HEMATOLOGIE ET HEMOSTASE

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1 SPTS 0004 HEMATOLOGIE ET HEMOSTASE Services suisses d'essais d aptitude Schweizerische Eignungsprüfungsdienststellen Servizi svizzeri di prove valutative interlaboratorio Swiss proficiency testing services 1. Hématologie Caractéristiques Nom du programme HE Fréquence des enquêtes 4, 6 ou 12 fois par an au choix VS : 4 fois par an Identification de l échantillon Hématologie : ABX Micros, Microsemi CRP, QuikRead go : Réticulocytes microscope : Réticulocytes automate : Vitesse de sédimentation : 3 parts (3 populations leucocytaires) : 5 parts (5 populations leucocytaires) : Nombre d échantillons par enquête 1 à 4 Type d échantillon Sang stabilisé R1 : lame colorée Type d évaluation Quantitative 1 ère enquête organisée en 1972 Nombre de participants (2017) H1 H70 R1 R2 VS H31, H32, H70 H51, H52, H53, H55, H56 Hématologie : Réticulocytes : 195 VS : parts : parts : 200 Description Ce programme est adapté pour tous les instruments d hématologie, y compris les POCT. Chaque échantillon est prévu pour des paramètres spécifiques. Il est impératif d utiliser l échantillon correct en fonction des paramètres à mesurer. Des échantillons spécifiques sont utilisés en fonction des instruments. Il est donc indispensable de nous informer de tout changement d instrument et de réactif. Des évaluations quantitatives sont réalisées en fonction des divers paramètres et des méthodes utilisées. Un programme spécifique à l hématologie différentielle existe aussi (voir la fiche «Hématologie différentielle»). Il consiste en l envoi de lames colorées accompagnées d une anamnèse. Si vous effectuez des frottis dans votre laboratoire, ce programme fait partie des obligations légales. N hésitez pas à consulter le pour toutes questions. Manuel Hématologie et Hémostase 1 / 6

2 Paramètres évalués Code Nom Abréviation Code OPAS Evaluation QUALAB - Critère de qualité Tolérance Exemple résultat 73 Sg-Erythrocytes, Numération Sg-Ery ± 25 % ± 3 % 5, /L (=E12/L) 71 Sg-Hématocrite Sg-Ht ± 9 % ± 3 % 43 % 72 Sg-Hémoglobine totale Sg-Hb ± 9 % ± 3 % 141 g/l 74 Sg-Leucocytes, Numération Sg-Leuc ± 25 % ± 8 % 7, /L (=E9/L) 81 Sg-MCH Sg-MCH -- ± 6 % 28,2 pg 82 Sg-MCHC Sg-MCHC ± 6 % 317 g/l 70 Sg-MCV Sg-MCV -- ± 6 % 88,9 fl 601 Sg-Réticulocytes automate Sg-RétiAut ± 30 % 1,50 % 600 Sg-Réticulocytes microscope Sg-Réti. M ± 30 % 1,20 % 75 Sg-Thrombocytes, Numération Sg-Thro ± 25 % ± 9 % /L (=E9/L) 650 Eosinophiles tot, Basophiles, Neutrophiles % Sg-Gran % ± 25 % 85,0 % 645 Eosinophiles, Basophiles, Neutrophiles % Sg-Gra % ± 25 % 85,0 % 640 Eosinophiles, Neutrophiles % Sg-Eo/Neu % ± 25 % 85,0 % 610 Lymphocytes % Sg-Lym % ± 25 % 12,0 % 615 Monocytes % Sg-Mono % ± 25 % 2,9 % 617 Basophiles % Sg-Baso % ± 25 % 1,0 % 620 Monocytes, Basophiles % Sg-Mo/Ba % ± 25 % 2,9 % 622 Eosinophiles % Sg-Eosin % ± 25 % 2,0 % 625 Monocytes, Eosinophiles % Sg-Mo/Eo % ± 25 % 2,9 % 630 Monocytes, Eosinophiles, Basophiles (MXD) % Sg-MXD % ± 25 % 2,9 % 635 Neutrophiles % Sg-Neutro % ± 25 % 85,0 % 88 Sg-Vitesse de sédimentation 1h Sg-VS 1 h ± 15 % 12 mm / h 89 Sg-Vitesse de sédimentation 2h Sg-VS 2 h ± 20 % 19 mm / 2h 9023 Qualité coloration réticulocytes QColorRéti Bon Qualité étalement réticulocytes QEtal.Réti Bon -- Paramètres actuellement soumis obligatoirement, selon la QUALAB, à un CQE. Evaluation QUALAB critère de nombre : pour tous les paramètres, 75% des résultats doivent être conformes. Les codes OPAS ci-dessous sont en particulier concernés, en fonction des divers bilans Erythrocytes, Leucocytes, Hémoglobine, Hématocrite, Indices Idem Thrombocytes Idem sous-populations et Idem sous-populations (codes en fonction des techniques) Unité Conservation, stabilité et pré-analytique Le sang stabilisé doit être conservé au réfrigérateur (+ 2 à + 6 C). L échantillon est stable jusqu à la date de validité inscrite sur le flacon. Laisser l'échantillon revenir à température ambiante (+ 20 à + 25 C), pendant environ 30 minutes avant d effectuer les analyses. Avant toute analyse, homogénéiser soigneusement l échantillon : 1. Faire rouler le flacon entre les paumes des mains pendant 30 à 45 secondes. 2. Retourner lentement le flacon 10 fois. Traiter l'échantillon de contrôle de la même manière que vous traitez un échantillon de patient. Manuel Hématologie et Hémostase 2 / 6

