Tableau 1 : Concentrations de X (en mg/l) mesurées par LC/MS et Kit enzymo-immunologique dans des échantillons de plasma surchargés.
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- Agathe Lepage
- il y a 6 ans
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1 Exercice Enoncé : La sociéé ABC a développé un nouveau ki enzymo-immunologique (Ki E) pour le dosage d un médicamen X. Elle souhaie valider ce ki par comparaison à une echnique de référence. La echnique de référence choisie es la chromaographie liquide haue performance couplée à la specromérie de masse (LC/MS). Quesions : ) Douze échanillons de plasma surchargés à des concenraions héoriques connues son dosés par les méhodes. Les résulas son donnés dans le ableau ci-dessous. Tableau : Concenraions de X (en mg/l) mesurées par LC/MS e Ki enzymo-immunologique dans des échanillons de plasma surchargés. Ech n KIT 0,5 5,6 8,,6 5, 8, 5,5, 5, 8,,5 8, LC/MS 5,, 8, 5,7 7, 0, 0, 0, 6,, 0, 0, Les concenraions obenues par ces méhodes son-elles significaivemen différenes au risque 5 %? ) La comparaison enre les méhodes es ensuie réalisée à parir d échanillons sanguins collecés chez paiens raiés par le médicamen X. Les résulas obenus son rapporés dans le ableau ci-dessous : Tableau : Concenraions de X (en mg/l) mesurées par LC/MS e Ki enzymo-immunologique dans des échanillons de plasma issus de paiens raiés par X. Ech n KIT 8,0 6,0 68, 5,7 5,8, 6,5 7,5 59,8 6,7 9,6 8,6 LC/MS 0, 6,5,8 8,0 7,5 9, 6,,9 50,7 5,,7 0,8.. La suresimaion apparene observée avec le ki E es-elle significaive au risque de 5 %?.. Afin d éudier la répariion des différences en foncion des concenraions, représener graphiquemen, à parir des données du ableau, la différence d en foncion de la concenraion mesurée par LC/MS. d = (concenraion mesurée avec le ki E concenraion mesurée par LC/MS)... Déerminer l équaion de la droie d = f (concenraion par LC/MS). Exise--il une relaion enre la suresimaion apparene e la concenraion de référence?
2 Exercice Enoncé : L adminisraion IV bolus d une dose de 50 mg d un médicamen chez un paien A condui, après dosage à parir du plasma, à une cinéique bicomparimenale d équaion : C 0,85 0,08 0,5 e 0,6 e avec C en mg/l e en heure. On sai par ailleurs que ce médicamen présene une liposolubilié élevée, qu il es éliminé à 5 % sous forme inchangée dans les urines, que son méabolisme es esseniellemen hépaique, qu il se fixe sur l albumine. Chez un paien B, oujours après IV bolus de 50 mg, on obien l équaion suivane : C 0, e 0,6 0,58 e 0,0085 Le suje B présene une albuminémie diminuée e une baisse du aux du complexe prohrombinique, par rappor au paien A. Quesions : ) Pour les deux paiens déerminer la clairance plasmaique oale e la demi-vie plasmaique à la phase d éliminaion. Calculer le volume de disribuion du comparimen cenral (ou volume de disribuion iniial) e la consane d éliminaion (kel) pour le paien A. ) Commen peu-on expliquer la différence de demi-vie d éliminaion enre les deux paiens? ) Quelles modificaions de dose s imposen chez le paien B par rappor à celle du paien A? Jusifier vore réponse.
