CHLAMYDIAE A. HAMMAMI

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1 CHLAMYDIAE A. HAMMAMI Laboratoire de Microbiologie Laboratoire de recherche Microorganismes et Pathologie humaine CHU H. Bourguiba de Sfax

2 (d apr après Moulder et Page 1966) Bactéries à part entière - Présence de LPS au niveau de la paroi - Présence simultanée d ADN et d ARN - Division binaire - Sensibles aux antibiotiques Bactéries très particulières et singulières - Multiplication intra cellulaire obligatoire - Cycle de développement spécifique Existent sous deux formes : - Corps élémentaires (CE) : formes matures, infectieuses - Corps réticulé (CR) : formes métaboliquement active, non infectieuses

3 CLASSIFICATION Ordre Famille Genre Espèces Chlamydiales Chlamydiaceae Chlamydia Chlamydophila C. trachomatis C. suis C. muridarum C. Pneumoniae C. Pecorum C. Psittaci C. Caviae C. Felis C. abortus

4 Chlamydia trachomatis, agent responsable du trachome, premier agent bactérien responsable d infections sexuellement transmissibles (IST) et d environ 70 % des stérilités tubaires. Chlamydophila pneumoniae, un des principaux agents bactériens responsable de pneumopathies atypiques communautaires. Chlamydophila psittaci est une espèce à tropisme animal, pouvant occasionnellement provoquer des infections respiratoires chez l homme. Les infections à Chlamydia posent des problèmes majeurs de santé publique.

5 N I 1907 Halberstäder et Von Prowazek Inclusions basophiles intra cytoplasmiques dans les frottis conjonctivaux de sujets atteints de trachome ainsi que des babouins Inoculés expérimentalement

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7 Les Chlamydia existent sous deux formes caractéristiques : - Le corps élémentaire (CE), forme infectieuse, extracellulaire, incapable de multiplication - Le corps réticulé (CR), intracellulaire, non infectieux, métaboliquement actif. Le cycle de développement est unique dans son genre dans le monde bactérien. Il comprend plusieurs étapes et il dure 48H à 72H : 1-Attachement et entrée du CE dans la cellule hôte 2-Différenciation du CE en CR 3-Différenciation des CR dans inclusion cytoplasmique caractéristique de l infection 4-Diférenciation des CR en CE 5-Sortie des CE par éclatement de la cellule

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9 Contamination des cellules avoisinantes Lyse de la cellule Cellule eucaryote (hôte) H Invagination de la membrane CE : Corps élémentaire CI : Corps intermédiaire CR : Corps réticulé 0 H Multiplication des CR par scission binaire, les CR produisent leurs propres macromolécules d ADN, d ARN et de protéines Membrane vacuolaire CR 8 H 40 H Transcription de l ADN synthèse d ARN et de protéines dans le CE Réorganisation des CR en CI puis en CE Inclusion contenant des CE, CR et CI 30 H 30 H Réorganisation des CE en CR Inclusion contenant des CR 12 H division binaire d un CR CYCLE DE DEVELOPPEMENT DES CHLAMYDIA

10 Ce cycle de développement spécifique, particulièrement lent explique : - Le caractère subaiguë et insidieux des infections à Chlamydia - La fréquence des formes asymptomatiques et des complications - La nécessité d une antibiothérapie prolongée avec des molécules actives en intra cellulaire.

11 CHLAMYDIA Bactérie de petite taille 0,3 um Croissance intracellulaire Parasite obligatoire des cellules (besoin en ATP) Cycle de développement complexe

12 MANIFESTATIONS PATHOLOGIQUES DES CHLAMYDIA

13 CHLAMYDIA TRACHOMATIS MANIFESTATIONS PATHOLOGIQUES DE C. TRACHOMATIS Pouvoir pathogène : Homme Infections : Trachome: sérovars A, B, Ba et C IST: sérovars D,Da,E,F,G,H,I,Ia,J,K LGV: sérovars L1, L2,L2a et L3

14 LE TRACHOME

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23 INFECTION SEXUELLEMENTS TRANSMISSIBLES A C. TRACHOMATIS PROBLEME DE SANTE PUBLIQUE Asymptomatique Latente Chronique Persistante Complications fréquentes Salpingite, épididymite INFERTILITE

24 CHLAMYDIA PNEUMONIAE Large éventail de pathologies infectieuses Infections respiratoires communautaires Affections cardio-vasculaires - Athérosclérose - Endocardite

25 MANIFESTATIONS PATHOLOGIQUES DE C. PSITTACI Pouvoir pathogène : Homme (Accidentellement) Infections : * Pneumopathies atypiques * Manifestations cardiaques

26 DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE

27 DIAGNOSTIC DIRECT : DETECTION DE LA BACTERIE

28 PRODUITS PATHOLOGIQUES Prélèvements pour la détection de C. trachomatis * Prélèvement urétral * Prélèvement endocervical * Urine * Sperme * Sécrétion prostatique * Adhérences * Liquide de Douglas

