Access Free T4 Thyroxine libre

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1 ACCESS Immunoassay Systems Mode d emploi 2015 Beckman Coulter, Inc. All rights reserved. Access Free T4 Thyroxine libre RÉSERVÉ À UN USAGE PROFESSIONNEL Rx Only RÉVISION ANNUELLE À UTILISER AVEC LE TEST : FRT4 Revu par Date Revu par Date PRINCIPE UTILISATION Le test Access Free T4 utilise une technique immunoenzymatique chimioluminescente à particules paramagnétiques pour le dosage de la thyroxine libre dans le sérum ou le plasma (hépariné) humain à l aide des Systèmes d Immunoanalyse Access. GÉNÉRALITÉS L axe hypothalamo-hypophyso-thyroïdien contrôle la synthèse, la libération et l action des hormones thyroïdiennes. La thyrotropine (TRH), sécrétée à partir de l hypothalamus, stimule la synthèse et la libération de la Thyroid Stimulating Hormone (TSH). La TSH, à son tour, stimule la synthèse, le stockage, la sécrétion et le métabolisme de la thyroxine (T4) et de la triiodothyronine (T3). Les formes libres et liées de la T4 et de la T3 sont, ensembles, présentes dans le sang. Plus de 99% de la T4 et de la T3 circulent dans le sang, liées à des protéines porteuses, ceci laissant moins de 1% sous la forme non liée. Il s agit de cette concentration d hormone non liée ou libre qui est en corrélation avec l état fonctionnel de la thyroïde chez la plupart des individus. 1,2 La T4 libre et la T3 libre régulent la croissance et le développement normaux en maintenant la température du corps et en stimulant la réduction de chaleur. De plus, la T4 libre et la T3 libre touchent tous les aspects du métabolisme des hydrates de carbone aussi bien que certaines parties du métabolisme des lipides et des vitamines. Le développement fétal et néonatal réclame également des hormones thyroïdiennes. 1,2 Des concentrations nettement élevées en T4 libre corroborent les observations cliniques d un diagnostic d hyperthyroïdisme tandis que des valeurs nettement faibles en T4 libre couplées avec des observations cliniques convenables peuvent permettre d établir un diagnostic d hypothyroïdisme. Le dosage des concentrations de T4 libre DÉCEMBRE 2015 Page 1 de 13

2 accompagné d autres tests touchant la thyroïde ainsi que des observations cliniques peuvent établir un diagnostic d hyperthyroïdisme ou d hypothyroïdisme limite. 3 La RIA à l équilibre de dialyse est considérée comme la technique de référence pour le dosage de la T4 libre parce qu elle prévoit la séparation de la T4 libre de la T4 liée aux protéines avant le dosage direct de la T4 libre. 2 Toutefois, cette méthode est lourde, astreignante du point de vue technique et ne convient pas à une utilisation en routine dans les laboratoires cliniques. Plus récemment, des radio-immunodosages et des dosages immuno-enzymatiques ont été développés pour le dosage de la T4 libre. Ces dosages utilisent des combinaisons variées de traceurs analogues ou non et des procédures d incubation en une ou deux étapes. METHODOLOGIE Le test Access Free T4 est un test immunoenzymatique en deux étapes. L anticorps monoclonal anti-thyroxine (T4) couplé à de la biotine, l échantillon, la solution tamponnée de protéines et la phase solide sensibilisée à la streptavidine sont déposés dans la cuvette réactionnelle. Durant la première incubation, l anticorps anti-t4 couplé à la biotine se xe sur la phase solide et à la T4 libre contenue dans l échantillon. Après incubation, la séparation dans un champ magnétique et le lavage éliminent tout produit non lié à la phase solide. Ensuite, la solution tamponnée de protéines et le conjugué phosphatase alcaline - triiodothyronine (T3) sont ajoutés dans la cuvette réactionnelle. Le conjugué phosphatase alcaline - triiodothyronine (T3) se xe sur les sites de liaison vacants de l anticorps anti-t4. Après