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1 Annexe au certificat d'accréditation Bijlage bij accreditatie-certificaat Annex to the accreditation certificate Beilage zur Akkreditatierungszertifikat 262-TEST NBN EN ISO/IEC 17025:2005 Version/Versie/Version/Fassung 12 Date d'émission / Uitgiftedatum / Issue date / Ausgabedatum: Date limite de validité / Geldigheidsdatum / Validity date / Gültigkeitsdatum: Nicole Meurée-Vanlaethem La Présidente du Bureau d'accréditation Voorzitster van het Accreditatiebureau Chair of the Accreditation Board Vorsitzende des Akkreditierungsbüro L'accréditation est délivrée à/ De accreditatie werd uitgereikt aan/ The accreditation is granted to/ Die akkreditierung wurde erteilt für: Asbl COMITE DU LAIT Route de Herve, BATTICE

2 Laboratoire Lait cru INT-MOP Germes Totaux Matériel : BactoScan FC (Foss) Références normatives : AM 06/11/2001, annexe 2, modifié le 13/09/2004 De 1000 colonies/ml à colonies/ml Principe : ajout d un colorant (se fixant à l ADN bactérien) et d enzymes, comptage sous microscope des bactéries ainsi colorées (cytométrie de flux) puis utilisation d un étalonnage pour exprimer le résultat de colonies/ml. INT-MOP Cellules somatiques Matériel : Fossomatic (Foss) Références normatives : De /ml à /ml ISO : «Lait Dénombrement des cellules somatiques Partie 2 Lignes directrices pour la mise en œuvre des méthodes fluoro-optoélectronique AM 06/11/2001, annexe 2, modifié le 13/09/2004 Principe : ajout d un colorant se fixant à l ADN cellulaire puis comptage sous microscope des cellules ainsi colorées (cytométrie de flux). Annexe/Bijlage/Annex/Beilage BELAC 262-TEST V. 12-2/13

3 INT-MOP Absence ou présence de substances inhibitrices dans l échantillon Matériel : - DelvoTest T (DSM Food specialties) - βeta-star Combo (kit de 25 tests, Neogen) - Trisensor, 4Aminosensor, Tylosensor, Quinosensor (Unisensor) Références normatives : AM 06/11/2001, annexe 2, modifié le 13/09/2004 Expression du résultat : - POSITIF=Présence - NEGATIF=Absence - TRACES=traces détectées de β- lactames Principe : Etape 1 : Screening en utilisant un test microbiologique DelvoTest T Etape 2 : confirmation des échantillons ayant donné une réaction positive lors de l'étape 1 par une série de tests complémentaires : - divers tests rapides permettant de rechecher des substances des principales familles utilisées - et par répétition du DelvoTest T (avec et sans ajout de pénicillinase dans le lait à analyser) L'ensemble des renseignements collectés lors de l'étape 2 permet de conclure à l'un des résultats décrit dans le domaine de mesure (POSITIF, NEGATIF, TRACES). Remarque : dans le cadre d un test visant à autoriser la reprise des livraisons après un test positif lors de la recherche de substances inhibitrices, une méthode différente est utilisée (NOT-INH «Recherche substances inhibitrices - Test autorisation de reprise après résultat défavorable», hors scope d accréditation). Annexe/Bijlage/Annex/Beilage BELAC 262-TEST V. 12-3/13

4 INT-MOP Absence ou présence d'antibiotiques de la famille b-lactames en quantité suffisante pour justifier une pénalisation. Matériel : βeta s.t.a.r. Combo (kit de 25 tests) Références normatives : AM 06/11/2001, annexe 2, modifié le 13/09/2004 Principe : Le test est basé sur l'emploi de deux récepteurs spécifiques liés a des particules d'or. Au cours de la première étape d'incubation, les antibiotiques b lactames, s'ils sont présents dans l'échantillon de lait, se lient au récepteur BL; la même chose pour des tétracyclines. Pendant la deuxième étape d'incubation, le lait migre sur un support immunochromatographique qui présente trois bandes de capture. La comparaison de l intensité de chaque bande a l aide d un scanner (AccuScan PRO) permet de conclure à l absence ou la présence d'antibiotiques de la famille b lactames en quantité suffisante pour justifier la pénalisation. Le résultat des tétracyclines n'est pas interpreté. Expression du résultat : - POSITIF=Présence - NEGATIF=Absence - TRACES=traces détectées de β- lactames Remarque : dans le cadre d un test visant à autoriser la reprise des livraisons après un test positif lors de la recherche de substances inhibitrices, une méthode différente est utilisée (NOT-INH «Recherche substances inhibitrices - Test autorisation de reprise après résultat défavorable», hors scope d accréditation). Annexe/Bijlage/Annex/Beilage BELAC 262-TEST V. 12-4/13