3 Exercice Enoncé : Quesion N : Le fluor 8, 8 9F, es un isoope radioacif émeeur d un rayonnemen +. Ecrire la réacion de désinégraion de ce isoope. Quel rayonnemen secondaire à cee émission + sera uilisé pour la déecion de ce isoope? Données : exrai de la classificaion périodique : 6C 7N 8O 9F 0Ne Na Mg Quesion N : L acivié d une source de 8 F es mesurée au cours du emps ; les résulas son les suivans : Temps (minues) 0 80 Acivié (MBq) 80 5,7 Calculer la consane radioacive 8 F. Quesion N : Le 8 F ser à la préparaion de médicamens radiopharmaceuiques uilisés en médecine nucléaire. Un des médicamens radiopharmaceuiques, parmi les plus uilisés, es le ( 8 F)Fluoro--deoxy-Dglucose ( 8 FDG). Il perme d analyser le méabolisme du glucose dans les cancers, en cardiologie e dans diverses pahologies du cerveau. Pour rechercher un cancer pulmonaire, on injece 85 MBq de 8 FDG à un malade. Il fau prévoir un délai de deux heures e demie enre la préparaion indusrielle du médicamen radiopharmaceuique e son uilisaion au cenre hospialier. a) A quelle acivié, exprimée en MBq, cee injecion correspond-elle au momen de sa préparaion indusrielle? b) Quelle masse de 8 FDG sera injecée au malade, sachan que la masse molaire du 8 FDG es de 8 g.mol -? Donnée : nombre d Avogadro N A = 6,0.0 mol - Quesion N : Lors de la fabricaion du 8 FDG, on uilise des écrans de plomb pour se proéger du rayonnemen élecromagnéique mono-énergéique produi. On adme que la loi de ransmission du flux énergéique en foncion de l épaisseur x d écran raversé es exponenielle. a) Sachan qu une épaisseur de plomb de cm laisse passer pour 00 du flux énergéique inciden, calculer le coefficien d aénuaion linéaire µ du plomb. b) Pour proéger le préparaeur, on veu que 95 pour 00 du flux énergéique soi absorbé par l écran. Quelle épaisseur de plomb faudra--il uiliser?
4 Exercice Enoncé : L acéylcholinesérase (EC...7) es purifiée à parir d un homogéna de orpille élecrique. A chaque éape de la purificaion, on dose la concenraion caalyique (U/mL) e la concenraion en proéines oales. Les résulas son reporés dans le ableau ci-dessous. Eape de purificaion Volume (ml) proéines (mg/ml) concenraion caalyique (U/mL) Homogéna précipiaion par ( ) SO Affinié (élua) Quesions - Calculer l acivié spécifique de chaque fracion, ainsi que les rendemens e degrés de purificaion pour l ensemble de la purificaion. Le Km de l enzyme pour son subsra es de 0,0 mm. Pour mesurer les concenraions caalyiques du ableau ci-dessus, chaque fracion es préalablemen diluée au /000 ème, le emps de mesure es de min e les condiions du dosage (dans les condiions convenionnelles reenues pour la définiion de l unié d acivié enzymaique) son elles que ( ES ) 90 % des sies acifs de l enzyme 0, 9 son occupés par le subsra acéylcholine. ( E) Quelle doi êre la concenraion en acéylcholine (en mm e en uniés Km) dans les condiions du dosage? a) Calculer pour la ème éape de purificaion (précipiaion par ( ) SO la viesse iniiale (v 0 ) mesurée dans le milieu réacionnel. Quelle serai la Vmax? b) En déduire, après min d incubaion, la concenraion résiduelle en subsra (en mmol/l e en uniés Km). c) Calculer la viesse (v) correspondan à cee concenraion e l exprimer en % de la viesse iniiale (v 0 ) mesurée. Commener.
5 Exercice 5 Enoncé : a) On désire préparer 00 ml d une soluion aqueuse ampon ammoniacale de ph = 9,0 en uilisan 0 ml de soluion molaire de, υ ml de soluion molaire de C e de l eau disillée. Soi T cee soluion ampon. b) On désire préparer 00 ml d une soluion aqueuse ampon ammoniacale de ph = 9,0 en uilisan 0 ml de soluion molaire de, υ ml de soluion molaire de HC e de l eau disillée soi T cee soluion ampon. Quesion : Calculez e υ ; pka / 9,5. υ Quesion : Quelles son les molariés des soluions ampons ammoniacales T e T? Quesion : Quelle es l osmolarié de chacune des soluions T e T? Quesion : Peu-on uiliser une de ces soluions T ou T pour amponner à ph = 6,00 une soluion d ions méalliques de ph =,00? Explicier clairemen vore réponse. Quesion 5 : Quel volume de ampon T doi-on uiliser pour amener 0 ml d une soluion chlorhydrique de ph =,00 à ph = 8,75?
