Bases de la classification des lymphomes : OMS 2008
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- Marie-Josèphe Lecours
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2 Bases de la classification des lymphomes : OMS 2008 Entités cliniques OMS Histologie Architecture Cytologie Immunophénotype Contre-partie normale Modèle immunologique Cytogénétique FISH Conventionnelle
3 Différenciation Lymphoïde Subdivisions du système lymphoïde Organes lymphoïdes centraux Moelle : Différenciation lymphoïde B Thymus : Différenciation lymphoïde T Organes lymphoïdes périphériques Rate Ganglions MALT: mucosa associated lymphoïd tissue
4 Prototype : Lymphome B repose sur un mode de réaction immunitaire adaptée Maturation LB dans la Moelle Circulation : cellules naïves Contact avec Ag dans le ganglion Réponse humorale : Rapide : extra-folliculaire (marginale?)» Sécrétion IgM, affinité médiocre Lente : formation d un follicule secondaire» Sécrétion IgG, IgA, forte affinité Plasmocytes, LB mémoires
5 OMS 2008
6 Maturation Lymphocytaire B Antigène indépendante Antigène dépendante TdT TdT TdT TdT M Ig CD34 CD34 CD19 CD22 CD34 CD19 CD22 CD10 (CD20) Pax5 CD79a (CD34) CD19 CD22 CD10 CD20 Pax5 CD79a CD19 CD22 CD20 CD21 (CD5) SIgM,D Pax5 CD79a Progéniteurs B Pre-Pre-B Pre-B Immature B (naïf) CD19 CD22 CD20 CD21 SIgM, D Pax5 CD79a mature B mémoire CD19 CD38 CD22 CD79a CD20 CD21 SIgM or G Pax5 CD79a B activé Plasmocyte différencié Réarrangement des gènes de la chaîne lourde des Ig Réarrangement des gènes de la chaîne légère des Ig
7 Zone du manteau Centre germinatif C.Naïves CB, BCR- CC, BCR+ BCL6- BCL6+, MUM1- LB BCR- ou basse affinité Apoptose (BCl2 négatif) Plasmocyte BCL6-, MUM1+ Switch des IG Mutations somatiques LB mémoire
8 Zone du manteau Zone claire Centre germinatif Zone sombre Zone Marginale
9 CD20 CD10 BCL6 BCL2 Ki67 CD21 CFD
10 Prototype : Lymphome B Maturation LB dans la Moelle osseuse Leucémie/Lymphome Lymphoblastique Circulation : cellules naïves, colonisation ganglionnaire Ganglion zone du manteau LNH Manteau Ganglion: Zones B centres folliculaires/tissu interfolliculaire: LNH Folliculaire LNH B diffus à grandes cellules LNH de Burkitt LH Ganglion : Zone marginale (LB mémoires, ) Lymphome de la zone marginale Ganglion : cordons médullaires : Plasmocytes Myélome/ Plasmocytome
11 Lymphome/leucémie lymphoblastique B
12 CD79a ki67 CD10 Tdt CD34
13 LYMPHOME B
14 Lymphome Manteau : architecture
15 Lymphome Manteau : cytologie
16 Lymphome Manteau : phénotype CD20 CD5 Cycline D1 CD23
17 11 Intérêt de la FISH : L du manteau 14 Témoin LSI IGH / CCND Locus BCL-1 (CCND1) en 11q13 Locus IgH en 14q32 Noyau interphasique FISH der 11 der 14 t(11;14)(q13;q32) t(11;14)(q13;q32)
18 Split CCND1 Indication FISH Si IHC faible, douteuse Si blastoïde Si phénotype paradoxale (rares+++)
19
20 Lymphome Folliculaire : cytologie
21 Centre germinatif LNH Folliculaire CD20 CD10 CD20 CD10 BCL6 BCL2 BCL6 BCL2 KI67 CD21 KI67 CD21
22 t(14;18)(q32;q21)
23 C. LYMPHOMATEUSE Indications FISH Si phénotype incomplet CD10 négatif Bcl2 négatif Si diagnostic différentiel difficile (marginal) Si prélèvement exigu Si extra-nodal Si grade 3b (BCL2 et BCl6) Split BCL2
