libérer un glucose et un disacharide (en fait les 2 galactoses liés en α1 4) 9- Une étude réalisée sur le globotriaosylcéramide montre qu il ne possède pas de pouvoir réducteur. Dessiner la structure complète de ce trisaccharide et indiquez le carbone impliqué dans sa liaison avec le céramide. Les lipides 10- Le globotriaosylcéramide est traité par une céramidase qui libère un acide gras dont l indice d iode est égal à zéro. Conclusions? L acide gras libéré est saturé 11- Cet acide gras est soumis à chromatographie de partage en présence de plusieurs molécules de références : Principe de cette techniquee? Permet la séparation des molécules en fonctions de leurs propriétés hydrophiles ou hydrophobes. Les plus hydrophobes étant entraînées par migration de la phase mobile organique (le solvant organique) par capillarité vers le haut du support poreux.

5 Page 5 sur 6 FACULTÉ DES SCIENCES ET TECHNOLOGIE DS du 13 janvier Conclusions sur cette chromatographie de partage? Les molécules les plus hydrophobes sont bien entraînées vers le haut de la plaque. Plus les molécules testées ont une chaîne aliphatique longue, plus elles migrent loin du dépôt. dépôts L acide gras inconnu migre au niveau du C18 :0. Nom de l acide gras mis en Acide stéarique évidence? 13- À partir de tous ces résultats sur l étude de la partie glucidique et de la partie lipidique du globotriaosylcéramide quelles conclusions pouvez-vous faires sur sa structure générale? Il est composé d un trisaccharide (galactose-galactose-glucose) lié en alpha du glucose au céramide qui contient un acide gras, l acide stéarique

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