Réponse humorale: production d anticorps. 3semaines
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- Pierre Richard
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1 Réponse humorale: production d anticorps Spécificité: GRM 3semaines Serum+GRM: Agglutination Mémoire: Serum+GRB: 0 GRH: 0 GR : 0 Rappel: réponse plus rapide et plus intense
2 LES IMMUNOGLOBULINES - Par électrophorèse: les Ac sont dans les gamma-globulines ( 2 aussi) -Etude biochimique possible chez l homme grâce aux myélomes: prolifération maligne d un clone plasmocytaire pic à l électrophorèse dans les gamma-globulines 1 cellule 1 Ig = exclusion isotypique - par injection à l animal, on montre qu il y a plusieurs antigènes dans les gamma-globulines: G, A, M OMS: définit les Immunoglobulines (Ig): IgG, IgA, IgM -découverte des IgD et des IgE: 5 classes ou isotypes Chez la souris: technique des hybridomes permettant d obtenir des Ac monoclonaux
3 STRUCTURE PRIMAIRE DE L IMMUNOGLOBULINE G NH2 110aa Fab Papaïne Pepsine: F(ab) 2 Fc COOH Glycoprotéine structure de base: 2 Fab+ 1Fc H2L2
4 STRUCTURE PRIMAIRES DES AUTRES CLASSES D IG IgG IgA IgD IgE ou ou ou ou Pièce sécrétoire IgM IgA sécrétoire Chaîne J
5 STRUCTURES II, III, IVaires Organisées en domaines globulaires (hypothèse émise par Edelman à cause des homologies internes entre séquences de 110aa) : -hypothèse génétique de la «duplication mutation» -autonomie thermodynamique de chaque domaine -rôle fonctionnel attribué à chaque domaine Site Ac VH Light Heavy Variable Constant VL CH1 CL CH2 CH3 Domaine: 7 feuillets béta associés à des coudes (béta turns) NB: Les IgM et les IgE ont un domaine supplémentaire CH4
6 Fonction du Fab: la reconnaissance de l Ag L épitope est la région de l antigène qui se lie à l anticorps Le paratope est la région de l anticorps qui se lie à l antigène Ag (peptide) VL VH Structure d un complexe Fab- Ag établie par cristallographie aux RX
7 Les forces de liaisons qui entrent en jeux sont faibles mais nombreuses: liaisons hydrogène liaisons électrostatiques forces de Van der Waals forces de London liaisons «hydrophobe» La liaison épitope paratope obéit à la loi d action de masse: [A]+[H] [AH] L affinité de la liaison se définit par la constante d affinité: [AH] K A = [A]*[H] Elle varie selon les Anticorps de 10 5 à M
8 Fc: FONCTIONS EFFECTRICES Le Fc des immunoglobulines peut se lier à des récepteurs membranaires ou à des molécules présentes dans le sérum (complément) IgG: -Liaison aux récepteurs membranaires: -En rapport avec les Fc R n: Transport placentaire des IgG de la mère au fœtus -En rapport avec les Fc R I, RIIA et III: La liaison des 2 Fab à l Ag entraîne des modifications conformationnelles aux niveau du Fc et fait apparaître au niveau des CH 3 et CH4 des sites de liaison pour ces récepteurs membranaires La liaison à ces récepteurs membranaires entraîne une signalisation qui varie selon le type de récepteur et de cellule -Opsonisation avec les macrophages,pnn: facilitation de la phagocytose -ADCC avec les LK (cytotoxité cellulaire dépendante des anticorps) -En rapport avec les Fc R IIb sur les BL par exemple: inhibition de la réponse immune -Liaison au complément La liaison - des 2 Fab à l Ag entraîne des modifications conformationnelles aux niveau du Fc et fait apparaître un site de liaison pour le C1q (première molécule de la cascade d activation de la voie classique du complément) IgM -Liaison aux récepteurs membranaires En rapport avec les Fc R(poly Ig): Opsonisation sur les cellules phagocytaire -Liaison au complément