incubation dans une cuvette réactionnelle, les matériels liés à la phase solide sont maintenus dans un champ magnétique tandis que les matériels non liés sont éliminés par lavage. Puis, le substrat chimioluminescent, Lumi-Phos* 530 est ajouté à la cuvette réactionnelle et la lumière générée par la réaction est mesurée à l aide d un luminomètre. La production de lumière est inversement proportionnelle à la concentration de T4 libre présente dans l échantillon. La quantité d analyte libre présente dans l échantillon est déterminée à l aide d une courbe d étalonnage multi-points mise en mémoire. ÉCHANTILLON PRÉLÈVEMENT ET PRÉPARATION DE L ÉCHANTILLON 1. Nature de l échantillon: sérum et plasma (hépariné). 2. Respecter les recommandations suivantes en ce qui concerne la manipulation, le traitement et la conservation des échantillons sanguins: 4 Prélever tous les échantillons sanguins en observant les précautions de routine concernant la ponction veineuse. Pour les sérums, laisser les échantillons coaguler complètement avant la centrifugation. Garder les tubes toujours bouchés. Séparer physiquement le sérum ou le plasma des cellules dès que possible. Ne pas conserver les échantillons dans des tubes bien bouchés à température ambiante (15 à 30 C) pendant plus de huit heures. Si le dosage n est pas terminé dans les huit heures qui suivent, réfrigérer les échantillons entre 2 et 8 C. Si le dosage n est pas terminé dans les 48 heures qui suivent, ou pour l expédition des échantillons, congeler à -20 C ou à une température inférieure. Décongelez les échantillons une seule fois. 3. Observer les recommandations suivantes lors de la préparation des échantillons: S assurer que toute brine résiduelle et toute matière cellulaire ont été éliminées avant l analyse. Suivre les recommandations du fabricant concernant le tube de prélèvement du sang pour la centrifugation. 4. Chaque laboratoire doit déterminer l acceptabilité de ses propres tubes de prélèvement de sang et produits de séparation du sérum. Des variations peuvent exister pour ces produits entre les fabricants et, parfois, de lot à lot. Access Free T4 FR Mode d emploi B01902 D Page 2 de 13 DÉCEMBRE 2015

3 RÉACTIFS INFORMATION SUR LE PRODUIT Pack Réactifs Access Free T4 Code 33880: Coffret de 100 dosages, 2 packs, 50 tests/pack Fournis prêts à l emploi. Conserver en position verticale et réfrigérer entre 2 et 10 C. Les Packs doivent être réfrigérés entre 2 et 10 C pendant deux heures minimum avant d être utilisés sur l instrument. Stables jusqu à la date de péremption indiquée sur l étiquette lorsqu ils sont conservés entre 2 et 10 C. Après ouverture, un Pack est stable entre 2 et 10 C pendant 28 jours. Les signes d une détérioration possible sont la rupture de la couche d élastomère sur le Pack ou des valeurs de contrôle en dehors des intervalles de con ance. Si le pack réactifs est endommagé (c est-à-dire, rupture de la couche d élastomère), jeter le pack. Tous les antisérums sont polyclonaux sauf indication contraire. R1a: Particules paramagnétiques Dynabeads** sensibilisées avec de la streptavidine dans du tampon TRIS avec des protéines (aviaires), du surfactant, 0,125% de NaN 3, et 0,125% de ProClin*** 300. R1b: Tampon TRIS salin avec des protéines (aviaires), du surfactant, < 0,1% de NaN 3, et 0,1% de ProClin 300. R1c: Tampon TRIS salin avec des protéines (aviaires), du surfactant, 0,125% de NaN 3, et 0,125% de ProClin 300. R1d : R1e: Conjugué phosphatase alcaline (bovine) - triiodothyronine dans du tampon TRIS avec des protéines (aviaires), du surfactant, < 0,1% de NaN 3, et 0,1% de ProClin 300. Anticorps monoclonal (souris) anti-thyroxine (T4) couplé à de la biotine dans du tampon TRIS, avec des protéines (aviaires et murines), du surfactant, 0,125% de NaN 3 et 0,125% de ProClin 