Effets du fipronil à des doses sublétales sur le comportement de l abeille

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1 Effets du fpronl à des doses sublétales sur le comportement de l abelle Monque Gauther, Abdelsallam Kacm el Hassan, Yassne Alouane, Abel Bernadou, Catherne Armengaud Centre de Recherches sur la Cognton Anmale UMR 5169 Unversté Paul Sabater 118 route de Narbonne 3162 Toulouse cedex Résumé Les fonctons sensorelles et motrces de l abelle ans que ses capactés d apprentssage ont été étudées en laboratore après exposton aguë ou chronque à des doses sublétales de fpronl, admnstrées par voe orale ou par contact. Les tests comportementaux ont été réalsés sur des butneuses prélevées drectement à l entrée de la ruche pour les études de toxcté aguë. La toxcté chronque a été étudée sur des abelles prélevées à l émergence. Après une semane d adaptaton en cagette, elles ont sub une contamnaton quotdenne pendant 11 jours. La contamnaton orale en ntoxcaton aguë a été réalsée en nourrssant les abelles 15 mn avant le test avec 1 µl de soluton sucrée contamnée. Pour la contamnaton chronque des abelles en cagette, la molécule état ajoutée au srop de nourrssage et le volume de srop état ajusté chaque jour au nombre d abelles présentes dans la cagette. La contamnaton par contact a été réalsée en déposant une goutte de 1 µl de soluton contamnée sur le thorax de l abelle, en ntoxcaton aguë ou chronque. Le fpronl (DL 5 env. 5 ng/ab) dlué dans l acétone a été testé aux doses de 1 ng,,5 ng et,1 ng/ab en applcaton aguë et aux doses de,1 ng et,1 ng/ab en applcaton chronque. En applcaton thoracque aguë, la dose de 1 ng/ab dmnue la sensblté aux solutons sucrées fablement concentrées. La dose de,5 ng/ab perturbe l apprentssage et la mémore du condtonnement olfactf. L ntoxcaton chronque à la dose de,1 ng/ab entraîne une mortalté totale au bout de 1 semane d exposton. La dose de,1 ng/ab (contact) augmente la consommaton d eau des abelles pendant la pérode d ntoxcaton et dmnue les déplacements locomoteurs mesurés dans une encente pendant 3 mn. Le fpronl (,1 ng/ab, oral ou par contact) perturbe la capacté de dscrmnaton des odeurs. Ces expérences montrent que l applcaton de fpronl par contact entraîne des modfcatons du comportement de l abelle. En ntoxcaton aguë, les fonctons gustatves et mnésques sont légèrement perturbées. Le tratement chronque potentalse les effets de la plus fable dose utlsée en aguë (,1 ng/ab) qu devent létale. La dose de,1 ng/ab (DL 5 /5) présente des effets perturbateurs lmtés sur la locomoton, la consommaton d eau et les dscrmnaton des odeurs. Ces données dovent être ntégrées dans un schéma d exposton des abelles au fpronl, afn de pouvor évaluer le rsque en stuaton de plen champ. Mots-clés : abelle, pestcdes, fpronl, locomoton, gustaton, apprentssage, mémore.

