La chirurgie doit être effectuée de manière aseptique (voir la PNF C-1, Chirurgie aseptique chez les rongeurs).

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1 Directin des services vétérinaires Prcédure nrmalisée de fnctinnement Objet : Chirurgie stérétaxique chez les rngeurs Numér : C-3 Prtée : Ceci est une directive de la Directin des services vétérinaires à l'intentin des utilisateurs et du persnnel des animaleries de l'université Laval et des centres de recherche affiliés. Préparée par Stéphanie Carn Technicienne en santé animale cnfrmité, Directin des services vétérinaires Mdifiée par Daphnée Veilleux-Lemieux Vétérinaire respnsable, Directin des services vétérinaires Révisée par Anne-Marie Catudal, Daphnée Veilleux-Lemieux Vétérinaires, Directin des services vétérinaires But : Décrire les prcédures de chirurgie stérétaxique chez les rngeurs. Date : 15 ctbre 2012 Date : 31 aût 2015 Date : 31 aût 2015 Versin 2 Généralités La chirurgie dit être effectuée de manière aseptique (vir la PNF C-1, Chirurgie aseptique chez les rngeurs). Le cadre stérétaxique dit être désinfecté en vaprisant un désinfectant sur un papier absrbant avant le début des chirurgies et entre chaque animal. Les prcédures prépératires, chirurgicales, pstpératires, d'anesthésie et d'analgésie apprpriées divent être appliquées. Les électrdes et les canules divent être stérilisées avant leur intrductin dans le cerveau (par immersin dans le glutaraldéhyde u équivalent, suivi d'un rinçage à l'eau/saline stérile, u au gaz). Le temps de stérilisatin par immersin dit être respecté (habituellement plus de 8 heures). Les tris cnditins à respecter pur assurer le maintien à lng terme d un implant snt : une technique stérile méticuleuse; une préparatin adéquate de la surface sseuse; un ancrage sécuritaire du ciment à s et des vis. 1

2 Prcédures Préparatin de l'animal Anesthésier l'animal seln la prcédure apprpriée seln lapnf A-1, Analgésie et anesthésie des rngeurs. Raser la tête et nettyer avec un savn antiseptique. Infiltrer un anesthésique lcal (lidcaïne et/u bupivacaïne) au site d'incisin et aux pints d'appui de l'appareil stérétaxique (i.e. cnduits auditifs) seln la PNF A-14, Dilutin des drgues. Installer l'animal dans l'appareil stérétaxique. Insérer les barres d'reilles dans les cnduits auditifs. Pur les prcédures avec survie, des barres à pinte musse divent être utilisées. Les barres à pinte fine snt permises pur les chirurgies sans survie (l animal dit être euthanasié sans être réveillé). Chirurgie Avant de cmmencer, vérifier la prfndeur de l anesthésie en pinçant un rteil pur vérifier l absence du réflexe de retrait. L'anesthésie dit être cnstante et prfnde, cmpte tenu de la pressin exercée sur le crâne par les pints de fixatin. Préparer le site chirurgical seln la PNF C-1, Chirurgie aseptique chez les rngeurs. Changer de gants et les passer à l alcl u revêtir des gants stériles. Placer un champ pératire stérile sur l animal tut en laissant la tête dégagée. Les instruments divent dnc être placés sur le champ afin de les garder stériles tut au lng de la prcédure. Inciser de façn rstr-caudale la peau et le fascia cuvrant le crâne avec un scalpel et les rétracter à l aide d un écarteur (ex. : «clibri retractr» pur les rats, «muse eyelid retractr» pur les suris). Pur les chirurgies de très lngue durée, réadministrer aux 3 heures le mélange de lidcaïne et de bupivacaïne sur le site, en faisant attentin de ne pas dépasser la dse maximale txique. Injectin directe Utiliser des ctns-tiges et de la saline stériles pur arrêter les saignements. À l aide d un prte-aiguille stérile, placer la mèche stérile dans la perceuse. Vérifier que le crâne est bien au niveau, en cmparant la hauteur du bregma et du lambda. Effectuer la cranitmie aux crdnnés stérétaxiques apprpriées en faisant attentin de ne pas percer accidentellement la dure-mère. 2