300. **Dynabeads est une marque déposée de Dynal A.S., Oslo, Norvège. ***ProClin est une marque de The Dow Chemical Company («Dow») ou une de ses liales. PRECAUTIONS Pour un usage diagnostique in vitro. Les échantillons de patients et les produits dérivés du sang peuvent être traités en routine avec un risque minimum si la procédure décrite est respectée. Cependant, manipuler ces produits comme s ils étaient potentiellement infectieux en suivant les précautions universelles et les bonnes pratiques de laboratoire, quels que soient leur origine, leur traitement ou leur certi cation antérieure. Utiliser un désinfectant approprié pour la décontamination. Conserver et éliminer ces produits et leurs récipients en suivant les règlements et les procédures locales. Pour connaître les dangers présentés par le produit, reportez-vous aux sections suivantes : COMPOSANTS ACTIFS, CLASSIFICATION DES RISQUES GHS et CLASSIFICATION EUROPÉENNE DES SUBSTANCES DANGEREUSES. DÉCEMBRE 2015 Page 3 de 13

4 INGRÉDIENTS RÉACTIFS ATTENTION L azoture de sodium, utilisé comme agent de conservation, peut réagir avec le métal des canalisations et former des composés explosifs. Voir le NIOSH Bulletin: Explosive Azide Hazards (8/16/76) (Bulletin de l Institut national pour la santé et la sécurité au travail : Les dangers d explosion des azotures). Pour éviter l accumulation potentielle des composés d azoture, rincer les tuyaux d évacuation à l eau après l élimination de réactifs non dilués. L élimination de l azoture de sodium doit se faire conformément aux réglementations locales en vigueur. CLASSIFICATION DES RISQUES SGH PMP (compartiment R1a) AVERTISSEMENT Tampon 1 (compartiment R1b) H317 P280 P333+P313 P362+P364 AVERTISSEMENT Peut provoquer une allergie cutanée. Porter des gants de protection/des vêtements de protection et un équipement de protection des yeux/du visage. En cas d irritation ou d éruption cutanée : demander un avis médical/consulter un médecin. Enlever les vêtements contaminés et les laver avant utilisation. stabilisateur composé de 5-chloro-2-méthyl-4-isothiazolin -3-one [n EC ] avec du 2-méthyl-4-isothiazolin-3-one [n EC ] (3:1) < 0,05% H317 P280 P333+P313 P362+P364 Peut provoquer une allergie cutanée. Porter des gants de protection/des vêtements de protection et un équipement de protection des yeux/du visage. En cas d irritation ou d éruption cutanée : demander un avis médical/consulter un médecin. Enlever les vêtements contaminés et les laver avant utilisation. Access Free T4 FR Mode d emploi B01902 D Page 4 de 13 DÉCEMBRE 2015

5 Tampon 2 (compartiment R1c) AVERTISSEMENT stabilisateur composé de 5-chloro-2-méthyl-4-isothiazolin -3-one [n EC ] avec du 2-méthyl-4-isothiazolin-3-one [n EC ] (3:1) < 0,05% Conjugué (compartiment R1d) H317 P280 P333+P313 P362+P364 AVERTISSEMENT Peut provoquer une allergie cutanée. Porter des gants de protection/des vêtements de protection et un équipement de protection des yeux/du visage. En cas d irritation ou d éruption cutanée : demander un avis médical/consulter un médecin. Enlever les vêtements contaminés et les laver avant utilisation. stabilisateur composé de 5-chloro-2-méthyl-4-isothiazolin -3-one [n EC ] avec du 2-méthyl-4-isothiazolin-3-one [n EC ] (3:1) < 0,05% Réactif biotine (compartiment R1e) H317 P280 P333+P313 P362+P364 AVERTISSEMENT Peut provoquer une allergie cutanée. Porter des gants de protection/des vêtements de protection et un équipement de protection des yeux/du visage. En cas d irritation ou d éruption cutanée : demander un avis médical/consulter un médecin. Enlever les vêtements contaminés et les laver avant utilisation. stabilisateur composé de 5-chloro-2-méthyl-4-isothiazolin -3-one [n EC ] avec du 2-méthyl-4-isothiazolin-3-one [n EC ] (3:1) < 0,05% H317 Peut provoquer une allergie cutanée. DÉCEMBRE 2015 Page 5 de 13

