15H30 16H00 : Mutants pré-core du VHB : implications cliniques Alexandra DUCANCELLE (Angers)
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- Édouard Larivière
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1 HEPATITE VIRALE B Modérateurs : Patrick MARCELLIN (Clichy) & Vincent LEROY (Grenoble) 15H30 16H00 : Mutants pré-core du VHB : implications cliniques Alexandra DUCANCELLE (Angers)
2 Mutants pré-core du VHB Décrits depuis 1981 en Italie (Bonino F et al, 1981, Hepatology) ) o Infection chronique par le VHB o Profil sérologique : AgHBs+, AgHBe-, AntiHBe+ o Persistance d une réplication virale VHB et ALAT fluctuantes o 1989 : identification de la mutation G1896A par séquençage de la région pré-core Prévalence élevée dans de nombreux pays o France : hépatite B Ag HBe négatif : forme prédominante des hépatites chroniques à VHB 2
3 Mutants pré-core du VHB Mutants de la région pré-core/core (PC/C) 1814 ATG 1901 ATG Promoteur Pré-C C ARN m PréC/C Protéine PréC/C AgHBe ARN m Core AgHBc Ducancelle A et al, 2011, Virologie
4 Mutants pré-core du VHB Mutants de la région pré-core/core (PC/C) 1814 ATG Promoteur Pré-C C TAG 1901 ATG G1896A Arrêt de l expression de l AgHBe ARNm préc/c PréC/C protéine Ducancelle A et al, 2011, Virologie
5 Mutants pré-core du VHB Mutants de la région du promoteur basal du core (PBC) A1762T G1764A 1814 ATG 1901 ATG Promoteur Pré-C C ARNm Diminution de l expression de l AgHBe PréC/C protéine Ducancelle A et al, 2011, Virologie
6 Mutants pré-core du VHB ADN VHB Positions (nucléotides) Site d initiation de la transcription de l ARNm precore Codon d initiation de la traduction du precore ATG 1814 Site d initiation de la transcription de l ARNm core ATG (a) 1901 Codon d initiation de la traduction du core Enhancer II PBC Sequence kozak Précore Core A1752G T1753C T1753A T1753G A1755C G1757A C1766T ± T1768A (site HNF1) G1764T/C1766G (site HNF3) A1762T/G1764A (site HNF1) ATG G1809T A1811T A1811C C1812T 1817 CAA A1814C T1815C G1816C C/T (b) TGG GGC C1817T : TAA (stop) perte de l ATG T1846A C1862T G1862T G1898A G1899A G1896A : TAG (codon stop) G1897A : TGA (codon stop) Mutations modifiant la transcription en ARNm precore Mutations modifiant la traduction Ou la maturation de l AgHBe Récapitulatif des principales mutations décrites dans la littérature affectant le PBC et la région précore (a : PBC (nt ) et précore (nt ) ; (b) selon le génotype) Stuyer, DeGendt et al, 2000 ; Crowthern et al 2008 ; Kramvis et al 2008 ; Quarleri J. WJG 2014; Thèse du Dr Pigneaux de Laroche
7 Brunetto MR et al, J Hepatol 1991 Mutants pré-core du VHB Ag HBe + Ag HBe - / Ac anti HBe + Phase réplicative ou immunotolérance Clairance Ag HBe VHB sauvage VHB mutant
8 Mutants pré-core du VHB Quantification des mutants PC/PBC au cours des différentes phases de l hépatite B PC Mutant BCP Mutant IT : Immuno-tolérance ; IC : immuno-clairance ; LR : réplication faible ; ENH : hépatite AgHBe (-) Tu WH et al, 2015, WJG 8
9 Mutants pré-core du VHB Caractéristiques biologiques d une infection par un mutant précore : AgHBs + > 6 mois AgHBe - > 12 mois ALAT > 1,5 N > 2 mois ADN VHB entre 2000 et UI/mL
10 CONTINUEL ALT ADN-VHB NORMAL FLUCTUANT Mutants pré-core du VHB % Cirrhose Taux annuel de cirrhose sans traitement 24% 25% 5% 48% 38% 3,8% NORMAL INTERMITTENT 3-38 mois 28% 15% 2,9% NORMAL2.4 Ratziu V et al. Gastro Clin Biol 2002