29 PRELEVEMENT URETRAL CHEZ L HOMME

30 PRELEVEMENT URETRAL CHEZ L HOMME

31 PRELEVEMENT ENDOCERVICAL CHEZ LA FEMME

32 PRELEVEMENT ENDOCERVICAL CHEZ LA FEMME

33 PRELEVEMENT DU LIQUIDE DE DOUGLAS

34 PRELEVEMENT CONJONCTIVAL

35 RECHERCHE DE C.TRACHOMATIS DANS LES PRELEVEMENTS GENITAUX PAR IMMUNOFLUORESCENCE DIRECTE (IFD)

36 RECHERCHE DE C.TRACHOMATIS DANS LES PRELEVEMENTS GENITAUX PAR IMMUNOFLUORESCENCE DIRECTE (IFD)

37 RECHERCHE DE C.TRACHOMATIS DANS LES PRELEVEMENTS GENITAUX PAR IMMUNOFLUORESCENCE DIRECTE (IFD) Prélèvement génital positif (technique IFD) : Nombreuses particules fluorescentes de C. trachomatis et de cellules épithéliales

38 ISOLEMENT DE CHLAMYDIA PAR CULTURE CELLULAIRE

39 ISOLEMENT DE CHLAMYDIA PAR CULTURE CELLULAIRE N I Chlamydia trachomatis : Inclusion en cellule Mc Coy (Coloration de May Grunwald Giemsa)

40 ISOLEMENT DE CHLAMYDIA PAR CULTURE CELLULAIRE N I N I Chlamydia trachomatis : Inclusion en cellule Mc Coy (Révélation par la technique d immunofluorescence directe)

41 PRODUITS PATHOLOGIQUES Prélèvements pour la détection de C. pneumoniae * Aspiration broncho-alvéolaire * Ecouvillonage nasopharyngé * Biopsie de valve * Plaque d athérome Prélèvements pour la détection de C. psittaci * Aspiration broncho-alvéolaire * Ecouvillonage nasopharyngé * Biopsie de valve

42 DIAGNOSTIC MOLECULAIRE

43 DIAGNOSTIC INDIRECTDIRECT: METHODES SEROLOGIQUES

44 Préparation des lames Dépôt des antigène Groupe d antigène Détail d un groupe d antigène LB1 IOL- 207 TE Loth Dépôt des dilutions de sérum LB1 : Souche de Chlamydia trachomatis Loth : Souche de Chlamydia psittaci IOL-207 : Souche de Chlamydia pneumoniae TE : Témoin œuf 1/16 1/32 1/64 1 /128 1 /256 1 /512 1 /1024 Sérum N 1 Sérum N 2 Sérum N 3

45 goutte de sérum Examen microscopique d une réaction positive selon le test de MIF

46 Interprétation des résultats de la technique MIF Espèce Titre des anticorps Interprétation C. trachomatis IgG 16 IgG 64 et/ou IgM 16 Réaction positive Infection aiguë évolutive C. pneumoniae IgG 32 IgG 512 et/ou IgM 16 Réaction positive Infection aiguë évolutive C. psittaci IgG 16 IgG 256 et/ou IgM 8 Réaction positive Infection aiguë évolutive

47 DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE DES INFECTION A CHLAMYDIA DIAGNOSTIC DELICAT Diagnostic direct * Sensibilité variable - Technique utilisée - Types de prélèvement - Type de pathologie : Infection hautes ou basses Infection persistante

48 DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE DES INFECTION A CHLAMYDIA Diagnostic sérologique * Manque de sensibilité au cours des infections basses * Manque de spécificité du fait des réactions croisées entre les différentes genres et espèces de Chlamydia et avec d autres bactéries

49 ANTIBIOTIQUES NATURELLEMENT ACTIFS SUR LES CHLAMYDIA Rifampicine Tétracycline Macrolides et apparentés Fluoroquinolone

50 Pénétration de l antibiotique dans la cellule Persistance de l antibiotique pendant la période d au moins un cycle bactérien Traitement au début de l infection avant l installation d une réponse de type HSR (infections séquellaires)

51 ANTIBIOTIQUES NATURELLEMENT INACTIFS SUR LES CHLAMYDIA Aminoside Vancomycine Quinolones de première génération Metronidazol Colimycine β-lactamine (sauf la pénicilline G et l amoxicilline)

52 Prophylaxie * Lutte contre les IST par l éducation, l utilisation d un préservatif et enfin le dépistage gratuit. Lors d un diagnostic positif, traiter le ou les partenaires éventuels. * Lutte contre le trachome : amélioration des conditions de vie mais aussi d hygiène. La prévention lors de l accouchement repose sur l application d un collyre. * Prévention de la conjonctivite du nouveau-né tels collyre à l oxytétracycline ou rifampicine.