24 DLBCL : Classification OMS 2008 : Prolifération diffuse de grandes cellules lymphoïdes B (taille noyau au noyau d un macrophage ou à 2 lymphocytes). Lymphome B diffus à grandes cellules NOS Sous-types de lymphome B diffus à grandes cellules Autres types de lymphome B diffus à grandes cellules: entités clinico-bio-pathologique Lymphomes «Bordeline» : entités provisoires
25 DLBCL : Classification OMS 2008 : Prolifération diffuse de grandes cellules lymphoïdes B (taille noyau au noyau d un macrophage ou à 2 lymphocytes). Lymphome B diffus à grandes cellules NOS Variantes morphologiques Centroblastique Immunoblastique Anaplasique B Rares : stroma myxoïde ou fibreux, à cellules fusiformes ou à cellules en bague à chaton Sous groupes moléculaires GCB (germinal center B-cell like) ABC (actived B-cell like) Sous groupes immunohistochimiques CD5+ GCB : MUM1 négatif, CD10 et ou BCL6 positif dans plus de 30% des cellules Non GCB : MUM1 positif (>30%) CD10 - et BCL6 +/-
26 LNH B Diffus à Grandes Cellules (DLBCL)
27 Variantes morphologiques Cb Ib Cb multilobé Cb polymorphe
28 Anaplasique B CD20 CD30 CD3
29 DLBCL : phénotype usuel CD20 KI67 BCL2 BCL2
30 Sous-groupes moléculaires Lymphochip NIH (LLMPP) L. Staudt et al. Alizadeh et al., Nature (2000), 403, p Profil d expression génique (puces à ADN) 274 pts 3 groupes - Germinal Center B cells - Activated B Cells - Type 3 DLBCL (hétérogène) Rosenwald et al, NEJM 2002
31 Sous-groupes immunohistochimiques GCB CD % Bcl % Mum % Non-GCB Hans et al algorithm (Blood 2004, nodal diffuse large B-cell) + Germinal Center B-cell-like (GCB) CD10 - Non GCB - Bcl6 - GCB + Mum1 Non GCB +
32 Sous-groupes immunohistochimiques GCB CD10 bcl6 Mum1 Non-GCB Confirmation IHC de la classification moléculaire des DLBCL C Hans Blood, 2004, 103;275-82
33 Sous-groupes immunohistochimiques DLBCL CD5+ Expression CD5 : 10% De novo Rarement sec à une LLC Mauvais pronostic CD20 CD5 CD3 Eliminer manteau blastoïde Importance t(11;14) Mum1 CD23 Bcl1
34 Données Cytogénétiques et Moléculaires: DLBCL Réarrangement des Immunoglobulines Translocation t(14;18)+ (20-30%) Réarrangement (translocations impliquant région 3q27) de BCL6 > 30% des cas Réarrangement de Myc 10% le plus souvent associé à d autres anomalies 60% Ig gène 40% non-ig gène Anomalies génétiques complexes Mauvais pronostic
35 DLBCL : Classification OMS 2008 : Recommandations :Quid de la FISH Morphologie et phénotype de type Burkitt Si l index de prolifération Ki67 est très élevé Réarrangements de MYC, BCl2 et BCL6 par FISH sont recommandés Mais!!!!! Ki67 variable % dans formes «bordeline» BL/DLBCL DLBCL NOS
36 LNH Burkitt: architecture
37
38 LNH Burkitt : phénotype BCL6 CD10 CD20 BCL2 KI67
39 LNH Burkitt : cytogénétique, t(8;14) t(2;8) t(8;22) Split C-Myc
40 LYMPHOME HODGKINIEN (LH) LH. CLASSIQUE à cellularité mixte scléro-nodulaire riche en lymphocytes à déplétion lymphoïde LH. à PREDOMINANCE LYMPHOCYTAIRE NODULAIRE (paragranulome Hodgkinien de Poppema Lennert)
41 Lymphome Hodgkinien : origine IgH réarrangé : microdissection Expression CD20 et CD79a : 20 à 30% Expression Pax 5 Mutations somatiques régions variables B Absence de production d Ig Mutations somatiques non fonctionnelles: codons stop Absence d expression de facteurs de transcriptions mpliqués dans synthèse des Ig (BOB1, Oct2)
42 Lymphome Hodgkinien
43 LH. CLASSIQUE C. Sternberg C. Sternbergoïde à cellularité mixte scléro-nodulaire riche en lymphocytes à déplétion lymphoïde ARCHITECTURE INFLAMMATION C. Hodgkin
