Effets à long terme et transgénérationnels d une exposition au polluants organiques. du développement chez les poissons

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Estelle Larivière
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1 Génération é POP Effets à long terme et transgénérationnels d une exposition au polluants organiques persistants t (POP) durant les stades précoces du développement chez les poissons Xavier COUSIN IFREMER UMS ELA L'Houmeau Farida AKCHA Ecotoxicologie IFREMER Nantes Jérôme CACHOT LPTC Université de Bordeaux Christel LEFRANÇOIS UMR LIENSS La Rochelle Véronique LOIZEAU LBCO IFREMER Brest

Xavier COUSIN IFREMER UMS ELA L'Houmeau Farida AKCHA Ecotoxicologie IFREMER Nantes Jérôme CACHOT

2 Les POP affectent différents aspects de la vie des poissons survie croissance reproduction génotoxicité & tumorigenèse MAIS dans la plupart des cas, ces études ont été réalisées sur des juvéniles et ou des adultes et les études portant sur les jeunes stades s sont rares

plupart des cas, ces études ont été réalisées sur des juvéniles et

3 Pénétration des POP à travers le chorion

4 Pénétration de PCB Détection de PCB par immunomarquage après incubation dans un milieu contenant des PCB. B) Embryon C) Larve de 4 jours L embryon de droite est un contrôle. Les PCBs passent à travers le chorion et il y a une relation entre la concentration de PCB et le phénotype observé.

B) Embryon C) Larve de 4 jours L embryon de droite est un contrôle.

5 Transmission maternelle TCDD dans l eau TCDD dans l alimentation maternelle TCDD est transférée à l œuf et produit les mêmes effets qu une exposition directe

6 Effets à long terme - reproduction Différenciation des gonades (~20 jours) Maturation des gonades (~30 jours) Reproduction (~90 jours)

7 Effets à long terme - croissance Les précurseurs musculaires recrutés lors de la croissance musculaire se forment au cours du développement embryonnaire

8 Les stades précoces sont donc susceptibles d être exposés et sont particulièrement sensibles Les oeufs, les embryons et les larves sont perméables aux molécules lipophiles Le développement embryonnaire dépend du contenu du vitellus La mise en place de nombreuses structures et fonctions se déroulent ou commencent lors des stades précoces

lipophiles Le développement embryonnaire dépend du contenu du vitellus La mise en

9 Génération POP Exposition d embryons de poissons zèbre à des PCB et HAP Caractériser les effets immédiats embryotoxicité et développement précoces Caractériser les effets à long terme d une exposition précoce physiologie (respiration, système cardiaque) croissance reproduction comportement genotoxicité tumorigenèse Identifier les effets transgénérationnel Identifier les mécanismes moléculaires

exposition précoce physiologie (respiration, système cardiaque) croissance reproduction

10 Modèle zebrafish Facilité d élevage Grand nombre d embryons Absence de saisonnalité Développement externe Emrbyons transparents Grand nombre d outils moléculaires l

11 Design expérimental PCB Alimentation des géniteurs Production d embryons PCB Incubation des embryons en solution HAP Incubation des embryons en solution Analyse phénotypique chez l embryon et tout t au long de la vie de l animale PCB : 3 doses mix CB153, CB118, CB149 et CB105 HAP : sédiment "Baie de Seine" à 3 concentrations

Analyse phénotypique chez l embryon et tout t au long de la vie de l animale PCB

12 Expérience préliminaire i i avec 12x2020 poissons adultes (10M et 10F) réalisée en 2007 Triplicats pour 3 concentrations : 10, 100 et 500 ng CB153 / g d aliment + témoins - Nourriture ad libitum. Sur 11 semaines : 106 pontes ~ œufs ~ embryons Reproduction normale Pas de défaut morphologique Prélèvement embryons à 24, 48 et 96h pour analyse

Nourriture ad libitum. Sur 11 semaines : 106 pontes ~37.000 œufs ~22.

13 Contamination géniteurs (45j) mix = CB153 (1 ; référence) + CB118 (1/2) + CB149 (1/2) + CB105 (1/4) ng/g PS CB149 métabolisé Femelles moins contaminées que mâles

14 Expression de myod au cours du temps

15 Expression de myod en fonction de la Expression de myod en fonction de la durée de contamination

16 Expression de myogenine au cours du Expression de myogenine au cours du temps

17 Expression de myogenine en fonction de Expression de myogenine en fonction de la durée de contamination

18 Conclusion analyse expression Nous n avons pas observé de différence marquée sur l expression des facteurs analysés Analyser plus en détail le patron d expression au niveau des somites Le schéma expérimental utilisé ne permet pas de suivre la dynamique d expression qui est un facteur clé de la régulation de la myogenèse embryonnaire et de la production de précurseurs musculaires Nous allons caractériser l expression d autres marqueurs : Pax7 (marqueur des précurseurs = nombre) et Myosines (différenciation)

d expression qui est un facteur clé de la régulation de la myogenèse embryonnaire et de la production de précurseurs

19 Perspectives PCB Alimentation des géniteurs Production d embryons PCB Incubation des embryons en solution HAP Incubation des embryons en solution Analyse phénotypique chez l embryon et tout au long de la vie de l animale l Existence d effets transgénérationnels

embryons en solution Analyse phénotypique chez l embryon et tout

20 UMS ELA 3109 Ifremer/CNRS L Houmeau Xavier Cousin Tarek Daouk Cyril Rigaud Sylvain Morlat Didier Legay LBCO IFREMER Brest Véronique Loizeau François Roupsard Anne-Marie Le Guellec Soutiens financiers : CNRS INSU EC2CO Cytrix Région Poitou-Charentes Conseil Général Charente maritime

Loizeau François Roupsard Anne-Marie Le Guellec Soutiens financiers :

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