2 Introducton Le fpronl est un nsectcde utlsé dans des produts à usage agrcole. Il consttue la molécule actve du Régent TS, utlsé en enrobage des semences de maïs et de tournesol et protège la plante pendant toute sa crossance. Il peut mgrer dans le xylème de la plante (Aajoud et al. 26) et se retrouver en fables quanttés dans les partes de la plante comme le nectar et consttuer une source d ntoxcaton pour les nsectes non-cbles comme les abelles. Le fpronl appartent à la famlle des phénylpyrazoles (Bloomqust 1996) et agt sur les système nhbteurs du système nerveux central. Ses cbles sont les récepteurs à l acde!- amno butyrque (GABA) et les récepteurs au glutamate couplés à un canal chlore nhbteur (Barbara et al. 25; Jansen et al. 27). Ces derners récepteurs sont spécfques de l nsecte, ce qu explquerat la plus grande effcacté du fpronl sur l nsecte par rapport aux vertébrés (Narahash et al. 27). Le blocage des récepteurs nhbteurs par le fpronl entraîne une hyperactvté des réseaux nerveux qu peut condure à la mort de l anmal. Au cours de ses actvtés de butnage, l abelle peut être en contact, de façon unque ou répétée, avec de fables quanttés de fpronl présentes dans le pollen ou le nectar. Le pestcde peut également être accumulé dans les produts de la ruche qu servent à nourrr les larves ou les jeunes ouvrères. Pluseurs scenar d exposton sont envsageables dans lesquels les jeunes ouvrères ou les butneuses sont en contact avec de fables doses de façon ponctuelle ou répétée. Les tests reconnus au plan européen, effectués sur l'abelle en laboratore ou sous tunnel, ont montré pour le fpronl des effets toxques très lmtés à court terme (pérode d'observaton de 72 ou 96 h) et ont condut, dans un premer temps, à l'autorsaton de l'utlsaton du produt dans des condtons contrôlées. Cependant, ces tests ne prennent pas en compte des effets sublétaux qu, à long terme, pourraent modfer des fonctons complexes comme l'orentaton, la mémore ou l'apprentssage et condure par exemple au dépeuplement des ruchers. Il nous a paru donc mportant de cbler au meux l'effet du fpronl sur le comportement de l'abelle et de réalser des observatons à long terme d abelles qu auraent été mses en contact avec le produt de façon répétée. Deux types d'expérmentatons ont été réalsés. Dans une premère sére d'expérences, nous avons testé l'effet du fpronl après une seule exposton au produt, orale ou topque. Afn de nous rapprocher des condtons d'exposton des abelles à ce produt dans le mleu naturel, nous avons également développé un protocole d'ntoxcaton chronque d'abelles à l'émergence avec une exposton quotdenne orale ou topque pendant 11 jours. La mortalté a été contrôlée. Les fonctons bologques qu ont été étudées sont l actvté locomotrce, la percepton de l eau et des solutons sucrées et pluseurs formes d apprentssage et de mémore. Les résultats montrent que le fpronl à fable dose (DL5/5 < dose < DL5/5) en tratement agu perturbe la percepton des solutons sucrées et détérore les capactés d'apprentssage et de mémore. La dose équvalent à la DL5/5 entraîne la mort des anmaux après une semane d'exposton. Une dose 1 fos plus fable en tratement chronque perturbe la dscrmnaton des odeurs et augmente la consommaton d eau. Matérel et méthodes 1) Anmaux, protocoles de contamnaton, doses utlsées Les tests comportementaux ont été réalsés en laboratore à l'échelon ndvduel sur des butneuses prélevées drectement à la ruche (vol de retour) pour les études de toxcté aguë. Pour les études de toxcté chronque, les abelles ont été prélevées à l émergence sur les