3 Echantillon de contrôle Tout échantillon biologique doit être considéré comme potentiellement infectieux. Les échantillons envoyés pour ce programme ne doivent jamais être utilisés pour le dosage du glucose. Unité de mesure et facteur de conversion Exemple de calcul vers l unité SI Erythrocytes 10 9 /L /L /L = 5, /L 10 6 /µl = /L 5, /µl = 5, /L 10 6 /mm 3 = /L 5, /mm 3 = 5, /L Hématocrite L/L x 100 % 0,45 L/L x 100 = 45 % Hémoglobine g/dl x 10 g/l 14 g/dl x 10 = 140 g/l mmol/l x 16,1 g/l 5,56 mmol/l x 16,1 = 88 g/l MCH fmol x 16,1 pg 1,89 fmol x 16,1 = 30 pg MCHC mmol/l x 16,1 g/l 20,6 mmol/l x 16,1 = 332 g/l MCV µ 3 = fl 89 µ 3 = 89 fl Leucocytes 10 6 /L /L /L = 7, /L 10 3 /µl = 10 9 /L 7, /µl = 7, /L 10 3 /mm 3 = 10 9 /L 7, /mm 3 = 7, /L Thrombocytes 10 6 /L /L /L = /L 10 3 /µl = 10 9 /L /µl = /L 10 3 /mm 3 = 10 9 /L /mm 3 = /L Spécificités liées aux méthodes et/ou appareils Il est impératif de suivre scrupuleusement les recommandations propres à votre appareil. Pour toute question concernant l'utilisation de ces appareils, adressez-vous à votre représentant. MS4 : lire l échantillon de CQE sur le canal «contrôle». PocH-100i : sur cet appareil, utiliser impérativement les adaptateurs pour prise veineuse (beige). Séditainer : sur notre site internet, vous pouvez consulter un guide pratique pour l'exécution du CQE : Vitesse de sédimentation : certains automates effectuent une mesure en extrapolant le mesurage effectué en 20 à 30 minutes. Le résultat est équivalent à celui obtenu manuellement en 1 heure. Ces automates sont évalués à part. Manuel Hématologie et Hémostase 3 / 6

4 2. Hémostase Caractéristiques Nom du programme HE Fréquence des enquêtes 4 ou 6 fois par an au choix Identification de l échantillon D-dimères : D-dimères pour Nycocard et tests qualitatifs : TP, aptt, Fibrinogène : aptt pour Hemochron : TP pour CoaguChek : TP pour Hemochron : TP pour microinr et Xprecia Stride : TP pour i-stat : Nombre d échantillons par enquête 1 à 3 Type d échantillon Plasma lyophilisé ou liquide Type d évaluation Quantitative et qualitative 1 ère enquête organisée en 1972 Nombre de participants (2017) Total : DD DN T1 T3 K2 K3 K4 K5 Description Ce programme est adapté pour tous les instruments d hémostase, y compris les POCT. Chaque échantillon est prévu pour des paramètres spécifiques. Il est impératif d utiliser l échantillon correct en fonction des paramètres à mesurer. Des échantillons spécifiques sont utilisés en fonction des instruments. Il est donc indispensable de nous informer de tout changement d instrument et de réactif. Des évaluations quantitatives et qualitatives sont réalisées en fonction des divers paramètres et des méthodes utilisées. Paramètres évalués Code Code Evaluation QUALAB Tolérance Exemple Nom Abréviation OPAS - Critère de qualité résultat Unité 691 P-D-dimères P-DDi ± 21 % ± 20 % 0,28 mg/l FEU 692 P-D-dimères P-DDi ± 21 % ± 20 % 0,14 mg/l DD 693 P-D-dimères qualitatif P-DDi ql Juste Juste positif mg/l 68 P-Fibrinogène P-Fibr ± 15 % ± 10 % 3,2 g/l 67 P-Thromboplastine partielle, Temps de - P-aPTT ± 25 % ± 10 % 34 s 65 P-Thromboplastine INR, # P-TP INR ± 15 % Temps de - ± 8 % 1,7 INR 66 P-Thromboplastine %, Temps de - P-TP % ± 15 % ± 15 % 41 % 6500 Numéro de lot, CoaguChek Lot CoaguC B Numéro de lot, D-dimères Lot N DD D Paramètres actuellement soumis obligatoirement, selon la QUALAB, à un CQE. Evaluation QUALAB critère de nombre : pour tous les paramètres, 75% des résultats doivent être conformes. Le temps de thromboplastine (TP, Quick) peut être exprimé en INR et en %. Les laboratoires qui utilisent les deux modes doivent enregistrer leur méthode à la fois pour le TP INR et pour le TP %. # TP INR : si la valeur cible est < 1,3, la tolérance QUALAB est ± 0,2. Le numéro de lot est utilisé pour des évaluations particulières. Manuel Hématologie et Hémostase 4 / 6

5 Conservation, stabilité et pré-analytique Le matériel liquide ou lyophilisé doit être conservé au réfrigérateur (+ 2 à + 6 C). L échantillon est stable jusqu à la date de validité inscrite sur le flacon. Laisser l'échantillon revenir à température ambiante (+ 20 à + 25 C), pendant environ 30 minutes avant d effectuer les analyses. Juste avant d effectuer les analyses, homogénéiser l échantillon par inversion ou au moyen d un agitateur à rouleaux, sans secouer pour éviter toute formation de mousse. Dans le cas d un échantillon lyophilisé, voir ci-dessous. Echantillon de contrôle Tout échantillon biologique doit être considéré comme potentiellement infectieux. Reconstitution des échantillons lyophilisés : T1 : L'utilisation d'une seringue pour l'adjonction du diluant, l utilisation de plusieurs volumes de diluant ou le remplissage direct du flacon ne sont pas possible. 1. Faire tomber tout le lyophilisat au fond du flacon. 2. Ouvrir délicatement le flacon en évitant toute perte de matériel (laisser pénétrer l air avant d ouvrir complètement le flacon). 3. Ajouter en une seule fois, à l aide d une pipette certifiée ou garantie, le volume exact d'eau distillée (ou bidistillée) indiqué sur le flacon (généralement 1 ml). L eau doit être à température ambiante. 4. Reboucher les flacons et laisser reposer, sans agitation, 15 à 20 minutes à l'obscurité. 5. Mélanger délicatement les échantillons sans provoquer de mousse, en les retournant une trentaine de fois ou 10 minutes en utilisant un agitateur à rouleaux ou rotatif. 6. Vérifier que la totalité du lyophilisat est dissout et procéder aux analyses. K2 et K5 : Matériel à conserver au réfrigérateur (+ 2 à + 6 C) jusqu'à reconstitution (1 flacon de plasma lyophilisé, 1 flacon de fluide, 1 pipette pasteur en plastique). Ajouter le fluide avec la micropipette jointe. K3 : Matériel à conserver au réfrigérateur (+ 2 à + 6 C) jusqu'à reconstitution (1 tube en plastique contenant le diluant et 1 ampoule en verre de sang lyophilisé). K4 : Matériel à conserver au réfrigérateur (+ 2 à + 6 C) jusqu'à reconstitution (1 flacon de plasma lyophilisé, 1 pipette plastique contenant le diluant). L'erreur de reconstitution doit être < 3 %. Une procédure pour la vérification des pipettes peut être trouvé sur le site Internet du sous : Documentation / Annexes du manuel / «Vérification des pipettes». Après solubilisation du lyophilisat, et si les analyses ne peuvent pas toutes être exécutées immédiatement, le matériel doit être conservé fermé au réfrigérateur (+ 2 à + 6 C). Le tableau ci-dessous donne alors les délais maximums à respecter pour les analyses. Délais maximums après reconstitution Immédiatement < 1 heure aptt Fibrinogène TP Unité de mesure et facteur de conversion D-dimères Afin de faciliter la saisie du résultat des D-dimères, le propose ce paramètre avec le code 691 pour les différentes unités FEU (Fibrinogen Equivalent Units) et avec le code 692 pour les différentes unités DD (D-Dimer Units). Manuel Hématologie et Hémostase 5 / 6

6 Spécificités liées aux méthodes et/ou appareils Il est impératif de suivre scrupuleusement les recommandations propres à votre appareil. Vous trouvez des modes d emploi simplifiés sur notre site Internet : Pour toute autre question concernant l'utilisation de ces appareils, adressez-vous à votre représentant. Spécificités liées aux D-dimères Pour les mesures qualitatives, seul le résultat «positif» ou «négatif» peut être rendu. Il est impératif de suivre scrupuleusement le mode d emploi fourni par votre fournisseur de test et de traiter l échantillon de CQE comme un plasma de patient. N o t e s p e r s o n n e l l e s Manuel Hématologie et Hémostase 6 / 6