Contamination des aliments par des moisissures et/ou des mycotoxines : analyse

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1 Contamination des aliments par des moisissures et/ou des mycotoxines : analyse 1- Stratégies d échantillonage 2- Conditions de conservation 3- Analyses mycologiques et /ou mycotoxicologiques 4- Analyses biologiques P. Guerre Analyse & Diagnostic 1 Comment évaluer la contamination? Echantillon représentatif: Erreur d échantillonnage Lot/sous lot Echantillon élémentaire/échantillon global Echantillon de laboratoire/prise d essai Méthodes de mesure: Erreur de mesure Méthode Sensibilité (LD, LQ) Spécificité ELISA +/- +/- HPLC UV/Fluo ++(+) ++(+) HPLC SM +++(+)

2 Echantillonage P. Guerre Analyse & Diagnostic 3 Echantillonage 10 kg??? => 1 kg Fonction des objectifs P. Guerre Analyse & Diagnostic 4 2

3 Conservation des prélèvements Mycotoxines, spores résistent à la congélation Problèmes d interprétation des flores Activité hydrique extemporanément??? Echantillothèques des usines de fabrication P. Guerre Analyse & Diagnostic Analyses mycologiques et /ou mycotoxicologiques Analyse Avantages Inconvénients Examen macroscopique microscopique - Identification des genres possible Ergostérol - Toute contamination fongique détectée - Moyennement quantitatif Flore (identification en culture des espèces) - Identification d une flore potentiellement toxinogène Détection ELISA ou - Spécifique & Quantitatif CCM des - Sensibilité suffisante (ppm) mycotoxines - N valeurs, analyse statistique Détection HPLC des - Spécifique & Quantitatif mycotoxines - Très sensible (ppb) - N valeurs, analyse statistique Détection CPG/SM - Spécifique & Quantitatif des mycotoxines - Très sensible (ppt) - Plusieurs analyses groupées - Peu sensible - Pas réalisable sur aliments préparés ou congelés - Peu d information sur la toxicité de l aliment - Difficulté d interprétation - Pas de différentiation d une flore banale d une flore potentiellement toxinogène - Aucune information sur la toxicité de l aliment - Faux positifs avec levures - Faux négatifs assez fréquents (destruction de la moisissure mais pas des mycotoxines pendant la préparation de l aliment) - Difficilement réalisable sur aliments congelés - Aucune information sur la toxicité de l aliment - Moyennement onéreux - Différentes analyses pour chaque mycotoxine - Onéreux - Différentes analyses pour chaque mycotoxine - Très onéreux - Adapté à une recherche ponctuelle tous azimuts, pas à des études P. Guerre Analyse & Diagnostic 6 3

4 Comment évaluer l'exposition? Fréquence * maïs n région x Fréquence * blé n+1 région y Moy: 842 P9: 2726 Pire cas: 800 DON (µg/kg) Moy: 37 P9: 100 Pire cas: 8996 DON (µg/kg) Comment évaluer l'exposition? Matières premières (%) Poulet standard Démarrage Croissance Retrait Maïs Blé T. soja Autres <10 <10 <10 CMV Total Contributeur majeur/contributeur mineur (peu contaminé, peu abondant) Matières Poulet standard premières Démarrage Croissance Retrait Moy P9 Max Moy P9 Max Moy P9 Max Maïs Blé Recommandation 2006/76/CE: céréales et dérivés/maïs: 8000/12000 µg/kg DON aliment volailles 000 µg/kg DON 4

5 Méthodes biologiques Analyse Avantages Inconvénients Tests biologiques non spécifiques - Limité aux trichothécènes dermonécrosants (toxine T2, - Révèle les effets cumulés de plusieurs déoxynivalénol, nivalénol, diacétoxyscirpénol, ) mycotoxines ayant les mêmes mécanismes - Semi-quantitatif et peu sensible (plus adapté à un d action diagnostic de mycotoxicose qu à la détermination d un niveau ) Biochimie classique - Non spécifique (aide au diagnostic) Marqueurs biologiques spécifiques - Spécifique - Moyennement onéreux - Eventuellement prédictif Sérologie protéines - Moyennement spécifique Formule +/- - Approche globale rep. Immune numération - Réfrigération prélèvements Poids carcasses et organes - Non spécifique - Adapté à un diagnostic de mycotoxicose pas à la détermination d un niveau => nécessite de grands nombres - Pour toxines perturbant le métabolisme des sphingolipides (fumonisines et précurseurs, AALtoxines, sphingofungines ) - Fortes variations individuelles chez canard - Nécessite une validation chez la dinde - Peu spécifique - Sensibilité variable (fibrinogène/ig) - Non spécifique - Pas de congélation - Coût variable - Simple - Peu spécifique et peu sensible - Nécessite autopsie P. Guerre Analyse & Diagnostic 9 Conclusions Diagnostic difficile Bien réfléchir aux objectifs Savoir ce que l on cherche Connaître les limites de chaque paramètre P. Guerre Analyse & Diagnostic 10