6 Exercice ) Comparaison de moyennes appariées : H H 0 0 µ µ diff diff 0 0 x diff,78 s d =,05 ddl = =,5 <,0 Les concenraions obenues par les méhodes ne diffèren pas significaivemen... Cas des ech. de paiens Comparaison de moyennes appariées : H H 0 :µ diff 0 :suresimaion moyennedu ki 0 x diff 9,5 s d =,05 ddl = = 5,59 seuil (lu à 0 %) =,796 La suresimaion du ki es significaive.. pene = - 0,07 ordonnée à l origine = 0,5 y = 0,5 0,07 x r = - 0,07 ddl = 0 r n r = 0,0 seuil =,8 On ne me pas en évidence de relaion enre la suresimaion du ki e la concenraion de référence. *Imporan : Les proposiions de réponses son données à ire indicaif. Elles n on rien d impéraif pour les jurys des concours d inerna en pharmacie qui resen souverains e libres d éablir les grilles de correcion e de coaion comme ils le souhaien.
7 Exercice Dose ) CL SSC 0 Paien A : SSC 0 A α B β 0,5 0,85 0,6 0,08,5789, 6 mg.h/l 50 0,69 CL,6 L/h 8,5 h 6 β 0,08 Paien B : SSC 0 A α B β 0, 0,6 0,58 0,0085,65 68, 69,85 mg.h/l 50 0,69 CL,7 L/h 8,5 h 69,85 β 0,0085 Paien A : Volume du comparimen cenral : V Dose 50 A B 0,5 0,6 50,07 0 L Consane d éliminaion : kel CL V,6 0 0,097 h ) Le paien B présene une demi-vie de l ordre de fois plus longue que celle du paien A ce qui es lié à sa clairance fois plus faible. Or ce médicamen (esseniellemen éliminé par méabolisme hépaique) présene un coefficien d exracion (E H ) faible (CL << débi sanguin hépaique, L/min). Donc CL dépend surou de la fracion libre plasmaique (f u ) e la clairance inrinsèque (CL in, correspondan à l affinié du médicamen pour les sysèmes enzymaiques impliqués e à l acivié de ces enzymes) : CL f u x CL in. Il es peu probable que f u du paien B soi inférieur à f u du paien A (au conraire une augmenaion de sa f u es aendue compe enu des perurbaions biologiques (albumine diminuée). En revanche, ces perurbaions biologiques peuven émoigner d une insuffisance hépaique chez le paien B responsable d une diminuion du CL in e donc de CL, insuffisance hépaique d auan plus probable chez ce paien B qu il a un aux de complexe prohrombinique diminué. ) Diminuion de dose chez le paien B (clairance d éliminaion plus faible) e ce d auan plus que la fracion libre plasmaique du médicamen doi êre supérieure chez le paien B. *Imporan : Les proposiions de réponses son données à ire indicaif. Elles n on rien d impéraif pour les jurys des concours d inerna en pharmacie qui resen souverains e libres d éablir les grilles de correcion e de coaion comme ils le souhaien.
8 Exercice Quesion N : Dans le processus +, un proon du noyau de fluor es ransformé en neuron : il y a donc ransformaion de 8 9F en 8 0 8O avec émission d un posion e (émission +) e d une paricule appelée neurino, neure de masse nulle e n ineragissan praiquemen pas avec la maière. On écri : F O e ν Lors d une désinégraion +, le posion émis dans le milieu perd de son énergie cinéique lors des collisions muliples e peu ensuie s annihiler sur un élecron : la démaérialisaion produi phoons d énergie 5 Kev ; cee émission élecromagnéique es uilisée dans les gamma caméra à posions (mesure du emps de vol). Quesion N : La loi de décroissance de l acivié a a e es exponenielle : lna varie donc linéairemen en 0 n a a foncion du emps, avec comme coefficien direceur - : λ = 0,006 min -, soi T = 0 min. Quesion N : a) Désignons par = 0 l insan de la préparaion e a 0 l acivié à prévoir, sachan qu au momen de l uilisaion =,5 h = 50 min, l acivié du 8 FDG doi êre a = 85 MBq. On a ln T a a e d où l acivié à prévoir : 0 a 0 50 ln 0 = 85 e = 76 MBq b) La masse de 8 M A at FDG injecée se calcule par la relaion : m dans laquelle M A = 8 N A n g, a = Bq, T = 6600 s e N A = 6,0 0 mol - On obien m = 5,.0-0 g Quesion N : La loi d aénuaion du flux du rayonnemen en foncion de x l épaisseur d écran raversée s écri : 0e x dans laquelle µ es le coefficien d aénuaion linéaire du plomb. a) Si pour x = cm, on a / 0 0,, on dédui la valeur de µ : μ -lnφ Φ x 0 = =,7 cm - b) Il ne doi passer qu une fracion de rayonnemen / 0 0,05. L épaisseur de plomb raversée doi êre : ln 0 x,0 cm μ *Imporan : Les proposiions de réponses son données à ire indicaif. Elles n on rien d impéraif pour les jurys des concours d inerna en pharmacie qui resen souverains e libres d éablir les grilles de correcion e de coaion comme ils le souhaien.
