Bases de la classification des lymphomes : OMS 2000
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- Bruno Lépine
- il y a 7 ans
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1 DIU Pathologie Moléculaire Module 3 Bordeaux M Parrens Bases de la classification des lymphomes : OMS 2000 Entités cliniques OMS Histologie Architecture Cytologie Immunophénotype Contre-partie normale Modèle immunologique Cytogénétique FISH Conventionnelle
2
3 Maturation et différenciation Lymphoïde Subdivisions du système lymphoïde Organes lymphoïdes centraux Moelle : maturation lymphoïde B Thymus : maturation lymphoïde T Organes lymphoïdes périphériques Rate Ganglions MALT: mucosa associated lymphoïd tissue
4 Prototype : Lymphome B repose sur un mode de réaction immunitaire adaptée Maturation LB dans la Moelle Circulation : cellules naïves Contact avec Ag dans le ganglion Réponse humorale : Rapide : extra-folliculaire (marginale?)» Sécrétion IgM, affinité médiocre Lente : formation d un follicule secondaire» Sécrétion IgG, IgA, forte affinité Plasmocytes, LB mémoires
5 OMS 2008
6 Maturation Lymphocytaire B Antigène indépendante Antigène dépendante TdT TdT TdT TdT M Ig CD34 CD34 CD19 CD22 CD34 CD19 CD22 CD10 (CD20) Pax5 CD79a (CD34) CD19 CD22 CD10 CD20 Pax5 CD79a CD19 CD22 CD20 CD21 (CD5) SIgM,D Pax5 CD79a Progéniteurs B Pre-Pre-B Pre-B Immature B (naïf) CD19 CD22 CD20 CD21 SIgM, D Pax5 CD79a mature B mémoire CD19 CD38 CD22 CD79a CD20 CD21 SIgM or G Pax5 CD79a B activé Plasmocyte différencié Réarrangement des gènes de la chaîne lourde des Ig Réarrangement des gènes de la chaîne légère des Ig
7 Zone du manteau Centre germinatif C.Naïves CB, BCR- CC, BCR+ BCL6- BCL6+, MUM1- LB BCR- ou basse affinité Apoptose (BCl2 négatif) Plasmocyte BCL6-, MUM1+ Switch des IG Mutations somatiques LB mémoire
8 Zone du manteau Zone claire Centre germinatif Zone sombre Zone Marginale
9 CD20 CD10 BCL6 BCL2 Ki67 CD21 CFD
10 Prototype : Lymphome B Maturation LB dans la Moelle osseuse Leucémie/Lymphome Lymphoblastique Circulation : cellules naïves, colonisation ganglionnaire Ganglion zone du manteau LNH Manteau Ganglion: Zones B centres folliculaires/tissu interfolliculaire: LNH Folliculaire LNH B diffus à grandes cellules LNH de Burkitt LH Ganglion : Zone marginale (LB mémoires, ) Lymphome de la zone marginale Ganglion : cordons médullaires : Plasmocytes Myélome/ Plasmocytome
11 LYMPHOME B LYMPHOBLASTIQUE
12 CD79a ki67 CD10 Tdt CD34
13 LYMPHOME B
14 Leucémie/lymphome lymphocytique chronique : cellules B non mutées (40-50%) Usage sélectif des IGVH, clones auto-réactifs Cellules B Mutées 50 à 60%
15 Leucémie/lymphome lymphocytique chronique : Architecture
16 Leucémie/lymphome lymphocytique chronique : cytologie
17 Leucémie/LNH lymphocytique chronique : phénotype CD20 CD5 CD23
18 Cytogénétique LLC Del 13q4.3 (50%) Trisomy 12 (20%) Del 11q Del 17p13 Del 6q21
19 Lymphome Manteau : architecture
20 Lymphome Manteau : cytologie