5 INT-MOP Point de congélation du Lait ( C) Analyse par la méthode de référence au cryoscope à thermistance De C à C Matériel : Cryoscope model 4C3 (Advanced Instruments) Références normatives : ISO 5764 : «Lait Détermination du point de congélation méthode au cryoscope à thermistance (méthode de référence)» AGW 29/01/2009 modifié par celui du 21/3/2013 : «Arrêté du Gouvernement wallon relatif au contrôle de la composition du lait, au paiement du lait par les acheteurs aux producteurs et à l agrément des organismes interprofessionnels». Principe : refroidissement d une prise d'essai et amorce la cristallisation par vibration mécanique conduisant à un palier de température (point de congélation). INT-MOP Point de congélation du Lait ( C) Méthode de routine De C à C Matériel : MilkoScan FT-6000 (Foss Electric) Références normatives : AGW 29/01/2009 modifié par celui du 21/3/2013 : «Arrêté du Gouvernement wallon relatif au contrôle de la composition du lait, au paiement du lait par les acheteurs aux producteurs et à l agrément des organismes interprofessionnels». Principe : détermination du point de congélation par mesure de la conductivité et du spectre IR. Annexe/Bijlage/Annex/Beilage BELAC 262-TEST V. 12-5/13

6 INT-MOP Propreté visible du lait Matériel : Appareil pour filtration du lait Expression du résultat : BON ou DECLASSE Références normatives : AM 06/11/2001, annexe 2, modifié le 13/09/2004 Principe : contrôle visuel de la propreté par filtration de l échantillon puis comparaison du filtre avec des filtres de référence. INT-MOP Taux de matière grasse (g/l) entre 0.0 g/l et 99.9 g/l Taux de matière azotée totale (MAT) (g/l) entre 25 g/l et 55 g/l Matériel : MilkoScan (Foss) Références normatives : FIL-IDF 141 AGW 29/01/2009 modifié par celui du 21/3/2013 : «Arrêté du Gouvernement wallon relatif au contrôle de la composition du lait, au paiement du lait par les acheteurs aux producteurs et à l agrément des organismes interprofessionnels». Principe : utilisation d un spectromètre pour mesurer le spectre de l échantillon puis utilisation de courbes d étalonnage pour quantifier les paramètres recherchés. INT-MOP Eau de puits, de source, de distribution, de pluie Teneur en NO 2 et NO 3 dans l échantillon d eau : Matériel : FIAstar à3.0 mg NO 2 / l - 0.5à200 mg NO3 / l Références normatives : méthode FIA décrite dans l ISO («Détermination des nitrates et des nitrites par analyse en flux (FIA) et détection spectrométrique») Principe : l échantillon est mélangé avec une solution de NED qui se fixe au NO 2 et provoque la coloration mauve du mélange. Cette coloration est automatiquement quantifiée par un photo-détecteur. Pour doser les NO 3, on les réduits en NO 2 à l aide d une colonne de Cadmium. Annexe/Bijlage/Annex/Beilage BELAC 262-TEST V. 12-6/13

7 NOT-EAU Eau de puits, de source, de distribution, de pluie Prélèvements ponctuels d eau au point d utilisation ISO 5667 : «Qualité de l eau Echantillonnage» Partie 1 : «Lignes directrices pour la conception des programmes et des techniques d échantillonnage» ( 5.7) Partie 3 : «Lignes directrices pour la conservation et la manipulation des échantillons d eau» ISO : «Qualité de l eau Echantillonnage pour analyses microbiologiques». Annexe/Bijlage/Annex/Beilage BELAC 262-TEST V. 12-7/13

8 INT-MOP Lait cru Echantillonnage et prélèvement en vue de l'analyse physico-chimique INT-MOP Absence ou présence d'antibiotiques en quantité suffisante pour justifier une pénalisation pour les familles suivantes - Sulfamides - Tétracyclines - Tylosines - Quinolones - Aminoglycosides ISO 707 : «Lait et Produits Laitiers : lignes directrices pour l échantillonnage». Matériel : Trisensor, Tylosensor, Quinosensor, 4- Aminosensor Références normatives : AM 06/11/2001, annexe 2, modifié le 13/09/2004 Principe : Les différents tests sont basés sur l'emploi de récepteurs spécifiques. Au cours de la première étape d'incubation, les antibiotiques, s'ils sont présents dans l'échantillon de lait, se lient au récepteur ad hoc. Pendant la deuxième étape d'incubation, le lait migre sur un support immunochromatographique qui présente une ou plusieurs bandes de capture spécifique aux molécules recherchées. La comparaison de l intensité de chaque bande test par rapport à un bande de contrôle (avec un scanner (ReadSensor)) permet de conclure à l absence ou la présence d'antibiotiques de l'une ou de plusieurs des familles recherchées et en quantité suffisante pour justifier la pénalisation. Expression du résultat : - POSITIF=Présence - NEGATIF=Absence Remarque : dans le cadre d un test visant à autoriser la reprise des livraisons après un test positif lors de la recherche de substances inhibitrices, une méthode différente est utilisée (NOT-INH «Recherche substances inhibitrices - Test autorisation de reprise après résultat défavorable», hors scope d accréditation). Annexe/Bijlage/Annex/Beilage BELAC 262-TEST V. 12-8/13

9 INT-MOP Absence ou présence de substances inhibitrices dans l échantillon Expression du résultat : - POSITIF=Présence - NEGATIF=Absence - TRACES=traces détectées de β- lactames Matériel : DelvoTest T (DSM Food specialties) Références normatives : AM 06/11/2001, annexe 2, modifié le 13/09/2004 Principe : diffusion d un échantillon de lait dans un milieu Agar ensemencé avec une souche bactérienne. Après incubation, l absence de substances inhibitrices se manifestera par une modification de l indicateur ph présent dans le milieu. Cette coloration est quantifiée par un scanner. NB : l'échantillon peut également être analysé après addition de pénicillinase afin de confirmer la présence d'antibiotiques de la famille des β-lactames dans le lait. Remarque : dans le cadre d un test visant à autoriser la reprise des livraisons après un test positif lors de la recherche de substances inhibitrices, une méthode différente est utilisée (NOT-INH «Recherche substances inhibitrices - Test autorisation de reprise après résultat défavorable», hors scope d accréditation). Annexe/Bijlage/Annex/Beilage BELAC 262-TEST V. 12-9/13

10 Laboratoire AGROLAB Microbiologie MB 1 Toutes denrées alimentaires Méthode horizontale pour le dénombrement des coliformes. Méthode par comptage des colonies. * Dénombrement à 30 C ISO 4832* MB 2 MB 3 Lait et produits laitiers Lait et produits laitiers. Dénombrement des microorganismes par comptage des colonies à 30 C Lait et produits laitiers. Dénombrement des UFC de levures et/ou moisissures. Comptage des colonies à 25 C. FIL 100 B FIL 94 = ISO 6611 MB 4 Beurre, laits fermentés, fromage frais Beurre, laits fermentés et fromage frais. FIL 153 = ISO Dénombrement des microorganismes contaminants. Technique par comptage des colonies à 30 C. MB 6c MB 7a MB 7b MB 8 Toutes denrées alimentaires Méthode horizontale pour le dénombrement des staphylocoques à coagulase positive (Staphylococcus aureus et autres espèces). Partie 2 : Technique utilisant le milieu gélosé au plasma de lapin et fibrinogène. Méthode horizontale pour la recherche de Salmonella spp. Recherche de Salmonella spp. Méthode horizontale pour la recherche et le dénombrement de Listeria monocytogenes. Partie 1 : Recherche de Listeria monocytogenes. ISO ISO 6579 (sans sérotypage) VIDAS SLM (Protocole double voie) AFNOR-BIO-12/1-04/94 ISO MB 8b Recherche de Listeria monocytogenes. VIDAS LMO2. AFNOR BIO-12/11-03/04 Annexe/Bijlage/Annex/Beilage BELAC 262-TEST V /13

11 MB 11 Lait et produits laitiers Méthode horizontale pour le dénombrement de Bacillus cereus présomptifs. Technique par comptage des colonies à 30 C. ISO 7932 (+ confirmation api 50 CHB) MB 12 Toutes denrées alimentaires et aliments pour animaux Méthode horizontale pour la recherche et le dénombrement des Enterobacteriaceae. Partie 2 : Méthode par comptage des colonies. * Dénombrement à 37 C. ISO * MB 13 Toutes denrées alimentaires Détection et/ou dénombrement des E. coli β-d-glucuronidase positive. AFNOR BIO 12/5-01/99 MB 14 Eaux de consommation Qualité de l eau - Dénombrement des micro-organismes revivifiables Comptage des colonies par ensemencement dans un milieu de culture nutritif gélosé à 22 et 36 C. ISO 6222 MB 15 Qualité de l eau - Recherche et dénombrement des Escherichia coli et des bactéries coliformes - Partie 1 : Méthode par filtration sur membrane. ISO MB 17 Lait et produits laitiers Méthode horizontale pour le dénombrement des staphylocoques à coagulase positive (Staphylococcus aureus et autres espèces). Partie 3 : Recherche pour les faibles nombres. ISO Annexe/Bijlage/Annex/Beilage BELAC 262-TEST V /13

12 MB 18 Toutes denrées alimentaires Méthode horizontale pour le dénombrement de Clostridium perfringens. Technique par comptage des colonies. MB 19 Lait et produits laitiers Méthode horizontale pour le dénombrement des Escherichia coli betaglucuronidase positive. Partie 2 : Technique de comptage des colonies à 44 C au moyen de 5-bromo-4-chloro-3- indolyl -D-glucuronate. ISO 7937 ISO MB 20 Toutes denrées alimentaires Méthode horizontale pour la recherche et le dénombrement de Listeria monocytogenes. Partie 2 : méthode de dénombrement. ISO (Amdt. 1) MB 21 Poudres de lait, formulations pour nourrissons, beurre Lait et produits laitiers. Recherche de Enterobacter sakazakii (Cronobacter sakazakii). ISO/TS MB 22 MB 23 MB 24 Toutes denrées alimentaires l exclusion des boissons, du lait cru et des produits d alimentation du bétail Dénombrement de la flore mésophile aérobie revivifiable Dénombrement des entérobactéries Dénombrement des coliformes totaux TEMPO TVC AFNOR BIO 12/15-09/05 TEMPO EB AFNOR BIO 12/21-12/06 TEMPO TC AFNOR BIO 12/17-12/05 MB 25 toutes denrées alimentaires à humidité > à 3% Dénombrement des UFC de levures et/ou moisissures. Comptage des colonies à 25 C. TEMPO YM (AOAC) MB 26 toutes denrées alimentaires et environnements recherche de salmonella spp Vidas UP salmonella AFNOR BIO 12/32-10/11 MB 27 poudres de lait et formulations pour nourrissons Méthodes horizontales pour la recherche des Enterobacteriaceae partie 1 : recherche avec préenrichissement ISO MB 28 toutes denrées Recherche des Listeria spp et des Listeria monocytogènes AFNOR BRD 07/04-09/98 Annexe/Bijlage/Annex/Beilage BELAC 262-TEST V /13

13 Composants CP 3 Laits et produits laitiers à Teneur en azote FIL 20-1 (méthode KJELDAHL) / ISO 8968 CP 4 l'exception des fromages Teneur en matière sèche FIL 21 B / ISO 6731 CP 5 Lait entier Teneur en matière grasse FIL 1 D / ISO 1211 CP 6 Lait sec, lactosérum sec, babeurre sec, sérum de babeurre sec Teneur en matière grasse FIL 9 C / ISO 1736 CP 7 Lait concentré sucré et non Teneur en matière grasse FIL 13 C / ISO 1737 sucré CP 8 Crème Teneur en matière grasse FIL 16 C / ISO 2450 Annexe/Bijlage/Annex/Beilage BELAC 262-TEST V /13