9 IgA: Sous forme dimérique -en rapport avec le récepteur poly Ig (Fc R) présent sur les cellules épithéliales: La liaison ne nécessite pas que l IgG soit liée à un Ag Transport au travers des cellules (transcytose). Une partie du récepteur reste liée aux IgA lors de l exocytose et constitue la pièce sécrétoire: 600 aa, associée aux IgA présentes dans les sécrétions (IgAs): elle joue un rôle protecteur et bactéricide IgE: -en rapport avec les récepteurs Fc R: -RI : affinité très forte (Kd 10-9M). La liaison ne nécessite pas que l IgG soit liée à un Ag La demi vie de de l IgE passe ainsi de qq jours à 3 mois récepteur présent sur les PNB, mastocytes. La fixation de l Ag entraîne la dégranulation des cellules responsable des hypersensibilités typei -RII (Kd 10-6M): Mn, P, PNE, Mp, -thermolabiles
10 Les Récepteurs membranaires des Ig Ils appartiennent pour la plupart à la superfamille des immunoglobulines type de récepteur membranaire rôle Fc RI Fc R Fc RI Fc RII A Fc RIII A, III B activation baso,masto,eos eos mono,neutro mono,poly,nk,placenta mono,nk augmentation RI ADCC régulation par formes solubles Fc RII B toutes sauf TL et NK diminution RI Fc Rn voie transplacentaire placenta regulateur intestin, foie stockage glande mammaire Poly Ig epithélium 7 domaines piece secretoire des IgA sécrétions Fc RII Proteine de type II lie IgE, C lectin, CD41, CD21 peut être clivée: forme soluble régulatrice augmentation RI régulation par formes solubles
11 Production des Ac Taux d Ac IgG 1an 3 s 3mois Ag IgM Ag temps
12 Concentrations sériques avec l âge % taux adulte IgG maternelles IgM IgG IgA 1 2 3ans
13 SPECIFICITES ANTIGENIQUES Isotypie - Allotypie - idiotypie Isotypie Spécificité propre à une espèce et présente chez tous les individus de l espèce: Pas d étude génétique possible. L épitope se trouve sur un domaine constant. Ag de Espèce A Espèce B Ac anti -isotype IgG IgA IgM IgD IgE chaine H chaine L
14 Allotypie Groupe 1 Ag Ac Groupe 2 Espèce Spécificité d un groupe d individus au sein d une espèce donnée. Obéit aux lois de Mendel : Système Gm qui a 25 allèles Système Am porté par les A2 (A2m1 et A2m2) Système Km qui a 3 allèles Pour les Ig, il y a exclusion allèlique: un seul des deux allèles s exprime.
15 Idiotypie Spécificité propre à un individu dans une espèce donnée. L épitope idiotypique se trouve sur un domaine variable. Ag= salmonelles S 1 Ab0 2 3 Ab1 Ab1+S Ab2 + 3 Ab1-3 Ab1 - Idiotype classique (Oudin): c est un idiotype privé lié aux CDR
16 Idiotype public Ag: virus de la mosaïque du tabac (TMV) lapin TMV lapin chèvre mouton souris... Ab1 Ab1 Ab1 Ab1 Ab1 + Ab2 Spécificité propre à un individu dans une espèce mais commune à plusieurs espèces Le site Ac de l Ab2 est une image interne de l épitope TMV TMV Ab1 Ab2 Réseau idiotypique
17 M D G1 G2 G3 G4 A1 A2 E isotype nbre de domaines/h nbre de sous unités 5 ou ou 2 1 ou 2 1 MM (kda) à % sucres 12 9 à 14 2 à 3 7 à [sérique] g/l 0,5 à 1,6 0,03 à 0, ,5 1,2 à 2,6 <10-4 demi-vie j 5 2, ,8 2,3 transfert placentaire allergies activités biologiques RI primaire marqueur B ac neutralisants sécrétions parasites ac anti-pathogènes (bactéries et virus)
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