6 P280 P333+P313 P362+P364 Porter des gants de protection/des vêtements de protection et un équipement de protection des yeux/du visage. En cas d irritation ou d éruption cutanée : demander un avis médical/consulter un médecin. Enlever les vêtements contaminés et les laver avant utilisation. stabilisateur composé de 5-chloro-2-méthyl-4-isothiazolin -3-one [n EC ] avec du 2-méthyl-4-isothiazolin-3-one [n EC ] (3:1) < 0,05% La che technique santé-sécurité est disponible à l adresse techdocs.beckmancoulter.com. CLASSIFICATION EUROPÉENNE DES RISQUES PMP (compartiment R1a) Tampon 1 (compartiment R1b) Tampon 2 (compartiment R1c) Conjugué (compartiment R1d) Réactif biotine (compartiment R1e) Xn;R22-43 R22 R43 S28 S37 Xi;R43 R43 S28 S37 Xn;R22-43 R22 R43 S28 S37 Xi;R43 R43 S28 S37 Xn;R22-43 Nocif en cas d ingestion. Peut entraîner une sensibilisation par contact avec la peau. Après contact avec la peau, se laver immédiatement et abondamment avec de l eau et du savon. Porter des gants appropriés. Peut entraîner une sensibilisation par contact avec la peau. Après contact avec la peau, se laver immédiatement et abondamment avec de l eau et du savon. Porter des gants appropriés. Nocif en cas d ingestion. Peut entraîner une sensibilisation par contact avec la peau. Après contact avec la peau, se laver immédiatement et abondamment avec de l eau et du savon. Porter des gants appropriés. Peut entraîner une sensibilisation par contact avec la peau. Après contact avec la peau, se laver immédiatement et abondamment avec de l eau et du savon. Porter des gants appropriés. Access Free T4 FR Mode d emploi B01902 D Page 6 de 13 DÉCEMBRE 2015

7 R22 R43 S28 S37 Nocif en cas d ingestion. Peut entraîner une sensibilisation par contact avec la peau. Après contact avec la peau, se laver immédiatement et abondamment avec de l eau et du savon. Porter des gants appropriés. MATÉRIEL NÉCESSAIRE, NON FOURNI AVEC LE KIT DE RÉACTIF 1. Calibrateurs: Access Free T4 Calibrators Fournis à des concentrations de zéro et approximativement 0,5, 1,0, 2,0, 3,0, et 6,0 ng/dl (6,4, 12,9, 25,7, 38,6, et 77,2 pmol/l). Code Matériel de contrôle de qualité (CQ) : matériel commercial de contrôle. 3. Substrat: Access Substrate Cat. N Access, Access 2, SYNCHRON LXi: Solution de lavage: Access Wash Buffer II, Code A16792 UniCel DxI: Solution de lavage: UniCel DxI Wash Buffer II, Code A16793 ÉQUIPEMENT ET MATÉRIELS R1 Packs Réactifs Access Free T4 CALIBRATION INFORMATIONS SUR LA CALIBRATION Une courbe d étalonnage actif est requise pour tous les tests. Pour le test Access Free T4, l étalonnage est requis tous les 28 jours. Se reporter aux manuels des systèmes appropriés et au système d Aide pour obtenir des informations sur la théorie de l étalonnage, la con guration des calibrateurs, la programmation de tests pour un calibrateur et la consultation des données de l étalonnage. CONTRÔLE DE QUALITÉ Les matériaux du contrôle de qualité simulent les caractéristiques des échantillons de patients et sont essentiels pour le contrôle des performances analytiques des tests immunochimiques. Du fait que les échantillons peuvent être traités à tout moment dans le format accès sélectif plutôt que dans le format séries, des matériaux de contrôle de qualité doivent être inclus dans chaque période de 24 heures. 