ScanGel ABO Complete/RH/K Duo x 24 cartes x 144 cartes Cartes ScanGel ABO Complete/RH1 Duo et ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo

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1 ScanGel ABO Complete/RH/K Duo x 24 cartes x 144 cartes Cartes ScanGel ABO Complete/RH1 Duo et ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo GELS FORMULES AVEC DES REACTIFS MONOCLONAUX D ORIGINE MURINE OU HUMAINE OU GEL NEUTRE Groupage ABO. Détermination des Ag RH1, RH2, RH3, RH4, RH5 et KEL1 IVD Tous les produits fabriqués et commercialisés par la société Bio-Rad sont placés sous un système d assurance qualité de la réception des matières premières jusqu à la commercialisation des produits finis. Chaque lot de produit fini fait l objet d un contrôle de qualité et n est commercialisé que s il est conforme aux critères d acceptation. La documentation relative à la production et au contrôle de chaque lot est conservée par le fabricant. 11

2 I - UTILISATION ET PRINCIPE DU RÉACTIF Ces cartes sont strictement réservées à des usages professionnels et diagnostiques in vitro. Destiné au groupage ABO et à la détermination des antigènes RH1 (D), RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e) et KEL1 (K), le test associe les principes d agglutination et de filtration sur gel. La réaction est obtenue et lue après centrifugation de microtubes spécialement conçus, remplis soit de gel imprégné de réactif spécifique de l antigène érythrocytaire à déterminer (épreuve globulaire du groupage ABO et détermination des antigènes RH1, RH2, RH3, RH4, RH5 et KEL1), soit de gel neutre pour l épreuve sérique du groupage ABO. La suspension de globules rouges et le plasma ou le sérum (pour l épreuve sérique de groupage ABO) sont déposés dans la cupule de chaque microtube et immédiatement centrifugés. Les globules rouges non agglutinés sont collectés au fond du microtube, tandis que les agglutinats sont retenus dans la hauteur de gel en fonction de leur taille. Leur position dans le gel détermine l intensité de la réaction II - CARACTÉRISTIQUES DES RÉACTIFS REMARQUE IMPORTANTE : La carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo doit obligatoirement être utilisée en même temps que la carte ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo 1. Carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo Les trois premiers microtubes de la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo contiennent chacun un gel imprégné d un réactif monoclonal d origine murine respectivement de spécificité anti-abo1 (A), anti-abo2 (B) et anti-abo3 (AB). Ces anticorps sont produits à partir des clones suivants : anti-abo1 (A) : 15750F7 anti-abo2 (B) : X9 anti-abo3 (AB) : AB5-63A5A2 / X9 Le quatrième microtube contient un gel imprégné d un réactif monoclonal d origine humaine de spécificité anti-rh1 (D). Cet anticorps est une IgM sécrétée par le clone B9A4-B2A6A6A1A1. Cet anti-rh1 (D) ne permet pas la détection du phénotype RH1 partiel catégorie VI (DVI). Le cinquième et le sixième microtubes contiennent du gel neutre. 12

3 Ces réactifs contiennent de l'azide de sodium (< 0,1 %) comme conservateur. Le code produit et le nombre de cartes par boîte sont mentionnés sur l'étiquette de la boîte. 2. Carte ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo Les cinq premiers microtubes de la carte ScanGel Monoclonal RH/K phenotypes Duo contiennent chacun un gel imprégné d'un réactif monoclonal d origine humaine respectivement de spécificité anti-rh2 (C), anti-rh3 (E), anti-rh4 (c), anti-rh5 (e) et anti-kel1 (K). Ces anticorps sont produits à partir des clones suivants : Anti-RH2 (C) : MS-24 Anti-RH3 (E) : MS-260/MS-258 Anti-RH4 (c) : MS-33 Anti-RH5 (e) : MS-63/MS-21/MS-16 Anti-KEL1 (K) : MS-56 Le sixième microtube contient le gel sans anticorps et correspond au contrôle (Ctl) valable pour les deux cartes ScanGel ABO Complete/RH1 Duo et ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo. Ces réactifs contiennent de l'azide de sodium (< 0,1 %) comme conservateur. Le code produit et le nombre de cartes par boîte sont mentionnés sur l'étiquette de la boîte. III - CONSERVATION - VALIDITÉ La date limite d utilisation et les conditions de stockage sont indiquées sur la boîte. Les cartes doivent être conservées à température ambiante de +15 C à +25 C. Les cartes doivent être stockées verticalement à l abri de toute source de chaleur dans un local où température et hygrométrie sont peu variables. IV - AVERTISSEMENTS ET PRECAUTIONS La fiabilité des résultats dépend de la bonne exécution des Bonnes Pratiques de Laboratoire suivantes : Ne pas utiliser les réactifs au-delà de la date de péremption indiquée sur l étiquette. Ne pas utiliser de cartes montrant des signes de dessèchement, des bulles ou une languette de scellage endommagée. Les réactifs contenus dans les microtubes étant de nature différente, il est indispensable de prendre les précautions nécessaires pour ne pas provoquer de contaminations inter-microtubes et ce, particulièrement, lors du retrait de la languette d aluminium et dans les étapes de distribution. 13

4 Utiliser un embout de pipette différent pour chaque échantillon. Vérifier la précision et le bon fonctionnement des pipettes et autres équipements. Porter des gants et des lunettes de sécurité lors de la manipulation de réactifs et d échantillons. Ne jamais pipeter directement à la bouche. Eviter les éclaboussures. En cas d éclaboussures, nettoyer avec de l eau de javel à 12 Cl diluée au 1/10, et essuyer avec un papier absorbant. Le matériel utilisé pour nettoyer devra être jeté dans un conteneur pour résidus contaminés. Les consommables et produits ayant été en contact avec les échantillons de patients ou des réactifs d origine humaine ne doivent être éliminés qu après décontamination. Les fiches de sécurité sont disponibles sur demande. V - RECUEIL ET TRAITEMENT DES ÉCHANTILLONS Le sang doit être prélevé aseptiquement dans un tube sans ou avec anticoagulant (EDTA, CPD). Le test doit être pratiqué le plus tôt possible après le recueil. Les échantillons qui ne peuvent être analysés rapidement devront être conservés entre +2 C et +8 C et testés dans un délai de 48 heures. En aucun cas une hémolyse ne doit être visible. Ne pas chauffer les échantillons. VI - TECHNIQUES Matériel fourni ABO Complete/RH/K Duo 2 x 24 cartes incluant ScanGel ABO Complete/RH1 Duo 24 cartes ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo 24 cartes ABO Complete/RH/K duo 2 x 144 cartes incluant ScanGel ABO Complete/RH1 Duo 144 cartes ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo 144 cartes Autre matériel nécessaire non fourni Milieux de suspension des globules rouges ScanLiss 100 ml ScanLiss 500 ml ScanSol 100 ml ScanSol 500 ml IH QC : Contrôle de qualité en immunohématologie IH QC 4 x 6 ml ReverScan A1 et B : globules rouges test prêts à l'emploi pour l'épreuve sérique du groupage ABO ReverScan A1, B, 2 x 5 ml 14

5 Centrifugeuse : ScanGel Centrifuge Pipettes automatiques ou semi-automatiques Embouts de pipette Tubes à usage unique Récipient pour déchets à risques biologiques Eau de Javel Gants latex Papier absorbant Lunettes de sécurité Contrôles Epreuve globulaire ABO et détermination des antigènes RH1, RH2, RH3, RH4, RH5 et KEL1 Témoins positif et négatif (globules rouges connus positifs et négatifs pour l'antigène étudié, testés simultanément avec les globules rouges de l'échantillon à tester pour valider l'activité propre du réactif). Epreuve sérique ABO Témoin positif (plasma ou sérum connu contenant au moins un anticorps spécifique), témoin négatif (plasma ou sérum connu ne contenant pas d anticorps). IH QC : Contrôle de qualité en immunohématologie. Mode opératoire Le mode opératoire doit être strictement suivi. La carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo doit obligatoirement être utilisée en même temps que la carte ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes, avec la même suspension de globules rouges à tester. Tous les réactifs doivent être remis à température ambiante avant utilisation. Par centrifugation séparer le sérum ou le plasma et les globules rouges de l'échantillon à tester. Lorsque le sang est prélevé sur tube sec, le sérum doit être recentrifugé. VI.1 - Suspension en ScanLiss a) Préparation extemporanée d'une suspension 1% de globules rouges en ScanLiss Distribuer 1 ml de ScanLiss dans un tube à usage unique, identifié. Ajouter 10 μl de culot globulaire. Mélanger. La suspension de globules rouges est prête à être utilisée. 15

6 b) Technique 1. Identifier chaque carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo et ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo par le nom ou le numéro d échantillon correspondant. Retirer les languettes d aluminium des cartes avec précaution pour éviter les contaminations inter-microtubes. Remettre en suspension les globules rouges avant utilisation. 2. Distribuer 50 μl de ReverScan A1 dans la cupule du microtube 5 de la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo. 3. Distribuer 50 μl de ReverScan B dans la cupule du microtube 6 de la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo. 4. Distribuer 50 μl de plasma ou de sérum dans les cupules des microtubes 5 et 6 de la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo 5. Distribuer 50 μl de suspension globulaire à tester dans les cupules des microtubes 1, 2, 3 et 4 de la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo, et dans la cupule de chaque microtube de la carte ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo. 6. Centrifuger 10 minutes dans ScanGel Centrifuge. 7. Lire les réactions. VI.2 - Suspension en ScanSol a) Préparation extemporanée d'une suspension 5% de globules rouges en ScanSol Distribuer 0,5 ml de ScanSol dans un tube à usage unique, identifié. Ajouter 25 μl de culot globulaire. Mélanger. La suspension de globules rouges est prête à être utilisée. b) Technique 1. Identifier chaque carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo et ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo par le nom ou le numéro d échantillon correspondant. Retirer les languettes d aluminium des cartes avec précaution pour éviter les contaminations inter-microtubes. Remettre en suspension les globules rouges avant utilisation. 2. Distribuer 50 μl de ReverScan A1 dans la cupule du microtube 5 de la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo. 3. Distribuer 50 μl de ReverScan B dans la cupule du microtube 6 de la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo. 4. Distribuer 50 μl de plasma ou de sérum dans les cupules des microtubes 5 et 6 de la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo 16

7 5. Distribuer 10 μl de suspension globulaire à tester dans les cupules des microtubes 1, 2, 3 et 4 de la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo, et dans la cupule de chaque microtube de la carte ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo. 6. Centrifuger immédiatement 10 minutes dans ScanGel Centrifuge. En aucun cas le délai entre le dépôt de la suspension et le début de la centrifugation de la carte ne doit dépasser 10 minutes. 7. Lire les réactions. VII - RÉSULTATS ET INTERPRÉTATION La présence d agglutinats en surface ou dispersés dans le gel correspond à un résultat positif. Un culot de globules rouges collectés au fond du microtube correspond à un résultat négatif. Une réaction positive dans un des microtubes 1 à 4 de la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo, ou dans les microtubes 1 à 5 de la carte ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo ne peut être validée que si le microtube Ctl de la carte ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo est négatif. Si le microtube Ctl présente une réaction positive : Laver les globules rouges en solution saline isotonique (NaCl 0,9%). Reprendre le mode opératoire comme indiqué en VI.1 ou VI.2. Si le microtube Ctl est négatif l interprétation pour les microtubes 1 à 4 de la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo est la suivante : Résultat positif Résultat positif faible Résultat négatif à Si le microtube Ctl est négatif l interprétation pour les microtubes de la carte ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo est la suivante : Résultat positif Résultat positif faible Résultat négatif +++ à à ++ - Si le microtube Ctl présente toujours une réaction positive refaire le test dans une autre technique que la technique gel filtration. L interprétation des microtubes 5 et 6 de la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo est la suivante : Résultat positif Résultat négatif + à Les résultats sont valides uniquement si les contrôles positif et négatif donnent les résultats attendus. 17

8 a) Interprétation du groupage ABO Le groupage ABO comporte 2 épreuves complémentaires : l'épreuve globulaire réalisée avec les réactifs anti-abo1 (A), anti-abo2 (B) et anti-abo3 (AB) et l'épreuve sérique réalisée avec les globules rouges test A1 et B. Les profils des réactions attendues avec les réactifs anti-abo1 (A), anti-abo2 (B), anti-abo3 (AB) et les globules rouges test A1 et B ainsi que leurs interprétations sont présentés dans le tableau suivant : GROUPES ÉPREUVE GLOBULAIRE : RÉACTIFS ÉPREUVE SÉRIQUE Anti-ABO1 (A) Anti-ABO2 (B) Anti-ABO3 (AB) ReverScan A1 ReverScan B A B AB O L'épreuve globulaire et l'épreuve sérique doivent être concordantes. Toute divergence entre les épreuves globulaire et sérique doit être résolue avant de rendre un résultat de groupage ABO. A chaque fois qu'une divergence entre les épreuves globulaire et sérique est observée, des tests complémentaires avec des contrôles appropriés doivent être effectués. b) Interprétation du microtube RH1 (D) Un résultat positif dans le microtube anti-rh1 (D) indique la présence de l antigène RH1 (D) à la surface des globules rouges. Malgré ses performances, l anti-rh1 (D) de la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo ne permet pas la détection de tous les antigènes RHW1 (D faible) ni la détection du phénotype RH1 partiel catégorie VI (DVI). Si la détection de ces antigènes particuliers est requise, effectuer un test complémentaire avec le réactif ScanGel Monoclonal Anti-RH1 (D)/RHW1 associé à la carte ScanGel COOMBS Anti-IgG,-C 3 d. c) Interprétation des microtubes RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c) et RH5 (e) Un résultat positif dans un des microtubes RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), et RH5 (e) indique la présence de l antigène correspondant à la surface des globules rouges testés. d) Interprétation du microtube KEL1 (K) Un résultat positif dans le microtube KEL1 (K) indique la présence de l antigène KEL1 (K) à la surface des globules rouges testés. 18

9 VIII - PERFORMANCES a) Performances spécifiques des réactifs anti-abo1 (A), anti-abo2 (B) et anti-abo3 (AB) Les réactifs anti-abo1 (A), anti-abo2 (B) et anti-abo3 (AB) ont été évalués sur un panel de 1641 échantillons tout-venant (1150 donneurs, 332 patients et 159 nouveaux nés) complété par un panel d échantillons particuliers (antigènes faibles ou variants). Chaque résultat a été comparé avec celui obtenu en technique plaque, tube, microplaque ou gel filtration. Les 1641 échantillons ont donné des résultats conformes à ceux attendus. Un panel de 17 échantillons particuliers (Ax, B3, AxB, Bh, CisAB, A3B, ABf) a été testé. Tous ont été détectés avec une réactivité de 1+ à 3+. Les antigènes B acquis testés n'ont pas été détectés avec l'anti-abo2 (B) de la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo Les réactifs anti-abo1 (A), anti-abo2 (B), anti-abo3 (AB) de la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo présentent une bonne reproductibilité aussi bien en intra qu en inter-essais. b) Performances spécifiques du réactif anti-rh1 (D) Le réactif anti-rh1 (D) a été évalué sur un panel de 1641 échantillons tout-venant (1150 donneurs, 332 patients et 159 nouveaux nés) complété par un panel d échantillons particuliers (antigènes faibles ou variants). Chaque résultat a été comparé avec celui obtenu en technique plaque, tube, microplaque ou gel filtration. Les 1641 échantillons ont donné des résultats conformes à ceux attendus. Un panel de 24 échantillons particuliers (Ag faibles, variants et phénotypes particuliers) a été testé. L ensemble des variants et phénotypes particuliers a été détecté à l exception d un échantillon de phénotype RH1 partiel catégorie VI (DVI). 94% des antigènes RHW1 (D faible) testés ont été détectés. Le réactif anti-rh1 (D) de la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo présente une bonne reproductibilité aussi bien en intra qu en inter-essai. c) Performances spécifiques du réactif Neutre (puits A1 et B, position 5 et 6 de la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo) Les hématies ReverScan (A1, B) ont été évaluées sur un panel de 1132 échantillons. Chaque résultat a été comparé avec celui obtenu en technique plaque, microplaque ou gel filtration. Sur l ensemble des échantillons, 1130 ont donné des résultats conformes à ceux attendus et 2 ont présenté des discordances, avec une des méthodes utilisées en parallèle, qui ont pu être levées après confrontation avec l épreuve globulaire. 19

10 Quel que soit l échantillon testé, les hématies ReverScan associées à la carte ScanGel ABO Complete/RH1 Duo présentent une bonne reproductibilité aussi bien en intra qu en inter essai. d) Performances spécifiques de la carte ScanGel Monoclonal RH/K Phenotypes Duo Les performances de la carte ScanGel Monoclonal RH/K Phénotypes Duo ont été évaluées sur un panel de 1518 échantillons tout venant (1149 donneurs, 332 patients et 37 nouveaux nés) complété par un panel d échantillons particuliers (antigènes faibles). Chaque résultat a été comparé avec celui obtenu en technique plaque, tube, microplaque ou gel filtration. Les 1518 échantillons testés ont donné des résultats conformes à ceux attendus. Un panel de 13 échantillons faibles et phénotypes rares a été testé. Tous ont été détectés avec une réactivité de 2+ à 4+. Les réactifs de la carte ScanGel Monoclonal RH/K Phénotypes Duo présentent une bonne reproductibilité aussi bien en intra qu en inter essai. LIMITES Des résultats anormaux peuvent être provoqués par : une contamination bactérienne ou chimique du sérum, du plasma, des globules rouges ou du matériel. une médication ou un état pathologique du patient donnant une réaction croisée. l'utilisation d un milieu de suspension des globules rouges autre que celui préconisé. une préparation des globules rouges différente de celle préconisée. une hémolyse des globules rouges tests utilisés. la présence de fibrine (image d'un culot cellulaire compact au fond d'un microtube accompagné d'une fine bande rosée en haut du gel correspondant aux globules rouges retenus par les résidus de fibrine). une contamination inter-microtubes. tout autre usage que celui décrit dans cette notice. Sous licence de DIAMED SA, 1785 Cressier-sur-Morat, Suisse 20

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12 Bio-Rad 3, bd Raymond Poincaré Marnes-la-Coquette - France Tél.: /2008 Fax.: Code: