Toxoplasmose : Toxoplasma Gondii
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- Oscar Julien St-Pierre
- il y a 7 ans
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1 Toxoplasmose : Toxoplasma Gondii Parasite Sporozoaires tissulaires. Coccidie : pénètre dans cellule par l intermédiaire d un complexe apical de pénétration. Epidémiologie Séroprévalence en France est de 54%. En France, 1000 à 2000 cas de toxoplasmose congénitale par an. Cycle Hote définitif : Félidés (chat) : Contamination par carnivorisme (rongeurs), eaux ou aliments contaminés. - Cycle au niveau des enterocytes du chat, pénétration dans cellules épithéliales du TD. Schizogonie : division asexuée Puis gamogonie : reproduction sexuée qui donne oocystes éliminés avec matières fécales. - Oocystes infestants après maturation 2-5j dans le milieu extérieur. Les oocystes murs (4 sporozoites) sont résistants et restent viables plusieurs mois dans le sol et dans le sol humide ou sur les végétaux. Hotes intermédiaires : Hommes, bovins, ovins, rongeurs. Kystes ou oocystes ingérés se disséminent rapidement dans la circulation sanguine sous forme de tachyzoites (= trophozoites). Réponse immune contrôle progressivement la multiplication du parasite, lequel s enkyste dans les tissus. Kystes contiennent de nombreux parasites en sommeil : les bradyzoites. Contamination humaine : - Kystes +++ : Viande de boucherie mal cuite : Toxo acquise. - Oocystes (rare) : terre, végétaux, fruits, contacts chats : Toxo acquise. - Trophozoites : transmission transplacentaire : Toxo congénitale. Phase aigue : Multiplication endocellulaire : foie. Phase intermédiaire : Contrôle de la prolifération par formation d anticorps. Enkystement dans tissus pauvres en anticorps (cerveau, œil). Phase chronique : Persistance des kystes permet le maintien d une immunité stable et durable. Rupture kyste grave chez immunodéprimés. Diagnostic Biologie : Syndrome mononucléosidique : apparition monocytose associée à Ly hyperactivés. Parasitologie : - isolement du parasite à partir du sang, placenta, cordon : examen direct de la dorme trophozoite (rare) ou inoculation IP à la souris. - Immunomarquage - PCR (recherche d ADN) +++
2 Toxoplasmose acquise Asymptomatique dans 80% des cas Parfois fièvre et adénopathie : Toxo ganglionnaire dans 15% des cas Cas grave dans moins de 5 % des cas (atteinte cardiaque, pulmonaire, méningée, abcès cérébraux) Toxoplasmose de l immunodéprimé CD4<200/mm³ - Toxoplasmose cérébrale : +++ abcès cérébraux (scanner+ IRM + clinique) - Pneumopathie (examen du LBA) - Oculaire : choriorétinite (fond d œil). Toxoplasmose congénitale En France : 1 à 2 % de séroconversion par an. 1 cas pour 2000 naissances. L atteinte fœtale est maximale en DEBUT de grossesse, mais le risque de transmission n est maximal qu en fin de grossesse. Risque maximal : semaine. Formes symptomatiques : 20% - Mort in utero - Encéphalo-méningo-myélite toxoplasmique : macrocéphalie, hydrocéphalie, signes neurologiques variés, calcifications intracrâniennes, choriorétinité pigmentaire. - Formes viscérales : ictère néonatale - Formes dégradées (à la naissance ou à distance) : choriorétinite, convulsions, retard psychomoteur. Formes infra cliniques : 80% Décompensation vers formes dégradées. 50% de risque en absence de traitement et risque<10% avec traitement. Facteurs de risque : - Consommation de viande de mouton ou bœuf mal cuite Hygiène incorrecte des mains. - Consommation de crudités lors de repas à l extérieur. - Présence d un chat au domicile (litières). Femme enceinte Stratégie Diagnostique Diagnostic sérologique : affirmer la séroconversion sur deux prélèvements à 15j d intervalle. Législation impose une sérologie lors : - Examen prénuptial - Déclaration de grossesse Si sérologie négative surveillance mensuelle : Titrage mensuel des IgG et IgM (2 techniques différentes) + Titrage du sérum précédent en parallèle (mêmes techniques, comparaison). Diagnostic basé sur l étude de la cinétique des anticorps anti-toxoplasmose. IgM : précoces, positif après 1 semaine, max à 1 mois.
3 IgG : plus tardifs, positif à 2 semaines, max à 3 mois, plateau entre 2 et 3 mois. IgA : précoces. Anticorps totaux (screening) Technique de dépistage Antigène figuré (+précoces) *Agglutination directe Fixation sur support fraction toxo ou toxo entier + sérum du patient Lecture directe de l agglutination voile : positif sédimentation : negatif Antigène soluble (+tardifs) *Hemagglutination Support : GR (mouton/humain) sensibilisés par Ag du toxo + sérum du patient Hémagglutination Test aux billes de Latex Support : Particules de latex sensibilisées. IgG (UI/mL) Ag figuré *IFI anti-igg Fixation sur lame des toxo + sérum du patient Révélation avec anti-igg marqués à la fluoréscéine. Ag soluble *ELISA IgG Support solide avec toxo + sérum du patient + révélation avec anticorps anti-igg couplé à 1 enzyme + substrat. *ADS=agglutination directe sensibilisée + 2ME 2Mercapto-Ethanol : réactif chimique qui détruit IgM précoce dans le sérum du patient. Si différence de résultat avec et sans 2ME : présence d IgM précoces. IgM Techniques d immunocapture (index) : Suppression de l interférence du facteur rhumatoïde = IgM anti-igg. FR pourra se fixer sur IgG du patient faux positifs car on dose IgG au lieu d IgM. On fixe alors directement des anti-igm monoclonales ainsi que les IgM du patient se fixeront. Technique semiquantitative. Présence d IgM ne traduit pas forcément une toxo récente car les techniques d immunocapture sont extrêmement sensibles et il peut s agir d IgM résiduelles.
4 Ag figuré *ISAGA (plus) Revélation IgM du patient en ajoutant suspension de toxo colorée et formolée. Agglutination. Ag soluble *ELISA inverse Révélation complexe par une anti-igm couplée à 1 enzyme + substrat. Techniques complémentaires - Datation : Technique d avidité : Avidité=Force de liaison entre Ag et Ac. Avidité augmente au cours de la réponse immunitaire humorale. ELISA simple et en parallèle ELISA sans laquelle on rajoute un réactif dissociant : - Si faible avidité, complexe se dissocie et résulats différents Toxo récente de moins de 3 mois. =Test d exclusion d infection récente. - Détection des IgA : Mais IgA sont inconstantes. - Etudes des profils comparés : Western Blot : Test de spécificité chez femme ou séroconversion a eu lieu et son enfant : recherche anticorps : si profils différents Enfant contaminé. Fœtus ECHOGRAPHIE : 1/mois et 1/15j si infection. Prélèvement de liquide amniotique = AMNIOCENTESE : 18 ème semaine d aménorrhée et 4 ème semaine après la contamination. - Recherche directe du parasite : frottis Trophozoites PCR ADN parasitaire : 48h et bonne sensibilité. - Inoculation IP à la souris : Sérologie à 30 jours à la souris Recherche de kystes au niveau cerveau : 45 j - Culture cellulaire (mauvaise sensibilité) Nouveau-né CLINIQUE : - Bilan neuro-ophtalmologique - Imagerie : échographie, IRM, radiologie EXAMEN PARASITOLOGIQUE : Prélèvement : sang du cordon, placenta, sang du NN. - Inoculation IP à la souris ou culture cellulaire - ADN : PCR (placenta) SEROLOGIE : - Synthèse néonatale d Ac : IgM et IgA (sang du cordon) Jo, J+3, J+10 ou J+20 : examens répétés car faux négatifs possibles ( contamination tardive avec synthèse d Ac décalée) et faux positifs possibles ( au moment de l accouchement contact entre sang maternel et enfant)
5 - Suivi du catabolisme des IgG : IgG transmises par la mère sont catabolisées en moins de 9 mois. - Profils comparés : Western Blot Dosage GGT, LDH, bilirubine et NFS peuvent être réalisés. Si bilan négatif : suivi bio clinique pendant la première année. Traitement de la toxoplasmose Toxoplasmose acquise : Pas de traitement. Toxoplasmose congénitale : SEROCONVERSION : Spiramycine ROVAMYCINE 9MUI/j en 3 prises jusqu à l accouchement. Permet de diminuer le risque de contamination en s accumulant au niveau du placenta ou trophozoites passent. Action uniquement sur trophozoites. ATTEINTE FŒTALE CONFIRMEE : Utilisation d antimétabolites qui inhibent la synthèse d acide folique et luttent contre les malformations fœtales. Sulfadiazine ADIAZINE + Pyriméthamine MALOCIDE Ou Pyriméthamine + Sulfadoxine = FANSIDAR + Acide Folique OSFOLATE Toxoplasmose oculaire : ADIAZINE + MALOCIDE ou FANSIDAR + acide folique + corticothérapie si inflammation Toxoplasmose chez l immunodéprimé : Toxo cérébrale : Association pyriméthamine + sulfadiazine Avec de l acide folique Si intolérance : pyriméthamine + clindamycine
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