5 Inclure des matériaux de contrôle de qualité disponibles commercialement couvrant au moins deux concentrations de l analyte. L utilisation plus fréquente de contrôles ou l utilisation de contrôles supplémentaires est laissée à la discrétion de l utilisateur d après les bonnes pratiques de laboratoire ou les conditions d accréditation de laboratoire et les lois en application. Suivre les instructions du fabricant en ce qui concerne la reconstitution éventuelle et la conservation. Chaque laboratoire doit établir des valeurs moyennes et des intervalles de con ance pour assurer des performances correctes. Les résultats du contrôle de qualité qui ne se situent pas dans les intervalles de con ance peuvent indiquer des résultats de test erronés. Examiner tous les résultats des tests effectués depuis le dernier contrôle de qualité validé pour cet analyte. Se reporter aux manuels des systèmes appropriés et au système d Aide a n d obtenir des informations sur la consultation des résultats du contrôle de qualité. DÉCEMBRE 2015 Page 7 de 13

8 PROCÉDURE(S) DE TEST OBSERVATIONS TECHNIQUES 1. Se reporter aux manuels des systèmes appropriés et au système d Aide pour obtenir une description de l installation, du démarrage, des principes de fonctionnement, des performances, des instructions de fonctionnement, des procédures d étalonnage, des limites fonctionnelles et des précautions, des risques, de la maintenance et du dépannage. 2. Mélanger le contenu des nouveaux packs réactifs (non ponctionnés) en les retournant doucement plusieurs fois avant de les charger sur l instrument. Ne pas retourner des packs ouverts (ponctionnés). 3. Utiliser trente (30) µl d échantillon pour chaque dosage en plus des volumes morts du récipient à échantillon et du système. Se reporter aux manuels des systèmes appropriés et au système d Aide pour connaître le volume minimal d échantillon requis. 4. L unité de mesure par défaut du système pour les résultats des échantillons est le ng/dl. Pour changer les unités des résultats d échantillons en unités du Système International (unités SI), pmol/l, se reporter aux manuels des systèmes appropriés et au système d Aide. Pour convertir manuellement les concentrations en Système International, multiplier les ng/dl par le facteur de multiplication, 12,87. PROCÉDURE Se reporter aux manuels des systèmes appropriés et au système d Aide pour obtenir des informations sur la gestion des échantillons, la con guration des tests, les demandes de tests et la consultation des résultats des tests. INTERPRÉTATION DES RÉSULTATS Les résultats des tests des patients sont déterminés automatiquement par le logiciel du système qui utilise un modèle mathématique courbe logistique pondérée à quatre paramètres (4PLC). La quantité d analyte présente dans l échantillon est déterminée d après la production de lumière mesurée au moyen des données d étalonnage en mémoire. Les résultats des tests des patients peuvent être consultés en utilisant l écran approprié. Se reporter aux manuels des systèmes appropriés et au système d Aide a n d obtenir des instructions complètes concernant la consultation des résultats. RAPPORTS DE RÉSULTATS RÉSULTATS ESCOMPTÉS 1. Les échantillons de sérum ont été obtenus à partir d un minimum de 150 hommes et 150 femmes situés dans une plage d âges de 18 à 60 ans. Les échantillons ont été prélevés depuis les Etats-Unis de l est, de l ouest et du centre. En suivant les directives du support aux laboratoires du NACB (National Academy of Clinical Biochemists) pour le diagnostic et le contrôle des maladies thyroïdiennes 6 et de L American Association of Clinical Endocrinologists, 7,8,9 les critères de dépistage suivants ont été utilisés: une valeur de TSH de 0,3 à 3,0 µiu/ml, aucun antécédent personnel ou familial de maladie thyroïdienne ou de maladie auto-immune et l absence de médication thyroïdienne. Après avoir complété le dépistage Access TSH, 32 échantillons ont été exclus à cause de valeurs de TSH en dehors de la plage de 0,3 à 3,0 µiu/ml. n Limite de référence à 95% (ng/dl) IC à 95% pour la limite inférieure (ng/dl) IC à 95 % pour la limite supérieure (ng/dl) 316 0,61-1,12 0,54-0,67 1,07-1,24 Access Free T4 FR Mode d emploi B01902 D Page 8 de 13 DÉCEMBRE 2015