11 Mutants pré-core du VHB Rôle controversé de la mutation G1896A Hépatite fulminante Prévalence élevée (1, 2, 3) Prévalence faible (4) Hépatite chronique Lésions sévères (5) Fibrose évoluée (6) Pas de lésions sévères (7) Donneurs de sang Données de prévalence entre 26% et 70% (8, 9,10) 1 - Ren X et al, JVH, Xu Zj et al, Exper Clin Vir, Panassié L et al, Clin Res Hep Gastro, Lapalus M et al, Liver int, Stuyver L et al, Hepatology, Biswas A et al, hepatol Res, Feray C et al, J Hepatol, Candotti D et al, JVH, Kitab B et al, Plosone, Pivert A et al. JMV
12 Mutants pré-core du VHB Rôle des mutants PBC dans la cirrhose A1762T/G1764A = facteur de risque indépendant de cirrhose (RR=4,26 ; IC95% 1,32-13,77) Analyse quantitative des mutants BCP par pyroséquençage BCP 45% RR=2,81 (IC95% 1,40-5,67 ; p=0,0004) versus BCP 10% Tseng TC et al, Gut
13 Mutants pré-core du VHB Rôle de l association des mutants A1762T/G1764A + G1896A dans la fibrose sévère Ganne-Carrié N et al, J Med Virol, 2006 Association entre génotype D, présence de mutations PC et PBC et score METAVIR F3/F4 (p = 0,02) Lapalus M et al, Liver Int, 2015 Âge, ALT, ADN VHB et mutants PBC/PC = facteurs de risque indépendants de fibrose sévère F2 A1762T/G1764A + G1896A = facteur de risque indépendant de fibrose sévère (RR=5,4 ; IC95% 2,4-12) 13
14 Mutants pré-core du VHB Mutation G1896A et risque de CHC Liu S et al. J Natl Cancer Inst 2009 Yang et al. Chin J Cancer Res 2015
15 Mutants pré-core du VHB Mutant A1762T/G1764A et risque de CHC Liu S et al. J Natl Cancer Inst 2009 Yang et al. Chin J Cancer Res 2015
16 Mutants pré-core du VHB Mutation T1753V et risque de CHC Liu S et al. J Natl Cancer Inst 2009 Yang et al. Chin J Cancer Res 2015
17 Mutants pré-core du VHB Mutation C1653T et risque de CHC Liu S et al. J Natl Cancer Inst 2009 Hua-Ping S et al. Asian pacific J Cancer Prev 2013
18 Présentation des études VHB Étude de la prévalence des mutants PC/PBC dans différentes populations de sujets porteurs du VHB Donneurs de sang ETUDE INTS Infection chronique VHB ETUDE ANRS AC11 Impact des mutants PC/PBC sur la fibrose hépatique 18
19 Etude INTS Dr S. Laperche (Institut National de Transfusion Sanguine) Groupe des Agents Transmissibles par Transfusion Établissements Français de Transfusion Sanguine Etude prospective chez 200 donneurs de sang prélevés de façon consécutive et nouvellement dépistés AgHBs positif entre janvier 2006 et juillet
20 Etude INTS Étude de la mutation G1896A Pivert A et al. JMV
21 Etude INTS Étude de la double mutation A1762T/G1764A Pivert A et al. JMV
22 Etude INTS Conclusions Prévalence élevée de la mutation précore G1896A chez les donneurs de sang français Angleterre : Davidson F et al, Vox sang, % infection chronique VHB - AgHBe négatif 55% (G1896A), 26% (A1762T), 35% (G1764A) Sénégal : Vray M et al, J Med Virol : % infection chronique AgHBe négatif ; génotype E (14/18 : 78%) 65% G1896A Inde : Vivekanandan P et al, Mol Diagn, % infection chronique VHB - AgHBe négatif 65% G1896A Question : Relation entre présence de la mutation G1896A et portage inactif? Pivert A et al. JMV
23 Étude ANRS AC11 VHB Projet ANRS : Étude de la variabilité des régions Précore (PC) et du Promoteur Basal du Core (PBC) du virus de l hépatite B (VHB) chez des patients atteints d une infection chronique par le VHB en France Objectifs : Compléter les données sur la prévalence des mutants PC/PBC sur un échantillon national de la population française Rôle de la variabilité de la région préc/c dans l histoire naturelle de l'hépatite B et dans la sévérité de la maladie hépatique 23