3 cadres de couvan. Après une semane d adaptaton en cagette, elles ont sub une contamnaton quotdenne pendant 11 jours. Deux protocoles de contamnaton ont été utlsés, une contamnaton orale et une contamnaton par contact (topque). Pour la contamnaton orale aguë, les abelles ont été nourres avant le test avec 1 µl de soluton sucrée contenant le fpronl. Pour la contamnaton chronque des abelles mantenues en cagette, le fpronl état ajouté au srop de nourrssage et le volume de srop état ajusté chaque jour au nombre d abelles présentes dans la cagette, sur la base d une consommaton de 33 µl par abelle et par jour (Decourtye et al. 25). La contamnaton par contact, aguë ou chronque, a été réalsée en déposant une goutte de 1 µl de soluton contenant le fpronl sur le thorax de l abelle. Le fpronl (Cluzeau Info labo, Sante-Foy-La Grande) a été utlsé à des doses représentant 1/5 à 1/5 de la dose léthale 5 (DL5) (DL 5 orale 48 h: 5ng). La soluton mère a été préparée dans l'acétone (Sgma). Pour l'applcaton topque, les dlutons successves ont été réalsées dans de l'eau dstllée et la proporton d'acétone dans la soluton fnale état de 1%. Pour l'ntoxcaton orale, la dluton fnale a été fate dans un srop de sucre à 5% avec une proporton de,3% d'acétone dans le srop de nourrssage. Des groupes d abelles recevant le solvant (,3 % d'acétone en contamnaton orale et 1 % en contamnaton topque) ont consttué les témons. 2) Tests comportementaux 2.1) Actvté locomotrce L'actvté locomotrce a été quantfée en ntrodusant l'abelle dans une encente vertcale vtrée (3 x 3 x 4 cm) dont le fond opaque, face à l'expérmentateur, est quadrllé (5 x 5 cm) pour permettre le repérage de l'abelle dans le dspostf. L'éclarage par le haut ndut un déplacement vertcal de l'abelle sur la vtre. La poston de l'abelle a été relevée toutes les 3 secondes pendant 3 mnutes et les paramètres ont été quantfés à l ade d un logcel spécalement conçu au laboratore (Lambn et al. 21). Les paramètres mesurés étaent la dstance parcourue, le temps passé en mmoblté et le nveau vertcal attent (entre le nveau 1 nféreur et le nveau 6 en haut de l'encente). Les tests dont la descrpton sut ont été effectués sur des abelles en contenton. La contenton a été réalsée en fxant ndvduellement chaque abelle dans un pett tube par une goutte de cre déposée sur l arrère du thorax. Le comportement observé est l extenson du proboscs. Le réflexe d'extenson du proboscs (REP) est ndut par la stmulaton des antennes avec un stmulus gustatf, eau ou sucre. Il permet d évaluer les capactés de percepton gustatve des abelles. Lorsqu l est assocé à un stmulus condtonnel (olfactf ou tactle), ce réflexe permet d étuder les capactés d apprentssage assocatf et de mémorsaton. Ces tests ont été réalsés sur des abelles mses à jeûn pendant une durée contrôlée afn d'augmenter la probablté de déclenchement du réflexe. 2.2) Taux de réponse à l'eau. Le test proposé permet de détermner s le pestcde utlsé modfe la percepton de l eau chez l'abelle. Chaque abelle est stmulée par une goutte d eau déposée au nveau des antennes. Le nombre d abelles au sen d un lot répondant par un REP est comptablsé et exprmé en pourcentage. Les lots témons ont été comparés aux lots contamnés. 2.3) Taux de réponse aux solutons sucrées. Dans ce test, les abelles sont stmulées au nveau des antennes avec des solutons sucrées de concentraton crossante (,3%,,1%,,3%, 1%, 3%, 1% et 3%). Les stmulatons sont délvrées toutes les 3 mnutes. On dénombre dans chaque groupe d abelles les ndvdus répondant par un REP à chaque

4 soluton sucrée. Les résultats exprmés en pourcentages ont été comparés entre les témons et les anmaux contamnés. Ce test permet de détecter une modfcaton de la percepton du nectar qu pourrat être ndute par une contamnaton avec le pestcde. 2.4) Apprentssages assocatfs. Condtonnement olfactf du REP. Dans cet apprentssage, une odeur qu représente le stmulus condtonnel (SC) est drgée vers les antennes de l'abelle pendant 6 secondes. Tros secondes après le début de la stmulaton olfactve, les antennes sont touchées avec une soluton sucrée (4%) (stmulus ncondtonnel, SI) qu ndut l'extenson des pèces buccales. Après pluseurs assocatons des stmulatons olfactves et gustatves, l'abelle répond à l'odeur seule par l'extenson du proboscs, ce qu consttue la réponse condtonnée. L'apprentssage qu a été réalsé comportat 5 essas, séparés d'une mnute. Condtonnement tactle du REP. Dans ce condtonnement la stmulaton gustatve (eau sucrée, SI) est précédée par une stmulaton tactle des antennes (SC). La stmulaton gustatve est