9 n Limite de référence à 95 % (pmol/l) IC à 95% pour la limite inférieure (pmol/l) IC à 95 % pour la limite supérieure (pmol/l) 316 7,86-14,41 7,00-8,57 13,73-15,96 2. Les échantillons de sérum ont été obtenus à partir d un minimum de 120 femmes au premier, deuxième et troisième trimestre de grossesse. TYPE D ECHAN TILLON n Limite de référence à 95% (ng/dl) IC à 90% pour la limite inférieure (ng/dl) IC à 90 % pour la limite supérieure (ng/dl) 1er trimestre 131 0,52-1,10 0,47-0,57 1,08-1,27 2ème trimestre 120 0,45-0,99 0,40-0,48 0,80-1,08 3ème trimestre 121 0,48-0,95 0,45-0,51 0,83-1,23 TYPE D ECHAN TILLON n Limite de référence à 95 % (pmol/l) IC à 90% pour la limite inférieure (pmol/l) IC à 90 % pour la limite supérieure (pmol/l) 1er trimestre 131 6,67-14,12 6,00-7,31 13,86-16,28 2ème trimestre 120 5,79-12,70 5,19-6,14 10,24-13,86 3ème trimestre 121 6,11-12,20 5,77-6,62 10,68-15,79 3. Chaque laboratoire doit établir ses propres intervalles de référence pour assurer une représentation correcte des populations spéci ques. 4. Le test Access Free T4 n a pas été validé pour les échantillons de gouttes de sang séché. NOTES RELATIVES AUX PROCÉDURES LIMITES 1. Les échantillons peuvent être dosés avec précision dans un intervalle analytique dé ni par la limite inférieure de détection et la valeur du calibrateur le plus fort (approximativement 0,25-6,0 ng/dl [3,2-77,2 pmol/l]). Si un échantillon contient moins que la limite inférieure de détection du test, rendre les résultats comme inférieurs à cette valeur (c.-à-d. < 0,25 ng/dl [< 3,2 pmol/l]). Si un échantillon contient plus que la valeur indiquée du calibrateur le plus fort Access Free T4 Calibrator (S5), rendre le résultat comme supérieur à cette valeur (c.-à-d. >6,0 ng/dl [>77,2 pmol/l]). IL N EST PAS POSSIBLE DE DILUER LES ECHANTILLONS POUR LE DOSAGE DE LA T4 LIBRE. 2. Pour les tests employant des anticorps, il existe la possibilité d une interférence par des anticorps hétérophiles présents dans l échantillon du patient. Les patients qui ont été régulièrement exposés à des animaux ou qui ont reçu une immunothérapie ou qui ont subi des procédures diagnostiques utilisant des immunoglobulines ou des fragments d immunoglobulines peuvent produire des anticorps, par exemple des anticorps HAMA (anticorps humains anti-souris), qui interfèrent avec les tests immunologiques. En outre, d autres anticorps hétérophiles tels que des anticorps humains anti-chèvre peuvent être présents dans les échantillons de patients. 10,11 Ces anticorps qui interfèrent peuvent être la cause de résultats erronés. Evaluer avec précaution les résultats de patients suspectés de posséder ces anticorps. 3. Les résultats du test Access Free T4 doivent être interprétés à la lumière du tableau clinique complet du patient, y compris: les symtômes, l anamnèse, les résultats provenant de tests supplémentaires et toute autre information appropriée. DÉCEMBRE 2015 Page 9 de 13

10 4. Les échantillons contenant des auto-anticorps thyroxine peuvent être dosés par des procédures en deux étapes telles que le test Access Free T4 sans interférence signi cative Des désordres non liés au métabolisme de la thyroïde peuvent entraîner des concentrations anormales en T4 libre. Une thérapie à base d anticonvulsivants (particulièrement la phénytoïne) peut entraîner un abaissement des concentrations en T4 libre, ceci étant dû, premièrement, à une augmentation du métabolisme hépatique et, deuxièmement, à un déplacement de l hormone des sites de liaison. 2,12,13 Les substances anti-in ammatoires telles que les salicylés et la phénylbutazone entrent également en compétition pour les sites de xation de l hormone, mais leurs effets sur les concentrations en T4 libre n ont pas été clairement dé nis. 2,14 Les patients sous traitement hépariné peuvent présenter des concentrations élevées en T4 libre dues à la libération d acides gras non estéri és, qui peuvent modi er le rapport entre hormones libres et liées. 