Le RHD et ses variants. Anne Long M.D.
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1 Le RHD et ses variants Anne Long M.D.
2 Plan Le groupe sanguin Rh Introduction Réactifs en sérologie Biologie moléculaire Variants D D types faibles D partiels Del Tests D chez les receveurs chez les donneurs
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4 Système Groupe Sanguin RH (004) Système complexe 52 Antigènes >285 allèles Un phénotype peut être le résultat de plusieurs génotypes Antigènes majeures D: C/c; E/e
5 D C E C E F CE C W C X V EW G Hr 0 Hr hr s VS C G CE D W c-like ce hr H Rh29 Go a hr B Rh32 Rh33 Hr B Rh35 Be a Evans Rh39 Tar Rh41 Rh42 Crawford Nou Riv Sec Dav JAL STEM FPTT MAR BARC JAHK DAK LOCR CENR CEST CELO CEAG Classification ISBT
6 Qu est-ce que le D? Localisé sur la protéine D dans la membrane érythrocytaire. Protéine poids moléculaire 30-33kDa, constitué de 417 acides aminés. Hautement immunogène Protéine RhD Protéine RhCE
7 Exemple de déterminants antigéniques ( épitopes) Illustrations C. Benay
8 Le complexe Rh Illustrations C. Benay
9 Quelques réactifs monoclonaux anti-d IgM IgG Tube Ortho MAD2 humain Tube Gamma GAMA 401 F8D8 Tube Immucor-4 MS201 MS26 Tube Immucor-5 Th28 MS26 Tube DBL/Immucor D175-2 D415 1 E 4 Tube Seraclone BS232 BS221/H41 11B7 gel ID-MTS MS201 na
10 Réactivités différentes selon des réactifs Volume 47, July 2007 Supplement TRANSFUSION 17S
11 Biologie moléculaire Rh (D )- Rh(D)+ Contrôle interne Exons 5, 4, 3, 7, 9, 6
12 RHD et RHCE
13 Gène RHD ADN Génotype Protéine Phénotype
14 RHD et RHCE Les gènes RHD et RHCE 10 exons Homologue à 96 %
15 Les phénotypes D négatifs Prévalence: Caucasiens 15 % Noirs ( Afrique) 5 % Asiatiques 3% Plusieurs génotypes
16 RHD et RHCE D négatif chez les caucasiens
17 Phénotypes D négatifs : génotypes chez les Noirs
18 Variants D D types faibles D partiels Del
19 Fréquence du phénotype D faible Hopkins Écosse ,56% Garretta France ,66% Beck États-Unis ,2% Jenkins États-Unis ,4% Flegel Allemagne ,4%
20 D faible D partiel Obstet Gynaecol Can Sep;29(9):746-52
21 Faible expression du D Description par Stratton en 1946 Nommé D u Résultats de: Haplotype r en trans avec le D ( effet Ceppellini) D partiels Types D faibles What to do about weak D in patients and donors, 2007 Joint CSTM Conference, Greg Denomme
22 D type faible Weak D s S3C Type 3 V270G Type 1 G385A Type 2 Les D types avec expression faible seraient secondaires à des mutations du gène RHD qui causent des changements d acides aminés qu on prévoit être situés intramembranaires ou intracellulaires. Sérologie Test indirect à l antiglobuline positif Réactions selon les caractéristiques des réactifs anti-d utilisés Biologie moléculaire indiquée pour l identification de D type faible 73 Types D faible
23 D type faible Biologie moléculaire: Nomenclature: on les appelle «Type» suivi d un numéro. D type faible 1 à 73 Type 1,2,3 représentent approximativement 90% des cas en Europe Mais: Certains phénotypes D,classés D Type faible, peuvent développer un anti-d : Type 4, Type 4.2, Type 11, Type 15. Il y a peu de données / classification à revoir
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28 Variants D D types faibles D partiels Del
29 Obstet Gynaecol Can Sep;29(9):746-52
30 D partiels Les individus D partiels peuvent développer un anti-d. Le D types partiels sont habituellement associés à des changements d acides aminés qu on prévoit être situés sur les boucles extracellulaires du RhD des hématies D Types Faibles D Partiels
31 Volume 47, July 2007 Supplement TRANSFUSION 17S
32 DII DIII DIV DVa DVI DFR DBT R o Har G-T I-T 4 I-T 5 ` O-T O-G direct-positive indirect-positive What to do about weak D in patients and donors, 2007 Joint CSTM Conference, Greg Denomme PhD
33 D partiels Nomenclature: on les nomme avec chiffres romains ex DVI, DVII etc. ou des lettres majuscules ex DNB etc. Sérologie: Réactions faibles ou normales selon le réactif utilisé Présence d un anti-d avec un phénotype D+ l identification et classification des D types partiels en sérologie est difficile (réactifs peu ou non disponibles, expression faible du D) Biologie moléculaire indiquée pour l identification et classification des D partiels ~> 70 D partiels décrits