applquée au nveau du proboscs et la stmulaton tactle est applquée au nveau des antennes pour dssocer la voe du stmulus ncondtonnel de la voe du stmulus condtonnel. Une pette plaque métallque rayée est approchée de l'antenne drote ou gauche et l'abelle explore l'objet pendant 6 secondes. Tros secondes après le début de l'exploraton de l'objet, la soluton sucrée est délvrée au nveau du proboscs pendant 3 secondes. L'apprentssage comportat 6 essas séparés de 1 mnutes. Dans ces deux apprentssages, l extenson du proboscs état récompensée par le fat que l abelle pouvat prélever avec son proboscs quelques mcroltres d eau sucrée. Des tests de mémorsaton ont été effectués à court terme (1 h pour l'apprentssage olfactf et 3 h pour l'apprentssage tactle) et à long terme (24 h et 48 h) après l'entraînement. Les tests consstent à présenter le stmulus condtonnel seul et ls permettent d'évaluer les capactés de mémorsaton à court terme et à long terme. Dans certanes expérences, un nouveau stmulus tactle ou olfactf état présenté au moment du test en plus du SC pour tester la spécfcté de la réponse apprse. Cec sera précsé dans la présentaton des résultats. 3) Tests statstques Le test de Kaplan-Meer a été utlsé pour comparer la mortalté cumulée sur 11 jours entre lots tratés et témons. Le test t de Student a été utlsé pour comparer les paramètres de la locomoton et la consommaton d eau journalère en contamnaton chronque, entre les lots tratés et les lots témons. Le test du kh-deux de Pearson a été utlsé pour comparer, entre les anmaux tratés et les témons, les taux d'extenson du proboscs (REP) aux solutons sucrées et au stmulus olfactf ou tactle dans les apprentssages et les tests de mémore. Le test de MacNemar a perms de comparer, à l'ntéreur du même groupe, les taux de réponses au stmulus condtonnel et au stmulus nouveau lors des tests de mémore. Pour tous ces tests, le seul de sgnfcatvté a été fxé à 5%. Les courbes d apprentssage tactles ont été analysées avec une ANOVA à 2 facteurs (facteur 1 : tratement, facteur 2 : essas) dont un répété (facteur 2 : essas). Les réponses à l ntéreur du même groupe (contrôle ou fpronl) ont été testées à l ade du test Q de Cochran. Ce test état suv, quand l état sgnfcatf, par le test de Marasculo et McSweeney. Résultats 1) Exposton aguë Le fpronl a été admnstré à chaque abelle, par voe orale ou par contact, à l'une des doses suvantes: 1 ng,,5 ng,,1 ng et,1 ng,

5 Mortalté Une augmentaton sgnfcatve de la mortalté a été observée 36 h et 48 h après l'exposton orale et topque au fpronl (fgure 1). Topque Oral 1 contrôle,1 ng 1 contrôle,1 ng,1 ng % Mortalté ,5 ng 1 ng * * * ,5 ng 1 ng * * Temps (heures) Temps (heures) Fg 1: Courbes de mortalté cumulée des abelles après applcaton topque ou ngeston de fpronl, en foncton du temps et de la dose. Exposton topque (*) p <,5 (contrôle /,1 ng) ; (**)p <,5 (contrôle /,1;,5 et 1 ng); exposton orale : (*)p <,5 (contrôle /1 ng). n = 15 pour chaque groupe Actvté locomotrce Elle a été mesurée 1 h après l exposton orale ou topque. Quelles que soent les doses et la modalté d'applcaton utlsées, aucune modfcaton de l'actvté locomotrce n a été observée par rapport aux témons. Sensblté aux solutons sucrées Le taux de réponse d extenson du proboscs a été mesuré avant l exposton orale ou topque au fpronl ou au solvant et 1 h après. Seule la dose la plus forte de fpronl (1 ng/ab) en applcaton topque ndut une dmnuton de la sensblté au sucre qu se manfeste par une dmnuton du pourcentage de réponses aux fables concentratons. Aucun effet n'est observé après exposton orale ce qu exclut auss un effet du solvant (acétone 1%) sur la percepton des solutons sucrées (fgure 2). Contrôle (13) Fpronl topque 1ng (14) ,3,1, % Concentratons en saccharose * *,3,1, % Concentratons en saccharose Fg 2: Taux de réponse d'extenson du proboscs (REP) aux solutons sucrées chez des lots d'abelles témons ou exposées au fpronl de façon topque. Courbe en nor: réponse avant l'applcaton de solvant ou de fpronl; courbe en grs: réponse après l'applcaton de solvant ou de fpronl.

6 Condtonnement olfactf Le condtonnement a été réalsé 3 h après l exposton orale ou topque au fpronl ou au solvant. Le fpronl, à la dose la plus fable (.1 ng/ab) admnstrée oralement, provoque un effet perturbateur sgnfcatf sur la phase d'apprentssage et sur la mémorsaton testée 1 h, 24 h et 48 h après la séance d'entraînement. Les doses plus élevées n'ont pas d'effet. En applcaton topque, la dose de.5 ng/ab ndut une dmnuton des performances en apprentssage et en stuaton de rappel. Condtonnement tactle Ce condtonnement a été réalsé chez des anmaux ayant reçu par contact une seule dose de fpronl (.5 ng/ab) 15 mnutes avant la séance d entraînement. 1 8 a Contrôle Fpronl 1 A+ Antenne 1 ( 57) A+ Antenne 1 (59) 8 b Essas Essas 1 c Test 3h (57) A+ 1 d Test 3h (59) A A B A B A B A B Antenne 1 Antenne 2 Antenne 1 Antenne 2 Fg 3: Apprentssage et mémorsaton d'un condtonnement tactle latéralsé. a et b: courbes d'apprentssage tactle en 6 essas chez des abelles témons (a) ou après 15 mn d'exposton au fpronl (,5 ng) (b). Le stmulus est présenté sur une seule antenne (drote ou gauche). c et d: tests de mémore effectués 3 h après l'apprentssage. Les deux antennes sont stmulées avec le stmulus condtonnel (A) et avec un nouveau stmulus (B). Des ndces dfférents () et () ndquent des dfférences sgnfcatves entre les hstogrammes.

7 Dans cette expérence, les abelles sont condtonnées à assocer un stmulus tactle (A), présenté sur une antenne (drote ou gauche) à une récompense sucrée. La deuxème antenne n est pas stmulée. L apprentssage comporte 6 essas. Lors des tests de mémore effectués 3 h et 24 h après l entraînement, le stmulus condtonnel A est présenté à chaque antenne, ans qu un nouveau stmulus B. Ans, le transfert de l nformaton apprse entre les deux partes du cerveau est testé, de même que la généralsaton de la réponse condtonnelle à un stmulus nouveau. Les résultats ont montré que les abelles tratées apprennent mons ben que les témons mas la dfférence n est pas sgnfcatve (fgure 3) (ANOVA à mesures répétées, effet tratement: F 1,114 = 2.15, p =.149). Lors des tests de mémore, ben que les taux de réponse au stmulus A pour l antenne 1 soent plus bas que pour le groupe contrôle, les abelles tratées au fpronl apprennent à dscrmner le stmulus A du nouveau stmulus. Du côté non condtonné (antenne 2) les taux de réponse aux deux stmul sont très fables et équvalents. En concluson, le fpronl à la dose de.5 ng/ab perturbe modérément les capactés d apprentssage tactle et la mémore; les capactés de dscrmnaton des stmul tactles sont préservées. 2) Exposton chronque Mortalté Le fpronl à la dose de.1 ng/ab provoque, au bout de 7 jours, la mort de la totalté des abelles tratées oralement ou par voe topque (fgure 4). En conséquence, l étude de l effet du fpronl en ntoxcaton chronque sur les fonctons bologques de l abelle a été réalsée à la dose de.1 ng/ab. Oral Topque 1 1 % Mortalté Contrôle (17) Fpronl (17).1 ng Contrôle (16) Fpronl (16).1 ng Jours Jours % Mortalté Contrôle (67) Fpronl (7).1 ng Contrôle (76) Fpronl (79).1 ng Jours Jours 1 11 Fg 4: Courbes de mortalté cumulée après exposton orale ou topque au fpronl à la dose de,1 ng/ab (graphes du haut) et à la dose de,1 ng/ab (graphes du bas). Comparason des courbes (test de Kaplan- Meer): fpronl.1 ng/ab, oral vs contrôle p =.3; topque vs contrôle p =. 11; fpronl.1 ng/ab, oral vs contrôle p =.758, topque vs contrôle p =.893

8 L'exposton au fpronl pendant 11 jours à la dose de,1 ng/ab entraîne une augmentaton de l'agressvté entre les ndvdus. Cec se manfeste par des attaques entre les abelles à l'ntéreur de la cagette, des battements des ales et l'émsson de la phéromone d'alarme détectée par l expérmentateur. Actvté locomotrce Le fpronl à la dose de,1 ng/ab n ndut aucune modfcaton du comportement locomoteur, quelle que sot la modalté d exposton utlsée. Aucune dfférence sgnfcatve n a été observée par rapport aux témons concernant la dstance parcourue dans la boîte, la durée passée en mmoblté et le nveau attent dans le plan vertcal (test de t de Student, p >.5 dans tous les cas). Consommaton d'eau et taux de réponse à l'eau La consommaton d eau est sgnfcatvement augmentée chez les abelles ayant reçu du fpronl (.1 ng/ab) en applcaton topque (test t sur la dfférence des consommatons moyennes journalères, p <.1) (fgure 5). Par contre, le pourcentage d'abelles répondant par un REP à la stmulaton des antennes avec de l'eau est dentque entre les lots tratés par voe orale ou topque et les lots témons correspondants. Fpronl (32) topque.1 ng Contrôle (32) Cosommaton moyenne (µl/ jour / ab) Jours Fg 5: La consommaton quotdenne d'eau, mesurée dans le lot témon et le lot traté de façon topque, est ramenée au nombre d'ndvdus présents dans chaque cagette (µl / jour / abelle). Taux de réponse au sucre La contamnaton orale avec le fpronl (.1 ng/ab) ndut une dmnuton du taux de réponse pour la concentraton d'eau sucrée à,3%. Il n'y a pas d'effet de la contamnaton par contact. Condtonnement olfactf Le tratement des abelles avec du fpronl ne modfe leurs capactés d'apprentssage olfactf. Après une ntoxcaton orale ou topque, les abelles tratées comme les témons montrent un taux d'apprentssage de 6% à la fn de la séance d'entraînement (fgure 6). Les taux de rappel sont dentques entre les groupes tratés et contrôle, quels que soent le déla du test de rappel et la modalté de tratement. Ans, on peut conclure que la mémore à court terme (1 h) et la mémore à long terme (24 h et 48 h) ne sont pas affectées par le tratement. Par contre, les capactés de dscrmnaton olfactve, qu ont été testées en présentant à l'abelle une odeur nouvelle et l'odeur condtonnée, sont perturbées aux délas de 24 h et 48 h quelle que sot la modalté de tratement. Les taux de réponse aux deux odeurs ne sont pas sgnfcatvement dfférents. Les abelles ne reconnassent pas spécfquement l'odeur

9 condtonnée. La fgure 6 llustre les effets nduts par l'ngeston de fpronl sur l apprentssage olfactf et la généralsaton de la réponse condtonnée à l odeur nouvelle Fpronl (25).1 ng oral Contrôle (28) * * * SC SC NS NS Essas 1 h 24 h 48 h 1 h 24 h 48 h Control Fpronl Fg 6: Apprentssage et mémorsaton d'un condtonnement olfactf. Courbes de réponses condtonnées (REP) pendant l'apprentssage (à gauche). Le stmulus condtonnel (SC) et un nouveau stmulus olfactf (NS) sont présentés pendant les tests à 1 h, 24 h et 48 h (à drote). Concluson L'exposton aguë au fpronl, par contact ou en ngeston à des doses subléthales, provoque une perturbaton de la percepton des soluton sucrées et des processus d'apprentssage et de mémorsaton du condtonnement olfactf. Les effets ne sont pas lés à la dose, car l'apprentssage olfactf est perturbé par la dose la plus fable (,1 ng/ab) délvrée dans le srop de nourrssage (El Hassan et al. 25). Dans des condtons d'exposton répétée (11 jours), le fpronl à une dose 5 fos nféreure à la DL5 (,1 ng/ab) ndut une mortalté totale après une semane d exposton. Une dose 5 fos nféreure à la DL5 (.1 ng/ab) n'ndut plus de mortalté par rapport au groupe témon. Ces données sont en accord avec celles de la lttérature qu rapportent globalement le même rapport