13 La détermination de l état thyroïdien chez les sujets atteints de maladies non thyroïdiennes (NTI) devra être interprétée avec précaution. 2,15 Dans de rares affections, telles que l hyperthyroxinémie dysalbuminémique familiale (FDH), le dosage direct des hormones libres peut produire des résultats erronés à cause des variations extrêmes de la capacité de liaison de l albumine pour la T4. Les substances suivantes ont été ajoutées à des échantillons de sérum provenant de sujets euthyroïdiens. Lorsqu ils ont été testés par le test Free T4, les variations moyennes en pourcentage observées ont été les suivantes: Substance Analyte ajouté (mg/dl) % de variation Aspirine 60 +6,4 Salicylate de sodium 50 +9,1 Phénylbutazone 7,5 +8,48 Thiouracile 5,0-0,6 Phénytoïne 5,0 +8,0 Thiamazol 0,4 +0,9 6. Ce test n est pas in uencé de façon signi cative par la présence de protéines xatrices de l hormone thyroxine. Dans une étude, l étalon Calibrator zéro, qui contient des concentrations normales de protéines, a été soumis à un test de surcharge avec les protéines xatrices de l hormone thyroxine d origine humaine. Ci-dessous est montrée la variation observée au niveau de la réponse signal du test: Substance Analyte ajouté % de variation Albumine 10,0 g/dl -7,2 Globuline xant la thyroxine 160 µg/ml -5,6 Prealbumine 600 µg/ml -1,3 CARACTÉRISTIQUES DU DOSAGE CARACTÉRISTIQUES DU DOSAGE COMPARAISON DE METHODES Une comparaison des valeurs de T4 libre utilisant le test Access Free T4 sur le Système d Immunoanalyse Access et une trousse d immunodosage disponible commercialement a fourni les données statistiques suivantes en utilisant les calculs de Deming: Access Free T4 FR Mode d emploi B01902 D Page 10 de 13 DÉCEMBRE 2015

11 TYPE D ECHAN TILLON n Fourchette des observations (ng/dl) Ordonnée à l origine (ng/dl) Pente Coef cient de corrélation (r) Sérum 326 0,27-5,11-0,275 1,16 0,940 Une comparaison des valeurs de T4 libre obtenues en dosant des paires d echantillons de sèrum et de plasma (hèparinè) en utilisant la trousse du test Access Free T4 a fourni les donnèes statistiques suivantes en utilisant les calculs de Deming: TYPE D ECHAN TILLON Sérum vs. Plasma (hépariné) n Fourchette des observations (ng/dl) Ordonnée à l origine (ng/dl) Pente Coef cient de corrélation (r) 51 0,61-1,06 0,033 0,962 0,980 IMPRÉCISION Ce test présente une imprécision totale 10% du CV à des concentrations 0,61 ng/dl et un ET < 0,06 ng/dl à des concentrations < 0,61 ng/dl. Une étude, utilisant trois matériels de contrôle à base de sérum humain disponibles commercialement générant un minimum de 38 dosages, 2 répliquats par dosage sur une période minimale de 19 jours, a fourni les données suivantes, analysées par l analyse de la variance (ANOVA). 16,17 Echantillon Intra-série Inter-essai Total Moyenne (ng/dl) DS CV (%) DS CV (%) DS CV (%) 1 0,46 0,02 4,40 0,04 8,08 0,04 9,20 2 0,76 0,02 2,12 0,03 4,47 0,04 4,95 3 2,04 0,06 2,74 0,07 3,34 0,09 4,32 4 4,27 0,08 1,82 0,20 4,71 0,22 5,05 SPÉCIFICITÉ ANALYTIQUE / INTERFÉRENCES Les échantillons contenant jusqu à 10 mg/dl (171 µmol/l) de bilirubine, les échantillons lipémiques contenant l équivalent de 1800 mg/dl (20,32 mmol/l) de trioléine et les échantillons hémolysés contenant jusqu à 1 g/dl (10 g/l) d hémoglobine n affectent pas la concentration de la T4 libre dosée. Le tableau suivant décrit la réactivité croisée des anticorps utilisés dans le test Free T4 avec des substances de structure similaire à la T4. La spéci cité des anticorps est déterminée dans un dosage de la thyroxine totale a n d éviter le déplacement de la xation de la T4 par des composés apparentés. Les substances ont été ajoutées à un pool de calibrateurs Access Free T4 et ont donné les résultats suivants exprimés par poids. Substance Analyte ajouté (µg/dl) Réactivité croisée (%) L-T4 5 > 100 D-T L-T ,7 R-T DÉCEMBRE 2015 Page 11 de 13