44 LH. CLASSIQUE : architecture Scléro-nodulaire Cellularité mixte Riche en lymphocytes Déplétion lymphoïde
45 LH. CLASSIQUE: phénotype C. Sternberg C. Hodgkin CD15 CD30
46 LH. CLASSIQUE C. Sternberg C. Hodgkin CD15 CD20
47 EBV LMP1 CD3
48 LH. à prédominance lymphocytaire nodulaire ORIGINE : centre germinatif Prolifération clonale B Expression Bcl6
49 LH. à prédominance lymphocytaire nodulaire
50 LH. à prédominance lymphocytaire nodulaire CD79a+ CD20+ CD75+ EMA+ CD30-/+ CD15- CD57
51 LHC :Indication biologie moléculaire : Diagnostics différentiels avec les LNHT: TLAI CD20 EBER
52 Leucémie/lymphome lymphocytique chronique : Architecture
53 Leucémie/lymphome lymphocytique chronique : cytologie
54 Leucémie/LNH lymphocytique chronique : phénotype CD20 CD5 CD23
55 Cytogénétique LLC Del 13q4.3 (50%) Trisomy 12 (20%) Del 11q Del 17p13 Del 6q21
56 LNH zone marginale :architecture
57 LNH zone marginale : cytologie
58 Kappa Lambda CD20 CD10 BCL6 PHENOTYPE KI67 BCL2
59 Lymphome T centraux Lymphome T lymphoblastique Lymphome T périphérique/mature LNH T ganglionnaire LNH T extra-ganglionnaire cutané LNH T (forme leucémique)
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61 Maturation Lymphocytaire T Localisation: Thymus Thymocyte médullaires ccd3 TdT L. Mature HELPERS CD4+ TdT CD34 ccd3 TdT CD34 CD7 (CD2) ccd3 TdT CD2 CD7 CD5 ccd3 CD4 TdT CD2 CD7 CD5 CD2 CD3 CD7 TCR CD5 CD8 CD1 CD4/CD8 ccd3 CD2 (CD7) CD5 CD3 CD4 TCR CD8 TdT Progéniteurs Pro immature mature thymocytes TCR R TCR R mature thymocyte L. Mature CYTOTOXIQUE CD8+ TCR D TCR R TCR R
62 Lymphome/leucémie T Lymphoblastique lymphome (thymus, ganglion) < 25%
63 Phénotype : CD3+, CD5+/-, CD7+, CD10+, Tdt+ CD3 CD20 Ki67 CD5 CD7 Tdt CD10 CD34
64 LYMPHOME T MATURE Formes leucémiques A grand lymphocytes granuleux Chronique à cellules NK Prolymphocytaire NK ATL Cutanées Mycosis Fungoïdes Syndrome de Sesary Sd lymphoprolifératif de l enfant EBV+ LNHT type panniculite LNHT CD30+ cutané primitif LNHT primitifs cutanés : Sous-types rares Extra-ganglionnaire Lymphome NK/T nasal type Lymphome T lié aux entéropathies Lymphome T hépato-splénique Lymphome T type panniculite Ganglionnaire LNH T de LAI LNH T périphérique LNH T anaplasique ALK+/ALK-
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66 Epidémiologie International T-Cell Lymphoma Project JCO 2008;26: PTCL-NOS 25.9% AITL 18.5% 2008 by American Society of Clinical Oncology
67 Prognostic
68 Cadre Nosologique: LNHT périphérique ganglionnaire PTCL-NOS CD4+ > CD8+ ALCL Null > CD4+ > CD8+ cytotoxic AITL CD4+ CXCL13+ CD30- CD30+ ALK- ALK+ PTCL with follicular/parafollicular pattern t(5;9)(q33;q22): SYK-ITK Cutaneous anasplastic CD30+ lymphoma T FH GERMINAL CENTER
69 AITL: morphologie
70 CD3 CD10 BCL6 CD20 EVB CD21 CXCL13 PD1
71 CD30 CD20 Clone T Clone B EBER LMP
72 AITL et PTCL-U: signatures différentes AITL : signature micro-environnement AITL : signature enrichie en gènes < TFH BLOOD, de Leval, 2007
73 Lymphome T périphérique NOS
74 CD20 CD3
75 CD5 CD4
76 Clone T Biologie Moléculaire
77 LYMPHOME T anaplasique CD30+
78 EMA CD30 CD43
79 LYMPHOME T CD30+ ALK+ ANAPLASIQUE t(2;5) cytoplasmique, nucléaire, nucléolaire nucleophosmin-anaplastic lymphoma kinase t(2;1) cytoplasmique t(2;3) cytoplasmique
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