3 Retirer les débris sseux de la cranitmie à l aide d une aiguille stérile. Percer la dure-mère sans endmmager le cerveau. Descendre lentement l aiguille d injectin aux crdnnées apprpriées (vitesse recmmandée : 1 mm/minute). Effectuer l injectin en utilisant une vitesse et un vlume adéquats seln l espèce et la zne visée. Attendre de 3 à 5 minutes afin de permettre la diffusin du prduit et retirer lentement l aiguille. Rincer le site d incisin avec un peu de saline stérile. Fermer le site de chirurgie avec des sutures u des agrafes, de façn aseptique. Les sutures u les agrafes divent être retirées 7 à 10 jurs après la prcédure. Implantatin d une canule u d une électrde Pur maximiser l'adhérence du ciment, le fascia dit être retiré cmplètement en nettyant la surface sseuse avec un ctn-tige stérile et tus les saignements divent être cntrôlés (par cmpressin/frictin avec un ctn-tige stérile) avant d'appliquer le ciment. Lrsque les saignements nt cessé, laver la surface sseuse avec de la saline stérile et l assécher avec un ctn-tige stérile. À l aide d un prte-aiguille stérile, placer la mèche stérile dans la perceuse. Vérifier que le crâne est bien au niveau, en cmparant la hauteur du bregma et du lambda. Percer les trus pur les vis, en utilisant une mèche de plus petit diamètre que celui des vis, et insérer les vis délicatement en ne dépassant pas 1 mm de prfndeur. De 2 à 4 vis peuvent être utilisées pur ffrir un supprt au ciment dentaire. Éviter de les placer trp près du site d intérêt. Éviter de percer le crâne au niveau des jnctins sseuses, car les saignements sernt plus imprtants. Effectuer la cranitmie aux crdnnés stérétaxiques apprpriées en faisant attentin de ne pas percer accidentellement la dure-mère. Rincer le crâne avec de la saline stérile et assécher avec un ctn-tige stérile. Insérer la canule à l aide du guide-canule («cannula hlder»); vitesse recmmandée : 1 mm/minute. Une petite gutte de clle à tissu peut être appliquée sur le crâne à la base de la canule, à l aide d une aiguille 25G. Attentin de ne pas cller le guide-canule. Appliquer du ciment dentaire autur de la canule et des vis et sur le crâne expsé pur maintenir la canule en place à l aide d une spatule u d un ctn-tige stérile. Une fis le ciment dentaire séché, retirer délicatement le guide-canule. 3

4 Pursuivre l applicatin du ciment pur frmer l implant, en évitant de laisser des bulles d air qui purraient affaiblir la structure. Appliquer le ciment dentaire en minces cuches pur prévenir des dmmages thermiques au cerveau, au crâne et aux tissus envirnnants le ciment dentaire dégage de la chaleur en se slidifiant). Retirer l écarteur retenant la peau. Cuper u plir les brdures du ciment en cntact avec la peau (les brdures divent être lisses). La peau ne devrait pas embarquer sur le ciment. Blquer la canule avec une canule tempraire («dummy») lrsqu elle n est pas reliée à un système d infusin (ex. : pmpe smtique). Suturer les extrémités rstrale et caudale de l'incisin au besin. Les sutures divent être retirées 7 à 10 jurs après la prcédure. Recuvrir l implant d un buchn en plastique («dust cap»). Péride pstpératire Avant que l animal ne se réveille, cuper la pinte des griffes des membres pstérieurs avec un petit ciseau u cupe-griffe. Suivre la prcédure décrite dans la PNF C-1, Chirurgie aseptique chez les rngeurs. Une fis l animal éveillé, vérifier la présence du réflexe palpébral (clignement des paupières lrsque le cin de l œil est tuché avec un ctn-tige). Si le réflexe est absent, appliquer un nguent phtalmique tris fis par jur jusqu à ce que le réflexe revienne. Privilégier un type de cage avec grillage de métal plus haut afin de prévenir les blessures avec l implant. Hébergement individuel recmmandé si implant. Administrer un analgésique pur un minimum de 48 heures après la chirurgie (vir le tableau 1 de la PNF A-1, Analgésie et anesthésie des rngeurs). 4

5 Références Gardiner, T.M., Tth, L.A., Steretactic Surgery and Lng-Term Maintenance f Cranial Implants in Research Animals, McGill University, SOP - Rdent Steretaxic Surgery, University f British Clumbia, SOP - Aseptic Steretaxic Surgery f the Rat, Versin 2 31 aût 2015 Mises à jur de la PNF Clarificatins apprtées sur le temps de trempage des instruments/matériel 5