9 Exercice - Les AS en U/mg son de 0,0 pour l homogéna; 0,5 pour le précipié redissous; e 8,5 pour l élua. Rendemen de la purificaion = (00/800) = 56,7 %. Faceur d enrichissemen = 8,5/0,0 = 5. - V o /Vmax = 0,9 = a / (a + ) avec a = concenraion en subsra exprimée en uniés Km ; soi a = 9 donc S = 9Km =,7 mm a) V o = 0,50 µmol/ml/min soi 0,50 mmol/l/min soi 0,5 Km/min e Vmax 0,50 0,66 mm/min 0,9 b) (S) =,7 0,5 =,55 mm ou 9 0,5 = 8,5 Km v ( 8, 5 / 9, 5) c) 0, 99 soi v à min = 99, % de v 0 = 0,50 x 0,99 = 0,9 mm v0 ( 9 / 0) /min. Commenaires : v 0 n es praiquemen pas modifiée donc la cinéique es linéaire e la mesure es correce. *Imporan : Les proposiions de réponses son données à ire indicaif. Elles n on rien d impéraif pour les jurys des concours d inerna en pharmacie qui resen souverains e libres d éablir les grilles de correcion e de coaion comme ils le souhaien.
10 Exercice 5 Quesion : Calcul de υ. 0 ml de soluion M appore 0 mmol. V ml de soluion M appore V mmol. Volume oal = 00 ml υ 00, le recul d équilibre es oal. eq oal eq oal ph pka log ph pka log ph pka 0 log υ, 0 log 0,5 υ, 0 0,56 υ υ 7,78 ml Calcul de υ N ml de soluion M appore N mmol. Volume oal 00 ml 0 υ 00 υ υ ph pka log υ, 0 - υ log υ 0,5, 0 - υ υ 0,56 υ 6, ml *Imporan : Les proposiions de réponses son données à ire indicaif. Elles n on rien d impéraif pour les jurys des concours d inerna en pharmacie qui resen souverains e libres d éablir les grilles de correcion e de coaion comme ils le souhaien.
11 Exercice 5 (suie) Quesion : Pour le ampon T Les formes ammoniacales apporées son 0 mmol de e 7,78 mmol de C. Le volume es de 00 ml. Molarié du ampon T = 0 7, ,78 M Pour le ampon T : Tou ce qui es ammoniacal es apporé par les 0 mmol de Molarié du ampon T = 0 0,0 M 00 Quesion : Tampon T : Formes en soluion, C = 56 mosmol.l - e C 0,0 0,78 0,56 Osmol.L - - Tampon T : 6, C 0,06 Μ 00 C 0,0 0,06 0,6 Osmol.L - 6 mosmol.l - ou - 0,59 (0,06) 0,6 Osmol.L Quesion : Ces ampons T e T de ph = 9,00 son inuilisables à ph = 6,00. Le domaine ampon d un ampon ammoniacal es compris enre 8,5 e 0,5. *Imporan : Les proposiions de réponses son données à ire indicaif. Elles n on rien d impéraif pour les jurys des concours d inerna en pharmacie qui resen souverains e libres d éablir les grilles de correcion e de coaion comme ils le souhaien.
12 Exercice 5 (suie) Quesion 5 : Le ampon T conien : 0, mmol de par ml e 0,78 mmol de par ml. La soluion chlorhydrique de ph =,00 conien 0, mmol de On veu ph = 8,75 soi x ml le volume de T uilisé H O dans les 0 ml. ph 0,x 0, 8,75 9,5 log 0,78x 0, x,0 ml *Imporan : Les proposiions de réponses son données à ire indicaif. Elles n on rien d impéraif pour les jurys des concours d inerna en pharmacie qui resen souverains e libres d éablir les grilles de correcion e de coaion comme ils le souhaien.
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