Phase d activation et phase effectrice d un lymphocyte T
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- Germain Paris
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1 Phase d activation et phase effectrice d un lymphocyte T
2 SUPERFAMILLE DU TNF ET DU RECEPTEUR AU TNF TACI BCMA CD27 EDAR XEDAR Fas DR4 DR5 DcR1 DcR2 OX40 AITR HveA CD40 4-1BB TNFR2 DR3 TNFR1 LTBR RANK DcR3 DR6 OPG CD30 EDA CD40L FasL OX40L AITRL CD30L 4-1BBL TWEAK CD27L LTα LIGHT TNF LTβ APRIL BLYS RANKL TRAIL
3 APOPTOSE ET IMMUNITE Récepteur Fas (CD95/APO-1) Inhibition du signal de mort : Humain : ALPS (Autoimmune lymphoproliferative syndrome) ; Souris : gld (generalized lymphoproliferative disease ) lpr (lymphoproliferation) lpr cg (lpr gene complementing gld) Lympho-prolifération -adénopathie -splénomégalie Auto-immunité: Humorale: Auto-anticorps entraînant anémie et souvent thrombocytopénie Progression tumorale (lymphomes)
4 DIVERS ALPS Type Ia: Fas muté (hétérozygotie) Type Im (mosaïque) : Mutation somatique dans des précurseurs hématopoïetiques Type Ib: FasL muté Type II: Caspase-10 muté Type III : Autres Type 0: Mutation homozygote Fas entraînant une perte de l expression.
5 LE SYSTEME Fas/FasL FasL DISC FADD CASP-8 Domaine de Mort (DM) Type I Type II Cyt c Apaf-1 CASP-3 CASP-9 EndoG AIF ICAD/DFF-45 Noyau cellulaire
6 CINETIQUE LYMPHOCYTE T ACTIVE/LE SIGNAL DE MORT LT naïf Type II Signal Fas inefficace? Type I AICD Signal Fas efficace
7 LES CASPASES Caspases : -1 à 10 (11: homologue murine de la caspase 4 et 5) (13 homologue bovine de la caspase-4) -Initiatrices: -8, -9, -10 -Effectrices: 3, -6, -7 -Initiatrice et effectrice: -2 -Caspases activatrices de cytokines: Processus de l inflammation -Caspase-1 : IL-1β et IL18 -Caspase-5 expression inductible (infection, LPS) complexe avec caspase-1 : inflammasome -Caspase-4 inductible par l INF rôle pas encore bien défini
8 Introduction CASPASES (cysteinyl-aspartate-cleaving proteases) Caspases : 1 à 10 (11: murine homolog of human caspase 4 and 5) 12 et 14 (13 bovine homolog of caspase-4) Expression ubiquitaire: -exceptions: 1) Expression de la caspase-14 limitée aux kératinocytes 2) Caspase-5 expression inductible -Initiatrices: -8, -9, -10 -Effectrices: 3, -6, -7 -Initiatrice et effectrice: -2 -Caspases activatrices de cytokines: Processus de l inflammation -Caspase-1 : IL-1β et IL18 -Caspase-5 expression inductible (infection, LPS) complexe avec caspase-1 : inflammasome -Caspase-4 : rôle pas encore bien défini «Caspase-3 clive IL-16 aussi pro-inflammatoire» «Caspase-12 atténue l inflammation?»
9 Mécanisme d activation
10 APOPTOSE: Caspases initiatrices FasL FADD Fas CASP-8 CASP-3 Noyau Voie extrinsèque Récepteurs de mort Voie intrinsèque Mitochondrie
11 Pro-domaines = spécificité CARD: Caspase recruitment domain DED: Death Effector Domain -Interaction homotypique
12 Signal apoptotique Fas FasL FADD CASP-8 Procasp 8 FasL Jurkat Jurkat FasL - + Taille (pb) Cyt c Apaf-1 p14 p CASP-3 CASP-9 EndoG AIF Procasp ICAD/CAD p20 p Noyau Western blot Caspase-activated DNAse
13 MODULATION DU SIGNAL Inhibiteurs: -IAP (Inhibitor of apoptosis) baculoviral IAP repeat : BIR -Caspase-8 like: c-flip L et short -Sur-exprimé par les LB lors de leur activation -HHV-8 tumeurs: v-flips primary effusion lymphoma (PEL) multicentric Castleman's disease (MCD). -Nombreuses tumeurs surexpriment IAPs et FLIPs -Promoteur Caspase-8 méthylé dans certains neuroblastomes
14 REGULATION (suite) Modification post-traductionnelle : -phosphorylation de la caspase-9 par Akt. -Nitrosylation du site catalytique de la caspase-3: nitrosylation de cystéine Localisation cellulaire Spécificité de substrats : -concentration? -Localisation?
15 Souris déficientes en Caspase-8 : mort in utero Chez l homme mutations observées : immunodéficient (caspase-10) -Réponse Adaptative: Caspase-8 immunodéprimé avec pas de production d IL2 : pas d activation du LT -Caspase-8 kinase wee1 Rôles NON-APOPTOTIQUES cdc2 Progression du cycle cellulaire -Production de cytokines: Processus de l inflammation: protection contre les pathogènes -Role dans le processus d énucléation (Erythrocytes, cellules épithéliales du cristallin, kératinocytes) -P Coupe sagittale d œil Flèche blanche : cornée Flèche violette : la rétine Astérisque bleue : chambre antérieure de l œil Astérisque blanche : le cristallin Astérisque rouge : le corps vitré
16 GRANZYMES - Sérine protéases : -clivage après acide aspartique (granzyme B) -Clivage après arginine ou lysine (granzyme A) - Activé après clivage par Cathepsin C (dipeptidyl peptidase I) - Inhibiteurs de granzyme : Serine Protease Inhibitors (Serpins) : - Région C-term mime substrat - Clivage entraîne l inhibition irréversible du granzyme
17 GRANZYME B : ENTREE ET ACTIVITE D après Wowk et trapani, Microbes and Infection, 2004
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