34 D partiels Majorité sont des gènes hybrides dans lesquels une ou des portions du gène RHD sont remplacées par une ou des portions du gène RHCE Molecular Testing to Resolve Blood Typing Problems & Controversies, C.Westhoff, N. Thomas
35 D partiels chez les caucasiens qui sont à risque d anti-d RHD RHCE DVI Type 1 Type 2 Type 3 Type 4 DFR Conversion du Gène avec le RHCE BARC+ BARC+ BARC+ - RHD exons RHD remplacés par RHCE -Peu de données -Allemagne 1:5000 DBT D partiels communs chez les caucasiens avec points de mutations DNB DVII L110P G355S - 1:292 Europe Centrale, Suisse - 1:900 Allemagne Molecular Testing to Resolve Blood Typing Problems & Controversies, C.Westhoff, N. Thomas
36 D Partiels chez les Noirs à risque d anti-d RHD RHCE Conversion gène avec RHCE DIVa (& Hispanic) L62F N152T D350H DAR DIIIa DOL (& Hispanic) T201R F223V I342T L62F A137V N152T T201R F223V M170T F223V - Échanges isolés avec RHCE et/ou points mutations - Fréquence peu d études DAR - 4.9% Noirs Sud-Africains - 2% patients Brésil avec anémie falciforme Molecular Testing to Resolve Blood Typing Problems & Controversies, C.Westhoff, N. Thomas
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38 Variants D D types faibles D partiels Del
39 Del Les Del seraient secondaires à des mutations du RHD qui réduisent l expression du D dans la membrane. D Types faibles D partiels Del Molecular Testing to Resolve Blood Typing Problems & Controversies, C.Westhoff, N. Thomas
40 Del Les Del sont détectables en sérologie seulement par adsorption elution d anti-d % des RH D négatifs chez les asiatiques Certains Del développent un anti-d Identification Biologie moléculaire 14 allèles Del décrits
41 D ou «D-Like»
42 Réactivités différentes selon les réactifs Volume 47, July 2007 Supplement TRANSFUSION 17S
43 Discordances RhD - Mount Sinai Hospital, Toronto Discordances entre 2 tests directs anti-d 33,864 phénotypes RhD effectués sur 18 mois 55/5672 discordances Rh D (0,98%) 53 étaient positifs au test direct IS avec un réactif 1 était positif et 1 un NN avec TDA 3+; anti-d élué TRANSFUSION 2005;45:
44 TRANSFUSION Volume 45, October 2005
45 Signification Clinique du D L anti-d : potentiel réaction hémolytique sévère L anti-d : peut causer un maladie hémolytique du nouveau-né (MHNN)
46 NORMES POUR SERVICES TRANSFUSIONNELS EN MILIEU HOSPITALIER- SCMT La recherche du D faible chez un receveur n'est pas nécessaire sauf dans le cas d'un nouveau-né ayant un Rh négatif dont la mère est Rh négatif et ne présente aucun signe d'alloimmunisation Rh.
47 Chez les receveurs et les femmes enceintes: Il n est pas conseillé de faire une recherche de D faible en phase antiglobuline.
48 Chez les receveurs et les femmes enceintes: Attention aux réactifs qui détectent des D-like
49 NORMES POUR SERVICES TRANSFUSIONNELS EN MILIEU HOSPITALIER- SCMT Une politique doit être établie concernant l'administration d'igrh aux femmes qui se démarquent comme étant D positif faible
50 Chez les donneurs: Il est important d utiliser des réactifs à large spectre pouvant détecter des variants
51 Discordances Rh Consulter votre encart manufacturier L utilisation de 2 réactifs (dont un à large spectre permet de détecter les discordances Rh) Investigation en biologie moléculaire
52 Résumé Variants D D types faibles D partiels Del D Tests D chez les receveurs chez les donneurs
53 Résumé Variants D D types faibles D partiels Del Tests D chez les receveurs chez les donneurs
54 Résumé Variants D D types faibles D partiels Del Tests D + sérologie: chez les receveurs et femmes enceintes: phénotypes avec expression D faibles = D négatifs chez les donneurs : phénotypes avec expression D faibles = D positifs Investigation en biologie moléculaire
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