21 Lymphome Manteau : phénotype CD20 CD5 Cycline D1 CD23
22 Intérêt de la FISH : L du manteau Témoin LSI IGH / CCND Locus BCL-1 (CCND1) en 11q13 Locus IgH en 14q32 Noyau interphasique FISH der 11 der 14 t(11;14)(q13;q32) t(11;14)(q13;q32)
23 Split CCND1 Indication FISH Si IHC faible, douteuse Si blastoïde Si DLBCL CCND1+ Si phénotype paradoxale (rares+++)
24 Lymphome Folliculaire : architecture
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26 Lymphome Folliculaire : cytologie
27 CFD CB CC Lymphome Folliculaire : cytologie
28 Centre germinatif LNH Folliculaire CD20 CD10 CD20 CD10 BCL6 BCL2 BCL6 BCL2 KI67 CD21 KI67 CD21
29 t(14;18)(q32;q21) 14 Dual colour dual fusion probes (Abbott) Normal 18 LSI IGH / BCL2 DCDF 32 IgH locus 14q32 BCL2 locus 18q21 Interphase nucleus 2R2G der 14 der 18 t(14;18)(q32;q21) LSI IGH / BCL2 FISH interphasique Split signal probes (Dako) 1R1G2F Normal Figure Split 1 Interphase nucleus 2F der 14 der 18 t(14;18)(q32;q21) 5 1R1G1F
30 C. LYMPHOMATEUSE Indications FISH Si phénotype incomplet CD10 négatif Bcl2 négatif Si diagnostic différentiel difficile (marginal) Si prélèvement exigu Si extra-nodal Si grade 3b (BCL2 et BCl6) Split BCL2
31 DLBCL : Classification OMS 2008 : Prolifération diffuse de grandes cellules lymphoïdes B (taille noyau au noyau d un macrophage ou > à 2 lymphocytes). Lymphome B diffus à grandes cellules NOS Sous-types de lymphome B diffus à grandes cellules Autres types de lymphome B diffus à grandes cellules: entités clinico-bio-pathologique Lymphomes «Bordeline» : entités provisoires
32 DLBCL : Classification OMS 2008 : Prolifération diffuse de grandes cellules lymphoïdes B (taille noyau au noyau d un macrophage ou > à 2 lymphocytes). Lymphome B diffus à grandes cellules NOS Variantes morphologiques Centroblastique Immunoblastique Anaplasique B Rares : stroma myxoïde ou fibreux, à cellules fusiformes ou à cellules en bague à chaton Sous groupes moléculaires GCB (germinal center B-cell like) ABC (actived B-cell like) Sous groupes immunohistochimiques CD5+ GCB : CD10 et ou BCL6 positif dans plus de 30% des cellules MUM1 négatif, Non GCB : MUM1 positif (>30%) CD10 - et BCL6 +/-
33 LNH B Diffus à Grandes Cellules (DLBCL)
34 Variantes morphologiques Cb Ib Cb multilobé Cb polymorphe
35 Anaplasique B CD20 CD30 CD3
36 DLBCL : phénotype usuel CD20 KI67 BCL2 BCL2
37 Sous-groupes moléculaires Lymphochip NIH (LLMPP) L. Staudt et al. Alizadeh et al., Nature (2000), 403, p Profil d expression génique (puces à ADN) 274 pts 3 groupes - Germinal Center B cells - Activated B Cells - Type 3 DLBCL (hétérogène) Rosenwald et al, NEJM 2002
38 Sous-groupes immunohistochimiques GCB CD % Bcl % Mum % Non-GCB Hans et al algorithm (Blood 2004, nodal diffuse large B-cell) + Germinal Center B-cell-like (GCB) CD10 - Non GCB - Bcl6 - GCB + Mum1 Non GCB +
39 Sous-groupes immunohistochimiques GCB CD10 bcl6 Mum1 Non-GCB Confirmation IHC de la classification moléculaire des DLBCL C Hans Blood, 2004, 103;275-82
40 Sous-groupes immunohistochimiques DLBCL CD5+ Expression CD5 : 10% De novo Rarement sec à une LLC Mauvais pronostic CD20 CD5 CD3 Eliminer manteau blastoïde Importance t(11;14) Mum1 CD23 Bcl1
41 Données Cytogénétiques et Moléculaires: DLBCL Réarrangement des Immunoglobulines Translocation t(14;18)+ (20-30%) Réarrangement (translocations impliquant région 3q27) de BCL6 > 30% des cas Réarrangement de Myc 10% le plus souvent associé à d autres anomalies 60% Ig gène 40% non-ig gène Anomalies génétiques complexes Mauvais pronostic
42 DLBCL : Classification OMS 2008 : Prolifération diffuse de grandes cellules lymphoïdes B (taille noyau au noyau d un macrophage ou > à 2 lymphocytes). Sous-types de lymphome B diffus à grandes cellules Lymphome B riche en T /histiocytes Lymphome B diffus à grandes cellules du SNC Lymphome B diffus à grandes cellules cutané primitif de type jambe. Lymphome B diffus à grandes cellules EBV+ du sujet âgé. CD20+
43 DLBCL : Classification OMS 2008 : Sous-types de lymphome B diffus à grandes cellules Lymphome B riche en T /histiocytes : Architecture diffuse avec <10% de cellules tumorales B sur un fond de cellules réactionnelles T +/- histiocytes Rare Diagnostic difficile Mauvais pronostic CB, IB Cellules Sternberg-like. IHC: CD20+ CD30-/+ EMA-/+ CD15- EBV- Diagnostic différentiel NPLHL Importance clinique!!! CD20 CD21 CD3
44 DLBCL : Classification OMS 2008 : Sous-types de lymphome B diffus à grandes cellules Lymphome B diffus à grandes cellules primitif du SNC : lymphome intra-cérébraux ou intra-occulaire <1% de tous les LNH 2 à 3 % des tumeurs cérébrales âge moyen 60 ans morphologie «DLBCL NOS» IHC CD20+ BCL6+ (60 à 80%) Mum1+ (90%)
45 DLBCL : Classification OMS 2008 : Sous-types de lymphome B diffus à grandes cellules Lymphome B à grandes cellules cutané primitif de type jambe : 4% des lymphomes primitifs cutanés, 20% des LNHB cutané H/F 1,3/4, âge moyen 70 ans Jambe+++ 5 à10 % ailleurs IHC : CD20+ BCL2+ Mum1+ BCL6+ CD10- Cytogénétique : translocations c-myc, Bcl6 fréquentes Survie à 5 ans 50% Facteurs péjoratifs : lésions multiples Inactivation CDKN2A (délétion ou méthylation promoteur)
46 DLBCL : Classification OMS 2008 : Sous-types de lymphome B diffus à grandes cellules Lymphome B à grandes cellules cutané primitif de type jambe : BCL2 CD20 BCL6 Ki67 Mum1
47 DLBCL : Classification OMS 2008 : Sous-types de lymphome B diffus à grandes cellules Lymphome B à grandes cellules EBV + du sujet âgé : Prolifération B clonale EBV+ > 50 ans, de novo Absence d immunodépression connue 8 à 10% DLBCL (20-25% 90 ans) H/F 1,4/1, âge moyen 70 ans 70% localisation extra-ganglionnaire +/- adénopathies 30% uniquement ganglionnaire IHC :CD20+ CD30+ Mum1+ BCL6- CD10- CD15- EBV LMP1+ 94%, EBNA2+ 28%, EBER Survie à 5 ans 20%
48 DLBCL : Classification OMS 2008 : Sous-types de lymphome B diffus à grandes cellules Lymphome B à grandes cellules EBV + du sujet âgé : CD20 CD30 EAHP 2008 Dr Van der Walt Ki67 LMP Eber
49 DLBCL : Classification OMS 2008 : Prolifération diffuse de grandes cellules lymphoïdes B (taille noyau au noyau d un macrophage ou > à 2 lymphocytes). Autres types de lymphome B diffus à grandes cellules : entités cliniques et pathologiques Lymphome B à grandes cellules primitif du médiastin (thymique) Lymphome B à grandes cellules intravasculaire Lymphome B primitif des séreuses Lymphome B diffus à grandes cellules associé à une inflammation chronique Granulomatose lymphomatoïde Lymphome B à grandes cellules ALK+ Lymphome plasmoblastique Lymphome B à grandes cellules sur maladie de Castleman multicentrique associée à l HHV8
50 DLBCL : Classification OMS 2008 : Prolifération diffuse de grandes cellules lymphoïdes B (taille noyau au noyau d un macrophage ou > à 2 lymphocytes). Autres types de lymphome B diffus à grandes cellules : entités clinique et pathologique Lymphome B à grandes cellules primitif du médiastin (thymique) Lymphome B à grandes cellules intravasculaire Lymphome B diffus à grandes cellules associé à une inflammation chronique EBV+ Granulomatose lymphomatoïde CD20+ Lymphome B à grandes cellules ALK+ Lymphome plasmoblastique Lymphome B à grandes cellules sur maladie de Castleman multicentrique associée à l HHV8 CD20- CD138+/-, CD38+/- Lymphome B primitif des séreuses HHV8+
51 DLBCL : Classification OMS 2008 : Lymphome B à grandes cellules primitif du médiastin (thymique) Origine B thymique M/F ½, 2-4% LNH Adulte jeune BCL6+CD30+BCL2+Mum1+ Mal+ CD10- Bcl2 bcl6 ou myc négatif Signature transcriptomique partage CHL différente DLBCL Bon pronostic CD20 CD3 CD23 70% Ki67
52 DLBCL : Classification OMS 2008 : Lymphome B à grandes cellules intravasculaire Croissance intravasculaire capillaires M=F âge moyen 67 ans Extra-ganglionnaire cutanée cérébrale pulmonaire rénale CD20+ CD5+ 38%, CD10+13%, Mum1+87% Absence de «homing» récepteurs (CD29, CD54) Mauvais pronostic, diagnostic tardif, Meilleur si cutané isolé CD20
53 DLBCL : Classification OMS 2008 : Granulomatose lymphomatoïde : EBV+ Lymphoprolifération angiodestructive EBV+ H/F 2/1, immunosupression Poumon+++ Rein, cerveau, peau Grading: compte des cellules Eber+ Grade 1: <5 Grade 2: 5-20 Grade 3: >50 Grade 2 et 3 clonal+ Grade 3 < chimiothérapie CD20 LMP Ebna2
54 DLBCL : Classification OMS 2008 : Lymphome B diffus à grandes cellules associé à une inflammation chronique : EBV+ DLBCL EBV+ inflammation chronique ancienne intervalle (10 ans), tuberculose cavités (plèvre), os âge ans, homme +++ IHC CD20+ Mum1+ CD138+/- Marqueurs T (CD3 CD2 CD4 CD7) Piège++++ EBV+: LMP+, EBNA2+, Eber+ survie à 5 ans 25-30% CD20 Mum1 Eber
55 DLBCL : Classification OMS 2008 : Prolifération diffuse de grandes cellules lymphoïdes B (taille noyau au noyau d un macrophage ou > à 2 lymphocytes). Autres types de lymphome B diffus à grandes cellules : entités clinique et pathologique Lymphome B à grandes cellules primitif du médiastin (thymique) Lymphome B à grandes cellules intravasculaire Lymphome B diffus à grandes cellules associé à une inflammation chronique Granulomatose lymphomatoïde CD20+ Lymphome B à grandes cellules ALK+ Lymphome plasmoblastique EBV+ Lymphome B à grandes cellules sur maladie de Castleman multicentrique associée à l HHV8 CD20- CD138+/-, CD38+/- Lymphome B primitif des séreuses HHV8+
56 DLBCL : Classification OMS 2008 : Lymphome B à grandes cellules ALK+ Rare++ < 1% LNH H>F tout âge (37 ans) Ganglions, médiastin Nasopharynx, langue, Estomac t(2;17) (ALK-Clathrin) t(2;5) rare Survie médiane 11 mois ALK EMA CD138
57 DLBCL : Classification OMS 2008 : Lymphome plasmoblastique: EBV+ Rare, H>F Immunodépression HIV++ Cavité buccale Autres: peau, os, tissu mou, orbite Ganglions: non HIV HHV8- DD: myélome et plasmocytome importance clinique importance biologie CD138 Eber Eber+, CD56-, Ki67 100%, contexte immunodépression ki67
58 DLBCL : Classification OMS 2008 : Lymphome B à grandes cellules sur maladie de Castleman multicentrique associée à l HHV8 HIV+++ HHV8++ (Afrique, et bassin méditerranéen) Rate, ganglions, sang (leucémie) Kaposi CD38+/-, IgM+, Eber- CD20-/+ HHV8
59 DLBCL : Classification OMS 2008 : Lymphome B primitif des séreuses HIV+++ EBV HHV8+ Séreuses : effusion, masse Td, peau, poumon, SNC CD138+, CD38+, Mum1+ Marquage T aberrant possible!!!!! CD138 Eber HHV8
60 DLBCL : Classification OMS 2008 : Prolifération diffuse de grandes cellules lymphoïdes B (taille noyau au noyau d un macrophage ou > à 2 lymphocytes). Lymphomes «Bordeline» : entités provisoires Lymphome B inclassable intermédiaire entre B diffus à grandes cellules et Burkitt Lymphome B inclassable intermédiaire entre B diffus à grandes cellules et Hodgkin classique
61 DLBCL : Classification OMS 2008 : Lymphome B inclassable intermédiaire entre B diffus à grandes cellules et Burkitt : entitée provisoire Adulte Ganglions, sang (leucémie) Extra-ganglionnaire Cytogénétique - Myc : 35-50% non Ig gène - Bcl2 15% - Bcl6 - Caryotype complexe CD20 CD10 BCL6 Ki67
62 DLBCL : Classification OMS 2008 : Lymphome B inclassable intermédiaire entre B diffus à grandes cellules et Hodgkin classique : entité provisoire Homme jeune ans EBV 20% Médiastin Ganglions Agressif Thérapeutiques? CD20 CD30 CD15
63 DLBCL : Classification OMS 2008 : Recommandations :Quid de la FISH Morphologie et phénotype de type Burkitt Si l index de prolifération Ki67 est très élevé Réarrangements de MYC, BCl2 et BCL6 par FISH sont recommandés Mais!!!!! Ki67 variable % dans formes «bordeline» BL/DLBCL DLBCL NOS
64 LNH Burkitt: architecture
65
66 LNH Burkitt: architecture
67 LNH Burkitt cytologie
68 LNH Burkitt : phénotype BCL6 CD10 CD20 BCL2 KI67
69 LNH Burkitt : cytogénétique, t(8;14) t(2;8) t(8;22) Split C-Myc
70 LYMPHOME HODGKINIEN (LH) LH. CLASSIQUE à cellularité mixte scléro-nodulaire riche en lymphocytes à déplétion lymphoïde LH. à PREDOMINANCE LYMPHOCYTAIRE NODULAIRE (paragranulome Hodgkinien de Poppema Lennert)
71 Lymphome Hodgkinien : origine IgH réarrangé : microdissection Expression CD20 et CD79a : 20 à 30% Expression Pax 5 Mutations somatiques régions variables B Absence de production d Ig Mutations somatiques non fonctionnelles: codons stop Absence d expression de facteurs de transcriptions mpliqués dans synthèse des Ig (BOB1, Oct2)
72 Lymphome Hodgkinien
73 LH. CLASSIQUE C. Sternberg C. Sternbergoïde à cellularité mixte scléro-nodulaire riche en lymphocytes à déplétion lymphoïde ARCHITECTURE INFLAMMATION C. Hodgkin
74 LH. CLASSIQUE : architecture Scléro-nodulaire Cellularité mixte Riche en lymphocytes Déplétion lymphoïde
75 LH. CLASSIQUE: phénotype C. Sternberg C. Hodgkin CD15 CD30
76 LH. CLASSIQUE C. Sternberg C. Hodgkin CD15 CD20
77 EBV LMP1 CD3
78 LH. à prédominance lymphocytaire nodulaire ORIGINE : centre germinatif Prolifération clonale B Expression Bcl6
79 LH. à prédominance lymphocytaire nodulaire
80 LH. à prédominance lymphocytaire nodulaire CD79a+ CD20+ CD75+ EMA+ CD30-/+ CD15- CD57
81 ΔΔ : LH. Classique riche en lymphocytes (I) versus LH à prédominance lymphocytaire nodulaire (II) I II CD30 + -/+ CD CD20, CD79a -/+ + CD EMA - +/-
82 LNH zone marginale :architecture
83 LNH zone marginale
84 LNH zone marginale : cytologie
85 Kappa Lambda CD20 CD10 BCL6 PHENOTYPE KI67 BCL2
86 Lymphome T centraux Lymphome T lymphoblastique Lymphome T périphérique/mature LNH T ganglionnaire LNH T extra-ganglionnaire cutané LNH T (forme leucémique)
87
88 Maturation Lymphocytaire T Localisation: Thymus Thymocyte médullaires ccd3 TdT L. Mature HELPERS CD4+ TdT CD34 ccd3 TdT CD34 CD7 (CD2) ccd3 TdT CD2 CD7 CD5 ccd3 CD4 TdT CD2 CD7 CD5 CD2 CD3 CD7 TCRαβ CD5 CD8 CD1 CD4/CD8 ccd3 CD2 (CD7) CD5 CD3 CD4 TCRαβ CD8 TdT Progéniteurs Pro immature mature thymocytes TCRδ R TCRγ R TCRβ R mature thymocyte TCRα R L. Mature CYTOTOXIQUE CD8+ TCRδ D
89 LYMPHOME T MATURE Formes leucémiques A grand lymphocytes granuleux Chronique à cellules NK Prolymphocytaire NK ATL Cutanées Mycosis Fungoïdes Syndrome de Sesary Sd lymphoprolifératif de l enfant EBV+ LNHT type panniculite LNHT CD30+ cutané primitif LNHT primitifs cutanés : Sous-types rares Extra-ganglionnaire Lymphome NK/T nasal type Lymphome T lié aux entéropathies Lymphome T hépato-splénique Lymphome T type panniculite Ganglionnaire LNH T de LAI LNH T périphérique LNH T anaplasique ALK+/ALK-
90 AITL et PTCL-U: signatures différentes AITL : signature micro-environnement AITL : signature enrichie en gènes < TFH CXCL13: chemokine NFATC1 Contre-partie normale = T CD4+ intrafolliculaire BLOOD, de Leval, 2007
91
92
93 CD3 CD4 CD7 CD8
94 CXCL13 CD10
95 CD21
96 CD20 CD30 Clone T Clone B EBER
97 LYMPHOME T anaplasique CD30+
98 LYMPHOME T CD30+ ANAPLASIQUE EMA CD30 CD43
99 LYMPHOME T CD30+ ALK+ ANAPLASIQUE t(2;5) cytoplasmique, nucléaire, nucléolaire nucleophosmin-anaplastic lymphoma kinase t(2;1) cytoplasmique t(2;3) cytoplasmique
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