LES LEVURES. Diagnostic au laboratoire des Candida. Diagnostic au laboratoire des levures

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1 LES LEVURES Diagnostic au laboratoire des Candida MO, peau, pus, biopsies ED direct Gram, MGG, BM Formes levures, filaments mycéliens Histologie rénale: coloration PAS Urine Pvt. vaginal Histologie renale: coloration Gomori Grocott Diagnostic au laboratoire des levures MO, peau, pus, biopsies ED direct Gram, MGG, BM Formes levures, filaments mycéliens Culture sur Sabouraud + ATB (genta, chloramphénicol) C Caractères culturaux et biochimiques Pseudomycélium, chlamydospores, blastèse 2 Indirect Recherche Ac et Ag

2 Production de chlamydospores sur milieux pauvres (PCB, RAT) Recherche des Ac par IFI Diagnostic au laboratoire du cryptocoque MO, peau, pus, biopsies ED direct: encre de chine PL liquide clair Lymphocytaire Hyperprotéinorachie (>2g/L) Hypoglycorachie Cryptococcus neoformans: capsule en contraste interférentiel Coloration HES Coloration PAS Cryptococcus neoformans dans le cerveau Observation à l encre de chine Coloration GC

3 Diagnostic au laboratoire du cryptocoque MO, peau, pus, biopsies ED direct: encre de chine Colorationhisto PAS, GC PL liquide clair Lymphocytaire Hyperprotéinorachie (>2g/L) Hypoglycorachie Culture sur Sabouraud + ATB (genta, chloramphénicol) C Caractères biochimiques Auxano-Zymo, Uréase 2 Indirect Recherche Ac et Ag Les dermatophytes 4.Etude biologique des dermatophytes 4.1 Examen en lumière de Wood Fluorescence verte pour teignes à GP = Microsporum sp. inflammatoire (si Microsporum) favique H.C. (si Microsporum) Négatif pour teignes à PP = Trichophyton sp. intertrigos des plis Fluorescence rouge corail = érythrasma ( Corynebacterium minutissimum) 4.2 le prélèvement: c est l étape la plus importante Il faut aller chercher le champignon là ou il est vivant HC: grattage en périphérie des lésions TT GP: arracher les petits cheveux fluo (+), gratter les squames TT PP: arracher ls petits cheveux fluo (-), gratter les squames TI: prélever le pus et les croûtes TF: couper les cheveux à 1cm de l émergence et les éliminer; arracher les petits cheveux, gratter le cuir chevelu IT: grattage (faire saigner si T. rubrum) Onyxis: éliminer la partie opaque de l ongle, prélever la partie spongieuse à la jonction saine/malade. 5. Examens directs Eclaircissement: KOH à 5-10%; chloral-lactophénol (dissoudre partiellement la kératine) squames cheveux (5 types de parasitismepillaire) Coupes schématiques d un cheveu et d un ongle

4 5.1 Le type microsporique 5.2 Le type microïde Wood (+) Petites spores 2µm de diamètre TT GP animal, ou d homme à homme M.canis, M. langeronii Petites spores 2µm de diamètre Kérions, présence de pus animal, jamais homme à homme T.erinacei, T.mentagrophytes 5.3 Le type mégaspore 5.4 Le type endothrix grosses spores 4-5µm de diamètre Kérions sub-aigus animal (bovidae, ungulae, volaille) T.ochraceum, T.equinum, T.gallinae grosses spores 4µm de diamètre TT PP Contamination enfants à enfants T.violaceum, T.soudanense T.tonsurans 5.5 Le type favique Wood (+) Cheveux longs Bulles d air TF Contamination familiales T.schoenleinii 5.Cultures Milieu de Sabouraud glucosé à 2% + ATB (genta, strepto, chloram) + antifongique (actidione Délais des cultures 4-5j: T.mentagrophytes 8-10j: M.canis, T. rubrum 1 mois: T. schoenleinii Observation des cultures macroscopie: recto-verso (revers-avers) microscopie: macro- micro-conidies, vrilles, chlamydospores

5 LES ASPERGILLOSES Etude biologiques des aspergillus Le diagnostic précis de l espèce est de la compétence des spécialistes Le laboratoire se contente de diagnostiquer le groupe ou la section auquel appartient le champignon 1 Les prélèvements Expectoration, LBA, hémocultures ( svt négatives) Examens directs Histopathologie Colorations spéciales PAS de Hotchkiss-Mc Manus, Gomori-Grocott 2 Les cultures Sabouraud avec ATB Délais de culture 3-4 jours 5.3 Identification Milieu de Czapek Milieu à l extrait de malt Examen macroscopique Examen microscopique