12 Substance Analyte ajouté (µg/dl) Réactivité croisée (%) Acide Tétraiodothyroacétique 25 4 D-T ,7 3,3 L-T < 0,1 3,5 L-T < 0,1 3,5 L-T < 0,1 L-Tyrosine 5000 < 0,01 d-tyrosine 5000 < 0,01 Monoiodotyrosine 5000 < 0,01 Diiodotyrosine 5000 < 0,01 SENSIBILITÉ ANALYTIQUE La plus faible concentration détectable de T4 libre distincte de zéro (Access Free T4 Calibrator S0) avec un intervalle de con ance de 95% est de 0,25 ng/dl. Cette valeur est déterminée en traitant une courbe d étalonnage complète de six points, des contrôles et dix répliquats du calibrateur zéro dans plusieurs dosages. La valeur de la sensibilité analytique est calculée d après la courbe au point situé à deux écarts-types du signal moyen mesuré du calibrateur zéro. DIVERS Beckman Coulter, le logo stylisé, Access, SYNCHRON LX, UniCel et DxI sont des marques de Beckman Coulter, Inc. déposées auprès de l USPTO (Bureau des brevets américain). * Lumi-Phos est une marque déposée de Lumigen, Inc., une liale de Beckman Coulter, Inc. Access Free T4 FR Mode d emploi B01902 D Page 12 de 13 DÉCEMBRE 2015

13 BIBLIOGRAPHIE 1. Gornall, AG, Luxton, AW, Bhavnani, BR. Endocrine disorders. In Applied Biochemistry of Clinical Disorders. 1986, Philadelphia, PA: J. B. Lippincott Co. 2. White, GH. Recent advances in routine thyroid function testing. CRC - Critical Reviews in Clinical Laboratory Sciences, 1987, 24: Watts, NB, Keffer, JH. The thyroid gland. In Practical Endocrine Diagnosis. 1982; Philadelphia, PA: Lea & Febiger. 4. Approved Guideline - Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens for Common Laboratory Tests, GP44-A Clinical and Laboratory Standards Institute. 5. Cembrowski GS, Carey RN. Laboratory quality management: QC QA. ASCP Press, Chicago, IL, Demers, LM, Spencer, CA. Laboratory medicine practice guidelines: laboratory support for the diagnosis and monitoring of thyroid disease. Clin Endocrinol (Oxf) 2003; 58(2): Lee, SL. When is the TSH normal? New criteria for diagnosis and management. 12th Annual Meeting of the American Association of Clinical Endocrinologists (AACE), May, Haugen, BR. When isn t TSH normal and why? Clinical implications and causes. 12th Annual Meeting of the American Association of Clinical Endocrinologists (AACE), May, Singer, PA. Now it s normal - now it s not: food for thought from a complex case. 12th Annual Meeting of the American Association of Clinical Endocrinologists (AACE), May, Kricka L. Interferences in immunoassays - still a threat. Clin Chem 2000; 46: Bjerner J, et al. Immunometric assay interference: incidence and prevention. Clin Chem 2002; 48: Liewendahl, K, Majuri, H, Helenius, T. Thyroid function tests in patients on long-term treatment with various anticonvulsant drugs. Clinical Endocrinology, 1978; 8: Wenzel, KW. Pharmacological interference with in vitro tests of thyroid function. Metabolis. 1981; 30(7): Wilke, TJ. Estimation of free thyroid hormone concentrations in the clinical laboratory. Clinical Chemistry. 1986; 32(4): Spencer, CA. Thyroid status: trends in testing - selective test use cuts cost. Clinical Chemistry News, November, 1989, 15(11): Tentative Guideline - Internal quality control: Principles and definitions, C24-T National Committee for Clinical Laboratory Standards. 17. Krouwer, JS, Rabinowitz, R. How to improve estimates of imprecision. Clinical Chemistry. 1984; 30: Beckman Coulter Eurocenter S.A., 22, rue Juste-Olivier. Case Postale 1044, CH Nyon 1, Switzerland Tel: +41 (0) Beckman Coulter, Inc., 250 S. Kraemer Blvd., Brea, CA U.S.A. DÉCEMBRE 2015 Page 13 de 13