Stratégie innovante de terrain pour la biodosimétrie de l irradiation externe

Transcription

1 Stratégie innovante de terrain pour la biodosimétrie de l irradiation externe Dr. Julie Bensimon ACUBENS, sas Congrès national de radioprotection SFRP 18 juin 2015

2 Origine du projet et problématique Problématique Projet européen BOOSTER (BiO-dOSimetric Tools for triage to Responder, FP7-SEC , n ) Biodosimétrie de l irradiation externe Irradiation globale et localisée Résultat rapide Utilisable sur le terrain ou en laboratoire Simulation sur terrain réalisée dans le cadre du projet BOOSTER, Budapest 2013

3 Quels outils de biodosimétrie de l irradiation externe? Sensibilité Difficulté Localisation de la zone irradiée Débit Utilisation sur le terrain Gold standard Cytogénétique Nouvelles approches Micronoyaux Foci ɣh2ax Contrôle 2Gy, 3min Il y a un manque en outil de biodosimétrie: Utilisable sur le terrain Simple et rapide Permettant de localiser la zone irradiée Ainsbury et al., Rad. Prot. Dosimetry 2011 Jaworska et al., Rad. Prot. Dosimetry 2014 Ainsbury et al., Int. J. of Radiation Biology 2014

4 Nouvelles approches ɣ P ɣ P Cassures doubles brin par cellule Dose (Gy) Contrôle 2Gy, 3min Trapp et al., Front. Plant Sc Rothkamm et al., PNAS 2003

5 Nouvelles approches Sensibilité Difficulté Localisation de la zone irradiée Débit Utilisation sur le terrain Cytométrie en flux Immunoblot Brevets «Procédure d évaluation de la biodosimétrie pour un individu exposé à des rayonnements ionisants» (FR ) «Electrodot : procédé d analyse d échantillons biologiques en matrice de spots fixés par l action d un courant électrique conjuguée à une différence de pression» (FR/2015/399)

6 Immunoblot: principe de fonctionnement Recueil des prélèvements Préparation et extraction des protéines * Prélèvements sanguin et pileux Transfert des protéines sur membrane et marquage par anticorps fluorescents Acquisition et analyse du signal

7 Analyse de lignées cellulaires ɣh2ax Irradiation (Gy) Analyse DosiKit sur cellules en culture (HEK293), cinétiques à 1Gy, 2Gy, 4Gy ɣh2ax Analyse DosiKit sur cellules en culture (HEK293), 1h à 6h après irradiation Irradiation (Gy) 1Gy 2Gy 4Gy

8 Prélèvements sanguins 0Gy 0,5Gy 1Gy 2Gy 4Gy 6Gy 0Gy 0,25Gy 0,5Gy 1Gy 2Gy 3Gy 4Gy 6Gy ɣh2ax 10,0 8,0 6,0 4,0 2,0 0, Irradiation (Gy) ɣh2ax 5,0 4,0 3,0 2,0 1,0 0, Irradiation (Gy) Sang de souris (Rad51 +/+) irradié in vivo t = 15 min Sang humain irradié ex vivo t = 1h ɣh2ax 3,50 3,00 2,50 2,00 1,50 1,00 0,50 0,00 2Gy 3Gy temps après irradiation (h) Sang humain irradié ex vivo

9 Prélèvements pileux ɣh2ax Irradiation (Gy)

10 Un dispositif de terrain - Simplicité d utilisation - Un résultat en 30 minutes - Débit 16 personnes/h avec 3 opérateurs KITS INDIVIDUELS MATERIEL D ANALYSE Classification des individus en 3 gammes de doses Faibles doses Effets Déterministes Effets aléatoires 0 0, Dose (Gy)

11 Perspectives Evaluation de la variabilité interindividuelle et prise en compte dans l analyse si nécessaire Comparaison des résultats avec l analyse des dicentriques, en collaboration avec l Institut de Recherche Biomédicale des Armées, Unité de Radiobiologie, Cellule de Dosimétrie Biologique par Cytogénétique (IRBA/CEDOC) Extension de la stabilité du signal dans le temps Amélioration de la sensibilité de l outil

12 Acubens, entreprise innovante en biotechnologies Partenariat CEA/DSV Laboratoire de Cancérologie Expérimentale, Dr. S. Chevillard Irradiation & cancers, Toxicologie des nanoparticules & innovations technologiques Collaboration (Comité scientifique et comité de pilotage) Brevets (achat, licencing, codéveloppement) Innovations et produits

13 Remerciements Laboratoire de Cancérologie Expérimentale, CEA Fontenay-aux-Roses Pr. Sylvie Chevillard Dr. Nicolas Ugolin Dr. Yoann Fedor Arnaud Tupinier Sandrine Altmeyer Laboratoire d Analyse de Biologie Médicale, CEA Fontenay-aux-Roses Contacts Julie Bensimon j.bensimon@acubens-biotech.com