24 Étude ANRS AC11 VHB Étude rétrospective à partir de sérums congelés provenant de patients suivis pour une infection chronique par le VHB Cohorte : Groupe AC11-VHB (effectif 200 patients) Critères de sélection : AgHBs positif > 6 mois avant la mise sous traitement antiviral disponibilité des données de fibrose hépatique absence de co-infection VIH, VHC et VHD, absence d alcool 24
25 Étude ANRS AC11 VHB Participation de 14 centres hospitaliers Nantes (7) Amiens (11) Reims (21) Strasbourg (8) Angers (82) Grenoble (19) Limoges(26) Avicenne (21) Beaujon (22) Bichat (9) Pitié-Salpêtrière (11) Saint Louis (8) Vernes (22) Saint Antoine (9) INVS (22) 289 inclusions 25
26 Étude ANRS AC11 VHB Etude longitudinale rétrospective chez des patients non traités Inclusion : recueil des données épidémiologiques (âge, sexe, origine), biochimiques (ASAT),virologiques (Ag/Ac anti-hbe, ADN VHB, génotype), histologiques (PBH, test non invasif ou Fibroscan) Etude virologique Extraction génomique sur Easy Mag Génotypage du VHB (1 seul sérum) Séquençage région POL (pol1m, pol2m, pol3m, pol4m) selon Villeneuve et al, J Hepatol 2003 Recherche des mutations G1896A, G1899A, G1757A et A1762T/G1764A par séquençage direct (3 sérums) selon Friedt et al, Hepatology 1999
27 Étude ANRS AC11 VHB Caractéristiques de la population étudiée 252 patients : 112 femmes et 140 hommes Moyenne âge (±SD) = 44,3 ans (±13,3) 2/3 patients sont AgHBe (-) et Ac anti-hbe (+) Moyenne de l ADN VHB (±SD) : 4,71 log UI/mL (±2,20) Taux d ALAT élevé : 43% Données de fibrose (252 patients) Score de fibrose Nombre total % F F F F F % 46% 27
28 Pourcentage Étude ANRS AC11 VHB Répartition des génotypes du VHB Répartition géographique A B C D E F G Génotypes Afrique Amérique Europe Asie 28
29 Percentage Étude ANRS AC11 VHB Prévalence des mutations PC et PBC % 90% 60 80% 50 70% 60% Wild Mutant 50% 40% 30% 20% G1757A BCP G1899A G1896A 10 10% 0 G1896A G1899A G1757A A1762T/ G1764A Wild 45 70,6 61,2 62,4 Mutant 54,9 29,3 38,7 34,1 0% A B C D E F G1757A BCP G1899A G1896A
30 Étude ANRS AC11 VHB Répartition des mutations PC et PBC 30
31 Étude ANRS AC11 VHB Facteurs de risque associés à F3 (analyse multi-variée) 31
32 Étude ANRS AC11 VHB Facteurs de risque associés à F3 (analyse multi-variée) 32
33 Étude ANRS AC11 VHB Modèle de prédiction de la fibrose >F3 Capacité discriminante du modèle : AUROC = [0,803-0,919] 33
34 Conclusion Impact des mutants PC ou PBC sur l évolution de la fibrose hépatique A1762T/G1764A = risque de fibrose sévère, de cirrhose et de CHC G1896A = pas d impact sur la sévérité de la fibrose quand elle est isolée Rôle synergique ou antagoniste des combinaisons de mutations dans la sévérité de la fibrose et le risque de CHC biomarqueurs prédictifs d apparition du CHC o C1653T+T1753V + A1762T/G1764A Intérêt de la quantification des mutants PC/BCP
35 Remerciements Pr Laperche et Dr Servant-Delmas, le GATT et les EFS ANRS et Groupe VHB AC11/AC33 de l ANRS Pr Vincent Thibault Adeline Pivert Pr Sandrine Castelain, Dr Marianne Coste-Burel, Dr Bénédicte Roquebert, Dr Vincent Mackiewicz, Pr Evelyne Schvoerer, Dr Sylvie Larrat, Dr Sarah Maylin, Pr Sophie Alain, Pr Véronique Loustaud-Ratti, Pr Emmanuel Gordien, Dr Joël Gozlan, Dr Véronique Brodard, Dr Brigitte Bernard-Chabert, Pr Chevaliez
36 FIN 36
37 VARIABILITÉ PRÉ-C/C Relation entre mutants PC et génotype
Christian TREPO, MD, PhD
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