dose/mortalté après applcaton topque pendant 11 jours (Decourtye et al. 25). Les tests comportementaux que nous avons réalsés montrent que la mortalté n'est pas un facteur suffsant pour évaluer les effets chronques d'un produt. Le fpronl à une dose qu n'ndut pas de mortalté (.1 ng/ab) modfe certanes des fonctons que nous avons testées. La consommaton d eau est augmentée, la sensblté au sucre est légèrement dmnuée et la dscrmnaton des odeurs est perturbée. Les effets sur le comportement d une dose 5 fos nféreure à la DL5 restent lmtés sur le comportement (Alouane et al. 28). Ces observatons effectuées en laboratore à l échelon de l ndvdu, ne peuvent être drectement transposées à l échelle de la colone. Un modèle mathématque basé sur des données de terran devrat permettre de défnr dans quelle mesure une perte de la sensblté gustatve ou de la dscrmnaton des odeurs peut avor un mpact négatf sur le fonctonnement de la ruche. L'évaluaton du rsque pour les abelles, lé à l'utlsaton du fpronl en stuaton de plen champ, nécesste de connaître la toxcté ntrnsèque de la molécule, ce que nos travaux tentent de fare. Nous avons montré en stuaton de laboratore que certanes fonctons bologques sont modfées par de fables doses de fpronl, admnstrées de façon unque ou répétée. Le degré d'exposton des abelles est foncton de la quantté de produt présente dans la plante et de la quantté de produt absorbée. Cette dernère dépend du statut de l'abelle au sen de la colone. Pluseurs scenar d'exposton dovent être défns, une butneuse sera à

10 pror plus exposée qu'une ouvrère à l'ntéreur de la ruche. La combnason de ces facteurs, toxcté et exposton, permettra alors de défnr le rsque lé à l utlsaton du fpronl pour les abelles en plen champ. Remercements Ce traval a fat l objet d une conventon entre l unversté Paul Sabater, le CNRS et le Mnstère de l Agrculture, dans le cadre du Programme Communautare pour l Apculture. Il a été fnancé par les tros organsmes. Bblographe Aajoud, A., Raveton, M., Aouad, H., Tssut, M., Ravanel, P., 26. Uptake and xylem transport of fpronl n sun flowers. J. Agrc. Food Chem 54: Alouane, Y., El Hassan, A. K., Gary, V., Armengaud, C., Lambn, M., Gauther, M., 28. Subchronc exposure of honeybees to sublethal doses of pestcdes: effects on behavor. Envronm. Toxcol. Chem. 54: Bloomqust, J. R., 1996, Ion channels as targets for nsectcdes, Ann. Rev. Entomol., 41: Barbara, G.S., Zube, C., Rybak., J., Gauther, M., Grünewald, B., 25. Acetylcholne, GABA and glutamate nduce onc currents n cultured antennal lobe neurons of the honeybee, Aps mellfera. J. Comp. Physol. A 191: Decourtye, A., Devllers, J., Genecque, E., Le Menach, K., Budznsk, H., Cluzeau, S., Pham- Délègue, M. H., 25. Comparatve sublethal toxcty of nne pestcdes on olfactory learnng performances of the honeybee Aps mellfera. Arch. Envron. Contam. Toxcol. 48: El Hassan A. K., Dacher, M., Gauther, M., Armengaud, C., 25. Effects of sublethal doses of fpronl on the behavor of the honeybee (Aps mellfera). Pharm. Bochem. Behav. 82: Lambn, M., Armengaud, C., Raymond, S., Gauther, M., 21., Imdacloprd-nduced facltaton of proboscs extenton reflex habtuaton n the honeybee. Arch. Insect Bochem. Physol Janssen, D., Derst, C., Bucknx, R., Van den Eynden, J., Rgo, J. M., Van Kerkhove, E., 27. Dorsal unpared medan neurons of Locusta mgratora express vermectn- and fpronlsenstve glutamate-gated chlorde channels. J. Neurophysol. 97: Narahash, T., Zhao, X., Ikeda, T., Nagat, K., Yeh, J. Z., 27. Dfferental actons of nsectcdes on target stes: bass for selectve toxcty. Hum. Exp. Toxcol. 26: